一种参芎葡萄糖注射液的生物活性测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于中药制剂质量控制的技术领域，特别涉及一种参芎葡萄糖注射液的生 物活性测定方法。
【背景技术】
[0002]中药成分复杂、药理活性广泛，单一或少数指标性成分的含量测定和指纹图谱的 定性鉴别，因没有与中药的药效建立直接的内在联系，难以全面反映其内在品质，难以有效 地控制和评价中药的质量，更难以反映安全性和有效性。而生物活性测定以药物的生物效 应为基础，直奔"有效性"的主题，从而达到控制药品质量的作用。
[0003] 参芎葡萄糖注射液作为目前临床广泛用于治疗心脑血管疾病的一种有效制剂，现 行质量标准过于简单，主要采用理化分析方法，对丹参素和盐酸川芎嗪进行含量测定，难以 全面反映制剂的化学成分特征。随着我国药品生产质量控制水平的提高和对注射剂安全、 疗效、质量可控等问题重视程度的不断深入，研宄建立了UFLC法同时测定参芎葡萄糖注射 液中6种主要成分以及指纹图谱测定方法，但与其有效性间的关系尚难确定。为进一步完 善参芎葡萄糖注射液质量控制方法，有必要对以生物活性测定并结合理化分析方法作为中 药注射剂质量标准有效性指标进行深入应用研宄，提高中药质量控制的准确性，整体性。
[0004] 鉴于参芎葡萄糖注射液由丹参和盐酸川芎嗪配伍组成。其中丹参为临床用于治疗 心绞痛及心肌梗死的传统中药，主要含有丹参素、丹参酮、原儿茶醛等活性成分，具有保护 心肌内皮细胞、抗心肌缺血、抗心律失常、改善微循环、抗氧化等药理作用。川芎嗪为中药川 芎中提取精制的有效成分，具有扩张冠状动脉，增加冠脉血流量，改善动脉微循环，抗血小 板聚集，改善心肌供氧和明显的心肌保护作用。因此，选择经典的小鼠耐缺氧试验作为参芎 葡萄糖注射液生物活性的评价模型，能够较好兼顾丹参和盐酸川芎嗪的生物活性，以达到 综合评价和控制产品质量的目的。
【发明内容】
[0005] 本发明针对现有技术所存在的诸多问题而提供一种参芎葡萄糖注射液的生物活 性测定方法。
[0006] 本发明针对参芎葡萄糖注射液现行质量标准过于简单，未与其药效建立内在联 系，难以全面反映其内在品质的问题，首次提出对参芎葡萄糖注射液的生物活性进行测定， 并作为其质量控制指标。以小鼠耐缺氧实验作为参芎葡萄糖注射液生物活性测定方法和限 值剂量确定依据，对参芎葡萄糖注射液生物活性进行测定。在实验中，选择具有活血化瘀功 能的川芎嗪作为阳性药，并进行了重复性实验、精密度实验方法学验证，结果表明该法操作 简便、指标明确、灵敏度高、重现性好，可用于表征参芎葡萄糖注射液质量生物活性信息，以 达到综合评价和控制产品质量的目的。
[0007] 为了实现上述目的，本发明所采用的技术方法如下：
[0008] -种参芎葡萄糖注射液的生物活性测定方法，其是健康昆明小鼠若干，随机分为 正常对照组、盐酸异丙肾上腺素对照组和参芎葡萄糖注射液组，参芎葡萄糖注射液组健康 昆明小鼠每天均自尾静脉注射给药一次，连续三天，给药量为以盐酸川芎嗪计，56mg/kg;正 常对照组健康昆明小鼠注射与参芎葡萄糖注射液组给药量等体积的生理盐水；盐酸异丙肾 上腺素对照组健康昆明小鼠在注射与参芎葡萄糖注射液组给药量等体积的生理盐水20min 后，皮下注射15mg/kg盐酸异丙肾上腺素；正常对照组、盐酸异丙肾上腺素对照组和参芎葡 萄糖注射液组注射15min后将各组置于装有5g钠石灰的125ml广口瓶中，瓶口用凡士林密 封，封盖后，以秒表观察小鼠存活时间，将每组数据进行t检验，以如下公式（1)计算存活 时间延长率；
【主权项】
1. 一种参芎葡萄糖注射液的生物活性测定方法，其特征是健康昆明小鼠若干，随机分 为正常对照组、盐酸异丙肾上腺素对照组和参芎葡萄糖注射液组，参芎葡萄糖注射液组健 康昆明小鼠每天均自尾静脉注射给药一次，连续三天，给药量为以盐酸川芎嗪计，56mg/kg; 正常对照组健康昆明小鼠注射与参芎葡萄糖注射液组给药量等体积的生理盐水；盐酸异 丙肾上腺素对照组健康昆明小鼠在注射与参芎葡萄糖注射液组给药量等体积的生理盐水 20min后，皮下注射15mg/kg盐酸异丙肾上腺素；正常对照组、盐酸异丙肾上腺素对照组和 参芎葡萄糖注射液组注射15min后将各组置于装有5g钠石灰的125ml广口瓶中，瓶口用凡 士林密封，封盖后，以秒表观察小鼠存活时间，将每组数据进行t检验，以如下公式（1)计 算存活时间延长率；
(1) 盐酸异丙肾上腺素组存活时间与正常对照组比较有显著性差异则试验有效；在试验有 效情况下，参芎葡萄糖注射液组存活时间与盐酸异丙肾上腺素组比较有显著差异，则参芎 葡萄糖注射液符合规定；结果判定盐酸异丙肾上腺素组存活时间与正常组比较有显著性差 异（p〈0. 05)则试验有效；参芎葡萄糖注射液组存活时间与盐酸异丙肾上腺素组比较有显 著差异（P〈〇. 05)，则样品符合规定，显示其具有延长小鼠存活时间的作用。
2. 如权利要求1所述的一种参芎葡萄糖注射液的生物活性测定方法，其特征在于，所 述正常对照组、盐酸异丙肾上腺素对照组和参芎葡萄糖注射液组中的健康昆明小鼠雌雄各 半。
【专利摘要】本发明提供了一种参芎葡萄糖注射液的生物活性测定方法。本发明采用小鼠耐缺氧实验作为参芎葡萄糖注射液生物活性的测定方法，实验证实参芎葡萄糖注射液可明显延长缺氧小鼠的存活时间，显示出较好的生物活性。该方法操作简便、指标明确、灵敏度高、重现性好，可用于表征参芎葡萄糖注射液生物活性信息，能有效控制参芎葡萄糖注射液的内在质量。
【IPC分类】A61K36-537, A61P9-10, A61K31-4965, A61K9-08
【公开号】CN104800285
【申请号】CN201510200913
【发明人】叶湘武, 郑林, 董莉, 黄勇, 李勇军, 兰燕宇
【申请人】贵州景峰注射剂有限公司
【公开日】2015年7月29日
【申请日】2015年4月24日