3) 种子罐发酵：将步骤（1)种子罐发酵培养基放入种子罐中，在种子罐内进行蒸汽高 温灭菌并冷却后，按接种量0. 5~1%接入步骤（2)的摇瓶菌种；每隔1h间歇搅拌3min 混匀，温度30 °C，罐压0. 06MPa，自然pH的条件下培养24h后备用； (4) 批量产品的制备：将步骤（1)固体培养基灭菌并冷却，按制备菌剂重量的3~5 %的 比例称取步骤（3)种子罐液体菌种，按菌种与水1 :6的比例放入无菌水中，而后接入固体培 养基中并混匀；移入发酵槽中，料厚90~100cm，表层覆盖塑料薄膜密封，室温控制在30~ 32 °C，培养72h后在低于50 °C的条件下烘干、粉碎、装袋，备用，所获干酪乳杆菌LCZ-1制 剂活菌数量不低于40X10sCFU/g。 toon] 所述用于防控雏禽肠道病原，促进肠道菌群发育的复合微生态制剂，在制备完成 后，真空封装，常温保存；该制剂用于初生雏禽开口饲喂时，直接水溶饲喂，或与不含抗生素 的营养物质或饲料混合使用，用量为：每公斤水或饲料添加复合微生态制剂5-10g，且需连 续饲喂4-6d;该制剂用于多日龄雏禽由沙门氏菌和大肠杆菌引起的疾病防控，以及肠道菌 群调控时，直接水溶饲喂，或与不含抗生素的饲料混合使用，用量为：每公斤水或饲料添加 复合微生态制剂3-5g，连续服用6-10d，或在幼龄期持续服用；该制剂用于患由沙门氏菌 和大肠杆菌引起的疾病雏禽的治疗时，直接水溶饲喂，或与不含抗生素的饲料混合使用，用 量为：每公斤水或饲料添加复合微生态制剂10-15g，连续服用4-6d。
[0012]与现有的技术相比，本发明具有以下突出优点和效果：（1)本发明是专用于雏禽 易感染的沙门氏菌、大肠杆菌等肠道病原防控，促进肠道菌群发育，促进雏禽免疫系统发育 的高效、复合微生态制剂；（2)所用多粘芽孢杆菌BPZ-1生长过程中对沙门氏菌和大肠杆菌 的抑菌活性强，所用干酪乳杆菌LCZ-1除具有较强的抑菌活性外，也具备乳酸菌固有的益 生、调控肠道菌群作用，这使得制备的复合微生态制剂可有效替代雏禽养殖过程中用于疾 病控制的抗生素或其它化学药物；（3)相较现有大多数用于雏禽的微生态制剂，本发明所 述的的复合微生态制剂以雏禽常见疾病防控为首要目标，针对性强，病原防控效果显著，其 益生、促生长作用也较明显，在禽类养殖过程中有着广泛、长期的适用性。
【具体实施方式】
[0013] 通过以下实施例对本发明作更详细说明，但以下实施例仅是说明性的，本发明并不受 这些实施例的限制。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动 前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0014] 实施例1 :多粘芽孢杆菌BPZ-1及其培养液对沙门氏菌和大肠杆菌的作用 配制牛肉膏蛋白胨培养基及其固体培养基，备用，牛肉膏蛋白胨培养基的成分如下： 每升培养基中含牛肉浸膏5.0g，蛋白胨10.0g，氯化钠5.0g，pH值7. 2-7.4,121°C灭 菌30min，其固体培养基加入1.5%的琼脂粉。用牛肉膏蛋白胨斜面活化多粘芽孢杆菌 BPZ_1，CGMCC保藏号：11255,随后接种于100 mL的牛肉膏蛋白 胨培养基中，在30°C，培养24 h后备用。将活化后的沙门氏菌和大肠杆菌分别用无菌水混 匀后涂布于牛肉膏蛋白胨固体平板，用镊子将3只无菌的牛津杯分别均匀放入培养皿中， 分别吸取〇. 2 ml牛肉膏蛋白胨培养基、多粘芽孢杆菌BPZ-1培养液和过滤去除菌体的多 粘芽孢杆菌BPZ-1培养液，置于牛津杯中，在30 °C条件下培养12 h，观察抑菌圈，结果发现 牛肉膏蛋白胨液体培养基对沙门氏菌和大肠杆菌没有抑菌效果，多粘芽孢杆菌BPZ-1培养 液在沙门氏菌平板和大肠杆菌平板上分别形成直径4. 6 cm、4. 8 cm的抑菌圈，过滤去除菌 体的多粘芽孢杆菌BPZ-1培养液在沙门氏菌平板和大肠杆菌平板上分别形成直径3. 3 cm、 3. 7 cm的抑菌圈。结果表明多粘芽孢杆菌BPZ-1及其培养液对沙门氏菌和大肠杆菌均有较 好的抑制效果。
[0015] 实施例2 :干酪乳杆菌LCZ-1及其培养液对沙门氏菌和大肠杆菌的作用 配制MRS琼脂和MRS肉汤培养基，备用，MRS琼脂培养基的成分如下：蛋白胨10g，牛肉 膏10g，酵母膏5g，葡萄糖20g，吐温80ml，K2HP04 2g，乙酸钠5g，梓檬酸二铵2g， MgS047H20 0. 2g，MnS044H20 0. 05g，琼脂粉15g，加蒸馏水至1L，用高压灭菌锅在121°C 灭菌15min，调节pH值6. 2-6.4。MRS肉汤培养基成分为MRS琼脂培养基去掉琼脂粉。用 MRS斜面活化干酪乳杆菌（ZacioAaciWMcasei)LCZ-l，CGMCC保藏号：11256,随后接种于 100ml的MRS肉汤培养基中，在30°C，培养24小时后备用。配制牛肉膏蛋白胨固体培养基： 牛肉膏5g，蛋白胨10g，NaCl5g，加水至1L，调pH值7. 2-7. 4,用高压灭菌锅在121°C 灭菌20min，倒固体平板。将活化后的沙门氏菌和大肠杆菌分别用无菌水混匀后涂布于牛 肉膏蛋白胨固体平板，用镊子将3只无菌的牛津杯分别均匀放入培养皿中，分别吸取0. 2ml MRS肉汤培养基、干酪乳杆菌LCZ-1培养液和过滤去除菌体的干酪乳杆菌LCZ-1培养液，置 于牛津杯中，在30°C条件下培养12h，观察抑菌圈，结果发现MRS肉汤对沙门氏菌和大肠杆 菌没有抑菌效果，干酪乳杆菌LCZ-1培养液在沙门氏菌平板和大肠杆菌平板上分别形成直 径4. 1cm、4. 4cm的抑菌圈，过滤去除菌体的干酪乳杆菌LCZ-1培养液在沙门氏菌平板和 大肠杆菌平板上分别形成直径2.1cm、2. 2cm的抑菌圈。结果表明干酪乳杆菌LCZ-1及其 培养液对沙门氏菌和大肠杆菌均有较好的抑制效果。
[0016] 随后对过滤去除菌体的干酪乳杆菌LCZ-1培养液分别于60 °C、80 °C、100 °C加 热处理15min，用牛津杯法检测干酪乳杆菌LCZ-1无菌培养液对沙门氏菌和大肠杆菌的抑 菌效果。结果表明，在30 °C条件下培养12h后，三种处理条件下在沙门氏菌平板和大肠杆 菌平板上形成抑菌圈直径分别为3.2〇11、3.1〇]1、1.5〇]1和2.3〇]1、2.1〇]1、1.1〇]1，说明干 酪乳杆菌LCZ-1无菌培养液中的抑菌活性物质具有较好的热稳定性。
[0017] 实施例3 :多粘芽孢杆菌菌剂的制备 (1) 各级培养基的配置，其中： 斜面培养基：为牛肉膏蛋白胨固体培养基，备用； 摇瓶菌种培养基和种子罐发酵培养基：为牛肉膏蛋白胨液体培养基，备用； 批量生产培养基：玉米芯粉45%，麸皮40%，砻糠：10%，葡萄糖3%，酵母膏2%，按 料水比1 :〇. 8加入水分； (2) 摇瓶菌种扩增：将用斜面培养基活化的多粘芽孢杆菌BPZ-1，在无菌操作下，接入 100mL的摇瓶培养基中，在30°C，160rpm/min的摇床中，培养24h后备用； (3) 种子罐发酵：将步骤（1)种子罐发酵培养基放入种子罐中，在种子罐内进行蒸汽高 温灭菌并冷却后，按接种量8%接入步骤（2)的摇瓶菌种；开动搅拌机在转速180rpm/min， 温度30°C，通气量4m3/h，罐压0. 1MPa，自然pH的条件下培养24h后备用； (4) 批量产品的制备：将步骤（1)固体培养基灭菌并冷却，按制备菌剂重量的3%的比 例称取步骤（3)种子罐液体菌种，按菌种与水1 :5的比例放入无菌水中，再接入固体培养基 中并混匀；移入培养室，料厚3. 5cm，室温控制在30°C，培养72h后在低于60 °C的条件下 烘干、粉碎、装袋，备用，所获多粘芽孢杆菌BPZ-1制剂活菌数量不低于40亿CFU。
[0018] 实施例4 :干酪乳杆菌菌剂的制备 (1) 各级培养基的配置，其中： 斜