Hmgcs2抑制剂在制备治疗可卡因成瘾的药物中的用图
【技术领域】
[0001]本发明涉及HMGCS2抑制剂在制备治疗可卡因成瘾的药物中的用途。
【背景技术】
[0002] 可卡因（Cocaine)又称古柯碱，化学名为苯甲酰甲基芽子碱（methyl benzoylecgonine)，一般呈白色晶体状，无臭，味苦而麻，其最早用于局部麻醉和治疗哮 喘，是最强的天然中枢兴奋剂，因其对中枢神经系统的兴奋作用而导致滥用，1985年起成为 世界性主要毒品之一。
[0003] 可卡因成瘾，是一种慢性复发性脑部疾病，属于药物依赖（drugdependence)类疾 病，可卡因成瘾会引起大脑结构和功能的可塑性变化，相关脑区包括伏隔核、纹状体、前额 皮质、海马和腹侧被盖区，健康也受到多方面的危害，包括精神颓废、人格缺损、心智功能紊 乱、并发相应的感染合并症以及吸毒者不顾一切地寻求和使用毒品而诱发各种违法犯罪活 动。
[0004] 可卡因成瘾的主要特点表现为即使患者在知晓用药的严重后果后，依然强迫性索 取和使用以满足欲望、对药物的寻觅和索取失去控制、对事物失去兴趣、成瘾记忆十分深 亥IJ，即使经过戒断治疗若干年后，接触与成瘾有关的刺激（如毒友、与过去用药有关的环境 等）都可能诱发复吸。
[0005] 鉴于可卡因成瘾危害甚大，找到合适的治疗靶点和药物，治疗可卡因成瘾迫在眉 睫。
【发明内容】
[0006] 为了解决上述问题，本发明提供了一类治疗可卡因成瘾的药物。
[0007]HMGCS2 :3羟3甲戊二酰辅酶A合成酶2,又称为3羟基-3甲基戊二酰辅酶A合成 酶线粒体亚型。
[0008] HMGCS2抑制剂：抑制3羟3甲戊二酰辅酶A合成酶2的活性或者表达的物质。
[0009] 本发明首先提供了HMGCS2抑制剂在制备治疗可卡因成瘾的药物中的用途。
[0010] 优选地，所述治疗可卡因成瘾的降低HMGCS2酶活的药物。进一步优选地，
[0011] 所述降低HMGCS2酶活的药物是化合物I，其结构式如下：
[0012]
化学式为C1SH2S05,分子量为324. 41。
[0013] 本发明还提供了一种治疗可卡因成瘾的药物，它是以HMGCS2抑制剂为活性成分， 加上药学上可接受的辅料或者辅助性成分制备而成的制剂。
[0014] 优选地，所述HMGCS2抑制剂为降低HMGCS2酶活的药物。进一步优选地，
[0015]所述降低HMGCS2酶活的药物是化合物I，其结构式如下：
化学式为C1SH2S05,分子量为324. 41。
[0016] 优选地，所述制剂是注射制剂。
[0017]HMGCS2抑制剂可以有效减弱可卡因奖赏行为，治疗可卡因成瘾，临床应用前景良 好。
[0018] 以下通过实施例形式的【具体实施方式】，对本发明的上述内容作进一步的详细说 明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明权利要 求书记载的内容所实现的技术均属于本发明的范围。
【附图说明】
[0019] 图1小鼠条件性位置偏好箱
[0020] 图2条件性位置偏好实验设计示意图。GroupI:生理盐水组；GroupII:可卡因 组。S:腹腔注射生理盐水；C:腹腔注射可卡因。
[0021] 图3小鼠自发活动箱
[0022] 图4可卡因处理诱导小鼠伏隔核HMGCS2的表达及活性。（A)可卡因条件性位置 偏好小鼠伏隔核HMGCS2的表达水平。⑶可卡因单次给药后30min(Single-30min)和 24h(Single_24h)，连续给药7天〇tepeated-7days)后伏隔核HMGCS2的表达水平。（C) 可卡因条件性位置偏好小鼠伏隔核HMGCS2的酶活性。Saline，SA:腹腔注射生理盐水组； Cocaine，C0:腹腔注射可卡因组。n= 6/组。*p〈0. 05,可卡因条件性位置偏好成瘾、单次 给药后30min和24h、连续给药7天，各组与生理盐水组比较有统计学差异。
[0023] 图5伏隔核注射HMGCS2小分子抑制剂对可卡因诱导的行为敏化的影响。（A) 伏隔核注射Hymeglusin干扰可卡因自发活动行为敏化模型建立模式图。（B)伏隔核注 射Hymeglusin对可卡因诱导的自发活动的影响，n= 15/组。（C)Hymeglusin预处理 对可卡因行为敏化小鼠伏隔核HMGCS2的酶活性的影响，n= 6/组。Saline-Saline: 伏隔核注射生理盐水-腹腔注射生理盐水组；Hymeglusin-Saline:伏隔核注射 Hymeglusin-腹腔注射生理盐水组；Saline-Cocaine:伏隔核注射生理盐水-腹腔 注射可卡因组；Hymeglusin-Cocaine:伏隔核注射Hymeglusin-腹腔注射可卡因组。 *p〈0. 05，Hymeglusin-Saline组、Saline-Cocaine组、伏Hymeglusin-Cocaine组分别与 Saline-Saline组比较有统计学差异。#p〈0. 05，Hymeglusin_Cocaine组与Saline-Cocaine 组比较有统计学差异。
[0024] 图6伏隔核注射HMGCS2小分子抑制剂对可卡因条件性位置偏好的影响。（A) 伏隔核注射Hymeglusin干扰可卡因条件性位置偏好模型建立模式图。（B)伏隔核注射 Hymeglusin对可卡因条件性位置偏好的影响，n=15/组。（C)Hymeglusin预处理对可卡 因条件性位置偏好小鼠伏隔核HMGCS2的mRNA转录的影响，n=15/组。（D)Hymeglusin 预处理对可卡因条件性位置偏好小鼠伏隔核HMGCS2的蛋白表达的影响，n=15/组。 Saline-Saline:伏隔核注射生理盐水-腹腔注射生理盐水组；Hymeglusin-Saline:伏隔核 注射Hymeglusin-腹腔注射生理盐水组；Saline-Cocaine:伏隔核注射生理盐水-腹腔注 射可卡因组；Hymeglusin-Cocaine:伏隔核注射Hymeglusin-腹腔注射可卡因组。*p〈0. 05， Hymeglusin-Saline组、Saline-Cocaine组、Hymeglusin-Cocaine组分别与Saline-Saline 组比较有统计学差异。#p〈〇.〇5，Hymeglusin_Cocaine组与Saline-Cocaine组比较有统计 学差异。
[0025] 图7HMGCS2小分子抑制剂对可卡因条件性位置偏好小鼠伏隔核能量形式的 影响。（A)Hymeglusin干扰可卡因条件性位置偏好模型下伏隔核ATP的含量变化。（B) Hymeglusin干扰可卡因条件性位置偏好模型下伏隔核乙酰辅酶A(Acetyl-C〇A)的含量 变化。（C)Hymeglusin干扰可卡因条件性位置偏好模型下伏隔核柠檬酸合酶活性的变 化。（D)HymegluSin干扰可卡因条件性位置偏好模型下伏隔核NAD+/NADH比率的变化。 Saline-Saline:伏隔核注射生理盐水-腹腔注射生理盐水组；Hymeglusin-Saline:伏隔核 注射Hymeglusin-腹腔注射生理盐水组；Saline-Cocaine:伏隔核注射生理盐水-腹腔注 射可卡因组；Hymeglusin-Cocaine:伏隔核注射Hymeglusin-腹腔注射可卡因组。n= 6/ 组。*p〈0. 05,Hymeglusin-Saline组、Saline-Cocaine组、Hymeglusin-Cocaine组分别与 Saline-Saline组比较有统计学差异。#p〈0. 05，Hymeglusin_Cocaine组与Saline-Cocaine 组比较有统计学差异。
[0026] 图8沉默伏隔核Hmgcs2对可卡因行为敏化的影响。（A)慢病毒shHmgcs2在伏 隔核注射示意图。（B)伏隔核注射shHmgCS2慢病毒对可卡因诱导的自发活动的影响，n= 15/组。（C)可卡因行为敏化模型下，伏隔核注射shHmgcs2慢病毒对HMGCS2mRNA转录水 平的影响，n= 6/组。（D)可卡因行为敏化模型下，伏隔核注射shHmgCS2慢病毒对HMGCS2 蛋白表达水平的影响，n= 6/组。*p〈0.05，shHmgcs2_Saline组、shControl-Cocaine 组、shHmgcs2_Cocaine组分别与shControl-Saline组比较有统计学差异。#p〈0. 05， shHmgcs2_Cocaine组与shControl-Cocaine组比较有统计学差异。
[0027] 图9沉默伏隔核HmgCS2基因对可卡因条件性位置偏好的影响。（A)伏隔核 注射shHmgcs2慢病毒对可卡因诱导的条件性位置偏好的影响，n = 15/组。（B)可 卡因行为敏化模型下，伏隔核注射shHmgCS2慢病毒对HMGCS2酶活性的影响，n = 6/ 组。*p〈0. 05，shHmgcs2_Saline组、shControl-Cocaine组、shHmgcs2_Cocaine组 分别与shControl-Saline组比较有统计学差异。#p〈0. 05，shHmgcs2_Cocaine组与 shContro 1-Cocaine组比较有统计学差异。
[0028] 图10沉默伏隔核HmgCS2基因对可卡因条件性位置偏好小鼠伏隔核能量形式的影 响。（A)伏隔核注射shHmgcs2慢病毒干扰可卡因条件性位置偏好模型下伏隔核ATP的含量 变化。（B)伏隔核注射shHmgCS2慢病毒干扰可卡因条件性位置偏好模型下伏隔核乙酰辅酶 A(Acetyl-C〇A)的含量变化。（C)伏隔核注射shHmgCS2慢病毒干扰可卡因条件性位置偏好 模型下伏隔核柠檬酸合酶活性的变化。（D)伏隔核注射shHmgCS2慢病毒干扰可卡因条件 性位置偏好模型下伏隔核NAD+/NADH比率的变化。n= 6/组。*p〈0. 05,shHmgcs2-Saline 组、shControl-Cocaine组、shHmgcs2_Cocaine组分别与shControl-Saline组比较有统计 学差异。#P〈〇. 05,shHmgcs2_Cocaine组与shControl-Cocaine组比较有统计学差异。
[0029] 图11泳道1:空白对照；泳道2:阳性对照；泳道3~泳道9:PLLU2G-shHmgcs2①~ ⑧号克隆；M:100bpDNALadder。
[0030] 图12重组载体结构示意图。
[0031] 图13PLLU2G-shHmgcs2质粒转染293T细胞48h病变情况。
[0032] 图14PLLU2G-shcontrol质粒转染293T细胞48h病变情况。
【具体实施方式】
[0033] 实验例1HMGCS2抑制剂治疗可卡因成瘾
[0034] 1 前言
[0035] 本研究中，采用药理与遗传手段，向小鼠伏隔核内定位注射关键酶的小分子抑制 剂或沉默关键酶基因的慢病毒，结合iH-NMR代谢组学分析确认HMGCS2抑制剂可以有效治 疗可卡因成瘾。
[0036] 2材料与方法
[0037] 2. 1实验材料
[0038] 2. 1. 1实验试剂
[0039] (1)盐酸可卡因，购自中国药品生物制品鉴定所。
[0040] (2)生理盐水，购自四川科伦药业股份有限公司。
[0041] (3)Hymeglusin((1233A;F244 ;L-659-699))，购自美国Sigma-Aldrich公司，其结
构式 化 ， 学式为C1SH2S05，分子量为324. 41。
[0042] (4)HMG_CoA合成酶活