一种红树莓提取物的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及保健食品加工领域，尤其是从红树莓中提取得到提取物的制备方法。
【背景技术】
[0002] 树莓（raspberry)为蔷薇科悬钩子属（Rubus L.)的多年生落叶性灌木型果树，果 实又称覆盆子、托盘、马林等，风味独特，在国际上被誉为"黄金水果"。据分析，树莓果实含 丰富的有机酸，维生素 A、维生素 C、维生素 B1、维生素 B2、烟酸等多种维生素及人体必需的8 种氨基酸；还有丰富的矿物质、黄酮、花青素及挥发油、酚类、萜类等有效成分；树莓果实还 含大量的天然SOD(超氧化物歧化酶）、鞣花酸、树莓酮、水杨酸（天然阿司匹林）、维生素 E等物质，具有壮阳、美容、抗癌、抗衰老、降脂、降血压、预防心脑血管疾病等功效，是一种极 具生物学功能和营养价值的天然水果，其抗氧化、抗衰老功能居于各种浆果之首。
[0003] 我国红树莓资源丰富，近年来栽培面积不断扩大；但由于红树莓鲜果柔嫩多汁，保 藏时间短，只能季节性消费，国内大量鲜果冷冻后出口，经济附加值低。目前国内市场已经 开始开发红树莓产品，主要以红树莓果酒、红树莓饮品为主，同时也进行了树莓多种生物学 功效的宣传工作。但是树莓的生物学功效并未得到充分的开发与利用，市场上也很少见以 红树莓作为原料开发的保健型功能产品。
【发明内容】
[0004] 本发明提供一种从红树莓果实中提取活性物质，并进行分离纯化，得到红树莓提 取物的方法。同时，本发明的应用研究表明，所得到的红树莓提取物具有良好的降血脂、降 血糖、降血压、减轻脂肪肝、提高机体免疫力、补肾、固精缩尿、控制体重、调节代谢等功能。
[0005] 本发明是通过以下技术方案来实现的：
[0006] 1、红树莓选果，预处理，得到红树莓盐制干果实；2、红树莓盐制干果实粉碎，过筛， 得到红树莓果实粉；3、红树莓果实粉经乙醇提取以及后处理，得到红树莓粗提物；4、红树 莓粗提物用大孔树脂层析法进行分离纯化，得到红树莓粗提物一纯物；5、红树莓粗提物一 纯物用凝胶层析法进行分离纯化，冷冻干燥，得到红树莓提取物。
[0007] 具体操作如下：
[0008] 1、红树莓选果，预处理，得到红树莓盐制干果实；其中，预处理包括两级烘干、食盐 水浸泡、再次烘干。选取新鲜、成熟度适中的红树莓鲜果，去除生果、过熟果，去除杂质及果 梗等异物，置于鼓风干燥箱中，每层鲜果堆积的厚度在2-5cm，在70-90°C下鼓风烘干1-2小 时，至红树莓鲜果半干；将温度调至50-60°C继续鼓风烘干，直至红树莓鲜果变干，干燥过 程中要适度翻动红树莓鲜果，使其干燥均匀，得到红树莓干果实；冷却至室温，加入一定量 的食盐水，浸泡两级烘干后的红树莓干果实，室温保持24小时，待食盐水被所述的红树莓 干果实充分吸入后，将吸入食盐水的所述的红树莓干果实置于60-80°C鼓风干燥箱内再次 烘干，再次烘干的过程需要时常翻动吸入食盐水的所述的红树莓干果实，至吸入食盐水的 所述的红树莓干果实接近干燥，取出，冷却至室温，晾干，得到红树莓盐制干果实。
[0009] 在红树莓鲜果实两级烘干的过程中，温度控制至关重要；前2个小时温度不能 超过90°C，温度太高，会导致红树莓鲜果实中活性物质的丧失；作为优选，温度控制在 75-80°C。2小时后的烘干过程温度不宜超过60°C，防止红树莓鲜果实内的活性物质遭到破 坏。
[0010] 所述的食盐水是质量百分比浓度为20-40%的食盐水，每100g两级烘干后的红树 莓干果实加入50mL所述的食盐水。作为优选，所述的食盐水的质量百分比浓度为25-30%。
[0011] 作为优选，所述红树莓盐制干果实在鼓风再次烘干过程中，温度保持在65-70Γ， 再次烘干后期，采用室温阴干的方式，利用余热使所述红树莓盐制干果实中的水分挥发掉。
[0012] 红树莓干果实进行盐制，有利于增强提取物的应用效果，对于提取物在体内的吸 收、发挥作用均具有增强的效果；对比盐制与未盐制的红树莓果实提取物，果实盐制后再提 取纯化，得到的提取物在补肾、固精缩尿、降血脂、降血糖等方面均显著优于未盐制处理。
[0013] 食盐水的浓度对于盐制效果有很大影响，适当的食盐水浓度，有利于盐制效果的 提高，在所述的食盐水浓度范围内，经过盐制处理的红树莓盐制干果实经过后续工艺加工 处理，得到的红树莓提取物具有很好的功效，超出此范围，虽然也是盐制，但是获得的红树 莓提取物功效会受到影响。
[0014] 2、红树莓盐制干果实粉碎，过筛，得到红树莓果实粉：将所述的已经干燥的红树莓 盐制干果实粉碎，过80目筛，过筛后筛上的碎肩继续粉碎过筛，保证原料得到充分地利用， 收集筛下的部分得到所述的红树莓果实粉。
[0015] 3、将红树莓果实粉经乙醇提取以及后处理，得到红树莓粗提物；后处理为依次进 行的一次减压低温浓缩、无水乙醇洗涤、低温静置、离心去掉沉淀、二次减压低温浓缩。
[0016] 采用两次提取法；第一次提取，乙醇水溶液质量百分比浓度为85-99%，以盐 酸调节乙醇水溶液的pH为2. 5-6. 5,所述红树莓果实粉与乙醇水溶液的质量体积比为 lg:5-20mL，提取温度为50-75°C，提取时间为2-4小时；第二次提取，乙醇水溶液质量百分 比浓度为30-70%，以盐酸调节乙醇水溶液的pH为2. 5-6. 5,红树莓果实粉与乙醇水溶液的 质量体积比为lg: 5-20mL，提取温度为40-60°C，提取时间为2-6小时；合并两次提取液，第 一次减压低温浓缩至乙醇挥发尽，用无水乙醇醇沉浓缩混合提取液，浓缩混合提取液与无 水乙醇的体积比例为1:1-3,将浓缩混合提取液与无水乙醇的混合物置于4°C下静止放置 24小时后，离心，去掉沉淀，上层液体第二次减压低温浓缩至乙醇挥发尽，即得到红树莓粗 提物。
[0017] 作为优选，第一次提取时乙醇水溶液质量百分比浓度为90-95%，所述红树莓果实 粉与乙醇水溶液的质量体积比优选为lg: 10-12mL，提取温度优选为60-65°C，提取时间优 选为3-3. 5小时。
[0018] 作为优选，第二次提取时乙醇水溶液质量百分比浓度为50-60%，所述红树莓果实 粉与乙醇水溶液的质量体积比优选为lg: 8-10mL，提取温度优选为50-55°C，提取时间优选 为3-3. 5小时。
[0019] 作为优选，用无水乙醇醇沉浓缩混合提取液，浓缩混合提取液与无水乙醇的体积 比例为1:1. 5。
[0020] 两次减压低温浓缩的温度均为35_50°C，作为优选，温度为40_45°C。
[0021] 采用两次提取使得最终提取物得率提高了 12-35%，两次提取分别采用较高浓度 乙醇溶液和较低浓度乙醇溶液，使得红树莓果实粉中的脂溶性及水溶性活性功能物质均得 到充分的提取。相比单次提取及单一浓度提取，采用高、低浓度两次提取结合，进一步增强 提取物的得率及功效，同时有效提高原料利用率。
[0022] 提取过程中各项参数的选择对提取效果也有很大影响，在所述的参数范围内，红 树莓果实粉中活性物质得到很好的提取，提取得率也高。
[0023] 4、将红树莓粗提物用大孔树脂层析法进行分离纯化，得到红树莓粗提物一纯物。
[0024] 上述步骤得到的红树莓粗提物以水配制成浓度为50-80mg/mL的溶液，以盐酸调 节pH到2. 0-5. 5,将2. 0-4. 0倍柱体积的红树莓粗提物溶液以I. 5-2. 5mL/min的流速通过 填充有大孔树脂的分离柱；静置吸附饱和后，用4. 0-6. 0倍柱体积的蒸馏水以I. 0-2. OmL/ min的流速淋洗吸附后的大孔树脂，至流出液为无色；再用4. 0-6. 0倍柱体积的酸性乙醇水 溶液以I. 0-2. 5mL/min的流速洗脱吸附了红树莓粗提物的大孔树脂，收集洗脱液，将收集 到的洗脱液减压低温浓缩，