一种组合物及其应用和药物的制作方法

本发明涉及医药，更具体的说是涉及一种治疗癌症的组合物及其应用和药物。

背景技术：

1、1.癌症流行病学

2、非传染性疾病是全球死亡的主要诱因，而癌症则是非传染性疾病中致死率最高的疾病，给社会健康医疗体系带来沉重负担。传统的癌症治疗以手术以及放化疗为主，对于进展期癌症则以化疗为主。经典的化疗因靶向性差而副作用大。以格列卫为代表的靶向化疗药物的出现极大的降低了化疗给患者带来的痛苦。靶向药针对癌症细胞不同于正常细胞生长特点和表达的分子而设计，如格列卫特异性针对慢性髓性白血病中组成型激活的酪氨酸激酶从而起到很好的治疗效果(flynn and gerriets,2020)。癌症细胞不同于正常细胞的另一显著特点为代谢方式的改变。为了平衡快速增殖对细胞组分的需求以及维持生存所需的能量供应，癌症细胞偏好于采用有氧糖酵解的方式利用葡萄糖，这叫做warburg效应(warburg,1956)。有氧糖酵解并不能充分的氧化葡萄糖产生atp，但却可以产生大量的中间代谢产物用于dna和蛋白质的合成从而促进癌症细胞增殖。因而靶向肿瘤细胞的糖代谢，从而达到抑制癌症细胞增殖的目的是可行的(kroemer and pouyssegur,2008)。

3、2.sglt1抑制剂与癌症治疗

4、癌症细胞从外界环境吸收葡萄糖主要通过葡萄糖转运蛋白完成，葡萄糖转运蛋白分为两大家族，一类是通过协助扩散的方式顺葡萄糖浓度梯度进行转运的glut家族，另一类则是通过协同转运钠离子而进行葡萄糖吸收的钠离子葡萄糖转运蛋白sglt家族，该家族蛋白以消耗atp的方式主动转运外界的葡萄糖供给细胞使用(navale and paranjape,2016)。sglt家族最主要的两个成员是sglt1和sglt2，sglt2主要分布在肾脏近曲小管的前端，通过主动运输将原尿中97％以上的葡萄糖重吸收入血，而sglt1则主要分布在小肠绒膜的上皮细胞以及肾脏近曲小管的远端，通过主动运输吸收肠道内食物中的葡萄糖以及原尿中经sglt2吸收后剩余的3％左右的葡萄糖(dominguez rieg and rieg,2019)。由于sglt1以及sglt2在糖吸收以及重吸收中的重要作用因而成为糖尿病治疗的理想靶点。目前靶向sglt2的恩格列净，卡格列净，达格列净在临床上用于治疗二型糖尿病显示出了很好的治疗效果，同时还具有降低心血管病的疗效。单独靶向sglt1的米格列净已经进入临床研究阶段。同时靶向sglt1和sglt2的sy-009(亚宝药业)、licogliflozin(诺华制药)则在欧盟获批上市。此外还在研究中的sglt抑制剂还有多种，而这些抑制剂在癌症中的应用还不曾被提及。

5、3.tki以及癌症对tki的耐药性

6、受体酪氨酸激酶(rtk)是癌症中最常见的促进癌症发展的基因，rtk结合相应的配体后通常会发生二聚化进而催化自我磷酸化而起始一系列促进癌症细胞增殖的下游信号级联反应(lemmon and schlessinger,2010；yarden and pines,2012)。癌症细胞通常会过表达rtk或者对rtk进行组成型激活的突变而上调rtk的活性促进自身增殖，因而靶向rtk活性是开发抗癌药物的主要手段，包括靶向rtk的atp结合口袋的小分子酪氨酸激酶活性抑制剂(tki)以及靶向配体结合的单克隆抗体等(thomas and weihua,2019)。tki的研发成功有效地延长了rtk过表达或组成型激活患者的无疾病进展生存期显著提高了患者的生活质量，目前绝大多数tki都是相应癌症领域的一线用药，然而排除天然对tki耐药的癌症患者外，即便对tki治疗应答良好的患者也会在一年左右的治疗周期内形成获得性耐药(camidge et al.；cortot and janne,2014)。总结耐药性产生的原因主要分为药理学耐药以及生物学耐药，药理学耐药多是由于机体药物相互作用而引起药物无法在癌症细胞周围达到起效浓度，癌症细胞本身可能仍然对药物敏感，而生物学耐药则是由于癌症异质性，药物选择压力导致的耐药性突变的产生，替代性的旁路信号通路激活所引起(minuti,g.,aet al)。生物学耐药是tki类药物耐药的主要原因。针对癌症细胞获得性耐药的机制，研究者们设计了很多方法来克服癌症的耐药性，包括针对常规耐药性突变开发第二代，第三代等更新的抑制剂，在耐药后联合放疗或化疗以及联合新的靶向药。就目前来看即便第三代抑制剂也存在获得性耐药，而放疗和化疗收效甚微。联合其他靶向药克服耐药是首要选择。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的在于提供一种组合物，使得所述组合物中的酪氨酸激酶活性抑制剂(tki)与sglt抑制剂具有协同抗肿瘤效应；

2、本发明的另外一个目的在于提供一种组合物，使得所述组合物中的酪氨酸激酶活性抑制剂与sglt抑制剂可以显著增强tki类药物的疗效并逆转耐药性；

3、本发明的另外一个目的在于提供上述组合物在制备治疗癌症药物中的应用；

4、本发明的另外一个目的在于提供包含上述组合物的治疗癌症的药物；

5、为实现上述发明目的，本发明提供如下技术方案：

6、一种治疗癌症的组合物，包括sglt抑制剂和酪氨酸激酶活性抑制剂。

7、本发明在研究中发现肿瘤细胞在低糖培养基中增殖速度变缓并且在低糖培养基中对于拉帕替尼，阿帕替尼，图卡替尼等tki类抑制剂敏感性增加。说明低糖增强了肿瘤细胞对tki类药物的敏感性。同时低糖培养基中的细胞密度也更低说明低糖培养还可以抑制癌症细胞的增殖。结合背景技术介绍，癌症细胞吸收糖主要依赖sglt家族蛋白，因此本发明由此预期两者的抑制剂联合使用将会产生协同抗肿瘤的作用；经过实验验证，酪氨酸激酶活性抑制剂以及sglt抑制剂组成的组合物对肿瘤生长具有显著抑制作用，该组合物对肿瘤的抑制具有显著的协同增效作用。同时，酪氨酸激酶活性抑制剂的耐药肿瘤细胞株在采用本发明组合物后可以逆转该耐药性显著增强tki类药物的疗效。

8、因此，本发明提供上述组合物在制备治疗癌症药物中的应用；所述癌症包括但不限于膀胱癌、血癌、骨癌、脑癌、乳腺癌、中枢神经系统癌症、宫颈癌、结肠癌、子宫内膜癌、食管癌、胆囊癌、胃肠道癌、外生殖器癌、泌尿生殖道癌、头癌、肾癌、喉癌、肝癌、肺癌、肌肉组织癌症、颈癌、口腔或鼻黏膜癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、皮肤癌、脾癌、小肠癌、大肠癌、胃癌、睾丸癌和甲状腺癌。

9、作为优选，所述sglt抑制剂和酪氨酸激酶活性抑制剂的摩尔比为(10～60)：(5～60)，更优选地为(10～40)：(5～60)；在本发明具体实施方式中，sglt抑制剂和酪氨酸激酶活性抑制剂的摩尔比为10:5、10:10、10:20、10：30、10:40、10:60、20:5、20:10、20:20、20：30、20:40、20:60、30:5、30:10、30:20、30：30、30:40、30:60、40:5、40:10、40:20、40：30、40:40或40:60。

10、在本发明具体实施方式中，本发明通过浓度的方式进行组合物的相关试验，所述组合物中0＜sglt抑制剂浓度为≤100μm，所述组合物中0＜酪氨酸激酶活性抑制剂≤100μm。在本发明具体实施方式中，所述sglt抑制剂浓度为5、10、20、30、40、60、80或100μm，所述酪氨酸激酶活性抑制剂浓度为2.5、5、10、20、30、40、50、60、80或100μm。

11、在本发明具体实施方式中，所述sglt抑制剂选自索格列净、sy-009(购自亚宝药业)、licogliflozin(购自诺华制药)中的一种或两种以上；

12、作为优选，所述酪氨酸激酶活性抑制剂选自egfr抑制剂、c-kit抑制剂、c-met抑制剂、c-ret抑制剂、raf抑制剂、pdgfr抑制剂、btk抑制剂、pka/c抑制剂、fgfr抑制剂、vegfr抑制剂、her2抑制剂中的一种或两种以上。

13、其中，所述egfr抑制剂选自吉非替尼，厄洛替尼、阿法替尼、二甲苯磺酸拉帕替尼、染料木素、拉帕替尼、沙普替尼、瑞香素、达克替尼、瓦利替尼、埃克替尼、盐酸利多卡因、奥斯替尼甲磺酸盐、奥斯替尼、波齐替尼、那扎替尼、azd3759、奥莫替尼、艾维替尼、来那替尼、拉泽替尼中的一种或两种以上；

14、所述c-met抑制剂选自卡博替尼；

15、所述pka/c抑制剂选自瑞香素；

16、所述btk抑制剂选自奥莫替尼；

17、所述c-ret抑制剂选自瑞戈非尼水合物和/或瑞戈非尼；

18、所述raf抑制剂选自瑞戈非尼水合物；

19、所述fgfr抑制剂选自4-[(1e)-2-[5-[(1r)-1-(3,5-二氯-4-吡啶基)乙氧基]-1h-吲唑-3-基]乙烯基]-1h-吡唑-1-乙醇、尼达尼布、尼达尼布乙磺酸盐、帕纳替尼、布立尼布、丙氨酸布立尼布中的一种或两种以上；

20、所述c-kit抑制剂选自阿昔替尼、帕唑帕尼、盐酸帕唑帕尼、瑞戈非尼水合物、苹果酸舒尼替尼、舒尼替尼、西特拉瓦替尼、替拉替尼中的一种或两种以上；

21、所述pdgfr抑制剂选自阿昔替尼、替沃扎尼、替拉替尼、尼达尼布、尼达尼布乙磺酸盐、帕唑帕尼、盐酸帕唑帕尼、帕纳替尼中的一种或两种以上；

22、所述vegfr抑制剂选自阿帕替尼、阿昔替尼、尼达尼布、西地尼布、盐酸帕唑帕尼、苹果酸舒尼替尼、布立尼布、卡博替尼、丙氨酸布立尼布、乐伐替尼、瑞戈非尼、enmd-2076、enmd-2076酒石酸盐、替沃扎尼、帕纳替尼、呋喹替尼、替拉替尼、花旗松素、帕唑帕尼、苹果酸卡博替尼、维生素e、瑞戈非尼水合物、尼达尼布乙磺酸盐、乐伐替尼甲磺酸盐、西地尼布马来酸盐、4-[(1e)-2-[5-[(1r)-1-(3,5-二氯-4-吡啶基)乙氧基]-1h-吲唑-3-基]乙烯基]-1h-吡唑-1-乙醇、舒尼替尼、西特拉瓦替尼、安罗替尼、索拉非尼、凡德他尼、贝伐单抗等靶向vegfr的单抗类药物中的一种或两种以上；

23、所述her2抑制剂选自拉帕替尼、来那替尼、沙普替尼、波齐替尼、图卡替尼、二甲苯磺酸拉帕替尼、图卡替尼中的一种或两种以上。

24、在本发明具体实施方式中，用于验证sglt抑制剂与酪氨酸激酶活性抑制剂联用的药效的tki类药物包括：阿昔替尼、尼达尼布、西地尼布、盐酸帕唑帕尼、苹果酸舒尼替尼、布立尼布、卡博替尼、丙氨酸布立尼布、乐伐替尼、瑞戈非尼、enmd-2076、替沃扎尼、帕纳替尼、enmd-2076酒石酸盐、替拉替尼、花旗松素、帕唑帕尼、苹果酸卡博替尼、维生素e、瑞格非尼水合物、尼达尼布乙磺酸盐、乐伐替尼甲磺酸盐、西地尼布马来酸盐、4-[(1e)-2-[5-[(1r)-1-(3,5-二氯-4-吡啶基)乙氧基]-1h-吲唑-3-基]乙烯基]-1h-吡唑-1-乙醇、舒尼替尼、西特拉瓦替尼、安罗替尼、凡德他尼、呋喹替尼、奥莫替尼、奥斯替尼、染料木素、艾维替尼、达克替尼、奥斯替尼甲磺酸盐、瑞香素、瓦利替尼、azd3759、拉泽替尼、那扎替尼、盐酸利多卡因、埃克替尼、拉帕替尼、沙普替尼、图卡替尼、二甲苯磺酸拉帕替尼、波齐替尼和来那替尼。

25、根据本发明所提供的应用，本发明还提供了一种治疗癌症的药物，其包含本发明所述组合物以及药学上可接受的助剂。

26、作为优选，药物剂型为口服药物的各种剂型，包括但不限于颗粒剂、丸剂、散剂、片剂、胶囊剂、口服液、糖浆剂等形式。

27、作为优选，胶囊剂为硬胶囊剂或软胶囊剂，片剂为口服片剂或口腔片剂。

28、所述片剂指供口服的片剂，多数此类片剂中的药物是经胃肠道吸收而发挥作用，也有的片剂中的药物是在胃肠道局部发挥作用。在实际的应用中，片剂可以为普通压制片、分散片、泡腾片、咀嚼片、包衣片或缓控释片。

29、药学上可接受的助剂包括但不限于水果粉、食用香精、甜味剂、酸味剂、填充剂、润滑剂、防腐剂、助悬剂、食用色素、稀释剂、乳化剂、崩解剂或增塑剂中的一种或两者以上的混合物。

30、本发明还提供了一种治疗癌症的方法，其为给予本发明所述的药物。

31、由以上技术方案可知，本发明提供了含有sglt1抑制剂和酪氨酸激酶活性抑制剂的组合物。基于tki靶向vegfr、egfr、her2等受体酪氨酸激酶的抑制作用，本发明通过体外抗肿瘤试验表明索格列净、sy-009、licogliflozin等sglt1抑制剂与酪氨酸激酶活性抑制剂联合用药可以对肿瘤产生协同抑制作用；而且能够显著增强tki类药物的疗效并逆转耐药性，可用于癌症治疗和抗癌药物的制备中。