小鼠股动脉和/或股静脉的血管插管模型的制备方法

专利名称:小鼠股动脉和/或股静脉的血管插管模型的制备方法
技术领域：
本发明涉及动物血管内插管模型，具体涉及小鼠股动脉和/或股静脉的血管插管模型的制备方法。
背景技术：
血管插管模型是为了研究动物生理、病理和药理等需要建立的导出体外的血管模型，可在体外动态连续观察和研究机体内各项生理、病理指标的变化，以掌握药物、毒物、营养物等物质在体内的代谢、生理和病理作用机理，是ー种经济有效的实验研究技木。目前血管插管模型主要是以猪、犬和大鼠等大型动物作为模型动物，导管为直型的硬管或软管，直型的硬管或软管插入如颈总动、静脉，股动、静脉，尾动、静脉等血管，如公开号为CN2626935的实用新型就公开了直型硬管，如包伦等在“大鼠股动脉、静脉插管手术方法的 建立及应用”(医药卫生论坛，2005，18 :235-236)，则公开了以大鼠股动脉、静脉作为插管对象，直型软管一端插入股动脉或股静脉并縫合、固定，另一端连接有阀门，可以通过阀门与注射器、注射泵、多向给药系统、电子信号系统等连接，进行药物、毒物、营养物等在体内的代谢、生理和病理作用机理研究，以及实验动物的生理研究等。但目前的血管插管模型多以大型动物为实验动物，来源少，成本高，且由于大型动物运动剧烈，只能在动物未完全清醒状态下才可进行间隔式研究。因此目前已建立的该类大动物血管插管模型无法在动物完全清醒和自由活动的情况下进行连续动态观察、研究，应用该类模型得到的实验结果參数波幅较大，不能反应动物正常活动状态下的生理病理变化。

发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种小鼠股动脉和/或股静脉的血管插管模型的制备方法，该方法以来源广，成本低的小鼠为实验动物，具有在动物完全清醒和自由活动状态下进行连续动态观察、研究小鼠的生理、病理和药理变化的优点，研究參数波幅小，研究结果较佳，可提供动物正常活动状态下的生理病理变化情況。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为小鼠股动脉和/或股静脉的血管插管模型的制备方法，包括下述步骤
a、软管模具制作将细铜管弯曲成J型，得到软管模具，该软管模具分为垂直部和弯曲部，在所述弯曲部的外侧设置有口径大于聚こ烯导管外径的缺ロ ；这样较软的聚こ烯导管就可以全部插入软管模具内，制得J型软管；
b、J型软管制作两手握住聚こ烯导管两端，将两手间的聚こ烯导管浸于75-85°C的热芝麻油中，浸后立即提出该聚こ烯导管，两手轻轻牵拉该聚こ烯导管，至两手间的聚こ烯导管的管腔内径为O. 10-0. 15mm,自然冷却，将两手间的聚こ烯导管切割成血管插管模型需要长度，得到聚こ烯导管片段，然后将所述聚こ烯导管片段细端插入上述软管模具的垂直部，当该聚こ烯导管片段细端从软管模具的缺ロ穿出时，边轻拉该聚こ烯导管片段，边将该聚こ烯导管片段细端插入弯曲部内，至该聚こ烯导管片段细端从弯曲部的尾端伸出O. 3-O.7cm，将插有聚こ烯导管片段的软管模具的弯曲部浸于80°C水中5-8秒，取出插有聚こ烯导管片段的软管模具，放于冰块中冷却3-5分钟，再从插有聚こ烯导管片段的软管模具中抽出该聚こ烯导管片段，得到J型软管，该J型软管由直行段和弯曲段组成；目前市售的聚こ烯导管(购于Dunn Industries Inc)管腔的内径最小也有O. 30mm,无法用于血管管径较小的小鼠股动脉和/或股静脉的插管，因此需 要对导管重新加工，我们经过多种试验，最后发现上述用热芝麻油浸后立即提出牵拉管腔口径变细效果最好，管腔口径大小也较均匀，可以得到管腔口径大小较均匀变细的导管片段；聚こ烯导管片段插入软管模具后，浸于80°C水中5-8秒复性，再在冰块中冷却3-5分钟固化，就可以得到形态较好的J型软管，便于插入股动脉和/或股静脉中，符合手术部位的生理弯曲，手术后导管不易堵塞；
C、颈部手术先用重量百分浓度为I. 5-5%的异氟烷对小鼠进行吸入性麻酔，将小鼠俯卧在手术恒温台上，用肥皂水涂搽颈部背面的局部毛发，再用剃毛刀剪去该局部毛发进行备皮，医用酒精消毒皮肤，用手木刀做纵向切ロ并分离肌肉；
d、腹股沟手术将小鼠翻转至侧仰位，用肥皂水涂搽左或右侧腹股沟的局部毛发，再用剃毛刀剪去该局部毛发进行备皮，医用酒精消毒皮肤，用手木刀做纵向切ロ并分离肌肉，在显微镜下小心分离出股动脉和/或股静脉，在分离出的股动脉和/或股静脉中进行近心端结扎和远心端结扎；
e、J型软管安装将上述J型软管的直行段嵌入颈部背面分离的肌肉中，所述直行段连接有装有20U的肝素的注射器，用注射器排出该J型软管内的空气，用眼科剪在近心端结扎与远心端结扎之间的股动脉和/或股静脉的管壁上剪一小切ロ，将J型软管的弯曲段的细端从小切ロ插入股动脉/或股静脉内；
f、J型软管固定用细线将J型软管与股动脉/或股静脉固定，再用胶水愈合小切ロ，撤去近心端结扎和远心端结扎，縫合腹股沟手术；将细铁丝一端与J型软管固定，另一端导出颈部，缝合颈部手木，血管钳夹住J型软管，撤去连接于直行段的注射器，直行段再连接上阀门，将所述阀门与细铁丝另一端固定，阀门连接上输液泵，撤去血管钳，用20u的肝素保持J型软管不堵塞，得到股动脉和/或股静脉的血管插管模型。
将该J型软管的弯曲段的细端剪成30-45°的斜切ロ。在股动脉中J型软管的弯曲段的细端向近心端方向插入，在股静脉中J型软管的弯曲段的细端向远心端方向插入。
在阀门上还可以连接多向给药系统、电子信号系统等，用于观察药物、毒物、营养物等在实验动物体内的代谢、生理和病理作用机理等的研究。
与现有技术相比，本发明的优点在于小鼠股动脉和/或股静脉的血管插管模型的制备方法，通过软管模具制作，J型软管制作，颈部手术，腹股沟手木，J型软管安装和固定等步骤，将铜管弯曲成J型，并在弯曲部的外侧设置缺ロ，便于聚こ烯导管穿入软管模具内，对市售的管腔内径较大的聚こ烯导管浸入热芝麻油后立即拉伸，可以得到管腔口径大小较均匀变细的聚こ烯导管片段，然后插入软管模具内，再将插有聚こ烯导管片段的软管模浸于80°C水中5-8秒，放于冰块中冷却3-5分钟放于冰块中冷却3-5分钟,抽出聚こ烯导管片段，得到J型软管，该J型软管形态较好，便于插入股动脉和/或股静脉中，然后对小鼠颈部背面手术切ロ，将J型软管的直行段嵌入颈部背面分离肌肉，再对小鼠腹股沟手术切ロ，在股动脉和/或股静脉上剪一小切ロ，将J型软管的弯曲段的细端从小切ロ插入股动脉和/或股静脉内，固定J型软管，这样制得的血液插管模型，由于J型软管在小鼠腹股沟和颈部两处固定，加上小鼠运动幅度较小，这样制得的血管插管模型在小鼠清醒运动状态下，该血管插管模型中的软导管也不会脱落，因此可在小鼠清醒、自由活动与进食的状态下，通过动、静脉插管给予研究因素，通过血管插管采集血样检测各种因素的动态变化，该模型在生理、病理、器官移植、药物代谢及毒理学等研究領域中用途广泛；且小鼠因为具有品系较纯、来源广、价格便宜、试剂来源多、免疫学检测方便，且其在食物结构、生理、生化和发育过程与人类较为接近，小鼠基因和人类基因有大于80%的同源性等优点，利用小鼠制作活体动物模型进行医学研究的越来越普遍。因此本发明方法以来源广，成本低的小鼠为实验动物，具有在动物完全清醒和自由活动状态下进行连续动态观察、研究小鼠的生理、病理和药理变化的优点，研究參数波幅小，研究结果较佳，可提供动物正常活动状态下的生理病理变化情況。


图I为本发明的软管模具的结构示意图；
图2为本发明的J型软管与软管模具的配合关系示意图。
具体实施方式
以下结合附图实施例对本发明作进ー步详细描述。
实施例
小鼠股动脉和/或股静脉的血管插管模型的制备方法，软管模具制作将细铜管弯曲成J型，得到如图I、图2所示的软管模具1，该软管模具I分为垂直部11和弯曲部12，在弯曲部12的外侧设置有口径大于聚こ烯导管外径的缺ロ 13 ； J型软管制作两手握住聚こ烯导管两端，将两手间的聚こ烯导管浸于75-85°C的热芝麻油中，浸后立即提出该聚こ烯导管，两手轻轻水平牵拉该聚こ烯导管，至两手间的聚こ烯导管的管腔内径为O. 10-0. 15mm,自然冷却，将两手间的聚こ烯导管切割成血管插管模型需要长度，得到聚こ烯导管片段，然后以该聚こ烯导管片段细端插入上述软管模具I的垂直部11，当该聚こ烯导管片段的细端从软管模具I的缺ロ 13穿出时，边轻拉该聚こ烯导管片段，边将该聚こ烯导管片段细端插入弯曲部12内至该聚こ烯导管片段细端从弯曲部12的尾端14伸出O. 3-
0.7cm，将插有聚こ烯导管片段的软管模具I的弯曲部12浸于80°C水中5-8秒，取出插有聚こ烯导管片段的软管模具I放于冰块中冷却3-5分钟，再从插有聚こ烯导管片段的软管模具I抽出聚こ烯导管片段，得到如图2所示的J型软管2，该J型软管2由直行段21和弯曲段22组成，静脉插管时弯曲段22的细端23为圆头，动脉插管时可以将该J型软管2的弯曲段22的细端23剪成30-45°的斜切ロ 24的尖头；颈部手术先用重量百分浓度为
1.5-5%的异氟烷对小鼠进行吸入性麻酔，将小鼠俯卧在手术恒温台上，用肥皂水涂搽颈部背面的局部毛发，再用剃毛刀剪去该局部毛发进行备皮，医用酒精消毒皮肤，用手木刀做纵向切ロ并分离肌肉；腹股沟手术将小鼠翻转至侧仰位，用肥皂水涂搽左或右侧腹股沟的局部毛发，再用剃毛刀剪去该局部毛发进行备皮，医用酒精消毒皮肤，用手木刀做纵向切ロ并分离肌肉，在显微镜下小心分离出股动脉和/或股静脉，在分离出的股动脉和/或股静脉中进行近心端结扎和远心端结扎J型软管安装和固定将J型软管的直行段嵌入颈部背面分离的肌肉中，直行段连接上装有20U的肝素的注射器，用注射器排出该J型软管内的空气，使软管处于使用状态，用牵拉器提起近心端结扎，用眼科剪在近心结扎与远心端结扎之间的股动脉和/或股静脉的管壁上剪一小切ロ，将J型软管的弯曲段的细端从小切ロ插入股动脉/或股静脉内，用细线将J型软管与股动脉/或股静脉固定，再用胶水愈合小切ロ，使血液不渗漏，撤去近心端结扎和远心端结扎，縫合腹股沟手术；将细铁丝一端与J型软管固定，细铁丝另一端导出颈部，缝合颈部手木，血管钳夹住J型软管，撤去连接于直行段的注射器，直行段再连接上阀门，将阀门与细铁丝另一端固定，阀门连接上输液泵，撤去血管钳，用输液泵给予少量的20 u的肝素，观察J型软管内液体的流动情况，最后以12-151/h的速度持续给予20 u的肝素，以保持J型软管不堵塞，得到股动脉和/或股静 脉的血管插管模型。
本发明可以对股动脉和股静脉可同时做血管插管模型，也可以单独做股动脉或股静脉血液插管模型，其中在股动脉中J型软管的弯曲段的细端向近心端方向插入，在股静脉中J型软管的弯曲段的细端向远心端方向插入。
权利要求
1.小鼠股动脉和/或股静脉的血管插管模型的制备方法，其特征在于包括下述步骤a、软管模具制作将细铜管弯曲成J型，得到软管模具，该软管模具分为垂直部和弯曲部，在所述弯曲部的外侧设置有口径大于聚乙烯导管外径的缺口 ；b、J型软管制作两手握住聚乙烯导管两端，将两手间的聚乙烯导管浸于75-85°C的热芝麻油中，浸后立即提出该聚乙烯导管，两手轻轻牵拉该聚乙烯导管，至两手间的聚乙烯导管的管腔内径为0. 10-0. 15mm,自然冷却，将两手间的聚乙烯导管切割成血管插管模型需要长度，得到聚乙烯导管片段，然后将所述聚乙烯导管片段细端插入上述软管模具的垂直部，当该聚乙烯导管片段细端从软管模具的缺口穿出时，边轻拉该聚乙烯导管片段，边将该聚乙烯导管片段细端插入弯曲部内，至该聚乙烯导管片段细端从弯曲部的尾端伸出.0.3-0. 7cm，将插有聚乙烯导管片段的软管模具的弯曲部浸于80°C水中5_8秒，取出插有聚乙烯导管片段的软管模具，放于冰块中冷却3-5分钟，再从插有聚乙烯导管片段的软管模具中抽出该聚乙烯导管片段，得到J型软管，该J型软管由直行段和弯曲段组成；C、颈部手术先用重量百分浓度为I. 5-5%的异氟烷对小鼠进行吸入性麻醉，将小鼠俯卧在手术恒温台上，用肥皂水涂搽颈部背面的局部毛发，再用剃毛刀剪去该局部毛发进行备皮，医用酒精消毒皮肤，用手术刀做纵向切口并分离肌肉；d、腹股沟手术将小鼠翻转至侧仰位，用肥皂水涂搽左或右侧腹股沟的局部毛发，再用剃毛刀剪去该局部毛发进行备皮，医用酒精消毒皮肤，用手术刀做纵向切口并分离肌肉，在显微镜下小心分离出股动脉和/或股静脉，在分离出的股动脉和/或股静脉中进行近心端结扎和远心端结扎；e、J型软管安装将上述J型软管的直行段嵌入颈部背面分离的肌肉中，所述直行段连接有装有20U的肝素的注射器，用注射器排出该J型软管内的空气，用眼科剪在近心端结扎与远心端结扎之间的股动脉和/或股静脉的管壁上剪一小切口，将J型软管的弯曲段的细端从小切口插入股动脉/或股静脉内；f、J型软管固定用细线将J型软管与股动脉/或股静脉固定，再用胶水愈合小切口，撤去近心端结扎和远心端结扎，缝合腹股沟手术；将细铁丝一端与J型软管固定，另一端导出颈部，缝合颈部手术，血管钳夹住J型软管，撤去连接于直行段的注射器，直行段再连接上阀门，将所述阀门与细铁丝另一端固定，阀门连接上输液泵，撤去血管钳，用20u的肝素保持J型软管不堵塞，得到股动脉和/或股静脉的血管插管模型。
2.如权利要求
I所述的小鼠股动脉和/或股静脉的血管插管模型的制备方法，其特征在于步骤b中，将该J型软管的弯曲段的细端剪成30-45°的斜切口。
专利摘要
本发明公开了小鼠股动脉和/或股静脉的血管插管模型的制备方法，通过软管模具制作，J型软管制作，颈部手术，腹股沟手术，J型软管安装和固定等步骤，铜管弯曲成J型，并在弯曲部的外侧设置缺口，对聚乙烯导管浸入热芝麻油后立即拉伸得到聚乙烯导管片段，插于软管模具内，再将软管模具弯曲部浸于80℃水中，然后冷却，抽出得到J型软管，由于手术时J型软管在小鼠腹股沟和颈部两处固定，并小鼠运动幅度较小，在小鼠清醒时该血液插管模型不会脱离，因此本发明方法以来源广，成本低的小鼠为实验动物，具有在动物完全清醒和自由活动状态下进行连续动态观察、研究小鼠的生理、病理和药理变化的优点，研究参数波幅小，研究结果较佳。
文档编号A61D1/00GKCN102697576SQ201210191506
公开日2012年10月3日 申请日期2012年6月7日
发明者史宏博, 赵进顺, 邹宝波, 露丝·玛盖亚 申请人:宁波大学