miR-501-3p抑制剂或miR-501-3p拮抗剂在制备促进口腔黏膜创伤愈合药物方面的应用

本发明属于生物技术及药物，涉及促进口腔黏膜创伤愈合的生物技术及药物，具体涉及mir-501-3p抑制剂或mir-501-3p拮抗剂在制备促进口腔黏膜创伤愈合药物方面的应用。

背景技术：

1、口腔颌面创伤、肿瘤、感染、先天畸形等疾病手术后大范围角化黏膜缺损的修复是口腔颌面外科的一大难题。自体软组织移植能提供的组织量有限，且存在供区损伤，不适用于大范围角化黏膜缺损的修复。组织替代材料移植仅涉及一个手术区，且组织量不受限，是大范围角化黏膜缺损最具前景的修复方案。然而单纯支架材料移植存活率不一，组织工程化口腔粘膜移植存在免疫排斥反应的风险。支架材料搭载生物活性物质是当前研究的热点。然而，生长因子稳定性差，外泌体提取操作复杂，进入市场后可能供不应求，目前尚无一种理想的可搭载于支架材料上用于修复大范围角化黏膜缺损的生物活性物质。

2、mirna是一类长度为20-24个核苷酸的非编码rna。作为基因组重要的调节因子，mirna可以实现多线程精准调控，且对正常组织几乎无副作用，在新一代药物的研发中具有极大的潜力。创面愈合是一个复杂的过程，涉及许多连续和平行的途径。mirna因其具有多靶点调控能力，可以同时影响多条信号通路，参与多种细胞功能，可能在创面愈合的调控中具有一定优势。与此同时，mirna具有显著的人鼠同源性，多种mirna的序列在人和小鼠组织中完全一致，这也为相关研究提供极大的便利。

3、鉴于上述mirna的特点，人们对mirna在创伤愈合中可能存在的机理以及对可促进创伤愈合具体的mirna的选择方面，开展了相关的研究工作。吴闽枫等人[1]对mirna在创伤愈合中的研究进展进行了总结，结合已有研究，阐释了mirna在不同阶段的病理生理干预机制。在具体mirna的筛选研究方面，吴鹏[2]开展了microrna-96-5p通过抑制bnip3介导的fak信号通路调控创面愈合的研究，发现mir-96-5p对下游靶基因bnip3和fak通路的负向调控作用并促进创面修复；唐慧怡[3]开展了microrna-200b/c靶向rac1调控皮肤创伤愈合的机制研究，发现mir-200b/c直接靶向rac1 3’utr，在角质形成细胞中抑制rac1表达，抑制皮肤创伤愈合；tgf-β1通过减缓mir-200b/c对rac1的靶向抑制，调控创伤再上皮化emt样过程，从而维持皮肤创伤愈合的稳态；xu juan等人[4]研究了mirna-221-3p促进糖尿病小鼠皮肤创伤愈合，发现mirna-221-3p是epc外泌体中高表达的mirna之一，可以促进糖尿病小鼠皮肤伤口愈合。

4、不过，人们对于mirna在创伤愈合方面的研究，至今仍集中在皮肤的创伤愈合方面，而在口腔黏膜创伤愈合方面的研究几乎是空白。皮肤与口腔黏膜在细胞、组织等多重层面存在显著差异。皮肤组织结构中角化层较黏膜显著增厚，真皮层中尚存在汗腺毛囊等皮肤附属器。在创伤愈合过程中，皮肤常常出现瘢痕愈合，而口腔黏膜瘢痕罕见；另外，由于口腔中存在唾液、细菌等复杂情况，口腔黏膜的愈合过程与皮肤愈合存在显著差异。

5、因此，如何针对口腔黏膜创伤的特殊性，开展相关mirna在口腔黏膜创伤愈合的研究，并获得可以促进口腔黏膜创伤愈合的方案，是本领域亟需解决的问题。

6、本部分引述的现有技术报道：

7、[1]吴闽枫,陈瑜,李莹等.mirna在创伤愈合中的研究进展[j].临床与病理杂志,2015,35(07):1408-1412.

8、[2]吴鹏. microrna-96-5p通过抑制bnip3介导的fak信号通路调控创面愈合的研究[d].山东大学,2020.

9、[3]唐慧怡. microrna-200b/c靶向rac1调控皮肤创伤愈合的机制研究[d].南方医科大学,2022.

10、[4]juan x,suwen b,yadi c, et al. mirna-221-3p in endothelialprogenitor cell-derived exosomes accelerates skin wound healing in diabeticmice.[j]. diabetes, metabolic syndrome and obesity : targets and therapy,2020,13.

技术实现思路

1、针对现有技术的缺点和本领域的技术需求，本发明的目的在于提供一种基于可促进口腔黏膜创伤愈合的具体mirna相关技术方案。

2、针对上述技术目的，本发明提供的技术方案如下：

3、mir-501-3p抑制剂或mir-501-3p拮抗剂在用于制备促进口腔黏膜创伤愈合的药物方面的应用。

4、具体地，所述mir-501-3p抑制剂或mir-501-3p拮抗剂能下调mir-501-3p的表达或活性。

5、在本发明之前，关于mir-501-3p的研究主要集中在精神分裂症、癌症等疾病方面[5-8]。mir-501-3p在创伤愈合方面的报道极少，零星的报道也仅在皮肤的创伤愈合方面进行研究，且据发明人所知，还没有mir-501-3p在口腔黏膜创伤愈合方面的报道。

6、如本发明的实施例所示，发明人发现当加入mir-501-3p抑制剂或mir-501-3p拮抗剂后，在hok细胞中下调mir-501-3p可促进细胞增殖加速细胞周期，同时促进细胞周期相关蛋白表达或磷酸化，激活细胞增殖相关的akt通路；在小鼠腭黏膜缺损模型中下调mir-501-3p可加快创面愈合速度。

7、该现象与其他一些mirna在皮肤创伤愈合方面的情况相反，例如潘晓秋等人[9]研究发现深ii度烧伤皮肤组织与正常组织相比，mir-99家族中mir-99a-5p、mir-99b-3p、mir-99b-5p的表达下调，由此，促进创伤愈合需上调前述mirna的表达。

8、本发明的有益效果：

9、本发明基于mirna技术获得了促进口腔黏膜创伤愈合的解决方案，开发出了mir-501-3p抑制剂或mir-501-3p拮抗剂在用于制备促进口腔黏膜创伤愈合的药物方面的应用。本发明可为研发高效修复大范围角化黏膜缺损的组织替代材料提供基础。

10、本部分引述的现有技术报道：

11、[5]c. d,j. l,l. z, et al. micro rna-501-3p functions as a tumorsuppressor in non-small cell lung cancer via downregulating rap1a[j].american journal of respiratory and critical care medicine,2020,201.

12、[6]dai j,lu l,kang l, et al. mir-501-3p promotes osteosarcoma cellproliferation, migration and invasion by targeting bcl7a[j]. human cell,2021,34(2).

13、[7]liujia h,shiming c,yufan y, et al. microrna-501-3p inhibits theproliferation of kidney cancer cells by targeting wtap.[j]. cancer medicine,2021,10(20).

14、[8]梁文权. 精神分裂症相关mir-501-3p表达下调通过mglur5介导的谷氨酸能传递亢进导致小鼠社交与记忆异常[d].南方医科大学,2023.doi:10.27003/d.cnki.gojyu.2022.000569.

15、[9]潘晓秋，翟红军，李丽晖等.深ⅱ度烧伤皮肤mirna差异表达研究[j].中国临床药理学与治疗学,2018,23(12):1321-1328.