一种中药野菊提取物及其制备方法、药物组合物和用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药领域，具体涉及一种中药野菊提取物及其制备方法，包含该野菊 提取物的药物组合物和用途。
【背景技术】
[0002] 静脉曲张已成为危害人民生命健康的常见疾病，重压、缺少运动、口服避孕药、怀 孕、更年期、肥胖、衰老、遗传等因素都可导致静脉曲张。静脉曲张可导致痔疮的发生，痔疮 是由于直肠下端粘膜下和肛管或肛缘皮下的静脉曲张、扩大造成的，是一种常见疾病，其发 病率约为25-40%，五十岁以上老年人的发病率为60-70%。当病人患痔疮时，会出现便血、 痔块脱落、疼痛、瘙痒等症状，给患者的生活带来很大的不便和痛苦。下肢静脉曲张也是最 为常见的静脉曲张疾病，人群患病率高达约5-30%。主要临床表现包括下肢浅表静脉发生 扩张、延长、弯曲成团状；患者有腿部沉重、乏力、酸胀、刺痛、麻木感、水肿、瘙痒感，久立或 行走后症状加重；疾病后期可出现浅表静脉血栓硬结形成、静脉性溃疡（俗称"老烂腿"）。 部分患者出现患处血管破裂急性出血，或慢性皮肤溃疡经久不愈，截肢乃至危及生命。
[0003] 静脉管壁强度减弱和静脉内压力升高是引起静脉曲张的主要原因，因此，增加静 脉血管的张力，降低静脉内压力就可有效地治疗静脉曲张。
[0004] 野菊为菊科植物野菊ChrysanthemumindicumL.的干燥地上部分。其味甘、苦， 性微寒；归肝、心经。具有清热解毒，明目的功效。临床用于感冒，痢疾，痈肿，疔疮，目赤肿 痛，眩晕，瘰疬，湿疹等的治疗。未见关于野菊用于治疗静脉曲张性疾病的相关专利申请和 研究报道。
【发明内容】
[0005] 本发明的一个目的是提供一种具有较好的消肿、抗炎作用，用于治疗静脉曲张相 关疾病的野菊提取物。
[0006] 本发明另一个目的在于提供一种上述野菊提取物的制备方法。
[0007] 本发明的又一个目的是提供一种包含上述野菊提取物的药物组合物。
[0008] 本发明的再一个目的是提供上述野菊提取物的用途。
[0009] 本发明在对野菊化学成分和药理活性进行研究的基础上，发现该植物中所包含的 黄酮类化合物和咖啡酸酯类化合物具有明显的抑制局部炎症引起的水肿、降低微脉血管通 透性和缩短正常小鼠出血时间和凝血时间的作用。
[0010] 本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：
[0011] 一方面，本发明提供一种野菊提取物，所述野菊提取物包含黄酮类化合物和咖啡 酸酯类化合物。
[0012] 优选地，所述所述黄酮类化合物主要包括刺槐素-7-0-鼠李糖葡萄糖苷、木犀草 素-7-0-鼠李糖葡萄糖苷、刺槐素、木犀草素和芹菜素等；所述咖啡酸酯类化合物主要包括 3-咖啡酰基奎尼酸、3, 5-二咖啡酰基奎尼酸和4, 5-二咖啡酰基奎尼酸等。
[0013] 另一方面，本发明提供一种制备上述野菊提取物的方法，所述方法包括以下步 骤：
[0014] (1)取野菊药材经溶剂提取；
[0015] (2)将步骤（1)所得的提取液减压浓缩至等生药体积，放至室温，离心，得沉淀和 上清液，备用；
[0016] (3)将上述（2)中上清液通过大孔吸附树脂或聚酰胺吸附，用水溶液洗脱，弃去洗 脱液；
[0017] (4)用高浓度甲醇或乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，回收溶剂并干燥，即得提取物 I;
[0018] (5)将步骤（2)中沉淀沉淀加入适当浓度氢氧化钠溶液，并加入适量醇溶液，搅拌 使溶解，过滤，取滤液，用酸调节pH至6-7,析出沉淀，抽滤，滤饼用蒸馏水充分清洗后，干 燥，粉碎，即得提取物II。
[0019] (6)把提取物I和提取物II合并，即得野菊提取物。
[0020] 优选地，所述步骤（1)中的提取方法为温浸、热回流和/或渗漉；所述步骤⑴中 的溶剂选自水、碱溶液、甲醇、乙醇和丙酮中的一种或多种。所述步骤（3)中的大孔吸附树 脂选自HPD100、HPD300或AB-8。所述步骤（5)中的醇溶液为甲醇、乙醇或二者的混合溶液 等；所述步骤（5)中的酸为浓盐酸、冰醋酸或浓硫酸等。
[0021] 上述制备方法简单易行、提取效果好、易于工业推广应用。
[0022] 又一方面，本发明提供一种药物组合物，所述药物组合物包含上述野菊提取物。
[0023] 优选地，所述药物组合物为胶囊剂、普通片剂、颗粒剂、滴丸剂、软胶囊剂、分散片、 口腔崩解片、缓释片、控释片、注射液、输液或注射用无菌粉末。
[0024] 可以采用常规方法将野菊提取物与任何一种或一种以上药用辅料，如淀粉、糊精、 乳糖、微晶纤维素、羟丙甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素、交联聚维酮、羧甲基淀粉钠、聚 乙二醇、硬脂酸镁、微粉硅胶、葡萄糖、甘露醇、木糖醇、甘氨酸等混合制成上述剂型。
[0025] 再一方面，本发明提供所述的野菊提取物在制备预防和/或治疗静脉曲张疾病的 药物中的用途。
[0026] 优选地，其中所述静脉曲张疾病为痔疮或下肢静脉曲张等。
[0027] 野菊提取物中总黄酮的含量测定方法如下：
[0028] 总黄酮的测定（分光光度法）
[0029] 对照品溶液的制备：精密称取干燥恒重的刺槐素-7-0-鼠李糖葡萄糖苷对照品适 量，用甲醇溶解制成每lml含15μg的溶液，即得。
[0030] 供试品溶液的制备：精密称取本品粉末50mg，置10ml量瓶中，加蒸馏水溶解至刻 度，摇匀，滤过。沉淀连滤纸置于l〇〇ml具塞锥形瓶中，加甲醇50ml，精密称定重量，超声处 理30min，再次称重，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。取续滤液lml，置25ml量瓶中，加 甲醇至刻度，摇勾，即得。
[0031] 标准曲线的绘制：精密量取刺槐素-7-0-鼠李糖葡萄糖苷对照品溶液（0. 13mg/ ml) 1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、6. 0ml，分别置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，以甲醇为空 白，在326mn波长处测定吸光度。以吸收度（A)为纵坐标，浓度C(μg·πι1-1)为横坐标，绘 制标准曲线。
[0032] 测定法：取供试品溶液，以甲醇为空白，按照分光光度法（中国药典2005年版一部 附录VA)，在326nm波长处测定吸收度。
[0033] 对本发明的药物的药效学部分进行了初步研究，结果发现本发明的药物对醋酸致 大鼠肛周溃疡具有明显治疗作用。在上述药理活性试验的基础上，野菊提取物在临床可用 于痔疮、下肢静脉曲张等疾病的预防和治疗。
[0034] 本发明的药物原料来源易得，易于产业化，可以根据需要制成各种剂型，为临床提 供了使用更加方便、治疗更加有效、质量更加可控的现代中药，为患者带来更多的益处，从 而产生了巨大的社会效益。
【具体实施方式】
[0035] 下面结合【具体实施方式】对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐 明本发明，而不是为了限制本发明的范围。
[0036] 实施例1
[0037] 取野菊药材10kg，用100L80% (体积）乙醇热回流提取三次，每次1小时。收集 提取液，减压回收乙醇，并浓缩至10L，放置至室温，离心，分别收集上清液和沉淀，备用。取 上述上清液，通过HPD-300型大孔吸附树脂柱（树脂体积20L)，先用3倍树脂体积水溶液 洗脱，水洗脱液弃去，再用3倍树脂体积70 %浓度乙醇溶液洗脱，收集70%乙醇洗脱液，减 压回收乙醇并浓缩至干，得提取物I。取上述沉淀加入1. 5L浓度10%氢氧化钠溶液，加入 4. 5L乙醇，搅拌使溶解，过滤，取滤液，加浓盐酸调节pH至6-7,静置析出沉淀，抽滤，滤饼分 另IJ用50%乙醇和蒸馏水充分清洗后，干燥，粉碎，得提取物II。合并提取物I和II，即得野 菊提取物。
[0038] 实施例2
[0039] 取野菊药材2kg，用60L80% (体积）乙醇渗漉提取，收集渗漉液，减压回收乙醇， 并浓缩至2L，放置至室温，分别收集上清液和沉淀，备用。取上述上清液，通过AB-8型大孔 吸附树脂柱（树脂体积4L)，先用3倍树脂体积水溶液洗脱，水洗脱液弃去，再用3倍树脂体 积60%浓度乙醇溶液洗脱，收集60%乙醇洗脱液，减压回收乙醇并浓缩至干，得提取物I。 取上述沉淀加入0. 4L浓度5%氢氧化钠溶液，加入1. 2L乙醇，搅拌使溶解，过滤，取滤液，加 浓硫酸调节pH至6-7,静置析出沉淀，抽滤，滤饼用蒸馏水充分清洗后，干燥，粉碎，得提取 物II。合并提取物I和II，即得野菊提取物。
[0040] 实施例3
[0041] 取野菊药材2kg，用20L70% (体积）甲醇热回流提取二次，每次1. 5小时。收集 提取液，减压回收甲醇，并浓缩至2L，放置至室温，离心，分别收集上清液和沉淀，备用。取上 述上清液，通过HPD-100型大孔吸附树脂柱（树脂体积4L)，先用3倍树脂体积水溶液洗脱， 水洗脱液弃去，再用3倍树脂体积50%浓度乙醇溶液洗脱，收集50%乙醇洗脱液，减压回收 乙醇并浓缩至干，得提取物I。取上述沉淀加入0. 2L浓度10 %氢氧化钠溶液，加入0. 6L乙 醇，搅拌使溶解，过滤，取滤液，加20%硫酸调节pH至6-7,静置析出沉淀，抽滤，滤饼用蒸馏 水充分清洗后，干燥，粉碎，得提取物II。合并提取物I和II，即得野菊提取物。
[0042] 实施例4
[0043] 取野菊药材2kg，用30L85% (体积）乙醇热回