专利名称：抗病增丝剂的制造工艺的制作方法
技术领域：
本发明公开了一种利用蚯蚓制造桑蚕添食剂的工艺内容。该添食剂用于桑蚕添食，具有抗病健体、增丝增卵、增产增收的综合效果，是显著提高蚕茧质量、有利于生产高档生丝的优良添食剂。
自七十年代开始，国外出现使用激素生理活性物质养蚕增丝的报道，此后，我国生物工作人员一直在寻求有效而价廉的生物活性物质，以求提高蚕茧的质量和产量;利用蚯蚓制取桑蚕添食剂是我国一项创造性的科研成果。众所周知，蚯蚓仅对桑树有耕耘供肥作用，对家蚕本身没有直接关系，但是运用现代生物技术有可能改变人们的传统观念。
利用蚯蚓制取桑蚕添食剂虽有多次尝试，但由于提取方法不当，防腐保存问题未解决，没找到最佳使用浓度，家蚕拒食现象明显，且不能解决家蚕发病多、蚕茧质量差等问题，因此以往利用蚯蚓制造的桑蚕添食剂尚未达到推广实用要求。
本发明的目的在于寻找一种方法，以求能有效地利用蚯蚓体内的活性物质，辅以中药制剂，制成一种既抗病健体，又增丝增卵的添食剂，以提高蚕茧的质量和产量，增加蚕农和丝绸工业的经济效益，从而多出口创汇，提高外贸竞争能力。
本发明的工艺及抗病增丝机理如下。
本发明借鉴中药制取复合方剂的方法，选择板兰根、地胆草、筋骨草与赤子爱胜蚓制剂配伍。其工艺为先对各药物分别提取有效成份，然后与制备好的蚯蚓制剂混合制成抗病增丝剂。
由于发现蚯蚓死亡后有自溶现象，且蚯蚓在干热条件下会溶解为液体，从而本发明力求利用蚯蚓体内的自溶酶来制取有生物活性的物质，并用于蚕茧生产。由于利用自溶酶来进行酶解，既降低了生产成本同时又不破坏蚯蚓体内的活性物质，提高了收率，从而使本发明具有实用的可能性。
一般按常规，酶解温度通常为40-60℃，而本发明为了达到充分酶解同时又不破坏活性物质的目的，经过大量实验筛选，发现在68-70℃时自溶酶活性最好，从而确定68-70℃为最佳酶解温度。
为了尽量保存其有效成份，本发明采用蚯蚓活体，这样也才能用自然排污法进行蚓体内部净化;通常，蚓体内部净化采用水洗法和置换法，前者净化不完全，后者成本高，本发明通过实验发现不给蚯蚓任何饲料(包括清水)，让其自然排净体内的污物，比前述两种方法既净化的完全又成本低。
利用蚯蚓制取添食剂喷洒于桑叶上给家蚕添食，不仅仅是增加桑叶蛋白质、氨基酸和核酸等营养物质的含量，实质是蚯蚓制剂作为外源生物活性物质在起作用;蚯蚓制剂中含有类细胞分裂素和类保幼激素，可以促进蚕的食欲和丝腺的发育，提高叶丝转换率。因而添食效果并非与添食剂浓度成正比，通过实验发现将抗病增丝剂原液稀释50倍时添食效果最佳。
根据蚕体发育受体内保幼激素与蜕皮激素的平衡来调节控制的规律，适当添加蜕皮甾酮类物质，可使蚕上簇整齐、加速吐丝、节约用桑，因而选择添加含B-蜕皮甾酮的筋骨草;此外，地胆草含地胆草素，有抗菌、抗病毒及消炎作用;板兰根有清热解毒、预防家蚕病毒病(DиV)的作用，将这些药物的有效成份加入蚯蚓制剂所得的添食剂就能达到抗病增丝的目的。
本发明的产品性状为黄褐色液体，PH值6-6.5，在常温下可贮存一年以上，原液含氨态氮0.5-0.7固形物5%，50毫升瓶装抗病增丝剂可稀释喂蚕0.5张。
据测定，本发明制得的抗病增丝剂中含17种氨基酸，含量达7%左右，特别是蚕体形成丝素蛋白的氨基酸(甘氨酸、丝氨酸、丙氨酸、酪氨酸)含量十分丰富，此外，还含有核酸及其降解物，如甲基腺嘌呤等类细胞分裂素，经测定含核酸总量为100-140毫克/100毫升。
具体制造方法是以赤子爱胜蚓(Eiseniafoetida)为主要原料，以筋骨草(Ajugadecumlens)、地胆草(Elephantopusscaben)、板兰根(Isatistinctonia)为辅料，分别提取其有效成份，再配伍混合，防腐处理后即得抗病增丝剂原液。
先制备中药制剂，将筋骨草、地胆草、板兰根分别浸提、煮沸、过滤、加防腐沉淀剂，获得上清液。另外，将鲜蚓从饲养槽中分离出来，让其自然排污，然后清洗、称重，由活体提制一级原液用于制造葆春剂，将蚓体匀浆，然后加缓冲剂，在搅拌状况下酶解，将酶解液过滤，滤渣可分离出来作动物蛋白质补充饲料，也可进行二次酶解，再过滤;将两次酶解滤液加防腐沉淀剂，然后与前述制备好的中药制剂混合，压(抽)滤，所得的即为抗病增丝剂原液，灌装后即为成品。
本发明的实施例1用工艺流程框图表示，见附图。
如下图1抗病增丝剂制造工艺图。
1.鲜蚓2.自然排污3.清洗4.活体提制
5.蚓体匀浆6.68-70℃酶解7.抽滤8.滤液9.筋骨草、(地胆草)、(板兰根)10提取液11滤液12上清液13混合14压滤15原液16灌装17葆春剂原液18滤渣19蛋白质补充饲料为了证实本发明的效果，发明人组织进行了对家蚕添食抗病增丝剂的小试和中试实验。试验结果表明桑蚕添食抗病增丝剂以后，不但能促进家蚕的生长发育，增强抗病免疫力，增加丝蛋白的积累，增加茧丝长度，提高叶丝转化率，提高蚕茧产量和质量，且能增加原蚕产卵量，同时还能提高干茧的解舒率，降低缫折和提高生丝品位，降低原料茧消耗。该制剂对家蚕安全无害，效益显著，深受广大蚕农和茧丝绸行业的欢迎。
本发明人组织进行了抗病增丝剂抗家蚕浓核病毒(BmDNV)的试验研究，证实该制剂具有预防和抑制家蚕浓核病毒的功能。同时证实了该制剂50倍稀释时抗病效果尤佳;人工接种蚕浓核病毒，使用浓度为10-4，详细调查病死蚕状况，茧期调查死笼等情况，试验证明，攻毒前添食抗病增丝剂，则幼虫生命率和虫蛹统一生命率大大高于攻毒对照区，甚至高于不攻毒的空白区，而死笼率大大低于攻毒对照区，甚至低于空白区，说明该制剂具有抗病健体，预防浓核病毒病的作用。攻毒后添食抗病增丝剂，则幼虫生命率和虫蛹统一生命率仍大大高于攻毒对照区，但低于不攻毒的空白区，死笼率与对照区相当，但高于空白区。说明该制剂具有抑制浓核病毒的作用。
给桑蚕添食抗病增丝剂能提高蚕茧质量，如正茧率上升，不良茧率显著下降等。同时，确有增产效果，表现在蚕茧产量、产值、茧层率、茧层量等方面的提高。据1988年春蚕的中试报告，添食区与对照区相比，克蚁产茧提高6.0%，克蚁产值增长5.7%，全茧量提高1.6%，茧层量高10.0%，鲜茧茧层率高8.1%，正茧率高0.6%，不良茧率降低21.6%，鲜茧销售等级提高2-3级。据1988年秋蚕的中试报告，添食区与对照区相比，克蚁产茧提高6.7%，克蚁产值增长8.3%，茧层量提高4.8%，鲜茧茧层率提高5.3%，正茧率高1.4%，不良茧率降低4.4%由上述春秋两次中试的结果可看出，秋试中的克蚁产茧，克蚁产值等主要指标增长幅度均明显优于春试，说明秋蚕添食抗病增丝剂效果更佳。
添食抗病增丝剂，可获得质量好的原料茧，据测定，1988年春秋两季干茧质检成绩较好，茧粒大，茧丝长增加35-96公尺，生丝出丝率提高1.3-1.6%，解舒率提高4.08%，消耗降低10.08公斤，即每缫100公斤丝少用10.08公斤原料茧。
给原蚕(种蚕)添食抗病增丝剂能提高克蚁制种、公斤茧制种及单蛾有效卵，据1988年中试报告，添食区与对照区相比，克蚁制种春季高2.9张(22.3%)，秋季高0.3张(13%);公斤茧制种春季高0.4张(11.8%)，秋季高0.7张(35%);单蛾有效卵春季高40粒(9%)，秋季未调查。
添食抗病增丝剂后对桑蚕龄期没有显著影响，用桑量不增加，而蚕茧质量、产量均提高，关健在于该制剂中的活性物质提高了桑蚕的叶丝转化率;叶丝转化率用茧层量与五龄给桑干物量的比值来表示。1988年春秋蚕期在指定品种上进行添食试验，五龄起开始添食，添食浓度分别为原液稀释50倍、100倍，200倍，同时进行清水对照和空白对照，添食结果表明，不同浓度的添食处理和清水及空白处理间的叶丝转化率有极显著差异，最高的是50倍液，为8.91%;最低的是空白对照，为8.00%，顺序是50倍＞100倍＞200倍＞清水对照＞空白对照。经多重比较，50倍液显著优于其它实验浓度。初步认为添食50倍液能有效地提高家蚕叶丝转化率，从而提高了饲料效率。
通过调查不同浓度添食的全茧量、茧层量、茧层率、熟蚕体重，全龄经过与五龄经过，都以50倍液的效果最佳，前述的其它试验也证实了50倍液是最佳添食浓度。
将本发明制取的抗病增丝剂用于桑蚕及原蚕添食，能获得显著的经济效益。据统计，1988年春蚕，添食区张平产茧42.8公斤，张平产值424.70元;对照区张平产茧40.0公斤，张平产值406.28元，添食区与对照区比较，单张蚕种产量提高2.8公斤(7.0%)，单张产值增加收入18.42元(4.5%)而每张蚕种用增丝剂两瓶，成本仅1.6元。1988年秋蚕，添食区张平产茧35.47公斤，张平产值302.71元;对照区张平产茧32.64公斤，张平产值274.38元，添食区比对照区，单张产茧提高8.7%，单张产值提高10.3%。
据统计，每张蚕种蚕农可增收18-28元，饲养原蚕的蚕农，增收高达62.78元。同时由于茧丝质量的提高，为生产高档出口生丝提供了优质原料，据试用和缫丝结果测算，若在全国推广使用本发明的抗病增丝剂，我国丝绸行业每年可增加4亿多元的经济效益，多出口创汇二千多万美元。
综上所述，本发明是一种有利于家蚕抗病健体、增丝增卵、提高蚕茧质量的优良添食剂，且制造成本低廉，贮存期长，产品质量稳定，使用简便，对家蚕无害，经济效益显著。
参考资料生理活性物质对蚕茧和茧质的影响《蚕丝科学与技术》1984(23)8∶52-55(日)赤井弘增丝剂蚕研二号资料汇编(一)、(二)四川省农科院蚕桑研究所编印
权利要求
1.一种利用蚯蚓制造桑蚕添食剂的工艺，包含蚓体净化、提制、分离、分离、压(抽)滤、灌装，其特征在于在两次分离之间有匀浆、酶解两步程序，在压(抽)滤之前还有一步混合程序。
2.根据权利要求1所述的工艺，其特征是在混合程序中加入由板兰根、筋骨草、地胆草分别经煎煮、乙醇沉淀制取的中药制剂。
3.根据权利要求1所述的工艺，其特征是在酶解程序中利用蚓体自溶酶进行酶解。
4.根据权利要求1或3所述的工艺，其特征是酶解温度为68-70℃。
5.根据权利要求1所述的工艺，其特征是吲体净化程序中的吲体采用活体。
6.根据权利要求5所述的工艺，其特征是蚓体净化程序中用自然排污法进行蚓体内部净化。
全文摘要
本发明公开了一种用于桑蚕添食的抗病增丝剂的制造工艺，其特点是利用蚓体自溶酶在特定温度下获得蚯蚓酶解液，然后加入中药制剂，制成含生理活性物质的抗病增丝剂。该添食剂对家蚕具有抗病健体、增丝增卵的作用，是显著提高蚕茧质量、有利于生产高档生丝的优良添食剂。
文档编号A61K35/56GK1038764SQ8910590
公开日1990年1月17日 申请日期1989年4月25日 优先权日1989年4月25日
发明者岳清泉 申请人:重庆市生物技术研究所