纺设备上，在纺丝电压为14 kV，接收距离为20cm,溶液推进速度为0.5 ml/h,纺丝温度为25°C，相对湿度为40%条件下进行纺丝，待纺丝一定时间后，将制备好的京尼平交联I型I型胶原/壳聚糖/聚氧化乙烯复合微纳米纤维膜置于真空干燥箱中充分干燥以除去残余溶剂。如图1所示，所得的京尼平交联I型胶原/壳聚糖/聚氧化乙烯复合微纳米纤维膜的纤维相貌良好，纤维直径为220-330nm。
[0031]实施例2
称取0.21g海绵状I型胶原和0.09g聚氧化乙烯粉末溶解于10mL六氟异丙醇和乙酸体积比为5:5的混合溶液中，常温下置于磁力搅拌机上搅拌完全，配制质量浓度为3g/mL的胶原/聚氧化乙烯共混溶液；称取0.27g壳聚糖粉末和0.03g聚氧化乙烯粉末共同溶解与10mL体积分数为90%的乙酸水溶液中，常温下置于磁力搅拌机上搅拌透明，配制质量浓度为3g/mL的壳聚糖/聚氧化乙烯共混溶液。
[0032]将质量浓度为3g/mL的胶原/聚氧化乙烯共混溶液和质量浓度为3g/mL的壳聚糖/聚氧化乙烯共混溶液按质量比6:4混合均匀，在得到的混合溶液中添加占混合溶液总质量2%的交联剂京尼平，置于磁力搅拌机上搅拌半个小时得到最终纺丝溶液。
[0033]将上述制备好的纺丝溶液置于静电纺设备上，在纺丝电压为16 kV，接收距离为20cm,溶液推进速度为0.8mL/h，纺丝温度为20°C，相对湿度为40%条件下进行纺丝，待纺丝一定时间后，将制备好的京尼平交联I型胶原/壳聚糖/聚氧化乙烯复合微纳米纤维膜置于真空干燥箱中充分干燥以除去残余溶剂。如图2所示，所得的京尼平交联I型胶原/壳聚糖/聚氧化乙烯复合微纳米纤维膜的纤维相貌良好，纤维直径为300-400nm。
[0034]实施例3
称取0.32g海绵状I型胶原和0.08g聚氧化乙烯粉末溶解于10mL六氟异丙醇和乙酸体积比为5:5的混合溶液中，常温下置于磁力搅拌机上搅拌完全，配制质量浓度为4g/mL的胶原/聚氧化乙烯共混溶液；称取0.36g壳聚糖粉末和0.04g聚氧化乙烯粉末共同溶解与10mL体积分数为90%的乙酸水溶液中，常温下置于磁力搅拌机上搅拌透明，配制质量浓度为4g/mL的壳聚糖/聚氧化乙烯共混溶液。
[0035]将质量浓度为4g/mL的胶原/聚氧化乙烯共混溶液和质量浓度为4g/mL的壳聚糖/聚氧化乙烯共混溶液按质量比7:3混合均匀，在得到的混合溶液中添加占混合溶液总质量2%的交联剂京尼平，置于磁力搅拌机上搅拌半个小时得到最终纺丝溶液。
[0036]将上述制备好的纺丝溶液置于静电纺设备上，在纺丝电压为16 kV，接收距离为25cm,溶液推进速度为0.5mL/h，纺丝温度为30°C，相对湿度为45%条件下进行纺丝，待纺丝一定时间后，将制备好的京尼平交联I型胶原/壳聚糖/聚氧化乙烯复合微纳米纤维膜置于真空干燥箱中充分干燥以除去残余溶剂。如图3所示，所得的京尼平交联I型胶原/壳聚糖/聚氧化乙烯复合微纳米纤维纤维相貌良好，纤维直径为300-400nm。
[0037]实施例5
称取0.4g海绵状I型胶原和0.lg聚氧化乙烯粉末溶解于10mL六氟异丙醇和乙酸体积比为5:5的混合溶液中，常温下置于磁力搅拌机上搅拌完全，配制质量浓度为5g/mL的胶原/聚氧化乙烯共混溶液；称取0.45g壳聚糖粉末和0.05g聚氧化乙烯粉末共同溶解与10mL体积分数为90%的乙酸水溶液中，常温下置于磁力搅拌机上搅拌透明，配制质量浓度为5g/mL的壳聚糖/聚氧化乙烯共混溶液。
[0038]将质量浓度为5g/mL的胶原/聚氧化乙烯共混溶液和质量浓度为5g/mL的壳聚糖/聚氧化乙烯共混溶液按质量比5:5混合均匀，在得到的混合溶液中添加占混合溶液总质量3%的交联剂京尼平，置于磁力搅拌机上搅拌半个小时得到最终纺丝溶液。
[0039]将上述制备好的纺丝溶液置于静电纺设备上，在纺丝电压为18 kV，接收距离为20cm,溶液推进速度为1.5mL/h，纺丝温度为20°C，相对湿度为45%条件下进行纺丝，待纺丝一定时间后，将制备好的京尼平交联I型胶原/壳聚糖/聚氧化乙烯复合微纳米纤维膜置于真空干燥箱中充分干燥以除去残余溶剂。所得的京尼平交联I型胶原/壳聚糖/聚氧化乙烯复合微纳米纤维膜的纤维相貌良好，纤维直径为500-650nm。
[0040]图4为海绵状I型胶原、聚氧化乙烯粉末、实施例1、2所配制的胶原/聚氧化乙烯共混溶液制备的胶原基静电纺膜的红外光谱图，该图结果初步表明，以六氟异丙醇和乙酸混合溶液为纺丝溶剂，通过添加纺丝助剂聚氧化乙烯所制备的胶原基静电纺纤维膜较好地保留了 I型胶原3股螺旋结构的完整性。
[0041]本发明所述的胶原/聚氧化乙烯共混溶液的总质量浓度为2_6g/mL，其中胶原占胶原与聚氧化乙烯总质量的70%-95%。壳聚糖/聚氧化乙烯共混溶液的总质量浓度为2-6g/mL,壳聚糖占壳聚糖和聚氧化乙烯总质量的90%-95%。胶原/聚氧化乙烯共混溶液与壳聚糖/聚氧化乙烯共混溶液混合的质量配比选自以下之一:9:1，4:1，1:1，3: 2，2: 3，3: 7，1: 4，1:9。交联剂京尼平占纺丝溶液总质量的1%_10%。静电纺丝方法参数为:纺丝电压10-20kV，推进速度0.5-3mL/h，接收距离10_25cm，温度20-45°C，相对湿度25-50%的条件下进行。以上参数均可以本发明的范围内调整实施。
[0042]以上所述的实施例只是本发明的一种较佳的方案，并非对本发明作任何形式上的限制，在不超出权利要求所记载的技术方案的前提下还有其它的变体及改型。
【主权项】
1.一种生物敷料用复合微纳米纤维膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 步骤1:将I型胶原和聚氧化乙烯粉末溶解于六氟异丙醇和乙酸的混合溶剂中，室温下置于磁力搅拌机上搅拌混匀，得到胶原/聚氧化乙烯共混溶液； 步骤2 :将壳聚糖粉末和聚氧化乙烯粉末共同溶解于乙酸水溶液中，室温下置于磁力搅拌机上搅拌混匀，得到壳聚糖/聚氧化乙烯共混溶液； 步骤3 :将步骤1得到的胶原/聚氧化乙烯共混溶液与步骤2得到的壳聚糖/聚氧化乙烯共混溶液混合，得到胶原/壳聚糖/聚氧化乙烯共混溶液。2.步骤4:在步骤3所得的胶原/壳聚糖/聚氧化乙烯共混溶液加入交联剂京尼平，再置于磁力搅拌机上搅拌混匀，得到最终纺丝溶液； 步骤5 :将步骤4所得的纺丝溶液通过静电纺丝法制备复合微纳米纤维膜，将复合微纳米纤维膜置于真空干燥箱中干燥至少48h以去除残留溶剂。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述的I型胶原为陆生酸性I型胶原，相对分子质量为350-360Kda ;所述的壳聚糖相对分子质量为800_1000KDa，脱乙酰度>90%。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤1中的六氟异丙醇和乙酸的混合溶剂其溶剂配比为：六氟异丙醇与乙酸体积比为5:5，所述的胶原/聚氧化乙烯共混溶液的总质量浓度为2-6g/mL，其中胶原占胶原与聚氧化乙烯总质量的70%-95%。5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤2中的乙酸水溶液由乙酸与去离子水按照体积比为9:1混合而成，壳聚糖/聚氧化乙烯共混溶液的总质量浓度为2-6g/mL，壳聚糖占壳聚糖和聚氧化乙烯总质量的90%-95%。6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤3中的胶原/聚氧化乙烯共混溶液与壳聚糖/聚氧化乙烯共混溶液混合的质量配比选自以下之一 ：9:1，4:1，1:1，3:2，2:3，3:7，1:4，1:9ο7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤4中的交联剂京尼平占纺丝溶液总质量的1%_10%。8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤5中的静电纺丝方法参数为??纺丝电压10-20 kV，推进速度0. 5-3mL/h，接收距离10_25cm，温度20_45°C，相对湿度25-50%的条件下进行。9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤5得到的复合微纳米纤维膜的纤维直径为200-800nm。
【专利摘要】本发明公开了一种生物敷料用复合微纳米纤维膜的制备方法，针对胶原和壳聚糖静电纺丝存在的主要问题，本发明以六氟异丙醇和乙酸的混合溶液和乙酸水溶液分别作为高分子量I型胶原和壳聚糖的纺丝溶剂，降低了溶剂的毒性和成本，通过将生物相容性良好交联剂京尼平直接添加到纺丝溶液中，将静电纺丝和化学交联有效结合在一起，避免了传统交联方式所带来的二次生物毒性，通过该方法所制备的胶原/壳聚糖/聚氧化乙烯复合微纳米纤维膜的纤维形貌良好，作为生物敷料用材料具有很好的生物相容性，止血，抗菌和促进伤口愈合的功能。
【IPC分类】D04H1/728, A61L15/26, A61L15/28, A61L15/32, D01D5/00, A61L15/42, D01D1/02
【公开号】CN105401232
【申请号】CN201510729455
【发明人】陈燕, 王仙
【申请人】浙江纺织服装科技有限公司
【公开日】2016年3月16日
【申请日】2015年11月2日