专利名称：含有岩白菜素提取物的化妆品及该提取物的提取方法
技术领域：
本发明涉及在岩白菜素中提取能抑制弹性蛋白酶及原酶的提取物，把它用在化妆品里，可以抑制皮肤皱纹。
背景技术：
制造可治疗皮肤皱纹的化妆品是为了维持健康有弹力的皮肤并且防止或延迟皮肤老化。皮肤是减少外部刺激、保护身体、调解体温、呼吸及排泄等作用的重要的身体器官。但是人到一定年龄后这些功能也渐渐地衰退，因此开始皮肤地老化。特别是，执行“皮肤墙壁”功能的脂肪层中脂质的组成与其数量的变化即功能的急速衰退而减少皮肤的水分会引起皮肤的干燥及黄褐斑、雀斑、色斑等皮肤的病变。
在紫外线作用下所生成的活性氧分子与激发态分子会把皮肤组分氧化成过氧化物，因此导致成皮肤的构造与功能上的损伤及其促进老化。胶原质，弹性蛋白，蛋白多糖，葡萄多糖，昆布氨酸(N-三甲基赖氨酸内盐)等被氧化而退化皮肤组织功能，因而皮肤失去弹力形成皱纹。
有关形成皱纹的皮肤结合组织有胶原质纤维，网状纤维，弹性纤维等组分构成。
真皮组织中胶原质纤维和弹性蛋白纤维的紧密结合而维持皮肤的弹性与幼嫩肌肤。
约占真皮组织70％的胶原质是维持肌肤柔嫩性的重要纤维组织。胶原质纤维中的多肽链在纤维原细胞粗粒内质网内合成为两端具有端肽的状态，并形成端肽三重螺旋结构往细胞外分泌原骨胶原。分泌出的原骨胶原在特定酵素的作用下断开原胶原(蛋白)而生成原胶原(蛋白)，生成的原胶原(蛋白)在细胞外基质内组合形成胶原质纤维。皮肤老化会使胶原质纤维的合成程度急速降低，并且胶原质纤维在外部环境影响下变形而形成更多更深的皱纹。引起这种胶原质分解的是称为胶原质分解酵素的胶原酶。
弹性蛋白纤维跟胶原质纤维-样也是保持皮肤弹性的主要纤维组织。虽然它的比例只是2％比起胶原质纤维比例少得很，但它是保护表皮的连接网组织，是重要的维持皮肤弹性的纤维质。弹性蛋白被称为弹性蛋白酶的分解酵素所分解。弹性蛋白在18-19岁之前是通过纤维原细胞可以生成，但以后是只能用已存在的弹性蛋白来维持皮肤弹性功能。因此，一旦损伤弹性蛋白纤维会很难恢复皮肤的弹性。
胶原质与弹性蛋白是防止皱纹的因素。胶原质的破坏、胶原质合成的减少、弹性蛋白的损失会引起皮肤皱纹的形成等皮肤老化，这些现象不仅在表皮上引起而且也在真皮上引起。
最近对于皮肤皱纹的生成及其治疗方法的研究正活跃地进行。现在所提倡的是防止皮肤皱纹的防紫外线、抗氧化性、促进细胞活性等化妆品，还有有关胶原质合成的治疗皮肤皱纹的化妆品。
例如，治疗皮肤皱纹及色斑的视黄醇(维生素A)已用于化妆品组分在市场上销售；胶原质合成必须物质维生素C在治疗皱纹、防止紫外线及祛除色斑很有效(美国专利第4,938,969号，美国专利第4,772,591号及欧洲专利第0533667号等)。有效祛除角质层的含有α-羟基酸的化妆品会促进细胞的活性而治疗皮肤。但上述所提的治疗皱纹的化妆品也是存在着稳定性差的问题。
视黄醇是促进胶原质合成来治疗皮肤皱纹，但它很容易被光照、水、空气及热等氧化；维生素C的稳定性也极弱，容易导致产品的变色及变质；α-羟基酸在弱酸条件下显出很高的效果，但有对皮肤有刺激的弱点。
发明内容
为了解决上述所出现的问题，开发出优质的治疗皮肤皱纹的化妆品，本发明人发现了在中国等地区自然生长的岩白菜素，它的提取物可以抑制弹性蛋白分解酵素(弹性蛋白酶)及胶原质分解酵素(胶原酶)的活化，用这个提取物制成的化妆品可以抑制皮肤皱纹、且几乎无副作用。
本发明的目的在于提供一种含有岩白菜素提取物的化妆品、及该提取物的提取方法。
为了解决以前化妆品稳定性差、存在副作用、治疗皮肤皱纹效果不明显等，本发明人对许多天然植物的提取物进行分析的结果终于发现，在中国等地区自然生成的岩白菜素提取物在治疗皮肤皱纹中有显著效果而且副作用也很低。
岩白菜素是属于虎耳草科的多年生草本植物，高20-30厘米、叶子大而厚。花的颜色是粉红色到白色的很多种。主要分布在四川省、云南省及西藏等海拔1590米的高原地区。作为中国少数民族民间药草的岩白菜素是主要使用它的根和茎。有酸甜滋味的岩白菜素是主要用于咳嗽、吐血等症状，起解热、解毒及止血等作用。
本发明的岩白菜素提取物是抑制弹性蛋白酶及胶原酶的活化。这种特性会抑制真皮组织内的弹性蛋白与胶原质的分解，最终达到有效治疗皮肤皱纹的目的。
本发明中所利用的岩白菜素提取物是可以从岩白菜素的不同器官、组织(例如根、叶、花、茎、果实及种子等)中取得，但最好是抽出岩白菜素根的提取物。
想得到本发明岩白菜素提取物，可以利用下列溶剂，例如(a)水，(b)碳的个数为1-4的无水或含水低级醇(甲醇、乙醇、丙醇、丁醇等)，(c)上述低级醇和水的混合溶液，(d)丙酮，(e)乙酸乙酯，(f)氯仿，(g)1，3-丁基甘醇，(h)乙酸丁酯。本发明是利用含水低级醇类或乙醇为溶剂来提取岩白菜素。而且根据每个不同的研究人，用其他的容剂来抽出岩白菜素同样也可以获得理想的提取物。
本发明的提取物不仅是上述所提的提取物，而且还包括经过通常的提取物，例如，具有一定大小的分子是可以利用半透膜抽出；气象色谱分析(大小、电荷、疏水性或亲和性的抽出)抽出等通过附加实施的多种净化方法得到的活性分裂也属于本发明岩白菜素提取物。
本发明的岩白菜素提取物通过减压蒸馏、冻干燥或蒸馏干燥等附加过程而制造成粉末状态。
本发明的岩白菜素提取物可以从水、C1-C4无水或含水的低级醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸丁酯、氯仿、1，3-丁基甘醇以及它们之间构成的群体中选出溶剂，把岩白菜素在40-100℃条件下加热3-20小时所获得。
另一种是将从水、C1-C4无水或含水的低级醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸丁酯、氯仿、1，3-丁基甘醇以及它们之间构成的群体中选出溶剂在4-50℃条件下存放1-15日后抽出岩白菜素。
获取岩白菜素提取物可以通过现在通常使用的抽出器(装有冷凝器的抽出器)是防止抽出时有效成分的蒸发。而且提取物的干燥也有很多，例如搅拌减压蒸发器等。
按照上述的第一情况，本发明有效成分岩白菜素提取物的含量在化妆品总组分中所占比例为0.0001-10％，最好是0.001-5％。其含量在0.0001％是显示不出它的效果，但超过10％是会导致皮肤的刺激并且也会影响品种的稳定性。
本发明化妆品组成物不仅是岩白菜素提取物，而且还包括其他成分(抗氧化剂、稳定剂、增溶剂、维生素、着色剂及香料等通常使用的辅助剂与淡体。
本发明的美白组成物的产品种类很多，有溶液、悬浮液、乳状液、糊状、凝胶体、(护肤)面霜、洗液、粉末、表面活性-清洁剂、油、粉底、粉底乳液、湿粉、喷雾等产品种类。不仅如此，还有柔肤水、收缩水、营养化妆水、营养霜、按摩膏、基础霜、眼面霜、洁面乳、香皂、清洁水、面膜、喷雾或粉末的产品种类。
本发明的产品种类为糊状、面霜、凝胶体等成分时可以利用动物油、植物油、增白霜、石蜡、淀粉、黄芪胶、纤维素衍生物、聚乙烯乙二醇、硅树脂、膨润土、无水硅酸、云母或氧化锌等。
本发明的产品种类为粉末或喷雾时可以利用乳糖、云母、无水硅石、氢氧化铝、硅酸钙或聚酰胺粉末，尤其是在喷雾时候可以包括附加氯氟烃、丙烷/丁烷或二甲醚等催化剂。
本发明的产品种类为溶液或乳状液时可以利用溶液、增溶剂或乳化剂，例如水、乙醇、异丙醇、乙烷基碳酸盐、乙烷基醋酸盐、苯甲醇、苯甲醇苄酯、丙烯乙二醇、1，3-丁烯乙二醇、油、丙三醇脂肪酯、聚乙二醇或山梨聚糖脂肪酯等。
本发明的产品种类为悬浮液时可以利用水、乙醇、丙烯乙二醇等悬浮稀释剂与乙氧基硬脂醇醇、聚氧乙烯山梨(糖)醇酯、聚氧乙烯脱水山梨聚糖酯等悬浮剂、微小晶体维生素、膨润土、琼脂或黄芪胶。
本发明的产品种类为表面活性剂清洁剂的时候可以利用脂肪醇硫酸酯、脂肪醇醚硫酸酯、黄基丁二酸单酯、羟乙黄酸盐、咪唑鎓盐衍生物、牛黄酸甲酯、基氨酸酯、脂肪酸酰胺醚硫酸酯、烷基酰胺甜菜碱、脂肪醇、甘油脂肪醇质、脂肪酸二乙醇酰胺、植物油、羊毛脂衍生物、乙氧基甘油脂肪酯等。
本发明的积极效果是它提供含有岩白菜素提取物抑制弹性蛋白酶及胶原酶的活化的化妆品，还提供利用含有这些有效成分治疗皮肤皱纹的化妆品。本发明的组分对治疗皮肤皱纹有很好的效果。
具体实施方式
下面通过一些实例详细说明本发明。
从中国药材市场购买的岩白菜素。
实例1岩白菜素提取物的提取方法
实例1-1
取先用蒸馏水洗干净后烘干的岩白菜素200g加入1.2
的水中，在装
有冷凝器的抽出器上70-90℃条件下加热5个小时抽出。提取物用300圈过滤器进行过滤、并在5-10℃条件下放置7-10天熟成后用滤纸过滤5次。在65℃条件下用旋转减压蒸馏器把过滤液干燥，得到95.9g岩白菜素提取物。
实例1-2
取先用蒸馏水洗干净后烘干的岩白菜素200g加入1.2
的水中，在15-35℃条件下放置5天抽出后把提取物用300圈过滤器进行过滤，再用旋转减压蒸发器浓缩2倍，其中加入0.6
100％乙醇在5-10℃条件下放置7-10天熟成后用滤纸过滤5次。在65℃条件下用旋转减压蒸发器把过滤液干燥，得到98.6g岩白菜素提取物。
实例1-3
取先用蒸馏水洗干净后烘干的岩白菜素200g加入1.2
的水中，在4-40℃条件下放置5天抽出后把提取物用300圈过滤器进行过滤并5-10℃条件下放置7-10天熟成后把Whattman用滤纸过滤5次。在65℃条件下用旋转减压蒸发器把过滤液干燥，得到90.4g岩白菜素提取物。
实例1-4
同1-3方法，只换抽出溶剂制造岩白菜素提取物。所制造出的提取物在干燥后的质量如下表1。各个提取物的用提取物4到21来表示。
表1
实例1-5
取先用蒸馏水洗干净后烘干的岩白菜素200g加入1.2
1，3-丁二醇中抽出48个小时后用300圈过滤器进行过滤并5-10℃条件下放置7-10天熟成后用滤纸过滤5次。所得到的提取物很难用旋转减压蒸发器过滤，因此求干燥前后物质质量差值，调整最终浓度为1％(w/v)。
实例1-6
取先用蒸馏水洗干净后烘干的岩白菜素200g加入10％1.2
乙醇中，在装有冷凝器的抽出器上加热5个小时抽出后再用300圈过滤器进行过滤并在5-10℃条件下放置7-10天熟成后用滤纸过滤5次。在65℃条件下用旋转减压蒸馏器把过滤液干燥，得到110.2g岩白菜素提取物(提取物23)。
实例1-7
同1-6方法，只换抽出溶剂浓度制造出岩白菜素提取物。所制造出的提取物在干燥后的质量如下表2。各个提取物的用提取物24到32来表示。
表2
实验例
实验例1岩白菜素提取物对抑制弹性蛋白酶活化的效果
对上述实例1中制造出的岩白菜素提取物(提取物1到32)抑制弹性蛋白酶活化效果的实验。
各取提取物1到32溶液100
60
缓冲溶液(用0.267 M盐酸溶液校正0.267 M Tris溶液使pH值为8.0)中加入基础溶液(校正弹性蛋白酶基础Succ-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilide标准液(Sigma，USA)为8.8mM)20
再加入上述提取物1到32溶液100
酵素溶液(校准猪的胰腺弹性蛋白酶标准液(Sigma，USA)为10
)20
并在25℃条件下进行反应15分钟。反应完成后当410
条件下以蒸馏水为参照液测出吸光度。弹性蛋白酶的活化抑制率可以用下列公式1来求出。
公式1
弹性蛋白酶活化抑制率(％)＝[(药品的吸光度-参照液的吸光度)/参照液的吸光度]×100
实例2岩白菜素提取物对抑制胶原酶活化的效果
对上述实例1中制造出的岩白菜素提取物(提取物1到32)抑制胶原酶效果的实验。先取牛胶原质(Sigma，USA)25mg再加入0.05 M TES 5
并在37℃条件下边摇晃反应15分钟。从反应结束后的溶液中取0.2
并加入在4％茚三酮甲基纤维素溶剂1m1、0.2 M柠檬酸钠溶液与0.71mM氯化锡溶液(pH5.0)之中加热20分钟左右，再加入5ml的 n-丙醇溶液，放置15分钟后在600nm条件下测出吸光度。胶原酶的活化抑制率可以用下列公式2来求出。
公式2
胶原酶活化抑制率(％)＝[(药品的吸光度-参照液的吸光度)/参照液的吸光度]×100
上述实例1及2的结果以下列表3表示
表3
从上表3能看出，本发明的岩白菜素提取物对弹性蛋白酶活化的抑制率高达60-80％，提取物14表现出78.9％的最高抑制率。而且胶原酶的活化抑制率也高达60-80％，并在提取物10时表现出79.8％的最高抑制率。因此表明本
发明的
岩白菜素提取物是抑制弹性蛋白酶与胶原酶的有效成分。
以下是关于本发明的产品种类，例如，柔肤水、收缩水、营养化妆水、营养霜、按摩膏、精华素、面膜等。本发明的组成物不仅如此，还有很多产品种类。
产品种类
种类例1柔肤水
含有岩白菜素提取物的柔肤水的产品种类如下表表4
种类例2收缩水
含有岩白菜素提取物的收缩水的产品种类如下表表5
种类例3营养化妆水
含有岩白菜素提取物的营养化妆水的产品种类如下表表6
种类例4营养霜
含有岩白菜素提取物的营养霜的产品种类如下表表7
种类例5按摩膏
含有岩白菜素提取物的按摩膏的产品种类如下表8
表8
种类例6精华素
含有岩白菜素提取物的精华素的产品种类如下表9
表9
种类例7面膜
含有岩白菜素提取物的精华素的产品种类如下表10
表10
实验例3含有岩白菜素提取物的化妆品对治疗皱纹的效果的评价
以实际检验评价本发明化妆品的治疗皱纹的效果。产品种类例4为例以比较的形式(例4中的含有6％岩白菜素提取物的营养霜与不含岩白菜素提取物的霜比较)评价治疗皱纹的效果。
我们把30-40岁女性20名为研究对象进行了比较。每10名为一组，一组是使用含有岩白菜素提取物的营养霜，另一组是使用普通营养霜。每天早晚两次洗脸后以眼睛部位为中心均匀的抹在脸上，这样坚持两个月后比较能明显看得出其效果。
上述实验的结果用下列表11表示
表11
从表11我们可以看出含有岩白菜素提取物的化妆品比普通化妆品有显著的效果，并且对皮肤无刺激性。
以上是讲述一些有关本发明的例子。对于本发明的范围很广，随着附加范围与它的有关物质而决定它所在的实际范围。
权利要求
1、一种治疗皮肤皱纹的含有岩白菜素提取物的化妆品，它含有化妆品的成分，其特征是它还含有从岩白菜素中提取的、具有抑制弹性蛋白酶及胶原酶的活化的提取物的有效成分。
2、一种权利要求1所述的具有抑制弹性蛋白酶及胶原酶的活化的含有岩白菜素提取物的提取方法，其特征是岩白菜素提取物是利用水、C1-C4无水或含水的低级醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸丁酯、氯仿、1，3-丁基甘醇以及它们之间构成的群体中选出溶剂抽出而得的。
3、按照权利要求1所述的治疗皮肤皱纹的含有岩白菜素提取物的化妆品，其特征是岩白菜素提取物占化妆品总组分的0.0001-10％。
4、按照权利要求2所述的具有抑制弹性蛋白酶及胶原酶的活化的含有岩白菜素提取物的提取方法，其特征是岩白菜素提取物是从水、C1-C4无水或含水的低级醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸丁酯、氯仿、1，3-丁基甘醇以及它们之间构成的群体中选出溶剂，并把岩白菜素在40-100℃条件下加热3-20小时所获得。
5、按照权利要求2所述的具有抑制弹性蛋白酶及胶原酶的活化的含有岩白菜素提取物的提取方法，其特征是岩白菜素提取物是从水、C1-C4无水或含水的低级醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸丁酯、氯仿、1，3-丁基甘醇以及它们之间构成的群体中选出溶剂在4-50℃条件下存放1-15日并把岩白菜素抽出。
6、按照权利要求1或3所述的治疗皮肤皱纹的含有岩白菜素提取物的化妆品，其特征是提到的治疗皮肤皱纹的化妆品的种类有溶液、悬浮液、乳状29液、糊状、凝胶体、护肤面霜、洗液、粉末、表面活性-清洁剂、油、粉底、粉底乳液、湿粉及喷雾等。
全文摘要
本发明是有关防止皮肤皱纹生成的岩白菜素提取物的提取方法及在化妆品上的应用。本发明所要解决的技术问题是目前治疗皱纹的化妆品也是存在着稳定性差和副作用较大的问题。本发明提供抑制弹性蛋白酶或胶原酶活化的含有岩白菜素提取物的有关化妆品组分。本发明组分在阻止弹性蛋白酶或胶原酶活化中有很好的效果，并且是治疗皮肤皱纹的很好的组分。
文档编号A61Q19/00GK1507851SQ0310747
公开日2004年6月30日 申请日期2003年3月18日 优先权日2002年12月16日
发明者李康泰, 李善英, 李根洙, 鄭志憲 申请人:高丽雅娜化妆品股份有限公司