喜树碱类衍生物在制备治疗膀胱癌药物中的应用

本发明公开了喜树碱类衍生物新的药物活性——抗膀胱癌活性，以用于制备治疗膀胱癌的药物，属于医药领域。

背景技术：

1、膀胱癌是一种常见的泌尿系统恶性肿瘤，由于其高复发的特性，药物治疗尤其是化学药物治疗是膀胱癌治疗过程中尤为重要的一环。膀胱癌的化学药物治疗主要包括膀胱灌注化疗和全身化疗。膀胱灌注化疗主要用于非肌层浸润性膀胱癌的手术后膀胱内灌注治疗进而预防肿瘤的复发，但由于肿瘤的异质性，存在一定比例的肿瘤对药物不敏感从而导致肿瘤复发的情况。膀胱癌全身化疗的标准治疗方案为以铂类为基础的顺铂+吉西他滨（gc）方案，总体的反应率为49%，但仍有一半左右的病例存在无反应的情况，针对这种不同膀胱癌细胞对于现有药物敏感性不同的情况，开发和使用不同作用靶点的药物以期增加总体的肿瘤反应率，是十分必要的。

2、喜树碱类衍生物是以从中药喜树树皮中提取出的活性生物碱——喜树碱为基础改造而来的一类化合物，有强大的抗肿瘤活性，其抗肿瘤作用的发挥主要依赖于以三元复合物形式阻止细胞核内dna复制的关键酶——拓扑异构酶ⅰ发挥生物学作用，从而造成dna复制叉的断裂和细胞凋亡。以irinotecan为代表的一些喜树碱衍生物在临床上作为一线治疗药物得到了广泛应用，但在膀胱癌中目前应用尚较少，且本发明所述的化合物尚未见在膀胱癌治疗中的应用。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种喜树碱类衍生物的抗膀胱癌活性，以期用于制备治疗膀胱癌的药物。

2、下面通过对膀胱癌t24和j82细胞系的干预，使用cck-8法测定不同浓度干预的t24和j82细胞的细胞存活率的实验，对喜树碱类衍生物化合物对膀胱癌细胞的抗膀胱癌活性进行具体研究和分析。

3、本发明所提供的喜树碱类衍生物，均以dmso溶解稀释为10mm 母液，以rpmi-1640完全培养基为溶剂梯度稀释为8μm、1.6μm、0.32μm、0.064μm、0.0128μm、0.00256μm、0.000512μm、0.0001024μm、0.00002048μm、0.000004096μm的工作液。对膀胱癌t24和j82细胞系的干预，使用cck-8法测定不同浓度干预的t24和j82细胞的细胞存活率，根据细胞存活率计算拟合出每个衍生物在不同细胞中的半数抑制浓度（ic50）值，ic50越低代表同等浓度下细胞存活越少即对肿瘤细胞的杀伤能力越强。

4、所用的膀胱癌细胞系t24和j82均使用rpmi-1640完全培养基（rpmi-1640基础培养基、10%胎牛血清、青霉素/链霉素双抗）并在37℃、5%二氧化碳和饱和湿度条件下培养。

5、将处于对数期生长的t24和j82细胞用胰蛋白酶消化并使用rpmi-1640完全培养基制备为单细胞混悬液，计数后以5000个/孔的密度接种至96孔板，待细胞贴壁之后去除培养液将上述工作液100ul/孔加入孔板，每组设置3个重复孔，干预72h之后去除工作液，每孔加入100ul含有5% cck-8 试剂的rpmi-1640基础培养基，继续培养2h后，酶标仪450nm波长测定每孔吸光度，根据吸光度计算细胞抑制率和ic50。并与膀胱癌治疗常用药顺铂进行对比。

6、每种化合物重复检测三次，数值以均数±标准差表示。所述喜树碱类衍生物的结构式及在膀胱癌细胞中的ic50见表1。

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9、表1的实验结果显示，所涉及的喜树碱类衍生物对膀胱癌细胞的半数抑制浓度（ic50）低于顺铂或与顺铂接近，即上述喜树碱类衍生物对膀胱癌细胞的杀伤能力优于顺铂或与顺铂相似，因此本发明所涉及的喜树碱类衍生物在膀胱癌的治疗中具有良好的应用前景。

10、基于上述研究成果，以喜树碱类衍生物为活性物质，按药学上可接受的盐加入药学上可接受的载体和/或辅料，制成药学上可接受的任一剂型，如片剂、喷雾剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液、针剂、混悬剂的任一种剂型。

技术特征：

1.喜树碱类衍生物作为活性成分在制备抗膀胱癌药物中的应用，其特征在于：所述喜树碱类衍生物的结构式如下：

2.如权利要求1所述喜树碱类衍生物作为活性成分在制备抗膀胱癌药物中的应用，其特征在于：所述喜树碱类衍生物或其药学上可接受的盐加入药学上可接受的载体和/或辅料，制成药学上可接受的任一剂型。

3.如权利要求2所述喜树碱类衍生物作为活性成分在制备抗膀胱癌药物中的应用，其特征在于：所述剂型为片剂、喷雾剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液、针剂、混悬剂的任一种剂型。

技术总结
本发明公开了一种喜树碱类衍生物的新的药物活性——抗膀胱癌活性，以用于制备治疗膀胱癌的药物，属于医药领域。具体涉及在膀胱癌治疗中的用途。根据在不同膀胱癌细胞中的药物活性测定，与膀胱癌治疗常用药顺铂进行对比，结果显示，本发明所涉及的喜树碱类衍生物化合物对膀胱癌细胞的半数抑制浓度（IC50）低于顺铂或与顺铂接近，即上述喜树碱类衍生物对膀胱癌细胞的杀伤能力优于顺铂或与顺铂相似，因此所涉及的喜树碱类衍生物在膀胱癌的治疗中具有良好的应用前景。

技术研发人员：范光锐,王志平,刘映前,张智军,罗雄飞,周翰
受保护的技术使用者：兰州大学
技术研发日：
技术公布日：2024/2/29