离子配位沉淀法纯化苹果多酚的方法_2

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其他与一相同。
【具体实施方式】 [0026] 三:本实施方式与一或二不同的是:步骤三中离心转 速为1500rpm。其他与一或二相同。
【具体实施方式】 [0027] 四:本实施方式与一至三之一不同的是:步骤三中离 心时间为50min。其他与一至三之一相同。
【具体实施方式】 [0028] 五:本实施方式与一至四之一不同的是:步骤三中pH 值为7. 5。其他与一至四之一相同。
[0029] 通过以下实施例验证本发明的有益效果:
[0030] 实施例一:一种Mn+离子配位沉淀法纯化苹果多酚的方法是通过以下步骤进行的:
[0031] -、原料预处理:将新鲜的苹果切成Icm3的小块,在温度为80°C的水中漂烫8s~ IOs后破碎得到匀浆;
[0032] 二、微波辅助粗提取:将5g步骤一得到的匀浆加入到70mL质量浓度为50%的乙 醇中,然后在微波功率为640W的条件下进行粗提取,粗提取的时间为70s,得到苹果多酚粗 提取液;所述苹果多酚粗提取液中苹果多酚的含量为9. 92mg/g ;
[0033] 三、将50mL步骤二得到的苹果多酚粗提取液采用质量浓度为1%~5%的氨水将 pH值从3. 8~4. 5调整至7. 5,得到调节后的苹果多酚粗提取液;向调节后的苹果多酚粗提 取液中投加〇? Ig~I. 4g ZnCl3,然后在离心转速为1500rpm、离心时间为50min和pH值为 7. 5的条件下进行离心,静置lOmin,得到纯化后的苹果多酚沉淀物;
[0034] 四、沉淀物转溶提取:将步骤三得到的纯化后的苹果多酚沉淀物加入到浓度为 lmol/L的盐酸中至沉淀物完全溶解,得到转溶后的苹果多酚样液,然后再向转溶后的苹果 多酚样液中加入乙酸乙酯萃取,冷冻干燥得到棕红色粉末状苹果多酚;所述转溶后的苹果 多酚样液与乙酸乙酯的体积比为1:1。
[0035] 图1为不同ZnCl3添加量与苹果多酚沉淀率的关系曲线;由图1可知,苹果多酚沉 淀率与ZnCl^添加量呈正比例关系,说明ZnCl 3含量越高,多酚沉淀率越大,在ZnCl 3的添 加量为0. 1~0. 4g范围内,随着ZnCl3的增加,苹果多酚沉淀率快速增大,此后,苹果多酚沉 淀率仍随ZnClJ^添加量而增大,但增加速率逐渐变得缓慢最后趋于稳定,说明当ZnCl 3的 添加量达到I. 2g左右时,苹果多酚沉淀率值趋于稳定,说明粗提液中的苹果多酚已纯化的 比较完全。
[0036] 实施例二:一种Mn+离子配位沉淀法纯化苹果多酚的方法是通过以下步骤进行的:
[0037] -、原料预处理:将新鲜的苹果切成Icm3的小块,在温度为80°C的水中漂烫8s~ IOs后破碎得到匀浆;
[0038] 二、微波辅助粗提取:将5g步骤一得到的匀浆加入到70mL质量浓度为50%的乙 醇中,然后在微波功率为640W的条件下进行粗提取,粗提取的时间为70s,得到苹果多酚粗 提取液;所述苹果多酚粗提取液中苹果多酚的含量为9. 92mg/g ;
[0039] 三、将50mL步骤二得到的苹果多酚粗提取液采用质量浓度为1%~5%的氨水将 pH值从3. 8~4. 5调整至5~9,得到调节后的苹果多酚粗提取液;向调节后的苹果多酚粗 提取液中投加I. 2g ZnCl3,然后在离心转速为1500rpm、离心时间为50min和pH值为5~9 的条件下进行离心,静置l〇min,得到纯化后的苹果多酚沉淀物;
[0040] 四、沉淀物转溶提取:将步骤三得到的纯化后的苹果多酚沉淀物加入到浓度为 lmol/L的盐酸中至沉淀物完全溶解,得到转溶后的苹果多酚样液,然后再向转溶后的苹果 多酚样液中加入乙酸乙酯萃取,冷冻干燥得到棕红色粉末状苹果多酚;所述转溶后的苹果 多酚样液与乙酸乙酯的体积比为1:1。
[0041] 图2为不同pH值与苹果多酚沉淀率的关系曲线;由图2可知,随着pH的增大,样 品溶液环境逐渐由酸性到中性,苹果多酚与金属离子配位产生沉淀,苹果多酚沉淀率由少 至多,苹果多酚逐渐从粗提液中纯化出来,当PH值等于7. 5,样液环境达到中性稍偏碱后, 苹果多酚沉淀率达到最大值。随着pH值的继续增加,样液逐渐偏碱性,随着碱性的增大, 苹果多酚沉淀率减少,说明强碱性环境会破坏苹果多酚与Zn 3+离子配位产生的酚盐类沉淀 结。因此无论样液环境过酸或者过碱都不利苹果多酚与金属离子配位产生沉淀。中性偏碱 的环境才可获得最大的苹果多酚沉淀率。
[0042] 实施例三:一种Mn+离子配位沉淀法纯化苹果多酚的方法是通过以下步骤进行的:
[0043] -、原料预处理:将新鲜的苹果切成Icm3的小块,在温度为80°C的水中漂烫8s~ IOs后破碎得到匀浆;
[0044] 二、微波辅助粗提取:将5g步骤一得到的匀浆加入到70mL质量浓度为50%的乙 醇中,然后在微波功率为640W的条件下进行粗提取,粗提取的时间为70s,得到苹果多酚粗 提取液;所述苹果多酚粗提取液中苹果多酚的含量为9. 92mg/g ;
[0045] 三、将50mL步骤二得到的苹果多酚粗提取液采用质量浓度为1%~5%的氨水将 pH值从3. 8~4. 5调整至7. 5,得到调节后的苹果多酚粗提取液;向调节后的苹果多酚粗提 取液中投加I. 2g ZnCl3,然后在离心转速为500~4000rpm、离心时间为50min和pH值为 7. 5的条件下进行离心,静置lOmin,得到纯化后的苹果多酚沉淀物;
[0046] 四、沉淀物转溶提取:将步骤三得到的纯化后的苹果多酚沉淀物加入到浓度为 lmol/L的盐酸中至沉淀物完全溶解,得到转溶后的苹果多酚样液,然后再向转溶后的苹果 多酚样液中加入乙酸乙酯萃取,冷冻干燥得到棕红色粉末状苹果多酚;所述转溶后的苹果 多酚样液与乙酸乙酯的体积比为1:1。
[0047] 图3为不同离心转速与苹果多酚沉淀率的关系曲线;由图3可知,离心速率对苹 果多酚沉淀率的影响较明显,在离心转速为500~1500rpm范围内,随着转速的增加,苹果 多酚沉淀率增加,说明增加离心转速,可以促进粗提液中的苹果多酚与溶液中的Zn 3+配位 产生沉淀,但随着离心转速的增加苹果多酚沉淀率减少,说明离心转速过大,会使环境不稳 定性增强,使刚刚生成的苹果多酚沉淀在物理作用下被破坏分解,令样液内的沉淀减少。因 此,离心转速不宜过大。
[0048] 实施例四:一种Mn+离子配位沉淀法纯化苹果多酚的方法是通过以下步骤进行的:
[0049] -、原料预处理:将新鲜的苹果切成Icm3的小块,在温度为80°C的水中漂烫8s~ IOs后破碎得到匀浆;
[0050] 二、微波辅助粗提取:将5g步骤一得到的匀浆加入到70mL质量浓度为50%的乙 醇中,然后在微波功率为640W的条件下进行粗提取,粗提取的时间为70s,得到苹果多酚粗 提取液;所述苹果多酚粗提取液中苹果多酚的含量为9. 92mg/g ;
[0051] 三、将50mL步骤二得到的苹果多酚粗提取液采用质量浓度为1%~5%的氨水将 pH值从3. 8~4. 5调整至7. 5,得到调节后的苹果多酚粗提取液;向调节后的苹果多酚粗 提取液中投加I. 2g ZnCl3,然后在离心转速为1500rpm、离心时间为10~70min和pH值为 7. 5的条件下进行离心,静置lOmin,得到纯化后的苹果多酚沉淀物;
[0052] 四、沉淀物转溶提取:将步骤三得到的纯化后的苹果多酚沉淀物加入到浓度为 lmol/L的盐酸中至沉淀物完全溶解,得到转溶后的苹果多酚样液,然后再向转溶后的苹果 多酚样液中加入乙酸乙酯萃取,冷冻干燥得到棕红色粉末状苹果多酚;所述转溶后的苹果 多酚样液与乙酸乙酯的体积比为1:1。
[0053] 图4不同离心时间与苹果多酚沉淀率的关系曲线;由图4可知,苹果多酚沉淀率与 离心时间大致呈正比例关系,随着离心时间的增加,苹果多酚沉淀率增加,说明反应时间的 延长会促进酚盐沉淀的生成,当离心时间为50min,苹果多酚沉淀率最大,随后,苹果多酚沉 淀率随离心时间的增加略有减少后逐步趋于稳定,说明此时粗提液中的AP已纯化的比较 完全,增加反应时间,对苹果多酚沉淀率已无太大影响。
[0054] 实施例五:一种Mn+离子配位沉淀法纯化苹果多酚的方法是通过以下步骤进行的:
[0055] -、原料预处理:将新鲜的苹果切成Icm3的小块,在温度为80°C的水中漂烫8s~ IOs后破碎得到匀浆;
[0056] 二、微波辅助粗提取:将5g步骤一得到的匀浆加入到70mL质量浓度为50%的乙 醇中,然后在微波功率为640W的条件下进行粗提取,粗提取的时间为70s,得到苹果多酚粗 提取液;所述苹果多酚粗提取液中苹果多酚的含量为9. 92mg/g ;
[0057] 三、将50mL步骤二得到的苹果多酚粗提取液采用质量浓度为1%~5%的氨水将 pH值从3. 8~
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