一种消除妊娠纹的复合护肤膏及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于日化用品及美容用品领域，特别设及一种消除妊娠纹的复合护肤膏及 其制备方法。
【背景技术】
[0002] 妊娠纹，是萎缩纹的一种，常出现在产后妈妈腹壁、大腿内外侧、臀部、胸部、后腰 部及手臂等处，成为她们的苦恼，不仅影响女性的穿衣打扮和自信，还影响女性的社交和生 活。其主要是由于妊娠期荷尔蒙的影响，加之腹部膨隆使皮肤的弹力纤维与胶原纤维损伤 或断裂，腹部皮肤变薄变细，出现一些宽窄不同、长短不一的粉红色或紫红色的波浪状花 纹，分娩后，运些花纹逐渐消失，则留下白色或银白色的有光泽的癒痕线纹，即妊娠纹，一旦 出现妊娠纹就不会自行消失，并伴随皮肤松弛、乳房下坠、腹部脂肪堆积，严重影响了妇女 产后的体态和身屯、健康。
[0003]目前，常见的消除妊娠纹的方法主要包括：（1)精油或膏霜，按摩及仪器辅助治 疗的方法，精油的渗透效果好，但是没有很好的修复效果。通过一年的修复，效果能达到 40%左右，操作时间长，目前的霜膏只能淡化，且疗程长，效果还不理想；（2)激光疗法，运 种方法不适合大面积治疗，且前期能看到效果，后期则没有变化，还对操作技术要求很高， 成本高，效果不理想；（3)换肤法，使用化学脱皮剂，多使用酸性或腐蚀性物质，过程中患者 痛苦，还易引发增殖瘤痕发生，皮肤薄且敏感的皮肤50%会引发增殖瘤痕，大面积使用对身 体有不良影响，皮肤细胞受损，影响新陈代谢，化学物质产生沉淀后引发皮肤色素沉淀。（4) 注射碱性纤维生长因子，它是促进肉芽增生的过程（一般用于面部填充)，填充本身维持 时间短，技术不宜掌握，费用大，能修复到60%左右（5)磨削法，物理磨削皮肤过程痛苦且 易留瘤痕。
[0004] 综上可见，目前修复、消除妊娠纹的日用护肤产品或方法效果都不理想，是人们爱 美之路上亟待解决的难题。
【发明内容】
[0005] 为解决上述技术问题，本发明提供一种消除妊娠纹的复合护肤膏及其制备方法， 采用将肉毒杆菌破壁蛋白液、多种维生素、天然胶原蛋白、中草药粉剂及天然植物萃取精油 W科学、合理配比复合，并将其制成方便使用的护肤膏的技术方案，通过其协同作用实现了 高效消除妊娠纹和皱纹、增强皮肤弹性、滋养美白肌肤，且其制备方法简单，适合工业生产， 使用方便。
[0006] 本发明采用的技术方案是，一种消除妊娠纹的复合护肤膏，所述护肤膏包括均匀 混合的下述原料：60-100mL肉毒杆菌破壁蛋白液、5-15mL丙S醇、5-15mL维生素E、5-15mL 维生素A、10-20g维生素C、15-25g胶原蛋白、10-25gS屯粉、10-25g巧等粉、2-10血薰 衣草精油、0. 1-10g簇甲基纤维素钢，所述肉毒杆菌破壁蛋白液为肉毒杆菌培养液经破壁 处理后提取的蛋白溶液，其蛋白含量为0. 3-0. 5wt. %。
[0007] 所述护肤膏的原料还包括5-15g尿囊素和0. 1-0. 2g薄荷冰。
[000引优选的，所述护肤膏由下述原料均匀混合而成：80-100mL肉毒杆菌破壁蛋白液、 10-15血丙S醇、10-15血维生素E、10-15血维生素A、15-20g维生素C、20-25g胶原蛋白、 22-25gS屯粉、22-25g巧等粉、10-15g尿囊素、0. 1-0. 15g薄荷冰、2-4mL薰衣草精油、 5-8g簇甲基纤维素钢。
[0009] 所述肉毒杆菌破壁蛋白液是按照如下方法制备的：（1)取肉毒杆菌菌种按接种量 1环/1L或体积比0. 01-0. 1%接种至LB液体培养基中，37°C恒溫培养48-9化，得肉毒杆菌 发酵液；（2)将（1)中的肉毒杆菌发酵液进行细胞破碎，100°C水浴脱毒处理后离屯、弃沉淀， 保留上清液；（3)向（2)中的上清液加入硫酸锭，离屯、收集沉淀，将收集的沉淀W憐酸盐缓 冲液透析18-3化，调整蛋白含量为0. 3-0. 5wt. %，得肉毒杆菌破壁蛋白液。
[0010] 本发明还提供上述消除妊娠纹的复合护肤膏的制备方法，所述制备方法包括W下 步骤： (1) 按上述方法制备肉毒杆菌破壁蛋白液； (2) 取（1)中的肉毒杆菌破壁蛋白液60-100血，边揽拌边依次加入5-15血丙S醇、 5-15血维生素E、5-15血维生素A、10-20g维生素C、15-25g胶原蛋白、10-25gS屯粉、 10-25g巧等粉、2-10血薰衣草精油和0.1-10g簇甲基纤维素钢，得混合浆体； (3 )将（2 )中的混合浆体揽拌20-40分钟，得复合护肤膏。
[0011] 优选的，所述肉毒杆菌菌种为从变质腐烂腊肉中分离纯化获得，其分离纯化过程 如下：挑取腊肉腐烂表面的细菌接种于LB固体培养基37°C恒溫培养24-7化，挑取单菌落接 种至新的LB固体培养基上，37°C恒溫培养24-7化，显微镜下观察，反复进行挑取单菌落接 种至新的LB固体培养基恒溫培养，至显微镜下观察菌落为纯肉毒杆菌，即筛选得到纯化的 肉毒杆困困种。
[0012] 优选的，所述肉毒杆菌发酵液进行细胞破碎、100°C水浴脱毒处理后的离屯、条件为 4500-5500;r/min、8-15min;所述加入硫酸锭后进行离屯、的条件为SOOOr/min-lOOOOr/min、 8-15min。
[0013] 优选的，制备肉毒杆菌破壁蛋白液的过程中所述透析过程为：W1L肉毒杆菌发酵 液所得沉淀加70-90mL憐酸盐缓冲液计，将溶有沉淀的缓冲液放入透析袋中，再将透析袋 放入憐酸透析缓冲液中，维持揽拌，每4-化更换一次透析缓冲液，透析18-3化。
[0014] 优选的，所述步骤（2)中=屯粉和/或巧等粉在加入前进行预处理，所述预处理包 括灭菌、干燥、粉碎，粉碎后的S屯粉和/或巧等粉粒度为200-300目。
[0015] 优选的，所述步骤（2)中薰衣草精油纯度为99%W上。
[0016] 上述技术方案中，肉毒杆菌破壁蛋白液是肉毒杆菌发酵液经细胞破碎处理后提取 的富含蛋白的溶液液，含有纯度高、均一性好的小分子蛋白，高效无毒，可W增强皮肤弹性、 刺激细胞分裂和生长；加入丙=醇能够使溶液具备溶解脂溶性和水溶性的物质，W便添加 有效成分；胶原蛋白，优选天然胶原蛋白，可W改善皮肤纤维的弹力与肌肉的张力和伸缩 度，增强细胞壁厚度，胶原蛋白与提取的肉毒素蛋白液联合作用起到控制肌肉松弛，保持肌 肉弹性和张力的作用；维生素E、维生素A、维生素C化合理配比可W改善和促进皮肤代谢， 增加皮肤活性，具有显著的抗衰老和抗氧化作用；中药成分=屯粉、巧等粉是天然的舒经活 血素，与纯天然植物萃取的薰衣草精油共同作用可W有效的抗衰老和增加肌肉弹性，可W 对肉毒杆菌破壁蛋白液和胶原蛋白起到增效的作用；尿囊素是一种两性化合物，能结合多 种物质形成复盐，具有避光、杀菌、防腐、止痛、促进细胞生长和抗氧化作用，能加快伤口愈 合，软化角质蛋白、缓解和治疗皮肤干燥，使皮肤滋润、柔软；薄荷冰作用于皮肤或粘膜，有 清凉止痒作用；簇甲基纤维素钢用作增稠剂，有利于产品成为方便使用的膏体状；本产品 能够迅速渗透肌肤细胞，促进表皮的微循环，刺激细胞新生，提升细胞含氧量，增加皮肤修 复和皱纹间隙的修补。
[0017]本发明的有益效果是：（1)本发明W小分子蛋白和天然的维生素、胶原蛋白及中 草药粉剂、植物精油为主要成分，配比合理，制备工艺科学，通过其协同作用多种有效成分 互为增效，护肤防皱效果加倍呈现，有效消除及减轻妊娠纹，预防皮肤老化和增强皮肤弹 性，对皮肤具有滋润、白暫、抗皱等效果，同时还具有减轻皮肤痊痒等作用，且生物相容性 好，安全性高；（2)本发明提供的护肤膏制备方法简单，适宜工业生产。
[001引下面结合附图对本发明进行详细说明。
【附图说明】
[0019] 图1是分离纯化的肉毒杆菌的菌落图； 图2是显微镜下肉毒杆菌发酵液中的菌体形态图； 图3是对肉毒杆菌破壁蛋白液进行SDS-page分析后的凝胶电泳图，其中，最右侧一列 为作为参照的蛋白质分子量标准的条带图，左侧=列为不同浓度(从左到右浓度依次为1/6 浓度、1/3浓度、透析后蛋白液原液）的肉毒杆菌破壁蛋白液样品的条带图； 图4为蛋白质分子量标准的条带-分子量对应图。
【具体实施方式】
[0020] W下通过具体实施例对本发明作详细说明，其中所使用的实验方法如无特殊说 明，均为常规方法；所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。本发明利用 小分子蛋白和天然的维生素、胶原蛋白及中草药粉剂、植物精油为主要成分，并合理配伍制 成护肤膏，用于减轻及消除妊娠纹，其配伍示例如下表1所示，其中的肉毒杆菌破壁蛋白液 是经过如下过程获得的，（1)取肉毒杆菌菌种经LB固体培养基平板培养、摇瓶LB液体培 养基37°C恒溫培养48-9化，得肉毒杆菌发酵液；（2)将（1)中的肉毒杆菌发酵液经细胞破 碎、100°C水浴脱毒处理后，离屯、弃细胞壁沉淀，保留上清液；（3)向（2)中的上清液加入硫 酸锭，离屯、收集沉淀，将收集的沉淀W憐酸盐缓冲液（pH6. 8)透析18-3化，调整蛋白含量 为0. 3-0. 5wt. %，得肉毒杆菌破壁蛋白液。所用的憐酸盐缓冲液为抑6. 8,其配制方法为取 0. 2mol/L憐酸二氨钟溶液250血，加入0. 2mol/L氨氧化钢溶液118血，用水定容至1L，摇 匀。
[00川表1消除妊娠纹的复合护肤膏的组成示例_
上述成分中，=屯粉和/或巧等粉使用前先经过预处理，预处理步骤包括灭菌、干燥、 粉碎，粉碎后的粒度为200-300目，薰衣草精油为纯天然植物萃取获得，纯度为99%W上。 [00过制备实施例 W上述实施例1为例说明本发明的消除妊娠纹的复合护肤膏的制备方法： (1)分离纯化肉毒杆菌菌种： 挑取腊肉腐烂表面的细菌接种于LB固体培养基表面，在37°C恒溫条件下培养48h，W接种环挑取单菌落接种至另一新的LB固体培养基上，37°C恒溫培养24-7化，显微镜下观察 菌落形态，反复进行接种环挑取单菌落接种至新的LB固体培养基上恒溫培养的过程，至显 微镜下观察菌落为纯肉毒杆菌，即筛选得到了纯化的肉毒杆菌菌种。
[0023] (2)制备肉毒杆菌破壁蛋白液： ①W接种环挑取1环肉毒杆菌菌种接种至盛有1LLB液体培养基的发酵罐中，37°C恒 溫培养72h，得肉毒杆菌发酵液；其中，LB液体培养基的配制过程为：950mL去离子水中加 入膜蛋白腺10克、酵母提取物5克、氯化钢10克，摇动至溶质溶解，用5mol/L的化0H调 pH至7. 0,用去离子水定容至1L，最后在12TC蒸汽灭菌20分钟； ② 将①中的肉毒杆菌发酵液进行超声波细胞