一种越橘叶提取物及其制备方法和医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及植物提取物领域，具体涉及一种越橘叶提取物及其制备方法和医药用 途。
【背景技术】
[0002] 越橘叶为杜鹃花科植物越橘的叶。6月间开花时采叶，晒干，贮干燥处。又名熊果 叶（《新疆中草药手册》）。
[0003]原植物越橘，又名温普（《盛京通志》)、红豆、牙疙瘩，为常绿矮小灌木，高10~12厘米。茎直立，小枝细，灰褐色。单叶互生，革质，椭圆形或倒卵形，长1~2厘米，宽6~ 10毫米，先端圆钝，基部楔形，全缘或近全缘，叶缘有细毛，上面暗绿色，下面淡绿，有腺点； 叶柄长0. 5~3毫米，有白毛短总状花序，生花数朵；萼短钟状，4裂；花冠钟形，长4~6毫 米，白色或带粉红色，裂片4,广卵形；雄蕊8,花丝有毛；花柱丝状，超出于花冠外。浆果近 球形，熟时橘红色，径5~7毫米。花期6~7月。果期8月。生于高山针叶林下或灌木丛 中。分布吉林、黑龙江、内蒙古、新疆等地。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种越橘叶提取物，该提取物的制备方法和液相分析方 法，含有该提取物的药物制剂及利用该提取物制备抗抑郁的药物的用途。
[0005] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0006] -种越橘叶提取物，该提取物由以下方法制备：
[0007] (a)以重量计，每100份药材包含干燥的越橘叶80~90份和干燥的党参10~20 份，混合粉碎；(b)用乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液；（c)对步骤 (b)浓缩液依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸 乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（d)正丁醇萃取物用大孔树脂富集，先用20~30%乙醇冲洗 7~9个柱体积除去多糖，再用55~65%乙醇洗脱9~11个柱体积，收集55~65%乙醇 洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥。
[0008] 进一步地，步骤（d)中所述大孔树脂为AB-8型大孔树脂。
[0009] 进一步地，步骤（b)中所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为65~75%。
[0010] 进一步地，步骤（b)中所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为70%。
[0011] 进一步地，步骤（d)为用正丁醇萃取物用大孔树脂富集，先用25%乙醇冲洗8个 柱体积除去多糖，再用60 %乙醇洗脱10个柱体积，收集60 %乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干 燥。
[0012] 为了能够通过建立HPLC指纹图谱的方法控制不同批次药材制备的越橘叶提取物 批间差异，所述提取物的液相分析方法为：
[0013] 色谱柱：AgilentZorbaxSBC18 柱（4. 6mmX250mm，5μm);
[0014] 流动相：A为乙腈，B为0. 1%磷酸水溶液；
[0015] 梯度洗脱程序：0 ~14min，A25 % ~35 % ;14 ~20min，A35 % ~50 % ;20 ~ 32min，A50% ;32 ~35min，A50%~25% ;35 ~40min，A25% ;
[0016] 流动相流速：1.OmL·minS
[0017] 检测波长：254nm;
[0018] 柱温：30Γ;
[0019] 进样量：10μL。
[0020] 药物制剂，含有治疗有效量的所述越橘叶提取物和药学上可接受的载体。
[0021 ] 所述的越橘叶提取物在制备抗抑郁的药物中的应用。
[0022] 所述的药物制剂在制备抗抑郁的药物中的应用。
[0023] 本发明提取物用作药物时，可以直接使用，或者以药物制剂的形式使用。
[0024] 所述药物制剂含有治疗有效量的本发明越橘叶提取物，其余为药物学上可接受 的、对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0025] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物制剂以单位体重服用量的形式使用。本发明提取物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
[0026] 本发明的优点：本发明通过对越橘叶药材进行提取、除杂、富集处理，能得到抗抑 郁的提取物；本发明提供的液相分析方法可以用于建立该提取物的指纹图谱，用于控制不 同批次药材制备的提取物的批间差异。
【附图说明】
[0027] 图1为越橘叶提取物HPLC液相图谱。
【具体实施方式】
[0028] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0029] 实施例1 :越橘叶提取物制备
[0030] 药材来源：越橘叶和党参购自亳州中药材市场。经鉴定越橘叶为杜鹃花科植物越 橘的叶。
[0031] 主要试剂：食品级乙醇购自上海凌峰化学试剂有限公司；医药级AB-8大孔树脂购 自天津波鸿树脂有限公司；乙腈为HPLC级，购于TEDIA;85 %磷酸为HPLC级，购于TEDIA; 色谱用纯净水为哇哈哈纯净水。
[0032] 将8. 5kg干燥的越橘叶和1. 5kg干燥党参混合粉碎，用70%乙醇热回流提取 (25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液^L);对浓缩液依次用石油醚（6LX3 次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水饱和的正丁醇（6LX3次）萃取，分别得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大孔树脂 (2kg，柱体积1. 5L)富集，先用25%乙醇冲洗8个柱体积（12L)，再用60%乙醇洗脱10个柱 体积（15L)，收集60 %洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得越橘叶提取物浸膏粉约155g。
[0033] 实施例2 :越橘叶提取物②制备（80份越橘叶，20份党参）
[0034] 制备方法：将8. 0kg干燥的越橘叶和2. 0kg干燥党参混合粉碎，用70%乙醇热回 流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液（6L);对浓缩液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水饱和的正丁醇（6LX3次）萃取，分别得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大 孔树脂（2kg，柱体积1. 5L)富集，先用25%乙醇冲洗8个柱体积（12L)，再用60%乙醇洗脱 10个柱体积（15L)，收集60%洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得越橘叶提取物浸膏粉约155g。
[0035] 实施例3 :越橘叶提取物③制备（90份越橘叶，10份党参）
[0036] 制备方法：将9. 0kg干燥的越橘叶和1. 0kg干燥党参混合粉碎，用70%乙醇热回 流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液（6L);对浓缩液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水饱和的正丁醇（6LX3次）萃取，分别得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大 孔树脂（2kg，柱体积1. 5L)富集，先用25%乙醇冲洗8个柱体积（12L)，再用60%乙醇洗脱 10个柱体积（15L)，收集60%洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得越橘叶提取物浸膏粉约155g。
[0037] 实施例4 :越橘叶提取物④制备（75份越橘叶，25份党参）
[0038] 制备方法：将7. 5kg干燥的越橘叶和2. 5kg干燥党参混合粉碎，用70%乙醇热回 流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液（6L);对浓缩液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水饱和的正丁醇（6LX3次）萃取，分别得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大 孔树脂（2kg，柱体积1. 5L)富集，先用2