一种珍珠发酵物的制备方法及其应用与流程

本发明涉及生物，具体而言，涉及一种珍珠发酵物的制备方法及其应用。

背景技术：

1、珍珠药用在中国已有2000余年历史。三国时的医书《名医别录》、梁代的《本草经集》、唐代的《海药本草》、宋代的《开宝本草》、明代的《本草纲目》、清代的《雷公药性赋》等19种医药古籍，都对珍珠的疗效有明确的记载。《中华人民共和国药典》及《中药大辞典》均指明：珍珠具有安神定惊、明目去翳、解毒生肌等功效，现代研究还表明珍珠粉在提高人体免疫力、延缓衰老、祛斑美白、补充钙质等方面都具有独特的作用。

2、而由于珍珠包含90％以上的碳酸钙成分，导致其有效成分释放较为困难，在一些产品中的应用难度较大。目前珍珠深加工领域基本采用粉碎后酸解的方式来释放其有效成分，酸解过程中复分解反应产生的大量co2携带酸性气体逸出，对作业人员健康及场地气味控制带来挑战。因此，寻求更为高效利用珍珠的方式很有必要。

3、鉴于此，特提出本发明。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种珍珠发酵物的制备方法及其应用以解决上述技术问题。

2、本发明是这样实现的：

3、第一方面，本发明提供了一种珍珠发酵物的制备方法，其包括如下步骤：将珍珠发酵菌接种在种子培养基上进行培养得到种子液；

4、以含有珍珠粉的珍珠粉培养基为发酵底物，将种子液接种在发酵底物上进行发酵培养得到发酵液；发酵培养的条件为：25-35℃、150-200rpm，培养20-24h后，再于25-35℃、150-200rpm、0.2-0.5l/min的条件下通气培养48-72h；再对发酵液进行分离；珍珠发酵物含岩藻糖2～4mg/l、n-乙酰-d-氨基葡萄糖3～6mg/l及半乳糖醛酸2～5mg/l。

5、珍珠发酵菌通过商业购买可得；菌种来源：中国农业微生物菌种保藏管理中心，保藏编号accc 30144。

6、本发明提供的珍珠发酵物的制备方法可以直接将珍珠粉进行发酵利用，无需进行酸解等复杂的前期处理，工艺简单。采用出芽短梗霉菌进行发酵，以含的珍珠粉的珍珠粉培养基为发酵底物，通过特定的发酵工艺进行珍珠发酵物的制备。经检测，采用本发明提供的珍珠发酵物的制备方法制备的珍珠发酵物具有活性成分(岩藻糖、n-乙酰-d-氨基葡萄糖及半乳糖醛酸)含量高的技术优势。

7、在上述发酵条件下培养，有助于快速高效地提升珍珠发酵物中的活性成分含量。通气培养的条件为25℃、26℃、27℃、28℃、29℃、30℃、31℃、32℃、33℃、34℃或35℃，150rpm、155rpm、160rpm、165rpm、170rpm、175rpm、180rpm、185rpm、190rpm或200rpm；在0.2l/min、0.3l/min、0.4l/min或0.5l/min的条件下通气培养48h、50h、55h、58h、60h、62h、65h、68h、70h或72h。

8、在一种可选的实施方式中，先在25℃、26℃、27℃、28℃、29℃、30℃、31℃、32℃、33℃、34℃或35℃，150rpm、155rpm、160rpm、165rpm、170rpm、175rpm、180rpm、185rpm、190rpm或200rpm；培养20h、21h、22h、23h或24h。

9、在本发明应用较佳的实施方式中，珍珠粉的平均粒径为1-5μm；珍珠粉的平均粒径为1-2μm、1-3μm、2-4μm、2-5μm或3-5μm。

10、珍珠粉粉碎粒径太大不利于有效物质的溶出；粒径太小则对研磨工艺的要求较高，成本大幅上升。使用适中的粒径能的平衡生产成本与珍珠活性物利用率。

11、在一种可选的实施方式中，珍珠粉的平均粒径为1-3μm。

12、在一种可选的实施方式中，珍珠粉是将待粉碎的珍珠粉经超音速气流粉碎制得；且粉碎后不进行酸解。通过超音速气流粉碎可以形成具有规则几何形状的微米级珍珠粉。

13、超音速气流的气源压力≥0.8mpa；优选地，超音速气流的气源压力为0.85～0.9mpa。

14、优选地，超音速气流的进料压力≥0.8mpa；优选地，超音速气流的进料压力为0.8～0.85mpa。

15、上述超音速气流粉碎具有如下技术优势：超音速气流粉碎过程中，压缩气体喷嘴会使温度下降，且没有机械摩擦的过程，故在超音速气流粉碎过程中不会升温，有利于物料活性的保留。由于冲击速度大，可达2.5马赫以上，一般情况下很容易获得1－10微米(μm)粒子，根据物料性质，还能得到小于1微米(μm)粒子。

16、在本发明应用较佳的实施方式中，种子培养基包括：3～5％(w/v)葡萄糖，1～3％(w/v)酵母提取物，1～3％(w/v)大豆蛋白胨。可选的，种子培养基包括：3％、4％或5％(w/v)葡萄糖；1％、2％或3％(w/v)酵母提取物以及1％、2％或3％(w/v)大豆蛋白胨。

17、在一种可选的实施方式中，在种子培养基上进行培养的条件为：25-35℃、150-200rpm，培养20-24h。在种子培养基上进行培养的条件为25℃、26℃、27℃、28℃、29℃、30℃、31℃、32℃、33℃、34℃或35℃，150rpm、155rpm、160rpm、165rpm、170rpm、175rpm、180rpm、185rpm、190rpm或200rpm。

18、在一种可选的实施方式中，在种子培养基上进行培养的条件为：28℃、150rpm，培养24h。

19、在本发明应用较佳的实施方式中，珍珠粉培养基包括：3～5％(w/v)葡萄糖、1～3％(w/v)酵母提取物、1～3％(w/v)大豆蛋白胨和0.5～2％(w/v)珍珠粉。在一种可选的实施方式中，珍珠粉培养基包括：33％、4％或5％(w/v)葡萄糖；1％、2％或3％(w/v)酵母提取物；1％、2％或3％(w/v)大豆蛋白胨以及0.5％、1％、1.5％或2％(w/v)珍珠粉。

20、在一种可选的实施方式中，种子液接种的体积分数为1～10％。具体可以为1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％中的任意一种或任意两种之间的范围。

21、在本发明应用较佳的实施方式中，对发酵液进行分离的方法包括：先将发酵液离心，然后用陶瓷膜对离心获得的上清液进行过滤。通过陶瓷膜过滤以达到发酵液澄清、除杂、分离等目的。

22、在一种可选的实施方式中，离心的离心机的转速为13000～15000rpm。在上述离心转速条件下有助于实现更好的离心效果，离心机的转速为13000rpm、13500rpm、14000rpm、14500rpm或15000rpm。

23、在一种可选的实施方式中，陶瓷膜的过滤孔径范围为50～200nm；使用陶瓷膜进行过滤时的压力为0.2-0.4mpa。

24、使用陶瓷膜进行过滤时的压力为0.2mpa、0.3mpa或0.4mpa，或者其间的任意一个点值。

25、第二方面，本发明还提供了由上述珍珠发酵物的制备方法制备的珍珠发酵物。

26、第三方面，本发明还提供了一种晒后修复的产品，产品包括上述的珍珠发酵物。本发明制备得到的珍珠发酵液具有晒后修复功效，拓宽了珍珠深加工产品的使用场景。

27、在一种可选的实施方式中，产品为皮肤外用剂；

28、在一种可选的实施方式中，产品的形态为气态、固态和液态中的任意一种。

29、产品形式包括但不限于气溶胶型喷雾剂、霜剂、乳液、固体、液体、分散体、泡沫、凝胶、化妆水、摩丝、软膏、粉剂、贴剂、润发油、手按泵型喷雾剂、棒状物、面膜和湿纸巾。众所周知地，本发明的皮肤外用剂可为化妆品、皮肤病学或药物局部施用产品，其制备方法可为本领域常规的制备方法。

30、在一些实施例中，所述皮肤外用剂还可以进一步包括一种或多种下述成分：赋脂剂、分散剂、粘度调节剂、溶剂、增稠剂、美白剂、皮肤保护剂、螯合剂、祛斑剂、肤感调节剂、润肤剂、清洁剂、保湿剂、防晒剂、ph调节剂、悬浮剂、增溶剂、缓冲剂、还原剂、乳化剂、乳化稳定剂、光稳定剂、清凉剂、表面改性剂、抗氧化剂、成膜剂或其任意组合。该些成分的含量可为本领域常规的含量。

31、第四方面，本发明还提供了上述珍珠发酵物在制备晒后修复的产品中的应用，产品为皮肤外用剂。

32、在一种可选的实施方式中，产品的形态为气态、固态和液态中的任意一种；

33、在一种可选的实施方式中，产品为膏霜。

34、第五方面，本发明还提供了一种包括上述珍珠发酵物的组合物，其包括如下质量百分比计的原料：

35、a相：对羟基苯乙酮0.4％、edta二钠0.02％、丙烯酸(酯)类/c10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物0.15％、黄原胶0.08％、甘油7％和丁二醇2％，余量为水；

36、b相：peg-100硬脂酸酯1.2％、甘油硬脂酸酯0.3％、鲸蜡硬脂醇1.5％、白池花籽油1％、氢化聚癸烯3％、异十二烷4％和聚二甲基硅氧烷2.5％；

37、c相：珍珠发酵物3.5％、1,2-乙二醇1.1％和乙基己基甘油0.04％；

38、d相：氢氧化钾0.02％。

39、第六方面，本发明还提供了包括珍珠发酵物的组合物的制备方法，其包括如下步骤：

40、将a相中的各原料进行混合，加热至70℃-80℃；与b相中的各原料进行混合，加热到70℃-80℃后，与a相混合；均质，冷却至35℃-45℃，然后加入c相和d相；

41、在一种可选的实施方式中，均质的条件是3000rpm/min，均质3min；均质后还包括保温搅拌，保温搅拌条件为30rpm，保温20min。

42、在上述条件下制备的组合物具有良好的晒后修复功效。

43、本发明具有以下有益效果：

44、本发明提供的珍珠发酵物的制备方法可以直接将珍珠粉进行发酵利用，无需进行酸解等复杂的前期处理，工艺简单。采用特定菌种进行发酵，以含珍珠粉的珍珠粉培养基为发酵底物，通过特定的发酵工艺进行珍珠发酵物的制备。经检测，采用本发明提供的珍珠发酵物的制备方法制备的珍珠发酵物具有活性成分含量高的技术优势。

45、此外，本发明制备得到的珍珠发酵液具有晒后修复功效，拓宽了珍珠深加工产品的使用场景。