消肿止痛膏的制备方法及其质量检测方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及制药领域，特别是一种消肿止痛膏的制备方法及其质量检测方法。
【背景技术】
[0002] 消肿止痛膏由当归、姜黄、白芷、细辛等十味中药组成，具有活血化瘀、止痛散结、 舒筋通络、消炎消肿、解毒化痰之功效；临床主治软组织损伤、挫伤、跌仆闪挫伤、骨折、脱 臼、瘀血肿痛、闪腰岔气等病症，也适用于疔疮肿毒证。但是，目前《消肿止痛膏》在医院制 剂的生产、临床应用已有十多年，疗效确切、不良反应小，每年均产生一定的经济效益，并随 着其知名度的提高，该制剂的也逐年增加，而不仅仅局限在骨科病房，现在在医院门诊及皮 肤科、针灸科等科室也在使用。但是，过去普遍认为"丸散膏丹，神仙难辨"的复方，一直缺 乏一个标准的质量控制方法，一直以来，消肿止痛膏在质量检验方面仅限于显微鉴别，远不 足以对其质量进行控制。
【发明内容】
[0003] 本发明所要解决的技术问题在于提供一种消肿止痛膏的制备方法及其质量检测 方法，它将提高了消肿止痛膏的有效成分，并对其生产中的质量检验标准提供了一套可行 方案。
[0004] 本发明是这样实现的：消肿止痛膏的制备方法，按质量份数计算，将15-20份黄连 与48-52份黄柏混合，并采用质量百分比为70%的乙醇将其浸泡0. 8-1. 5小时，再将浸液 渗漉48小时后，收集渗漉液；将120-140份当归、30-35份细辛、48-53份白芷、48-53份姜 黄、48-53份栀子以及48-53份生大黄混合，加入该混合物总质量8-12倍量的质量百分比为 80%的乙醇进行回流提取0. 8-1. 5小时，自然冷却后进行过滤获得续滤液；将渗漉液与续滤 液合并，并浓缩成浸膏；再将1000份凡士林加热熔化，并加入上述浸膏中，充分搅匀均匀后 加入48-53份天花粉粉和7-9份生半夏，混匀即得成品。
[0005] 消肿止痛膏的制备方法的质量检测方法，在进行生产前，先将白芷、当归、细辛及 姜黄分别进行TLC鉴别（鉴别的目的是对原料进行质量控制）；在生产完成后，将成品取样， 采用HPLC法测定了欧前胡素的含量。
[0006] 为了验证本发明的技术效果效果，进行了如下实验。
[0007] -、消肿止痛膏的制备工艺 发明人采用正交实验法，以白芷的主要成分欧前胡素的转移率为评价指标，对影响欧 前胡素提取效率的主要因素(提取次数、乙醇用量、乙醇浓度、回流时间）进行考察，优选出 最佳提取工艺参数。
[0008] 仪器与材料 G1313A高效液相色谱仪(安捷伦科技有限公司）；WFA-203B三用紫外分析仪(上海精科 实业有限公司）；SK1200H科导斯超声仪(上海科导超声仪器有限公司）；MA110分析天平(上 海良平仪器仪表有限公司）；1〇1-1ΑΒ电热鼓风干燥箱(天津泰斯特仪器有限公司）；色谱柱 (Agilent ZORBAX SB-C18 4. 6X 150mm安捷伦科技有限公司）。甲醇为色谱纯；水为纯净水； 其余试剂均为分析纯。当归、姜黄、白芷、黄连、花粉、生半夏皆购于贵阳市济仁堂；欧前胡素 对照品(批号：110826-201013中国药品生物制品检定所)。
[0009] 方法与结果 以欧前胡素的转移率为评价指标，对药材乙醇用量（A)、乙醇浓度（B)、回流时间（C)及 提取次数（D)四种影响因素进行考察。
[0010] 含量测定 I. 2. I. 1色谱条件 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（55 :45)为流动相；流速：1. OmL/min ; 柱温：30°C ;检测波长：300nm。
[0011] 对照品溶液的制备 取欧前胡素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每ImL含IOyg的溶液，即得。
[0012] 供试品溶液的制备 称取1/20处方量的药材（当归4g，白芷、栀子、姜黄、生大黄各1.5g，细辛Ig)进行混合， 按L9 (34)正交表进行试验，因素水平见表1、表2。过滤，置于蒸发皿（已恒重)，挥干，得到 干浸膏。称取〇. 5g干浸膏置于25mL容量瓶中，加入甲醇溶解，甲醇定容之刻度，即得。
[0013] 法测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ L，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
[0014] 由表2可知：极差R的大小为B>D>A>C，即四因素对欧前胡素转移率的影响的主次 顺序为B>D>A>C，在因素 B中，B2^PB3，表明氏比B ^ ，同理，D 3比D 2、D1好，A 3比A ^ A2 好，C1KC 2、(：3好。因此，最佳提取工艺为B J3A3C1。由表3可知：因素 B、D显著；因素 C极不 显著，对试验没有影响；因素 A不显著，从经济利益考虑选择&。故最终提取工艺为A1B2C1Dy
[0015] 验证试验 为了验证实验结果提供的最终提取工艺的可行性，按正交试验确定的工艺条件进行验 证试验，见表4。
[0016] 讨论 本实验在预试验阶段，欧前胡素的转移率都未超过50%。但用正交实验优选提取工艺 时，欧前胡素的转移率均超过50%，转移率也最高，说明优选的最佳提取工艺条件合理、可 行。另外，根据正交实验结果得到最佳提取工艺为=A 3B2C1D3，而在A因素不显著，且在乙醇 8倍量和12倍量下所测得的欧前胡素转移率相差不大，考虑到消肿止痛膏为医院制剂需大 批量生产，出于成本考虑而选择乙醇8倍量。故本实验最终确定的提取工艺为A 1B2C1D3，即 处方药材加8倍量80%的乙醇回流3次，每次1小时。
[0017] 二、消肿止痛膏质量标准的建立 2. 1仪器与材料 G1313A高效液相色谱仪(安捷伦科技有限公司）；WFA-203B三用紫外分析仪(上海精科 实业有限公司）；SK1200H科导斯超声仪(上海科导超声仪器有限公司）；MA110分析天平(上 海良平仪器仪表有限公司）；1〇1-1ΑΒ电热鼓风干燥箱(天津泰斯特仪器有限公司）；色谱柱 (Agilent ZORBAX SB-C18 150mmX4. 6mm安捷伦科技有限公司）。甲醇为色谱纯；水为纯净 水；其余试剂均为分析纯。当归、姜黄、白芷、细辛均购于贵阳市济仁堂药业有限公司，并经 贵阳中医学院生药实验室周汉华教授准确鉴定；白芷对照药材（中国药品生物制品检定所， 120945-200406 )，细辛对照药材（中国药品生物制品检定所，121204-200803 )，当归对照药 材（中国药品生物制品检定所，120927-201014)，姜黄对照药材（中国药品生物制品检定所， 121188-200502)，欧前胡素对照品（中国药品生物制品检定所，110826-201013)，阿魏酸对 照品（中国药品生物制品检定所，110773-201012)，姜黄素对照品（中国药品生物制品检定 所，110823-201004)，异欧前胡素对照品（中国食品药品检定研宄院，110827-201109)，细辛 脂素对照品（中国食品药品检定研宄院，111889-201102 )。
[0018] 定性鉴别 2. 2. 2.1 白芷的TLC鉴别 取干膏粉末〇.5g，加乙醚10ml，浸泡1小时，时时振摇，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸 乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液。另取缺白芷的干膏粉末、白芷药材和白芷对照药材各 〇. 5g，同法制成阴性对照溶液、药材溶液和对照药材溶液。再取欧前胡素对照品、异欧前胡 素对照品，加乙酸乙酯制成每1ml各含Img的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附 录VI B)试验，吸取上述六种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30~ 60°C)_乙醚（3 :2)为展开剂，在25°C以下展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm)下检视。 供试品溶液色谱中，在与两个对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑