一种枸杞发酵原浆化妆品及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种枸杞发酵原浆化妆品及其制备方法。该枸杞发酵原浆化妆品，其有效成分为将枸杞果粉、水与发酵菌混合而得的初始体系发酵而得的发酵液经灭菌、离心而得的上清液。所述发酵菌为德氏乳杆菌。本发明采用德氏乳杆菌对枸杞果进行全植物发酵，保留了植物的全部功效成分及其活性，避免了提取方法造成的活性成分流失；且制备时不添加任何有机试剂，发酵温度和发酵pH温和，植物活性成分结构不被破坏，保持植物的天然活性，且发酵原浆中不添加香精等对化学成分，确保产品对人体的安全性。产品中富含枸杞多糖、枸杞黄酮等物质，与发酵滤液中的益生菌发酵产物成分具有协同作用，能够显著抗氧化及抗衰老。
【专利说明】一种枸杞发酵原浆化妆品及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于化妆品领域，本发明涉及一种枸杞发酵原浆化妆品及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 枸杞是多年生的落叶灌木，花紫、果红、枝繁叶茂。其果实枸杞子味甘、性平，有滋 肾补髓、养肝明目和祛风的作用，是传统滋补中药，具有抗衰老、保湿等多种生物活性。目前 市枸杞在化妆品中的价值几乎还未被开发，亟需开发一种充分发挥枸杞的美容功效的化妆 品。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是提供一种枸杞发酵原浆化妆品及其制备方法。
[0004] 本发明提供的枸杞发酵原浆化妆品，其有效成分为将枸杞果粉、水与发酵菌混合 而得的初始体系发酵而得的发酵液经灭菌、离心而得的上清液。
[0005] 上述化妆品中，枸杞果粉的目数为20-50目，具体为50目；
[0006] 所述发酵菌为乳杆菌，具体为德氏乳杆菌，更具体为德氏乳杆菌保加利亚亚种 (Lactobacillus delbrueckii subsp.Bulgaricus)〇
[0007] 所述发酵菌是以菌液的形式加入的；
[0008] 所述初始体系是将10_40ml发酵菌浓度为106-10 8CFU/ml的发酵菌菌液、3-20g枸 杞果粉和100-300ml水混合而得。
[0009] 所述初始体系具体为将20ml发酵菌浓度为106-10 8CFU/ml的发酵菌菌液、15g枸 杞果粉和200ml水混合而得。
[0010] 所述发酵步骤中，温度为36-48°C，具体为45°C ;时间为10-16小时；
[0011] 所述离心步骤中，转速为8000-12000r/min，离心半径为9_12cm ;离心时间为 10_20min。
[0012] 本发明提供的制备所述枸杞发酵原浆化妆品的方法，包括如下步骤：
[0013] 将所述枸杞果粉、水与发酵菌按照配比混合得到初始体系后进行发酵，再将所得 发酵液依次进行灭菌和离心，收集上清液，得到所述枸杞发酵原浆化妆品。
[0014] 上述方法中，所述枸杞果粉的目数为20-50目，具体为50目；
[0015] 所述发酵菌为乳杆菌，具体为德氏乳杆菌，更具体为德氏乳杆菌保加利亚亚种 (Lactobacillus delbrueckii subsp.Bulgaricus)〇
[0016] 所述发酵菌是以菌液的形式加入的；
[0017] 所述初始体系是将10-40ml发酵菌浓度为106-10 8CFU/ml的发酵菌菌液、3-10g枸 杞果粉和100-300ml水混合而得。
[0018] 所述初始体系具体为将20ml发酵菌浓度为106-10 8CFU/ml的发酵菌菌液、15g枸 杞果粉和200ml水混合而得。
[0019] 所述发酵步骤中，温度为36-48°C ;时间为10-16小时；
[0020] 所述离心步骤中，转速为8000-12000r/min，离心半径为9-12cm ;离心时间为 10_20min。
[0021] 所述灭菌步骤中，灭菌方法为高压灭菌；灭菌温度为115°c，时间为20min ;
[0022] 另外，上述本发明提供的枸杞发酵原浆化妆品在制备化妆品中的应用及以所述枸 杞发酵原浆化妆品为有效成分的化妆品，也属于本发明的保护范围。其中，所述化妆品为具 有清除DPPH自由基功能的产品。
[0023] 本发明提供了一种利用枸杞果发酵生产化妆品的方法。本发明所具有的优点是 (1)本发明采用德氏乳杆菌对枸杞果进行全植物发酵，保留了植物的全部功效成分及其活 性，避免了提取方法造成的活性成分流失。（2)本发明所采用的发酵法，在对枸杞果有效成 分提取过程中，不添加任何有机试剂，发酵温度和发酵pH温和，植物活性成分结构不被破 坏，保持植物的天然活性。（3)本发明提供的化妆品发酵完成后，发酵原浆中不添加香精等 对化学成分，确保产品对人体的安全性。（4)本发明提供的枸杞发酵原浆化妆品中富含的枸 杞多糖、枸杞黄酮等物质，与发酵滤液中的益生菌发酵产物成分具有协同作用，从而具有显 著地抗氧化及抗衰老作用。
【专利附图】
【附图说明】
[0024] 图1为枸杞发酵原浆化妆品清除DPPH自由基结果示意图；
【具体实施方式】
[0025] 以下实施例进一步说明本发明的内容，但不应理解为对本发明的限制。在不背离 本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明 的范围。
[0026] 若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。
[0027] 本发明所用枸杞果购自于青海康普生物科技有限公司，粉碎至20-50目。
[0028] 本发明所用德氏乳杆菌保加利亚亚种（Lactobacillus delbrueckii subsp. Bulgaricus)购自中国普通微生物菌种保藏管理中心。
[0029] 下述实施例所用德氏乳杆菌的菌液均为按照如下步骤而得：
[0030] 发酵过程首先将菌种进行活化，使其保持更高的生活力；然后将菌纯化，使发酵时 使用单一菌种；接着扩培使菌大量繁殖。将扩培后的菌接入枸杞果粉与水的混合液在适应 的条件下进行发酵，然后离心取上清进行检测。具体过程如下：
[0031] (1)菌种活化：从保藏的斜面中挑取菌落放入液体培养基中，将菌种活化。
[0032] (2)菌种纯化：将活化的菌种梯度稀释铺板，以便获取单菌落。
[0033] (3)菌种扩培：将待用菌种接种到脱脂牛奶和水组成的培养基中（脱脂奶粉100g/ L，pH自然）中，在培养箱中培养，培养温度为36-48°C，至其0D值=0. 5-1.0时，菌种处在 对数生长期，即为合适的接种浓度，该浓度为l〇6_l〇8CFU/ml。
[0034] 实施例1、枸杞发酵原浆化妆品的制备及检测
[0035] 将扩培培养基里的浓度为106_108CFU/ml的德氏乳杆菌菌液20ml接种到50目的 枸杞果粉15g和200g水中，并且在45°C培养箱中进行发酵16小时后，将所得发酵液进行 115°C高压灭菌，20min，使菌失活，将灭菌后的发酵液在12000r/min，离心半径为9cm;离心 时间为20min，收集上清液，即为本发明提供的枸杞发酵原浆化妆品。
[0036] 该实施例制备所得枸杞发酵原浆化妆品的外观为粘稠液体、颜色为淡红色至深红 色。pH值为5. 2-6. 8,粘度为50-300cP，可溶性固含物的质量百分含量为1. 5-5. 0 %，菌落 总数小于50CFU/ml，无致病菌检出。符合化妆品质量要求。
[0037] 对该枸杞发酵原浆化妆品进行成分分析，蛋白质检测方法参照GB5009. 5-2010; 粗多糖检测方法参照GB/T 5009. 8-2008 ;氨基酸检测方法参照GB/T 5009. 124-2003。所得 结果如下：
[0038] 该枸杞发酵原楽化妆品中含蛋白质3. 6g/kg、粗多糖0. 92g/kg、总黄酮3. 90g/ kg(以芦丁计）、总酚0. 130g/kg。总氨基酸1. 25g/kg，其中包括天门冬氨酸0. 152g/kg、苏 氨酸 0? 051g/kg、丝氨酸 0? 092g/kg、谷氨酸 0? 240g/kg、甘氨酸 0? 098g/kg、丙氨酸 0? 072g/ kg、缴氨酸〇? 〇44g/kg、异亮氨酸0? 034g/kg、亮氨酸0? 067g/kg、酪氨酸0? 079g/kg、组氨酸 0? 055g/kg、精氨酸 0? 083g/kg、苯丙氨酸 0? 132g/kg。
[0039] 实施例2、枸杞发酵原浆化妆品的抗氧化功效分析
[0040] DPPH是一种早期合成的有机自由基，常用来评估抗氧化物的供氢能力，它在有机 溶剂中非常稳定，呈紫色，而且在处有一个特征吸收峰，当遇到自由基清除剂时，DPPH的孤 对电子被配对而使其退色，也就是在最大吸收波长处的吸光值变小。因此，可通过测定吸光 值的变化来评价样品对DPPH自由基的清除效果。
[0041] DPPH自由基清除实验的具体实验步骤为：
[0042] (1)取等体积（一般为3mL)的待测液与2 X 10_4m〇l/L的DPPH溶液混匀％管）；
[0043] (2)取等体积的无水乙醇（待测物溶剂）与2X l(T4m〇l/L的DPPH溶液混匀（A2 管）；
[0044] (3)取等体积的无水乙醇与待测液混匀（A3管）；
[0045] (4)反应30min后，在517nm下测Ai、A2、A 3管吸光度值。
[0046] 清除率计算公式为：清除率（％ ) = [(a2+a3)-aj/a2
[0047] 做出枸杞发酵原浆对DPPH自由基清除作用曲线，见附图1。
[0048]由图可知，实施例1所得枸杞发酵原浆对DPPH清除作用的IC50=8. 6%，说明枸 杞发酵原浆具有较强的抗氧化能力可清除自由基，促进细胞代谢，增强细胞活力，改善机体 的结构和功能，提高机体生命力，从而延缓细胞老化，发挥其抗衰老的作用。
[0049] 实施例3、枸杞发酵原浆的安全性评价
[0050] 斑贴试验主要是用于检测化妆品终产品或原料的刺激性。本发明对枸杞发酵原浆 化妆品进行人体封闭式斑贴试验，对其潜在皮肤刺激性进行评估。
[0051] 选择合适的志愿者30人，年龄范围在18-60岁随机选择。称取0. 020g-0. 025g将 固体样品或半固体的样品放入斑试器中备用。将液体样品〇. 2mL到0. 025mL滴加在滤纸片 上，再将滤纸片置于斑试器内。每个样品均设置空白对照，在对照斑试器孔内加入与样品等 量的样品溶剂，如蒸馏水或橄榄油。
[0052]试验部位选为人体背部，利用无刺激性的胶带将斑试器固定贴敷于受试者背部。 测试周期持续24h。为了试验结果的准确、可信和科学，在测试期间志愿者按照要求，不能摘 掉斑试器,亦不可使受试部位接触水。24h后去除斑试器，静置30min后，等待压痕消失，观 察皮肤的反应。如果试验结果为阴性，则需要在斑贴试验后24h和48h分别再观察一次。
[0053] 斑贴试验结果如表1 :
[0054] 表1、斑贴试验结果
[0055]
【权利要求】
1. 一种枸杞发酵原浆化妆品，其有效成分为将枸杞果粉、水与发酵菌混合而得的初始 体系发酵而得的发酵液经灭菌、离心而得的上清液； 所述初始体系中的发酵菌浓度为106-108cfu/ml。
2. 根据权利要求1所述的化妆品，其特征在于：所述枸杞果粉的目数为20-50目，具体 为50目； 所述发酵菌为乳杆菌，具体为德氏乳杆菌，更具体为德氏乳杆菌保加利亚亚种 (Lactobacillus delbrueckii subsp.Bulgaricus)〇
3. 根据权利要求1或2所述的化妆品，其特征在于：所述发酵菌是以菌液的形式加入 的； 所述初始体系是将10-40ml发酵菌浓度为106-108cfu/ml的发酵菌菌液、3-20g枸杞果 粉和100-300ml水混合而得。
4. 根据权利要求1-3任一所述的化妆品，其特征在于：所述发酵步骤中，温度为 36-48°C ;时间为10-16小时； 所述离心步骤中，转速为8000-12000r/min，离心半径为9_12cm ;离心时间为 10_20min。
5. -种制备权利要求1-4任一所述枸杞发酵原浆化妆品的方法，包括如下步骤： 将所述枸杞果粉、水与发酵菌按照配比混合得到初始体系后进行发酵，再将所得发酵 液依次进行灭菌和离心，收集上清液，得到所述枸杞发酵原浆化妆品。
6. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述枸杞果粉的目数为20-50目，具体为 50目； 所述发酵菌为乳杆菌，具体为德氏乳杆菌，更具体为德氏乳杆菌保加利亚亚种 (Lactobacillus delbrueckii subsp.Bulgaricus)〇
7. 根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于：所述发酵菌是以菌液的形式加入的； 所述初始体系是将10-40ml发酵菌浓度为10 6-108cfu/ml的发酵菌菌液、3-10g枸杞果 粉和100-300ml水混合而得。
8. 根据权利要求5-7任一所述的方法，其特征在于：所述发酵步骤中，温度为36-48°C; 时间为10-16小时； 所述离心步骤中，转速为8000-12000r/min，离心半径为9_12cm ;离心时间为 10_20min。
9. 权利要求1-4任一所述枸杞发酵原浆化妆品在制备化妆品中的应用； 以权利要求1-4任一所述枸杞发酵原浆化妆品为有效成分的化妆品。
10. 根据权利要求9所述的应用或化妆品，其特征在于：所述化妆品为具有清除DPPH 自由基功能的广品。
【文档编号】A61Q19/08GK104257598SQ201410479856
【公开日】2015年1月7日 申请日期:2014年9月18日 优先权日:2014年9月18日
【发明者】李萌, 王昌涛, 林阿芳, 方晓薇, 王冬冬, 方祥铭 申请人:北京工商大学, 上海仪玳化妆品有限公司