一种连续提取沙棘籽中活性成分的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于天然产物的提取与分离纯化技术领域，涉及一种连续提取沙棘籽中活 性成分的方法。
【背景技术】
[0002] 沙棘HippophaerhamnoidesL.为胡颓子科沙棘属植物，具有健脾消食，止咳祛痰， 活血散瘀功效（高锦明等，1998 ;高锦明和张鞍灵，1999)。沙棘籽除含有大量油脂外，还含 有黄酮、生物碱、多糖、原花色素、皂苷等活性成分。已被制备成处方药复方沙棘籽油栓，用 来治疗宫颈炎取得了很好的疗效（王双双等，2014)。现代药理研究表明，沙棘籽油对心脑 血管及肝脏等器官有较好的保护作用，可以降血脂、抗抑郁、抗辐射、增强免疫力（臧茜茜 等，2015)。
[0003] 沙棘籽主要用来提取沙棘籽油。目前，对沙棘籽油的提取主要采用压榨法、超临界 流体萃取法和溶剂提取法。压榨法的出油率低，浪费大；超临界流体萃取法需要的设备造价 较高，小型生产厂家难以承受；溶剂提取法在提取过程中大多要加热，沙棘油中的热不稳定 性活性成分会发生聚合、氧化等作用而导致结构上的破坏。超声辅助提取法是利用超声波 的空化作用破坏植物细胞，使溶剂更容易进入细胞内部，从而提高提取效率，且提取过程避 免了高温对活性成分的破坏。有学者研究了沙棘籽油的超声波提取方法，但没有考虑超声 波频率对提取得率的影响因素（张海容和朱迎春，2009)。超声频率是影响超声波提取的重 要因素，高频超声波对细胞只能起到软化作用，低频超声波才能粉碎细胞壁，促使溶剂进入 细胞提取成分（Dongetal.，2010) 〇
[0004] 此外，提取沙棘籽油后的油柏大多被丢弃，造成资源的巨大浪费。研究表明，沙 棘籽黄酮具有抗氧化（陈丽娜和吴琼，2011)和降血脂作用（杨现艳等，2007)。三萜皂苷 有很强的抗肿瘤作用，且不会对正常细胞造成伤害（Shanmugametal.，2013;Shanmugamet al，. 2014)。但目前未见有关沙棘籽油、沙棘黄酮和三萜皂苷等活性成分连续提取的超声波 提取工艺研究。
[0005] 参考文献：
[0006] 高锦明，李芸生，张鞍灵，等·沙棘黄酮化学研究进展，沙棘，1998, 11 (2) :34-39
[0007] 高锦明，张鞍灵.中国沙棘果实黄酮成分的研究，西北林学院学报，1999, 14(3): 52-55
[0008] 王双双，杨红耀，梁殿迅.微波联合复方沙棘籽油栓治疗宫颈炎患者人乳头状瘤 病毒感染的研究[J].中华医院感染学杂志，2014, 16:4100-4102.
[0009] 臧茜茜，邓乾春，从仁怀，等.沙棘油功效成分及药理功能研究进展[J].中国 油脂，2015, 05:76-81.
[0010] 张海容，朱迎春.超声萃取沙棘籽油的研究[J].中国酿造，2009, 10:96-98. [0011] 陈丽娜，吴琼.沙棘籽及果皮渣黄酮粗提物抗氧化作用研究[J].食品研究与开 发，2011，10:51-53.
[0012] 杨现艳，瞿伟菁，徐自良，等.沙棘籽渣黄酮和沙棘油对高糖高脂诱导的老年肥 胖雌鼠血脂的影响[J].营养学报，2007, 03:284-287.
[0013] ShanmugamΜK，DaiX,KumarAP，etal.Oleanolicacidanditssynthetic derivativesforthepreventionandtherapyofcancer:Preclinicalandclinical evidence[J] ·CancerLett，2014, 346(2) :206-216.
[0014] ShanmugamΜK，DaiX,KumarAP，etal.Ursolicacidincancerprevention andtreatment:moleculartargets,pharmacokineticsandclinicalstudies[J].Bioch emPharmacol，2013, 85:1579-1587.
[0015] DongJuane，LiuYuanbai，LiangZongsuo,etal.Investigationon ultrasound-assistedextractionofsalvianolicacidBfromSalviamiltiorrhiza root.UltrasonicsSonochemistry, 2010, 17:61-65.
【发明内容】
[0016] 针对现有技术中的缺陷和不足，本发明的目的在于提供一种工艺简单、成本低、提 取时间短、提取效率高的连续提取沙棘籽中活性成分的方法，该方法克服了传统提取方法 的提取不全面、提取效率不高、热不稳定性成分破坏的问题，避免了资源的浪费，适宜工业 化大规模生产。
[0017] 实现上述发明目的的技术解决方案是：
[0018] -种连续提取沙棘籽中活性成分的方法，包括以下步骤：
[0019] 步骤一：采用超声波溶剂浸提法对沙棘籽进行沙棘籽油的提取得到沙棘籽油和沙 棘籽油柏；
[0020] 步骤二：采用超声波溶剂浸提法对步骤一得到的沙棘籽油柏进行沙棘籽总黄酮和 沙棘籽总三萜皂苷的提取得到粗提液；
[0021] 对步骤二得到的粗提液进行萃取纯化得到沙棘籽总黄酮和沙棘籽总三萜皂苷。
[0022] 具体的，所述的步骤二中进行沙棘籽总黄酮和沙棘籽总三萜皂苷的提取包括：向 沙棘籽油柏中加入醇溶液进行超声波提取得到沙棘籽总黄酮和沙棘籽总三萜皂苷粗提液， 超声波提取功率为400~4000W，超声波提取频率为30~80kHz，超声波提取温度为20~ 50°C，超声波提取时间为5~40min。
[0023] 更具体的，醇溶液的加入量是沙棘籽油柏粉体积重量比的5~30倍；所述的醇溶 液为乙醇溶液，乙醇溶液的体积浓度为50 %~80%。
[0024] 进一步的，所述的萃取纯化包括将粗提液在30~40°C条件下减压浓缩真空干燥 得到粗提物，将粗提物用体积重量比为1~3倍量的冷水分散得到混悬液，调节混悬液的pH 为2~5,再用乙酸乙酯或正丁醇对调节pH值后的混悬液萃取5~8次；合并萃取液挥干 溶剂，即得沙棘籽总黄酮和沙棘籽总三萜皂苷。
[0025] 更进一步的，所述的步骤一中采用超声波溶剂浸提法对沙棘籽进行沙棘籽油的提 取包括：
[0026] 将沙棘籽碾压破皮后加入体积重量比为5~20倍正己烷或石油醚，在频率为 30~80kHz、功率为400~4000W和温度为5~30°C的条件下超声提取5~30min得到沙 棘籽油提取液；将提取液过滤得到沙棘籽油柏和沙棘籽油。
[0027] 具体的，包括以下步骤：
[0028] 步骤一：将沙棘籽碾压破皮后加入体积重量比为10倍正己烷，在频率为30kHz、功 率为400W和温度为20°C的条件下超声提取40min得到沙棘籽油粗提液；将沙棘籽油粗提 液过滤得到沙棘籽油柏和沙棘籽油；
[0029] 步骤二：向沙棘籽油柏中加入乙醇水溶液进行超声波提取得到沙棘籽总黄酮和沙 棘籽总三萜皂苷的粗提液，超声波提取功率为400W，超声波提取频率为30kHz，超声波提取 温度为20°C，超声波提取时间为40min;
[0030] 对步骤二中得到的沙棘籽总黄酮和沙棘籽总三萜皂苷粗提液进行萃取纯化得到 沙棘籽总黄酮和沙棘籽总三萜皂苷；
[0031] 所述的萃取纯化包括将沙棘籽总黄酮和沙棘籽总三萜皂苷粗提液在30°C条件下 减压浓缩真空干燥得到粗提物，将粗提物用体积重量比为1倍量的冷水分散得到混悬液， 调节混悬液的pH为2,再用乙酸乙酯或正丁醇对调节pH值后的混悬液萃取5次，合并萃取 液挥干溶剂即得。
[0032] 且，所述的乙醇水溶液的体积浓度为50 %。
[0033] 本发明的优点为：
[0034] (1)本发明通过联合的提取工艺依次对沙棘籽中的沙棘籽油、黄酮和三萜皂苷 类的活性成分进行连续提取，最大程度的对沙棘