一种用于调节人体免疫功能的中药保健制剂的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于中药保健领域，设及一种用于调节人体免疫功能的中药保健制剂。 技术背景
[0002] 免疫力是人体自身的防御能力，首先是人体识别和消灭外来入侵的任何异物（病 毒、细菌等），其二是处理人体已经衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞，其Ξ是识别和处理体 内突变细胞和病毒感染细胞的能力，是人体识别和排除"异己"的正常生理反应，其过高过 低都属于异常，人体内执行运一正常生理反应的就是免疫系统。免疫低下则易于被感染或 患癌症或患屯、脑血管疾病；免疫力超常也会产生对身体有害的结果，如引发过敏反应、自身 免疫疾病等。
[0003] 人体免疫力异常是一个极其复杂的问题，其形成因素和机理也多种多样。各种原 因使免疫系统不能正常发挥保护作用，极易招致细菌、病毒、真菌等感染，因此免疫力低下 最直接的表现就是容易患病。因经常患病则会加重机体的消耗，所W-般有体质虚弱、营养 不良、精神萎靡、疲乏无力、食欲降低、睡眠障碍、血液循环不杨等表现。
[0004]目前人们调节免疫的方法很多，但各有优势又各有不足，所W研究开发W我国中 药材资源优势和祖国医学理论优势为背景的、无毒无副作用的、质优价廉的产品有其巨大 社会价值和经济价值。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种用于调节人体免疫功能的中药保健制剂。
[0006] 经过我们长期的研究认为，免疫异常的主流问题在于人体上下内外的不杨通、内 毒、气阴两虚所致。因此本发明的中药制剂选用川号、制大黄、黑豆、甘草、黄巧、山药、黄精 为原料进行配伍，使各药物的功效产生协同，共凑通达上下内外、行气活血、桂风解毒、养肺 健脾益肾、益气养阴固表、全力调节免疫之功能，进而达到全面调节免疫、康体养生的作用。 川号，辛，溫。归肝、胆、屯、包经。功能：活血行气，桂风止痛。本发明W川号为君药，活血行 气、桂风止痛，力求从根本上顺杨通达。制大黄，苦，寒。归脾、胃、大肠、肝、屯、包经。具有泻 热通便功效。本发明W制大黄为臣药，力主上中下Ξ焦，兼顾机体内外，通肠W泻其腑热、 凉血W解其脏毒、逐疲W通其诸经，同时特别使用制大黄避免因为生大黄过于寒凉而伤害 脏腑，协助君药通过疏通上下、沟通内外来全面让整个人体功能正常运转起来，从而让免疫 力得W调整。黑豆，味甘，性微寒，性平、入脾、肾经。功用：补肾益阴，健脾利湿，除热解毒。 现代医学研究证明，黑豆营养丰富，含有蛋白质、脂肪、维生素、微量元素等多种营养成分， 同时又具有多种生物活性物质，如黑豆色素、黑豆多糖和异黄酬等。甘草，甘，平。归屯、、肺、 脾、胃经。功能：补脾益气，清热解毒，桂疲止咳，缓急止痛，调和诸药。本发明W黑豆、甘草 为佐药，桂风解毒、活血利水W达疏通目的，补脾益气扶正助力疏通。黄巧，甘，溫。归肺、脾 经。功能：补气固表，利尿托毒，排脈，敛疮生肌。山药，甘、平、无毒。归脾、肺、肾经。具有 滋养强壮，助消化，敛虚汗，止泻之功效。黄精，甘、平，归脾、肺、肾经，功效：补气养阴，健脾， 润肺，益肾。本发明w黄巧、山药、黄精共为使药，补气养阴固表、益肺健脾补肾，扶正立足于 上中下Ξ焦，使全组方结构更加完善。全方合力，通达上下内外、行气活血、桂风解毒、养肺 健脾益肾、益气养阴固表、全面调节免疫之功能。
[0007]本发明中药制剂的各原料药按W下重量份配比：川号28-35份，制大黄20-26份， 黑豆12-18份，甘草12-18份，山药3-9份，黄巧3-9份，黄精3-9份。
[0008]优选配比：川号29-32份，制大黄20-23份，黑豆14-17份，甘草12-16份，山药5-7 份，黄巧5-7份，黄精5-7份。
[0009] 最佳配比：川号30份，制大黄22份，黑豆15份，甘草15份，山药6份，黄巧6份， 黄精6份。
[0010] 本发明的药物可W按中药药剂学的常规工艺和辅料制备成各种内服制剂。如胶囊 剂、软胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、丸剂(包括水丸、蜜丸、糖衣丸、胶丸、肠溶丸或滴丸）或口 服液。
[0011] 下面通过动物试验报告说明发明药物增强免疫功能的效果。
[001引 1材料与方法 1. 1样品来源及处理 本发明片剂药物(从生品片)，人群推荐日摄入量为2.4g/60kgBW(即0.04g/kgBW)。
[0013]样品配制：准确量取受试样品4g、8g、12g，分别用蒸馈水定容至200血，供低、中、 高剂量组小鼠灌胃用。
[0014] 1.2实验动物及环境 SPF级昆明种雌性小鼠，18-22g，200只，由湖北省实验动物研究中屯、提供。实验动物生 产许可证号：SCXK(鄂）2008-0005 ;实验动物使用许可证号：SYXK(鄂）2008-0014。动物饲 养室溫度为20-25°C，湿度为40-70%。
[001引 1. 3剂量分组 按人群推荐日摄入量2. 4g/60kgBW扩大10、20、30倍设置低、中、高Ξ个剂量组，即设 计0. 4g、0. 8g、l. 2g/kgBW，共分五个实验组，每实验组包括阴性对照组、低、中、高剂量组， 各剂量组实验动物数为10只。免疫实验一组进行迟发型变态反应实验；免疫实验二组进行 淋己器官/体重比值测定和碳廓清实验；免疫实验Ξ组进行ConA诱导的小鼠淋己细胞转化 实验和NK细胞活性测定；免疫实验四组进行血清溶血素的测定和抗体生成细胞检测；免疫 实验五组进行小鼠腹腔巨隧细胞吞隧鸡红细胞实验。小鼠连续灌胃30天后开始试验。各 实验组均按0. 20ml/10gBW容量经口灌胃给予。
[001引 1.4试验方法 1.4.IConA诱导的小鼠脾淋己细胞转化试验 方法：无菌取脾，置于盛有适量无菌Hank'S液平皿中，用綴子轻轻将脾磨碎，制成单 个细胞悬液。经200目筛网过滤，用Hank'S液洗2次，每次离屯、lOmin(lOOOr/min)。然后 将细胞悬浮于ImL的完全培养液中，用台酪兰染色计数活细胞数(应在95%W上)，调整细胞 浓度为3Xl0s个/mL。将每一份脾细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔ImL，一孔加 75MLConA液(相当于7. 5μκ/πιυ，另一孔作为对照，置5%C02, 37。CC02解箱中培养72h。 培养结束前地，每孔轻轻吸去上清液0. 7mL，加入0. 7mL不含小牛血清的RPMI1640培养液， 同时加入MTT巧mg/血）50化/孔，继续培养地。培养结束后，每孔加入1血酸性异丙醇， 吹打混匀，使紫色结晶完全溶解。然后分装到96孔培养板中，每个孔作3个平行孔（100化/ 孔)，用酶标仪W570nm波长测定光密度值。
[0017] 1. 4. 2二硝基氣苯值NFB)诱导迟发型变态反应值TH) 方法巧肿胀法。用1%DNFB(W1:1的丙酬麻油溶液配制）致敏小鼠后，第5天再用DNFB攻击右耳，24h后处死动物剪下左右耳壳用打孔器取下直径8mm的耳片，称重，W左右 耳的重量之差来表示DTH的程度。
[0018] 1.4. 3血清溶血素的测定 方法：血凝法。取羊血，用生理盐水洗涂3次，每次离屯、（20(K)r/min)lOmin。将压积SRBC用生理盐水配成2% (v/v)的细胞悬液，每只鼠腹腔注射0. 2血进行免疫。4天后，摘 除眼球取血于离屯、管内，放置约化，将凝固血与管壁剥离，使血清充分析出，20(K)r/min离 屯、lOmin，收集血清。
[0019] 凝集反应：用生理盐水将血清倍比稀释，将不同稀释度的血清分别置于微量血凝 实验板内，每孔100μL，再加入100化0. 5% (v/v)SRBC悬液，混匀，放入湿润的平盘内并加 盖，于37°C溫箱解育化，观察血球凝集程度。根据血清凝聚程度的级别计算出抗体积数。
[0020] 1. 4. 4腹腔巨隧细胞吞隧鸡红细胞试验 方法：半体内法。制备20%的鸡红细胞悬液；每只鼠腹腔注射ImL该悬液，30min后处 死动物，将其仰位固定于鼠板上，开腹，经腹腔注入生理盐水转动鼠板Imin，然后吸出 腹腔洗液ImU平均分滴于2片载玻片上，37°C溫育30min;育毕用生理盐水漂洗，惊干，W体 积比1:1的丙酬甲醇溶液固定，4%Giemsa-憐酸缓冲液染色3min，再用蒸馈水漂洗惊干。油 镜下计数100个巨隧细胞，按下式计算吞隧率和吞隧指数： 吞隧率（％ )=吞隧鸡红细胞的巨隧细胞数/计数的巨隧细胞数X 100% 吞隧指数=被吞隧的鸡红细胞总数/计数的巨隧细胞数。
[0021] 1.4. 5小鼠碳廓清试验 方法：按体重从小鼠尾静脉注入稀释的印度墨汁（lOmL/kg)，待墨汁注入，立即计时注 入墨汁后2、10min，分别从内赃静脉丛取血20化，并立即将其加到2血0. 1%胞2〇)3溶液中。 各吸0.ImL于96孔酶标板中，用酶标仪在600nm波长处测光密度值（0D)，WNazCOs溶液作 阴性对照。
[0022] 将小鼠处死，取肝脏和脾脏，用滤纸吸干脏器表面血污，分别称重。W吞隧指数表 示小鼠碳廓清的能力。按下式计算吞隧指数a。受试样品组的吞隧指数显著高于对照组，可 判定该项实验结果阳性。
[0023]K=Lg孤1_Ig孤2/t厂t1 吞隧指数a=体重/ (肝重+脾重）XKi々 1.4. 6抗体生成细胞检测 取脱纤维的羊血，用生理盐水洗涂3次，每次离屯、（200化/min)lOmin，每只鼠经腹腔 注射2% (v/v)SRBC0. 2mL。将SRBC免疫4天后的小鼠颈椎脱白处死，取出脾脏，放在盛装 有化nk'S液的小平皿内，轻轻磨碎脾脏，制成细胞悬液，经200目筛网过滤，离屯、（1000/ min)lOmin，用化nk'S液洗2遍，最后将细胞悬浮在5血RPM