5-轻色胺（5-hydroxytryptamine, 5-HT)的ELISA 检测结果；
[0030] 图8本发明实施例中实验大鼠血管活性肠肽（Vasoactive intestinal p印tide, VIP)的ELISA检测结果。
【具体实施方式】
[0031] 实施例
[0032] 为了证明该种肝郁脾虚型功能性消化不良大鼠模型的造模方法的有效性，进行了 以下实验：
[0033] 1 材料
[0034] I. 1实验动物
[0035] 健康Wistar雄性大鼠80只，体重（200±20)g，由甘肃中医学院动物实验中心提 供，许可证号：SCKX (甘）2014-0001。
[0036] 1. 2 药物
[0037] 平胃胶囊是在宋代《太平惠民和剂局方》中平胃散的基础上，综合现代医学发病机 理、现代药理研究和多年临床经验加减化裁而来。由麸炒苍术、厚朴、麸炒枳壳、陈皮等16 味中药组成。已于2012年批准为甘肃中医学院附属医院院内制剂，批准文号为：甘药制字 Z120022224,功效为疏肝健脾、清热燥湿、抑酸止痛；吗丁啉（多潘立酮片），批准文号：国药 准字H10910003,由西安杨森制药有限公司生产。
[0038] 1.3营养性半固体糊的制备
[0039] 营养性半固体糊的制备：取羧甲基纤维素纳5g，溶于100mL蒸馏水中，分别加入 奶粉8g、糖4g、淀粉4g、碳素墨水2ml，搅拌均匀，配制成约150ml的黑色半固体糊状物，冰 箱冷藏，用时恢复至室温。
[0040] 1. 4 试剂
[0041] 血清胃促生长素（Ghrelin)、瘦素（Leptin)、5-羟色胺 (5-hydroxytryptamine, 5-HT)和血管活性肠肽（Vasoactive intestinal peptide, VIP)的 Elisa试剂盒，由上海恒远生物科技有限公司提供。
[0042] 1. 5 仪器
[0043] MA-100A型酶标仪（杭州博特仪器设备有限公司），GNP-9080型隔水式恒温培养箱 (上海精宏实验设备有限公司），移液器，BL-420S生物技能实验系统，TGL-16高速台式冷冻 离心机（长沙湘仪离心仪器有限公司），ZB-200疲劳转棒仪（成都泰盟科技有限公司）。
[0044] 2 方法
[0045] 2. 1动物造模方法
[0046] 取准备好的实验大鼠，在室内温度20°C -28°C、相对湿度在45-65%的饲养室饲养 7天，于无菌条件下行电极埋置术，术前自制针状电极，配置0. 3%戊巴比妥钠麻药。腹腔注 射麻醉大鼠 lml/100g，将腹部及颈背部剃毛并用0. 5%碘伏常规消毒，铺消毒洞巾，剑突下 腹正中线切口，取出胃、十二指肠，将2对自制针状电极分别埋置于胃窦及十二指肠浆膜下 肌层，第一对电极埋置于胃窦处，距幽门上约lcm，第二对电极置于十二指肠距幽门l-2cm 处，双极电极沿胃窦及肠管纵向排列，间距5mm，电极导线沿皮下走行至颈背部穿出固定，腹 腔滴数滴青霉素注射液以防止腹腔感染，逐层缝合创口，术后用无菌〇. 9 % NaCl注射液配 置青霉素注射液0. 8万U/ml，每只大鼠 Iml腹腔注射，每天1次，连续注射3天，以防止腹腔 感染，术后分笼常规饲养，恢复一周后，禁食不禁水18_24h，将导线与BL-420S生物技能实 验系统相连，首次记录大鼠胃肠肌电活动，作为正常对照。之后进行造模：用卵圆钳夹大鼠 尾巴中外1/3处，以大鼠愤怒反抗或撕咬为度，尽量不要夹破尾部的皮肤，每次连续不断刺 激夹尾30min ;夹尾刺激结束后将大鼠放在疲劳转棒仪上，令其跑步lOmin，转速35r/min ; 每天每隔3h重复夹尾刺激和疲劳转棒仪跑步运动的操作，每天进行4次，连续造模10天， 10天内隔日给食，观察大鼠的毛色、拱背、嗜倦怠、扎堆、乏力、易激惹情况，并记录体重、体 温、食量、饮水量、大鼠胃肠肌电活动、粪便情况，至符合FD理论诊断标准，造模结束。
[0047] 2. 2动物分组
[0048] 首次记录大鼠正常胃肠肌电活动后进行随机分组：正常对照8只，其余大鼠进行 造模。将模型大鼠随机分成5组，分别为平胃胶囊高、中、低剂量组、吗丁啉组、模型组，每组 各8只，正常对照组8只，正常组不给予任何刺激，自由进食水，自由活动。
[0049] 2. 3给药方法
[0050] 造模完成后，按人与大鼠体表面积比折算成等效剂量。平胃胶囊高、中、低剂量组 分别按24倍、16倍、8倍剂量换算后，高、中、低剂量组分别将平胃胶囊配置成0. 24g/ml、 0. 16g/ml、0. 08g/ml均以lml/100g灌胃；吗丁啉组以0. 5mg/ml的混悬液以lml/100g灌胃， 模型组及正常对照组均以等量生理盐水灌胃，六组均每日2次，给药3周。
[0051] 2. 5标本采集与检测
[0052] (1)记录胃肠电活动
[0053] 给药三周后，再次记录胃肠电活动情况。
[0054] (2)取血及进行胃排空肠推进试验
[0055] ①禁食不禁水18-24h后，以5%碳末悬液lml/lOOg灌胃给药，20min后，将大鼠摔 晕，股动脉采血，室温静置1-2小时后，在4°C条件下离心以3500-4000rpm转速离心lOMin， 取上层清液即血清，分装于离心管中，存放在_80°C冰箱中，拟日行Elisa检测。
[0056] ②打开腹腔，结扎胃贲门和幽门，取出胃，用滤纸吸干后称重，然后沿胃大弯剪开 胃体，洗去胃内容物，再用滤纸吸干，称胃净重。计算胃排空（％)= 1_[(胃全重一胃净 重）/半固体糊]X 100%，以此评价胃排空速度。
[0057] ③然后取出小肠自然摆直平铺于白纸上，测量小肠总长度L(幽门至回盲部的距 离），炭末推进距离L。（幽门至炭末推进前端）。小肠推进度（％ ) = U/L X 100 %，以此来 评价小肠推进速度。
[0058] 2. 6统计学处理
[0059] 采用SPSS19. 0软件进行分析，实验数据以均数土标准差(；?±4表示，组间比较 采用单因素变量的方差分析。以P〈〇. 05表示有统计学意义。
[0060] 3 结果
[0061] 3.1生理学观察
[0062] 对造模前后的模型实验大鼠毛色、粪便、活动度及情绪等一般情况进行观察与记 录，结果如下：
[0063] 表1生理学观察结果
[0064]
[0065] 3. 2进食量检测
[0066] 对造模前后及药物治疗后的进食量、体重分别进行测定，检测结果如下：Λ
[0067] 表2大鼠进食量的改变（η = 8,.太土^ )
[0068]
[0069] 注：与正常组比较>〈0. 01，与模型组比较ΛΡ〈0. 01，与吗丁啉组比较*P>0. 05。
[0070] 表3大鼠体重的改变（η = 8, $士Λ，）
[0071]
[0073] 注：与正常组比较* Ρ〈0. 01，与模型组比较ΛΡ〈0. 05,与吗丁啉组比较4>0. 05。
[0074] 3. 3胃肠电活动检测
[0075] 对造模前后及药物治疗后的胃、十二指肠电慢波振幅、频率、快波振幅、发生率分 别进行测定，检测结果如下：
[0076] 表4胃电活动的变化（η = 8，? ± a )
[0077]
[0078] 注：与正常组比较* P〈0. 01，与模型组比较ΛΡ〈0. 01，与吗丁啉组比较4>0. 05。 [0079] 表5十二指肠电生理的变化（η = 8, jc土^ )
[0080] 注：与正常组比较>〈0. 01，与模型组比较ΛΡ〈0. 01，与吗丁啉组比较*Ρ&g