达原饮在制备抑制EMT的药物中的应用

本发明属于中医药，具体涉及达原饮在制备抑制emt的药物中的应用。

背景技术：

1、上皮间质转化(epithelial to mesenchymal transition，emt)是上皮细胞下调其上皮特征，获得间充质细胞表型的动态转化过程。肿瘤细胞通过emt丢失某些上皮细胞特征来获得更强的侵袭和迁移能力，促进肿瘤的发生、侵袭和转移，增强其耐药性。同样各种亚临床迁延性损伤因素首先累及肺泡上皮，诱导肺泡上皮细胞发生emt，发生emt的肺上皮细胞参与肺组织过度修复，促进肺纤维化进展。

2、旁分泌信号分子tgf-β1等下调上皮细胞e-钙粘蛋白(e-cadherin，e-cad)的表达，破坏细胞连接是emt发生的关键。emt发生的组织学鉴定标准为：丢失e-cad蛋白等上皮细胞黏附分子，增加n-cad、vimentin、α-sma蛋白等间充质细胞的标志蛋白的表达。

3、达原饮是“开达膜原”的经典方剂，已用于治疗sars的“邪伏膜原”证和covid-19的“湿邪郁肺”证。除治疗肺系疫病外，达原饮还可用于治疗无名发热等，但通过抑制emt预防和/或治疗疾病的研究与应用至今未见报道。

技术实现思路

1、本发明第一方面的目的，在于依据中医理论，提供达原饮在制备抑制emt的药物中的应用。

2、本发明第二发明的目的，在于提供达原饮在制备cdh1基因、e-cad蛋白促进剂中的应用。

3、本发明第三发明的目的，在于提供达原饮在制备n-cad或vimentin抑制剂中的应用。

4、本发明第四方面的目的，在于提供达原饮在制备胶原蛋白合成抑制剂中的应用。

5、为了实现上述目的，本发明所采取的技术方案是：

6、本发明第一个方面，在于提供达原饮在制备抑制emt的药物中的应用，所述达原饮由包括以下组分的原料制成：槟榔、厚朴、草果仁、知母、白芍、黄芩、甘草片。

7、在本发明一些实施方式中，所述达原饮由包括以下重量份的组分的原料制成：槟榔6～18份、厚朴3～9份、草果仁1～5份、知母3～9份、白芍3～9份、黄芩3～9份、甘草1～5份。

8、在本发明一些实施方式中，所述达原饮由包括以下重量份的组分的原料制成：槟榔6～10份、厚朴3～7份、草果仁1～4份、知母3～6份、白芍3～6份、黄芩3～6份、甘草1～4份。

9、在本发明一些实施方式中，所述药物促进发生emt的上皮细胞中e-cad蛋白的表达，和/或抑制发生emt的上皮细胞中n-cad、vimentin、α-sma蛋白的表达。

10、在本发明一些实施方式中，所述药物抑制发生emt的肿瘤细胞迁移，降低细胞迁移，和/或抑制肺纤维化过程中emt的发生，降低肺组织中的羟脯氨酸含量。

11、在本发明一些实施方式中，所述药物由包括所述的达原饮和药学上可接受的辅料制备而成。

12、在本发明一些实施方式中，所述药物可按本领域常规方法制备。本发明所述药物是各原料药粉碎后混合而成的组合物；或者各原料药混合后提取得到的提取物，或者各原料药单独提取后混合得到的提取物。任选的，提取物进一步精制纯化。其中，所述提取的方法包括煎煮提取、回流提取、浸渍提取、超声提取、渗漉提取、微波提取等：所述纯化的方法包括水提醇沉、碱溶酸沉以及各种柱色谱纯化方法，如大孔树脂柱、硅胶柱、凝胶柱、反相柱等。

13、在本发明一些实施方式中，所述药物的剂型为汤剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、口服液、散剂和膏剂中的一种。

14、在本发明一些实施方式中，上述达原饮加入适宜的药学上可接受的辅料，按所需剂型的常规制备工艺即可，以制成相应的汤剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、口服液、散剂和膏剂。

15、在本发明一些实施方式中，所述药学可接受的辅料包括填充剂、崩解剂、稀释剂、润滑剂、粘合剂、湿润剂、矫味剂、助悬剂、溶剂、缓释剂、乳化剂、吸收促进剂、表面活性剂或防腐剂中的至少一种。

16、在本发明一些实施方式中，所述填充剂选自淀粉、蔗糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素或葡萄糖等；所述粘合剂选自纤维素衍生物、藻酸盐、淀粉、水、糊精、明胶、羟丙基纤维素、甲基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮等；所述稀释剂选自乳糖、蔗糖、甘露醇、玉米淀粉、马铃薯淀粉、磷酸钙、柠檬酸钙和结晶纤维素中的至少一种；所述崩解剂选自玉米淀粉、马铃薯淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙基纤维素、羧甲基淀粉钠、羧甲基纤维素、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙和藻酸中的至少一种；所述润滑剂选自硬脂酸、聚乙二醇、碳酸钙、碳酸氢钠、微粉硅胶、滑石粉、无水硅胶和硬脂酸镁中的至少一种：所述助悬剂选自微粉硅胶、蜂蜡、纤维素、羧甲基纤维素钠和固态聚乙二醇中的至少一种：所述润湿剂选自甘油、吐温-80、氧基氢化蓖麻油、十二烷基硫酸钠和卵磷脂中的至少一种：所述溶剂选自乙醇、液态聚乙二醇、异丙醇、吐温-80、甘油、丙二醇和植物油中的至少一种，所述植物油选自大豆油、蓖麻油、花生油、调和油等：所述表面活性剂选自十二烷基苯磺酸钠、硬脂酸、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物、脂肪酸山梨坦和聚山梨(吐温)中的至少一种：所述矫味剂选自阿斯巴甜、蔗糖素、香精、甜菊素、安赛蜜、柠檬酸和糖精钠中的至少一种；所述防腐剂选自对羟苯甲酸甲酯或对羟苯甲酸丙酯中的至少一种。

17、本发明第二个方面，在于提供达原饮在制备cdh1基因、e-cad蛋白促进剂中的应用。

18、在本发明一些实施方式中，所述cdh1基因、e-cad蛋白促进剂为促进cdh1基因或e-cad蛋白表达的促进剂。

19、在本发明一些实施方式中，所述cdh1基因、e-cad蛋白促进剂用于促进细胞内cdh1基因或e-cad蛋白的表达。

20、在本发明一些实施方式中，所述细胞包括肺癌细胞和肺泡上皮细胞。

21、在本发明一些实施方式中，所述达原饮由包括以下组分的原料制成：槟榔、厚朴、草果仁、知母、白芍、黄芩、甘草片。

22、在本发明一些实施方式中，所述达原饮由包括以下重量份的组分的原料制成：槟榔6～18份、厚朴3～9份、草果仁1～5份、知母3～9份、白芍3～9份、黄芩3～9份、甘草1～5份。

23、在本发明一些实施方式中，所述达原饮由包括以下重量份的组分的原料制成：槟榔6～10份、厚朴3～7份、草果仁1～4份、知母3～6份、白芍3～6份、黄芩3～6份、甘草1～4份。

24、在本发明一些实施方式中，所述促进剂由包括所述的达原饮和药学上可接受的辅料制备而成。

25、在本发明一些实施方式中，所述促进剂可按本领域常规方法制备。本发明所述促进剂是各原料药粉碎后混合而成的组合物；或者各原料药混合后提取得到的提取物，或者各原料药单独提取后混合得到的提取物。任选的，提取物进一步精制纯化。其中，所述提取的方法包括煎煮提取、回流提取、浸渍提取、超声提取、渗漉提取、微波提取等：所述纯化的方法包括水提醇沉、碱溶酸沉以及各种柱色谱纯化方法，如大孔树脂柱、硅胶柱、凝胶柱、反相柱等。

26、在本发明一些实施方式中，所述药学可接受的辅料包括填充剂、崩解剂、稀释剂、润滑剂、粘合剂、湿润剂、矫味剂、助悬剂、溶剂、缓释剂、乳化剂、吸收促进剂、表面活性剂或防腐剂中的至少一种。

27、本发明第三个方面，在于提供达原饮在制备n-cad或vimentin的抑制剂中的应用。

28、在于提供达原饮在抑制n-cad或vimentin的表达中的应用。

29、在本发明一些实施方式中，所述n-cad或vimentin抑制剂为抑制n-cad或vimentin基因或蛋白表达的抑制剂。

30、在本发明一些实施方式中，所述n-cad或vimentin抑制剂用于抑制细胞内n-cad或vimentin基因或蛋白表达。

31、在本发明一些实施方式中，所述细胞包括肺癌细胞和肺泡上皮细胞。

32、在本发明一些实施方式中，所述达原饮由包括以下组分的原料制成：槟榔、厚朴、草果仁、知母、白芍、黄芩、甘草片。

33、在本发明一些实施方式中，所述达原饮由包括以下重量份的组分的原料制成：槟榔6～18份、厚朴3～9份、草果仁1～5份、知母3～9份、白芍3～9份、黄芩3～9份、甘草1～5份。

34、在本发明一些实施方式中，所述达原饮由包括以下重量份的组分的原料制成：槟榔6～10份、厚朴3～7份、草果仁1～4份、知母3～6份、白芍3～6份、黄芩3～6份、甘草1～4份。

35、在本发明一些实施方式中，所述抑制剂由包括所述的达原饮和药学上可接受的辅料制备而成。

36、在本发明一些实施方式中，所述抑制剂可按本领域常规方法制备。本发明所述抑制剂是各原料药粉碎后混合而成的组合物；或者各原料药混合后提取得到的提取物，或者各原料药单独提取后混合得到的提取物。任选的，提取物进一步精制纯化。其中，所述提取的方法包括煎煮提取、回流提取、浸渍提取、超声提取、渗漉提取、微波提取等：所述纯化的方法包括水提醇沉、碱溶酸沉以及各种柱色谱纯化方法，如大孔树脂柱、硅胶柱、凝胶柱、反相柱等。

37、在本发明一些实施方式中，所述药学可接受的辅料包括填充剂、崩解剂、稀释剂、润滑剂、粘合剂、湿润剂、矫味剂、助悬剂、溶剂、缓释剂、乳化剂、吸收促进剂、表面活性剂或防腐剂中的至少一种。

38、本发明第四个方面，在于提供达原饮在制备胶原蛋白合成抑制剂中的应用。

39、在于提供达原饮在体外抑制胶原蛋白合成中的应用。

40、在本发明一些实施方式中，所述胶原蛋白合成抑制剂为抑制纤维化过程中胶原的过度合成。

41、在本发明一些实施方式中，所述达原饮由包括以下组分的原料制成：槟榔、厚朴、草果仁、知母、白芍、黄芩、甘草片。

42、在本发明一些实施方式中，所述达原饮由包括以下重量份的组分的原料制成：槟榔6～18份、厚朴3～9份、草果仁1～5份、知母3～9份、白芍3～9份、黄芩3～9份、甘草1～5份。

43、在本发明一些实施方式中，所述达原饮由包括以下重量份的组分的原料制成：槟榔6～10份、厚朴3～7份、草果仁1～4份、知母3～6份、白芍3～6份、黄芩3～6份、甘草1～4份。

44、在本发明一些实施方式中，所述抑制剂由包括所述的达原饮和药学上可接受的辅料制备而成。

45、在本发明一些实施方式中，所述抑制剂可按本领域常规方法制备。本发明所述抑制剂是各原料药粉碎后混合而成的组合物；或者各原料药混合后提取得到的提取物，或者各原料药单独提取后混合得到的提取物。任选的，提取物进一步精制纯化。其中，所述提取的方法包括煎煮提取、回流提取、浸渍提取、超声提取、渗漉提取、微波提取等：所述纯化的方法包括水提醇沉、碱溶酸沉以及各种柱色谱纯化方法，如大孔树脂柱、硅胶柱、凝胶柱、反相柱等。

46、在本发明一些实施方式中，所述药学可接受的辅料包括填充剂、崩解剂、稀释剂、润滑剂、粘合剂、湿润剂、矫味剂、助悬剂、溶剂、缓释剂、乳化剂、吸收促进剂、表面活性剂或防腐剂中的至少一种。

47、本发明的有益效果是：

48、本发明首次公开了达原饮在制备抑制emt的药物中的应用。通过实验证明，达原饮可有效促进发生emt的上皮细胞中cdh1基因和e-cad蛋白的表达，抑制发生emt的上皮细胞中n-cad、vimentin、α-sma蛋白的表达。抑制发生emt的肿瘤细胞迁移，降低肿瘤细胞迁移率。抑制肺纤维化过程中emt的发生，降低肺组织中的羟脯氨酸含量，抑制纤维化过程中胶原蛋白的过度合成。即达原饮可通过抑制emt用于预防和/或治疗emt相关的疾病，为emt相关疾病的预防和治疗提供新的可能。本发明所用的达原饮的质量可控、便于标准化生产，且安全可靠、对人体无毒副作用。