2-磷酸甘油酸或其盐在制备用于缺氧缺血性脑损伤治疗的试剂/药物中的应用的制作方法

本发明属于生物医药领域，公开了2-磷酸甘油酸或其盐在制备用于缺氧缺血性脑损伤治疗的试剂/药物中的应用。

背景技术：

1、新生儿缺氧缺血性脑病是指新生儿由于围产期窒息缺氧而导致的脑缺氧缺血性损伤，易遗留神经损伤后遗症，比如：癫痫、智力障碍、运动障碍等。其中我国足月儿中缺氧缺血性脑病发生率约为千分之三，而其中的20％在新生儿期死亡，存活者中约有30％患儿遗留不同程度的神经系统后遗症。大量证据表明，中枢神经系统的神经损伤是长期神经功能障碍的根本原因。因此，减少神经损伤或促进损伤后神经恢复是改善缺氧缺血性脑病神经损伤的有效治疗方法。到目前为止，报道称亚低温治疗是新生儿中重度缺氧缺血性脑病的有效治疗方法。然而，亚低温治疗必须在出生后6小时内进行，即使如此，也仅只有不到50％的新生儿在亚低温治疗后神经损伤得到改善。而针对神经损伤修复的药物，如epo、鼠神经生长因子、胞磷胆碱等仍面临着神经功能改善作用有限、远期保护效应不明等争议。因此，积极寻找安全有效的可补充或替代现有干预措施的治疗方式，降低缺氧缺血导致的神经损伤至关重要。

技术实现思路

1、为解决上述问题，本发明公开了一种化合物2-磷酸甘油酸及其在制备神经损伤试剂或药物中的用途，所述的2-磷酸甘油酸可显著降低氧糖剥夺/再氧合(ogd/r)海马神经元细胞铁死亡，降低ogd/r引起的氧化应激，改善线粒体损伤，促进神经细胞活力；显著降低脑梗死面积，明显促进皮层区及海马区神经元细胞存活，可以作为潜在的神经损伤修复药物，具有良好的应用前景。

2、本发明包括以下技术方案：

3、2-磷酸甘油酸或其盐在制备用于缺氧缺血性脑损伤治疗的试剂/药物中的用途。

4、所述2-磷酸甘油酸具有如以下式1的结构：

5、

6、进一步的，上述2-磷酸甘油酸或其盐可以是商业购得，或者自己生产所得。

7、进一步的，所述试剂/药物为促进氧糖剥夺ogd/r海马神经元细胞活力和或抑制氧糖剥夺ogd/r海马神经元细胞死亡的药物。在一些实施例中，细胞培养液中加入2-磷酸甘油酸，有促进ogd/r海马神经元细胞活力的作用；在一些实施例中，细胞培养液中加入2-磷酸甘油酸，有抑制氧糖剥夺(ogd/r)海马神经元细胞死亡的作用。

8、进一步的，所述的海马神经元细胞属于ht-22细胞系。在某些实施例中，所述的海马神经元细胞为ht-22细胞系，所述的ogd/r氧糖剥夺模型为常规氧糖剥夺模型，其中细胞培养在无糖dmem的培养基中，在5％co2，94.9％n2和0.1％o2的三气细胞培养箱中缺氧培养12小时，此后，细胞换高糖dmem及fbs添加的培养基转移至正常细胞培养箱中，复氧培养2小时。

9、进一步的，所述试剂/药物为治疗新生儿缺氧缺血引起的神经损伤或缺血再灌注神经损伤的试剂/药物。

10、进一步的，所述试剂/药物制备成用于侧脑室注射的剂型。

11、进一步的，本发明公开了2-磷酸甘油酸或其盐在制备促进缺氧缺血性脑损伤神经元存活的试剂/药物中的用途

12、进一步的，本发明公开了2-磷酸甘油酸或其盐在制备抑制海马神经元细胞铁死亡的试剂/药物中的用途；在一些实施例中，所述的海马神经元细胞铁死亡，为25nm rsl3诱导的海马神经元细胞铁死亡模型；在一些实施例中，细胞培养液中加入2-磷酸甘油酸，有促进rsl3诱导的海马神经元细胞活力的作用。

13、另一方面，本发明公开了2-磷酸甘油酸或其盐在制备抑制氧糖剥夺(ogd/r)海马神经元细胞铁死亡的试剂/药物中的用途。在一些实施例中，细胞培养液中加入2-磷酸甘油酸，有抑制氧化应激，降低细胞内fe2+积累，降低acsl4高表达、增加gpx4表达水平、增加线粒体膜电位、改善线粒体功能的作用。

14、进一步的，本发明公开了2-磷酸甘油酸或其盐在制备抑制缺氧缺血性脑损伤神经元铁死亡的试剂/药物中的用途。

15、另一方面，本发明公开了2-磷酸甘油酸或其盐在制备降低缺氧缺血性脑损伤脑梗死中的用途。

16、进一步的，所述的缺氧缺血性脑损伤为新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型。

17、进一步的，降低缺氧缺血性脑损伤脑梗死，在一些实施例中，通过侧脑室注射2-磷酸甘油酸，有降低缺氧缺血性脑损伤脑梗死的作用。

18、另一方面，本发明公开了2-磷酸甘油酸或其盐在制备促进缺氧缺血性脑损伤神经元存活的用途。

19、进一步的，促进缺氧缺血性脑损伤神经元存活，在一些实施例中，通过侧脑室注射2-磷酸甘油酸，有促进缺氧缺血性脑损伤皮层及海马区神经元存活作用。

20、另一方面，本发明公开了2-磷酸甘油酸或其盐在制备抑制缺氧缺血性脑损伤神经元铁死亡的用途。

21、进一步的，抑制缺氧缺血性脑损伤神经元铁死亡，在一些实施例中，通过侧脑室注射2-磷酸甘油酸，有促进缺氧缺血性脑损伤皮层及海马区gpx4表达的作用。

22、另一方面，本发明公开了一种用于治疗缺氧缺血性脑损伤的试剂、药物或药物组合物，其特征在于，含有治疗量的2-磷酸甘油酸或其盐。

23、进一步的，所述试剂、药物或药物组合物的制剂为药学上可接受的形式，包括但不限于胶囊、片剂、丸剂、滴丸、栓剂、锭剂、喷雾、乳膏、贴剂中的一种或者多种。

24、本发明具有以下有益效果：

25、本发明首次发现2-磷酸甘油酸作为细胞溶液添加剂可显著促进ogd/r引起的海马神经元降低，促进ogd/r诱导的海马神经元细胞存活，降低ogd/r诱导的海马神经元导致的铁死亡。本发明构建缺氧缺血性脑病损伤新生大鼠模型，通过侧脑室给药2-磷酸甘油酸，可显著降低缺氧缺血引起的脑梗死面积，促进大脑皮层及海马区神经元细胞存活，降低神经元细胞铁死亡。

26、进一步的，本发明公开了一种化合物2-磷酸甘油酸及其在制备神经损伤修复试剂或药物中的用途，所述2-磷酸甘油酸可显著提高ogd/r诱导的海马神经元细胞活力，抑制ogd/r导致的海马神经元细胞死亡；机制解析发现2-磷酸甘油酸通过调控acsl4/gpx4轴，抑制ogd/r诱导的海马神经元细胞铁死亡，发挥神经保护作用，具体表现在2-磷酸甘油酸可显著降低ogd/r导致的fe2+积累，抑制ogd/r导致的ros积累，提高ogd/r导致线粒体膜电位降低，并改善gd/r导致线粒体形态异常；此外，动物实验表明，2-磷酸甘油酸可显著降低缺氧缺血导致的新生大鼠脑梗死面积，通过提高大脑皮层及海马区神经元细胞gpx4表达，抑制神经元铁死亡，促进大脑皮层及海马区神经元细胞存活。因此2-磷酸甘油酸可可以作为潜在的修复神经药物，或者制备针对抑制细胞铁死亡的细胞培养液，具有良好的应用前景。

技术特征：

1.2-磷酸甘油酸或其盐在制备用于缺氧缺血性脑损伤治疗的试剂/药物中的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物为促进氧糖剥夺ogd/r海马神经元细胞活力和或抑制氧糖剥夺ogd/r海马神经元细胞死亡的试剂/药物。

3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述的海马神经元细胞属于ht-22细胞系。

4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述试剂/药物为治疗新生儿缺氧缺血引起的神经损伤或缺血再灌注神经损伤的试剂/药物。

5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述试剂/药物制备成用于侧脑室注射的剂型。

6.2-磷酸甘油酸或其盐在制备促进缺氧缺血性脑损伤神经元存活的试剂/药物中的用途。

7.2-磷酸甘油酸或其盐在制备抑制海马神经元细胞铁死亡的试剂/药物中的用途。

8.2-磷酸甘油酸或其盐在制备抑制缺氧缺血性脑损伤神经元铁死亡的试剂/药物中的用途。

9.一种用于治疗缺氧缺血性脑损伤的试剂、药物或药物组合物，其特征在于，含有治疗量的2-磷酸甘油酸或其盐。

10.根据权利要求9所述的试剂、药物或药物组合物，其特征在于，所述试剂、药物或药物组合物的制剂为药学上可接受的形式，包括但不限于胶囊、片剂、丸剂、滴丸、栓剂、锭剂、喷雾、乳膏、贴剂中的一种或者多种。

技术总结
本发明属于生物医药领域，公开了2‑磷酸甘油酸或其盐在制备用于缺氧缺血性脑损伤治疗的试剂/药物中的应用，本发明通过缺氧和葡萄糖剥夺(OGD)/再氧合(OGD/R)海马神经元细胞(HT‑22)实验及体内缺氧缺血性脑损伤新生大鼠模型实验发现，2‑磷酸甘油酸可直接影响ACSL4/GPX4信号轴，抑制缺氧缺血引起的神经细胞铁死亡，促进神经元存活，能够显著降低脑梗死面积，明显促进皮层区及海马区神经元细胞存活，可以作为潜在的神经损伤修复试剂或药物，具有良好的应用前景，特别的对于新生儿缺氧缺血引起的神经损伤或缺血再灌注神经损伤的预防和/或治疗具有重要的意义。

技术研发人员：董晓华,张光明,王龙,赵璟,陈浩聪
受保护的技术使用者：上海市同仁医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15