用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。
[0039] 实施例
[0040] 以下的实施例将对本发明作进一步的说明，但并不因此限制本发明。
[0041] 以下实施例、对比例和试验例中：
[0042] 贻贝粘蛋白购自BD Biosciences公司，货号为354242。
[0043] 壳聚糖、血管内皮生长因子、止血纱、凝血酶、氯化钙、白芨、三七、茶树精油、乙酸、 丙三醇、无水乙醇均为市售产品。
[0044] 扫描电镜的型号为SU-8020,购自日立公司。
[0045] 试验用成年大鼠购自北京大学医学部实验动物部，身体健康，各大鼠间的体征状 况均表现一致。
[0046] 实施例1
[0047] 本实施例用于说明本发明的止血贴及其制备方法。
[0048] 取4g壳聚糖，脱乙酰度80 %，黏度2000mPa · s，黏均分子量3. 8X 106 (壳聚糖 脱乙酰度为80~90%，黏度为600~2000mPa · s，黏均分子量高于3X106的范围内制 备的壳聚糖-贻贝粘蛋白凝胶在质地、止血效果上差别不大，因此，用脱乙酰度80%，黏度 2000mPa · s，黏均分子量3. 8 X 106的壳聚糖作为代表，上述范围内的其余壳聚糖的实施例 在此省略），加入2%乙酸溶液2001^，室温（20~25°〇搅拌至完全溶解，静置脱泡，后过 滤得澄清壳聚糖溶液；在壳聚糖溶液中加入贻贝粘蛋白，缓慢搅拌至均匀使得壳聚糖与贻 贝粘蛋白的质量比为500 : 1;制备以壳聚糖为基质的贻贝粘蛋白胶：将壳聚糖-贻贝粘 蛋白溶液在70°C下烘干lh，然后注入平底敞口模具中，并放入沉析液至完全沉析形成壳聚 糖-贻贝粘蛋白凝胶，用去离子水冲洗至中性；剪成I. 5cmX I. 5cm的方形（厚度和大小由 伤口的大小和深度决定）。
[0049] 将适量血管表皮生长因子加入0. 5%质量浓度氯化钙和凝血酶的酶活为4000IU/ mL的溶液中，通过浸泡的方法渗入医用即溶止血纱（线装订好的两层，IcmX Icm)(厚度和 大小由伤口的大小和深度决定）的氧化纤维束中，20min后取出，KTC下风干lh，制备得止 血复合材料。
[0050] 将止血复合材料直接贴合在制备的壳聚糖-贻贝粘蛋白凝胶即得止血贴。
[0051] 本实施例制备得到的止血复合材料的扫描电镜图如图2所示，由图2可知，该止血 复合材料为多孔结构。
[0052] 实施例2
[0053] 除了壳聚糖与贻贝粘蛋白的质量比为250 : 1，其余方法和实施例1相同。
[0054] 实施例3
[0055] 除了壳聚糖与贻贝粘蛋白的质量比为20 : 1，其余方法和实施例1相同。
[0056] 实施例4
[0057] 除了壳聚糖与贻贝粘蛋白的质量比为10 : 1，其余方法和实施例1相同。
[0058] 实施例5
[0059] 除了医用即溶止血纱所浸泡的溶液只含有血管表皮生长因子和0. 5%质量浓度氯 化钙，其余方法和实施例3相同。
[0060] 实施例6
[0061] 除了医用即溶止血纱所浸泡的溶液是血管表皮生长因子和凝血酶的酶活为 5000IU/mL的溶液，其余方法和实施例4相同。
[0062] 实施例7
[0063] 除了医用即溶止血纱所浸泡的溶液是血管表皮生长因子和凝血酶的酶活为 5000IU/mL的溶液，其余方法和实施例1相同。
[0064] 实施例8
[0065] 除了医用即溶止血纱所浸泡的溶液是血管表皮生长因子和三七的溶液，其余方法 和实施例3相同。
[0066] 实施例9
[0067] 除了医用即溶止血纱所浸泡的溶液是血管表皮生长因子和白芨的溶液，其余方法 和实施例4相同。
[0068] 实施例10
[0069] 除了医用即溶止血纱所浸泡的溶液是血管表皮生长因子、白芨、三七和凝血酶的 酶活为3000IU/mL的溶液，其余方法和实施例4相同。
[0070] 试验例说明：创口停止出血的标准为：取下止血贴后，不见有血渗出。
[0071] 试验例 1-10
[0072] 将试验用麻醉后的成年大鼠固定，分别在其颈静脉上切出0. 5mm大的创口。创口 出血后分别将实施例1-10制备得到的止血贴敷于创口上。
[0073] 试验例11
[0074] 按照试验例1的方法，不同的是，止血贴为壳聚糖凝胶，制备方法如下：取4g壳聚 糖，脱乙酰度80%，黏度2000mPa · s，黏均分子量3. 8 X 106,加入2%乙酸溶液200mL，室温 (20~25°C )搅拌至完全溶解，静置脱泡，后过滤得澄清壳聚糖溶液；将壳聚糖溶液在70°C 下烘干lh，然后注入平底敝口模具中，并放入沉析液至完全沉析形成壳聚糖凝胶，用去离子 水冲洗至中性；剪成I. 5cmX I. 5cm的方形。
[0075] 试验例12
[0076] 按照试验例1的方法，不同的是，止血贴为5层医用即溶纱布。
[0077] 试验例13
[0078] 按照试验例1的方法，不同的是，止血贴制备方法为：将适量血管表皮生长因子加 入〇. 5%质量浓度氯化钙和凝血酶的酶活为4000IU/mL的溶液中，通过浸泡的方法渗入医 用即溶止血纱（线装订好的3层，IcmX Icm)的氧化纤维束中，20min后取出，10°C下风干 Ih，制备得止血复合材料。
[0079] 上述每个试验例平行做5个，创口停止出血的平均时间见表1。
[0080]
【主权项】
1. 一种止血贴，包括上、下两层，其特征在于，上层是一种止血复合材料，下层是高粘合 性生物材料，其中上层的面积小于下层的面积，上层位于下层中部，其中，所述高粘合性生 物材料是以壳聚糖为基质的贻贝粘蛋白胶，所述止血复合材料是氧化纤维素、凝血因子、血 管内皮生长因子的复合体。
2. 根据权利要求1所述的止血贴，其中，所述以壳聚糖为基质的贻贝粘蛋白胶中壳聚 糖与贻贝粘蛋白的质量比为10-500 : 1。
3. 根据权利要求1所述的止血贴，其中，所述以壳聚糖为基质的贻贝粘蛋白胶中壳聚 糖与贻贝粘蛋白的质量比为10-20 : 1。
4. 根据权利要求1所述的止血贴，其中，所述氧化纤维素是医用即溶止血纱。
5. 根据权利要求1所述的止血贴，其中，所述凝血因子为凝血酶、氯化钙、白芨、三七中 的一种或几种。
6. -种权利要求1-5中任意一项止血贴的制备方法，其特征在于包含以下步骤： (1) 止血复合材料的制备， (2) 高粘合性生物材料的制备， (3) 止血复合材料与高粘合性生物材料的结合。
7. 如权利要求6所述制备方法，其中，步骤（1)具体为通过将凝血因子和血管表皮生长 因子通过浸泡的方法渗入氧化纤维束中的方法制备止血复合材料。
8. 如权利要求6所述制备方法，其中，步骤（2)具体为： a制备壳聚糖溶液：取一定质量的高黏度壳聚糖，加入2 %乙酸溶液中，在室温下缓慢 搅拌至完全溶解，配制成2%的壳聚糖溶液，静置脱泡，后过滤得澄清壳聚糖溶液； b在壳聚糖溶液中加入贻贝粘蛋白，缓慢搅拌至均匀； c制备以壳聚糖为基质的贻贝粘蛋白胶：将步骤b中取得的壳聚糖-贻贝粘蛋白溶液 在70°C下烘干lh，然后注入平底敞口模具中，并放入沉析液至完全沉析形成壳聚糖-贻贝 粘蛋白凝胶，用去离子水冲洗至中性； d将制备的制备壳聚糖_贻贝粘蛋白凝胶真空冷冻干燥即得高粘合性生物材料。
9. 如权利要求7所述制备方法，其中，高黏度壳聚糖脱乙酰度为80~90%，黏度为 600~2000mPa ? s，黏均分子量高于3X106。
10. 如权利要求7所述制备方法，其中，沉析液为丙三醇浓度5 %、NaOH浓度0. 05 %的 无水乙醇溶液。
【专利摘要】本发明涉及一种止血贴及其制备方法。所述止血贴包括上下两层，上层是止血复合材料，下层是高粘合性生物材料，其中上层的面积小于下层的面积，上层位于下层中部。高粘合性生物材料能紧密贴合血管周围生物结缔组织，将出血封闭在局限的组织腔内。本发明的止血贴质地柔软，敷贴性强，免疫原性低，生物相容性强，可生物降解，止血所需时间短，具有优异的止血效果。
【IPC分类】A61L15-42, A61L15-44, A61L15-28, A61L15-32
【公开号】CN104857552
【申请号】CN201510249075
【发明人】赵明
【申请人】赵明
【公开日】2015年8月26日
【申请日】2015年5月18日