一种3d打印面膜及其制备工艺的制作方法_2

文档序号:9224004阅读:来源:国知局
] 所述干细胞生长因子包含于干细胞生长因子冻干粉中。所述干细胞生长因子冻干 粉中干细胞生长因子的含量优选为30~80wt %,更优选为33~50wt %。本发明对所述干 细胞生长因子冻干粉的来源没有特别限定,可以采用市售的干细胞生长因子冻干粉,也可 以按照以下方法进行制备:
[0037]a)、培养间充质干细胞,收集细胞培养液;
[0038] b)、所述细胞培养液依次经过浓缩和冻干,得到干细胞生长因子冻干粉。
[0039] 在本发明提供的干细胞生长因子冻干粉的制备方法中,首先进行间充质干细胞的 培养。其中,所述间充质干细胞优选由人体细胞组织经过组织贴壁法或酶消化法分离获得, 所述人体细胞组织优选为脐带、胎盘或人体脂肪组织。在本发明中,培养所述间充质干细胞 采用的培养基优选为无血清培养基,所述无血清培养基的型号优选为LONZA X-VIVO 15培 养基、PC-1 培养基、UltraMEM Reduced Serum 培养基、UltraMDCKTM 培养基或 HL-1TM 完全 无血清培养基;培养所述间充质干细胞的细胞接种密度优选为1〇5~10 6cell/mL。本发明 优选向培养所述间充质干细胞的培养基中添加一定量的生长因子,所述生长因子优选为表 皮生长因子(EGF),所述生长因子在培养基中的含量优选为1~10ng/mL。
[0040]间充质干细胞培养一段时间后,收集细胞培养液。在本发明中,优选收集第3代至 第5代的细胞培养液。收集到的细胞培养液后,所述细胞培养液进行过滤,得到滤液。在本 发明中,优选先采用〇. 4~0. 45 y m的滤膜对所述细胞培养液进行粗滤,之后再采用0. 2~ 0. 22 y m的滤膜对所述细胞培养液进行精滤。本发明对所述过滤采用的设备没有特别限定, 优选为本领域技术人员熟知的切向流过滤器。得到滤液后,对所述滤液进行冻干,得到干细 胞生长因子冻干粉。本发明对所述冻干采用的设备没有特别限定,优选为本领域技术人员 熟知的冻干机。
[0041] 本发明所提供的面膜液还包括金银花提取物,所述金银花提取物在所述面膜液中 的含量为4~20mg/ml,优选为5~15mg/ml,所述金银花提取物提取自天然植物金银花,其 主要成分为有机酸、黄酮、糖、挥发油和微量元素。在本发明中,所述金银花提取物的有效成 分为有机酸。在本发明提供的一个实施例中,所述金银花提取物中的有机酸包括新绿原酸、 绿原酸、咖啡酸和咖啡酰奎宁酸中的一种或多种。本发明对所述金银花提取物的来源并没 有特殊限制,可以为一般市售,也可以自行制备。在本发明中,优选按照下述方法进行金银 花提取物的制备:
[0042] 首先,使用溶剂对金银花粉末进行浸提。所述溶剂优选为乙醇水溶液,所述乙醇水 溶液的浓度优选为40~50wt %。所述溶剂与金银花粉末的质量比优选为5~20 :1,更优 选为10~15 :1。所述浸提的温度优选为60~90°C,更优选为70~80°C。所述浸提的时 间优选为1~5h,更优选为2~3h。在本发明中,优选对金银花粉末进行多次浸提,所述多 次浸提的次数优选为2~3次。
[0043] 浸提完毕后,收集浸提液。所述浸提液调节pH值至2左右后进行萃取,所述萃取 采用的萃取剂优选为乙酸乙酯。所述萃取剂与调节pH值后的浸提液的体积比优选为3~ 6 :1,更优选为4~5 :1。在本发明中,优选对调节pH值后的浸提液进行多次萃取,所述多 次萃取的次数优选为4~5次。在本发明中,在所述浸提液进行pH调节之前,优选先对所 述浸提液进行浓缩,所述浓缩的方式优选为减压浓缩。
[0044] 萃取完毕后,收集萃取液。所述萃取液调节pH值至6~7后,静置分层,取水层。 在本发明中,在所述萃取液进行pH调节之前,优选先对所述萃取液进行水洗,所述水洗的 次数优选为2~3次。
[0045] 获得水层后,所述水层依次进行浓缩和干燥,得到金银花提取物。所述浓缩的方式 优选为加压浓缩;所述干燥的方式优选为常温风干。
[0046] 本发明提供的面膜液中还包括蜂蜜,所述蜂蜜在所述面膜液中的含量为100~ 200mg/ml,优选为120~180mg/ml。在本发明中,所述蜂蜜是蜜蜂从开花植物的花中采得的 花蜜在蜂巢中酿制的蜜。本发明对所述蜂蜜的种类和来源并没有特殊限制。
[0047] 本发明提供的面膜液还包括透明质酸,所述透明质酸是一种酸性粘多糖。数均分 子量优选为5\10 5~15\1050&1,优选为7\105~10父10 50&1。所述透明质酸在所述面膜 液中的含量为100~500ng/ml,优选为200~400ng/ml。
[0048] 本发明提供的面膜液还包括水,本发明所用的水优选采用去离子水。
[0049] 本发明对上述面膜液的制备方法并没有特殊限制,本领域技术人员公知的面膜液 的制备方法即可。在本发明中,优选采用下述方法进行面膜液的制备:
[0050] 将透明质酸水溶液与干细胞生长因子冻干粉混合,再与金银花提取物的水溶液以 及蜂蜜水溶液混合,得到混合溶液;
[0051] 将所述混合溶液过滤除菌、浓缩,得到面膜液。
[0052] 本发明首先将透明质酸配制成水溶液,所述透明质酸水溶液的浓度为1~5 y g/ ml,优选为2~4 y g/ml。得到透明质酸水溶液后,用透明质酸水溶液溶解干细胞生长因 子冻干粉,其中,透明质酸水溶液与干细胞生长因子冻干粉的体积质量比优选为lml :(5~ 10) mg,更优选为 lml : (6 ~9) mg。
[0053] 本发明将透明质酸水溶液与干细胞生长因子冻干粉混合,再与金银花提取物的水 溶液以及蜂蜜水溶液混合,得到混合溶液;
[0054] 所述金银花提取物的水溶液浓度为0. 2~lg/ml,优选为0. 3~0. 8g/ml。所述蜂 蜜水溶液的浓度为0. 3~0. 5g/ml,优选为0. 35~0. 45g/ml。
[0055] 得到混合溶液后,将所述混合溶液过滤除菌、浓缩,得到面膜液。
[0056] 本发明对所述过滤除菌的方法并没有特殊限制,本领域技术人员公知的溶液过滤 除菌的方法即可,在本发明中,优选采用< 0. 22 y m的滤膜进行过滤。过滤除菌后,将所述 混合溶液浓缩,在本发明中,优选采用加压真空浓缩。
[0057] 最终得到包含0. 1~2mg/ml的干细胞生长因子、4~20mg/ml的金银花提取物、 100~200mg/ml的蜂蜜以及100~500ng/ml的透明质酸的面膜液。
[0058] 本发明提供的3D打印面膜中,所述多孔胶原蛋白凝胶与所述面膜液的体积比为 0. 5~2:1,在本发明的一些【具体实施方式】中,所述多孔胶原蛋白凝胶与所述面膜液的体积 比为2:1。
[0059] 本发明所述的3D打印面膜由多孔胶原蛋白凝胶层叠加而成,面膜液填充于多孔 胶原蛋白凝胶层的孔隙内。多孔胶原蛋白凝胶层为多孔结构,可以最大程度的吸附面膜液, 并且可以完整保存面膜液的有效成分。
[0060] 本发明还提供了一种3D打印面膜的制备工艺,包括以下步骤:
[0061 ] 在无菌真空的条件下,根据人体面部轮廓,采用3D打印机依次叠加打印胶原蛋白 凝胶以及面膜液,得到3D打印面膜。
[0062] 在进行3D打印面膜之前,通过电子扫面仪扫描个体面部轮廓,进而构建个人面部 轮廓图。在本发明中,所述扫描优选在洁净的环境中进行,更优选在万级洁净区进行扫描。 本发明对所述构建个人面部轮廓图的方法并没有特殊限制,优选采用CAD制图的方法进行 构建。
[0063] 构建个人面部轮廓图后,根据人体面部轮廓,在无菌真空的条件下,采用3D打印 机依次叠加打印胶原
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