专利名称：低胃肠毒性喜树碱衍生物的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及喜树碱衍生物的应用，这种衍生物不会引起胃-肠不耐受副作用，或胃-肠副作用很小。本发明还涉及氯化钠溶液在降低由喜树碱衍生物所引起的胃肠副作用中的应用。
人们知道，服用喜树碱衍生物可引起许多副作用。尤其在胃肠道中，它们往往引起非常严重的呕吐和腹泄，因此可能导致中断治疗。
在欧洲专利EP137145中描述过具有下述通式的喜树碱衍生物 式中R1是氢、卤素或烷基，X是氯原子或NR2R3，其中R2和R3相同或不同，可以代表氢原子、任选性取代的烷基、任选性取代的碳环或杂环，或和与其结合的氮原子一起形成杂环的烷基(任选取代的)，该杂环任选性地含有选自O、S和/或NR4的另一杂原子，R4是氢原子或烷基，其中X-CO-O-位于环A第9、10或11位。这些喜树碱衍生物是抑制拓扑异构酶I的抗癌剂，其中X-CO-O-是〔4-(1-哌啶子基)-1-哌啶子基〕羰氧基的伊立替康是对实体肿瘤，特别是对结肠直肠癌特别有效的活性组分。
专利申请EP74256还描述了其它的喜树碱衍生物，也提到它们可用作抗癌剂，特别是与上述结构类似的衍生物，其中X-CO-O-被-X′R′基代替，X′是O或S，而R′是氢原子、烷基或酰基。例如在下述专利或专利申请中也描述过其它的喜树碱衍生物EP56692、EP88642、EP296612、EP321122、EP325247、EP540099、EP737686、WO9003169、WO9637496、WO9638146、WO9638449、WO9700876、US7104894、JP57116015、JP57 116074、JP59 005188、JP60 019790、JP01 249777、JP01246287、JP91/12070或在Canc.Res.，38(1997)，摘要1526或95(圣迭戈-4月12日)、Canc.Res.，55(3)，603-609(1995)或AFMC Int.Med.Chem.Symp.(1997)摘要PB-55(汉城-7月27日-8月1日)。
通常喜树碱衍生物采用注射方法用药，更具体地采用无菌溶液或乳液静脉注射用药。还可以口服固体或液体组合物形式的喜树碱衍生物。
喜树碱衍生物也可以与其它抗癌剂联合使用，例如像顺铂、奥沙利铂、Tomudex、Taxotere、5-氟尿嘧啶和胸苷酸合成酶抑制剂。
然而，在与采用喜树碱衍生物治疗相关的临床副作用中，尤其有腹泄(3或4级)、胆碱能综合症、恶心或呕吐。尤其观察到，38％严重腹泄病人因脱水和/或相关感染而会出现生命危险。
曾实施过许多方案以对抗因服用该活性组分而产生的肠毒性，将其毒性降至最低，但是直到现在没有获得成功。由此可见，喜树碱衍生物限于有非常丰富经验的肿瘤学家使用，仅仅某些病人可以承受这些衍生物的作用。
现在发现，也正是本发明的目的，通过服用氯化钠溶液，可以获得针对用喜树碱衍生物治疗时产生的胃-肠损伤的保护作用。这种保护作用降低了，甚至特异性地抑制了胃-肠副作用，而对活性组分的系统承受能力或抗肿瘤活性没有降低。
本发明涉及氯化钠在制备一种用于降低或抑制使用喜树碱衍生物所产生的胃肠副作用的药物中的应用。根据本发明，用于降低或抑制服用喜树碱衍生物所产生的胃肠副作用的药物是氯化钠水溶液。
与服用喜树碱衍生物同时服用氯化钠溶液，或者在服用喜树碱衍生物前几天服用氯化钠溶液，然后同时服用喜树碱衍生物可以达到这种保护作用。
这种令人惊奇的作用具有极为有利的结果，特别是能够避免与非常严重的副作用相关的中断治疗。
根据本发明，使用的氯化钠溶液是水溶液，其浓度是4-13克/升。这种溶液口服使用。
优选地，使用的氯化钠溶液浓度为0.9克/升。
采用氯化钠溶于水(例如纯化水，无菌水)的常规方法制备这种氯化钠溶液。该溶液还可以含有其它的物质，具体如甜味剂或芳香剂。
在连续1-5天用喜树碱衍生物治疗期间，从治疗开始前5天到治疗停止后1天，可以每天服用这种氯化钠溶液一次或二次，其剂量为5-10毫升/千克/次。根据另外一种用药方式，在连续1-14天用喜树碱衍生物治疗期间，可以每天服用这种氯化钠溶液一次或二次，其剂量为5-10毫升/千克/次，优选地，可以每天服用这种氯化钠溶液二次，其剂量为10毫升/千克/次。优选地，按照第二种用药方式使用这种氯化钠溶液。
采用注射方法，优选地采用静脉注射方法，或口服使用喜树碱衍生物。
采用静脉注射方法使用喜树碱衍生物时，这些组合物还可以含有添加剂，特别是润湿剂、等渗剂、乳化剂、分散剂和稳定剂。具体地使用伊立替康(CPT-11)在静脉注射介质中的溶液，其剂量为175-500毫克/米2。
还可以口服固体组合物形式的喜树碱衍生物，例如明胶硬胶囊或半固体亲水基体胶囊。它们还可以以片剂、丸药、胶囊剂、胶囊、粉剂或颗粒剂使用。优选地。口服组合物可以制成片剂。在所有这些组合物中，将活性产品与一种或多种稀释剂或惰性添加剂混合，例如糖、糖衍生物或亲水大分子，特别是蔗糖、乳糖、葡萄糖、麦芽糖、D-果糖、山梨糖醇、淀粉，如小麦淀粉、玉米淀粉或大米淀粉，纤维素及其衍生物，如乙基纤维素或甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、甲基羟甲基纤维素、甲基羟丙基纤维素或羧甲基纤维素，或树胶，如阿拉伯胶、黄蓍胶、瓜尔胶、藻酸盐、角叉菜酸盐或糊精，或蛋白质、合成产品，如聚乙烯吡咯烷酮、高分子量PEG，或如无机产品，像胶体二氧化硅或硅酸盐。这些组合物还可以含有其它物质，例如润滑剂，如硬脂酸镁，或用于控制释放的包裹剂。它们还可以以药学上可接受的溶液、悬液、乳液、糖浆和酏剂形式使用，其中含有惰性稀释剂，例如水或如石蜡油之类的油。这些组合物还可以含有除稀释剂之外的物质，如润湿剂、甜味剂或芳香剂，特别是如蔗糖或多元醇。
应当理解，喜树碱衍生物和氯化钠药剂配方的药盒形式也属于本发明的范围内，其中氯化钠药剂用来降低或抑制因服用喜树碱衍生物引起的胃-肠副作用。
任何形式的药盒都可能适合，具体地，作为实例，以双瓶或多瓶形式包装、以装有喜树碱衍生物的瓶和一个或多个装氯化钠药剂的安瓿的形式包装、以装有喜树碱衍生物的输液袋和一个或多个装有氯化钠药剂的瓶或安瓿形式包装、涉及装有喜树碱衍生物的口服包装和一个或多个装有氯化钠药剂的瓶或安瓿的包装。应当理解，在上述的瓶或安瓿中，氯化钠可以是待稀释的粉末或溶液，特别即用的溶液。
实验研究在下述条件下用鼠和狗进行的不同研究，证明了本发明。
制备注射液制备以盐酸伊立替康三水合物为主要成分的注射液，在下述组分存在下为20毫克/毫升·盐酸伊立替康三水合物20毫克·D-山梨糖醇 45毫克·乳酸0.9毫克·氯化钠 适量至 pH＝3.5·注射制剂用水 适量至1毫升1、 用小鼠进行的实验研究1.1/研究I口服氯化钠溶液对静脉注射CPT-11肠毒性的保护作用的评价。
将CD1雄性小鼠(5-6周龄)分成两组各10只，从第6天到第10天连续5天的期间内，这二组鼠都静脉注射(按照0.5毫升/分，20毫升/千克)CPT-11在9克/升氯化钠中的水溶液，注射剂量为40毫克/千克(约120毫克/米2体表面积)。这个治疗时间后为无治疗的3天(直到第13天)。其中一组，这些鼠还连续10天(第1-10天)口服9克/升氯化钠水溶液，其体积为20毫升/千克/天(即每天2次，10毫升/千克/次，间隔时间约10小时)(CPT-11/NaCl组)。第二组动物不口服9克/升氯化钠水溶液(CPT-11组)。
所有这些天都观察了这些鼠的死亡率和临床症候。在第1、6、11和13天记录体重。在第13天使这些鼠无痛苦死亡并进行尸体解剖。从所有鼠上取出完整的胃肠道。直到这种观察结束都一直显微观察存活鼠的胃肠道。
在第6或7天观察使用喜树碱衍生物的鼠死亡率，CPT-11组为7/15鼠，而CPT-11/NaCl组为2/10。在使用CPT-11后偶尔观察到使用CPT-11所带来的运动机能性降低、颤抖、痉挛和/或呼吸困难。在CPT-11治疗期间，观察到CPT-11组和CPT-11/NaCl组鼠的体重减少。CPT-11组鼠的体重减少比CPT-11/NaCl组多，在治疗结束后，CPT-11组鼠的体重继续减少。
显微观察的肠损伤状态相应于使用抗癌剂所达到的状态。两组鼠都是主要造成小肠损伤。这些总体上中等到显著的损伤的特征是隐窝丧失与肠绒毛缩短。CPT-11/NaCl组鼠的肠损伤程度较小，尤其是这种隐窝丧失非常小，只是偶尔观察到。
结论，提前5天和在5天静脉注射CPT-11期间，每天2次(20毫升/千克/天)口服氯化钠等渗溶液(9克/升)，其剂量为10毫升/千克/次，会防止CPT-11引起的肠组织病理损伤的出现。1.2/研究II口服氯化钠溶液的不同方案对CPT-11肠毒性的保护作用的评价CD1雄性鼠(5或6周龄)分成5组，每组10只，在第6天至第10天的连续5天里，静脉注射击(按照0.5毫升/分，20毫升/千克)CPT-11在9克/升氯化钠溶液中的水溶液，其剂量为40毫克/千克(约为120毫克/米2体表面积)。第1组，从第1天到第10天每天二次，按照10毫升/千克/次(约10小时间隔)；第2组，从第1天到第10天每天二次，按照5毫升/千克/次；第3组，从第1天到第10天每天一次，按照20毫升/千克/次；第4组，从第6天到第10天每天二次，按照10毫升/千克/次使用9克/升氯化钠溶液。第5组不使用9克/升氯化钠溶液。
所有这些天都观察了这些鼠的死亡率和临床症候。在第3、6、10和13天测量了体重。在第13天使这些鼠无痛苦死亡并进行尸体解剖。从所有鼠上取出完整的胃肠道。直到这种观察期结束，都一直显微观察存活鼠的胃肠道。
观察到所有组鼠的临床症候与上述研究(研究I)的相似。观察到所有组鼠的体重减轻。
在肠中观察到的显微损伤相应于抗癌剂达到的损伤。所有组鼠主要是小肠损伤。口服9克/升氯化钠溶液组的肠损伤没有仅用CPT-11治疗的组严重。相反地，第1-4组口服不同给药方案的9克/升氯化钠溶液，其肠损伤后果和严重性是相同的。
结论，在静脉注射CPT-11之前和注射期间或仅仅在注射期间，在5天内每天一至二次口服氯化钠(9克/升)等渗溶液，口服体积不同(5-20毫克/千克/次)，阻止出现CPT-11引起的肠组织病理损伤的情况相似。1.3/研究III口服氯化钠等渗溶液对CPT-11的系统和肠毒性和对CPT-11及其主要代谢物SN-38毒性动力学影响的评价CD1雄性小鼠(5或6周龄)分成3组，每组10只，在第1天至第5天的连续5天里，2组静脉注射(按照0.5毫升/分，20毫升/千克)CPT-11在9克/升氯化钠中的水溶液，剂量为40毫克/千克(约为120毫克/米2体表面积)。这个治疗期之后是一个无治疗的3天时期(直到第8天)。这两个组中一个组的鼠，在连续5天(第1-5天)期间内，还口服9克/升氯化钠水溶液，其体积为20毫升/千克/天(即10毫升/千克/次，每天2次，时间间隔约10小时)(CPT-11/NaCl组)。第二组的鼠不口服9克/升氯化钠溶液(CPT-11组)。第三组鼠不静脉注射CPT-11，连续5天(第1-5天)口服9克/升氯化钠水溶液，其体积为20毫升/千克/天(即10毫升/千克/次，每天2次，时间间隔约10小时)(对照组)。CPT-11和CPT-11/NaCl组中36只补充动物用来测定CPT-11及其主要代谢物SN-38的血浆浓度。
所有这些天都观察了这些鼠的死亡率和临床症候。在第1、3、6和8天测量了体重。在第1天和第5天取血浆进行毒性动力学分析。在第8天使这些鼠无痛苦死亡并进行尸体解剖。测量胸腺、脾和睾丸的相对重量和绝对重量，并且从所有鼠上取出完整的胃肠道、胸骨骨髓、胸腺、脾、肠和睾丸和附睾，进行显微检查。
对于第1天和第5天CPT-11和CPT-11/NaCl组鼠，测定的CPT-11和SN-38(其主要代谢物)最大血浆浓度(Cmax)和曲线下面积(AUC)是相同的。
观察到，注射CPT-11第8天观察的死亡率在CPT-11/NaCl组中为1/10鼠。在CPT-11和CPT-11/NaCl组中，使用CPT-11后偶尔观察到使用CPT-11所带来的运动机能性降低和呼吸困难，在CPT-11/NaCl组中更为严重。在CPT-11治疗期间，观察到CPT-11组和CPT-11/NaCl组鼠的体重减少相同。在治疗结束后，鼠的体重继续减少。
所观察的胸腺和肠显微损伤相应于抗癌制剂达到的损伤。所观察的CPT-11和CPT-11/NaCl组鼠的胸腺显微损伤是相似的，其特征在于与这种器官重量和尺寸减少相关的淋巴样衰竭状态。CPT-11组和CPT-11/NaCl组鼠主要肠显微损伤在小肠中，其特征在于隐窝丧失和绒毛萎缩。CPT-11/NaCl组鼠肠损伤没有CPT-11组严重。
结论，在5天期间，在静脉注射CPT-11时每天二次口服9克/升氯化钠等渗溶液，每次为10毫升/千克(20毫升/千克/天)，不改变CPT-11和SN-38的系统暴露，也不改变CPT-11的胸腺毒性，但是选择性地降低了CPT-11引起的肠损伤严重性。
1.4/研究IV
口服氯化钠溶液对静脉注射CPT-11的抗肿瘤活性影响的评价在第1天用皮下方法移植哺乳动物腺癌MA16/C的雌性小鼠C3H/HeN分成两组，每组都静脉注射(20毫升/千克)CPT-11在5％葡萄糖中的水溶液，其剂量为从第6天到第10天连续5天里14.6-23.6-38.0或61.3毫克/升。一组鼠在连续10天里(第1天到第10天)还每天2次口服9克/升氯化钠水溶液，其体积为20毫升/千克/天(即10毫升/千克/次，每天2次，间隔约10小时)(CPT-11/NaCl组)。第二组动物未口服9克/升氯化钠。
用最大非毒性剂量评价CPT-11的抗肿瘤活性。造成体重减少20％以上或静脉注射CPT-11死亡率为20％以上的剂量认为是毒性太强的剂量。评价参数包括以百分数表示的肿瘤生长抑制率(T/C)、肿瘤生长延缓率(T-C)和杀死肿瘤细胞数(Log杀死肿瘤细胞＝T-C/3.32×肿瘤的倍增时间)。Log杀死肿瘤细胞值为0.7相应于最小活性，而高于2.8的值相应于高活性水平。
对于CPT-11组动物，CPT-11最大非毒性剂量是23.6毫克/千克/天，即累计总剂量为118毫克/千克，在第11天，体重减少最多为10％，Log杀死细胞值是1.7。对于CPT-11/NaCl组动物，CPT-11最大非毒性剂量是38.0毫克/千克/天，即累计总剂量为190毫克/千克，在第12天，体重减少最多为14.0％，Log杀死细胞值是2.3。
结论，提前5天和在5天静脉注射CPT-11时，每天2次(20毫升/千克/天)口服氯化钠等渗溶液(9克/升)，其剂量为10毫升/千克/次，没有降低CPT-11的抗肿瘤活性。
2/狗的实验研究口服氯化钠溶液对静脉注射CPT-11肠毒性影响的评价六只雌性小猎兔犬(年龄10-12个月)分成二组，每组3只，每组都在第6天一次静脉注射(5毫升/千克，2毫升/分)CPT-11在9克/升氯化钠中的水溶液，剂量为20毫克/千克(约400毫克/米2体表面积)。一组狗从前5天到注射CPT-11后1天的连续7天里(第1天到第7天)，还口服9克/升氯化钠水溶液，其体积为20毫升/千克/天(即10毫升/千克/次，每天2次，间隔约8小时)(CPT-11/NaCl组)。第二组动物未口服9克/升氯化钠(CPT-11组)。在最后口服9克/升氯化钠后2天(直到第9天)没有对动物给药。
所有这些天都观察死亡率和临床症候。在预试验期间和在第5天和第9天记录了体重。在第9天使这些鼠无痛苦死亡并进行尸体解剖。从所有这些动物取出有代表性的胃肠道组织试样，并进行了显微检查。
在治疗期间CPT-11给药的影响包括多涎、烦躁不安、呕吐(CPT-11给药期间或给药后立刻)、腹泄和体重稍微减轻。观察到大肠粘膜出现粗糙，CPT-11组比CPT-11/NaCl组更经常地出现这种现象。所观察到的这些损伤是由增生室的原发性病变造成的，并且包括粘膜退化，这些损伤在CPT-11组中为中等到显著，在CPT-11/NaCl组中为极小到轻微。
结论，给雌性狗仅静脉注射一次CPT-11，其剂量为20毫克/千克，造成的胃-肠毒性可与产品的抗有丝分裂活性相比。从前5天到注射CPT-11第1天，每天2次(20毫升/千克/天)口服氯化钠等渗溶液(9克/升)，剂量为10毫升/千克/次，阻止了CPT-11引起的肠组织病理损伤的突然出现。
权利要求
1.喜树碱衍生物在制备用于胃肠道癌的抗癌治疗同时胃肠副作用非常少的药物中的应用，其特征在于在施用所述药物期间或使用所述药物之前及其期间，施用氯化钠溶液。
2.氯化钠在制备用于降低或抑制使用喜树碱衍生物所造成的胃-肠道副作用的药物中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于用于降低或抑制使用喜树碱衍生物所造成的胃-肠道副作用的药物是氯化钠水溶液。
4.根据权利要求1或3所述的应用，其特征在于氯化钠水溶液浓度是4-13克/升。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于氯化钠水溶液浓度是9克/升。
6.根据权利要求1或3所述的应用，其特征在于氯化钠溶液使用剂量为5-10毫升/千克/次。
7.根据权利要求1或3-6中任一权利要求所述的应用，其特征在于在使用喜树碱衍生物期间或使用所述衍生物之前及其期间，使用氯化钠溶液。
8.根据权利要求1或3-7中任一权利要求所述的应用，其特征在于口服氯化钠溶液。
9.根据权利要求1所述的应用，其特征在于采用注射或口服途径施用喜树碱衍生物。
10.喜树碱衍生物和氯化钠药剂的配方药盒，所述氯化钠药剂用于降低或抑制使用喜树碱衍生物所造成的胃-肠道副作用。
11.根据权利要求10的药盒，其特征在于用于降低或抑制使用喜树碱衍生物所造成的胃-肠道副作用的氯化钠药剂是氯化钠水溶液。
全文摘要
喜树碱衍生物在制备用于胃肠道癌的治疗、同时胃肠副作用非常少的药物中的应用,其特征在于在使用所述药物期间或使用所述药物之前及其期间,使用氯化钠溶液。
文档编号A61K31/4745GK1354667SQ9980883
公开日2002年6月19日 申请日期1999年8月3日 优先权日1998年8月5日
发明者H·图泰恩, M·谷弗洛伊 申请人:阿文蒂斯药物股份有限公司