r>[0023] 本发明还提供一种多功能土壤环境生物清毒剂的制备方法，包括
[0024] (1)一级液体微生物剂的培养和配制：
[0025]把获得的酵母菌（Cyptococcushumicolus(Daszewska)Golubev土生隐球酵母 ACCC20248)乳酸菌（Lactobacillusacidophilus(Moro)Bergeyetal.ACCC10637)放线菌 (Nocardiacoralline珊瑚色诺卡氏菌ACCC40100)光合菌（Agrobacteriumradiobacter 放射形土壤杆菌ACCC02525)和真菌（TrichodermakoningiiOuden.康宁木酶ACCC30388) 进行平板分离和镜检，进行分类培养；
[0026] 所述培养方法是：先将适宜的培养基原料清精选后，按比例配制，加热溶为一起， 搅拌均匀后装瓶；再经过高压灭菌，接菌种，将制备好的斜面菌种进行培养一周；再进入摇 床三角瓶液体菌种培养，液体菌种温度保持在25°C_28°C的培养室内进行摇动培养；五-六 天菌液达到2亿/克菌孢数量后，再进行菌类混合发酵的第一次发酵进程；发酵好的多菌液 可作为二级液体发酵时所需要的液体种用菌液；
[0027] 或将10%的菌液以上方法进二次、三次扩大培养，以满足二级液体生产的需要数 量；
[0028] (2)二级扩大发酵及清毒剂制备的方法：
[0029] 配料:A首先将硼砂，硝酸铵和硝酸钾结晶固体物质磨成粉，按比例混合。
[0030] B取海洋藻类制品的海藻酸纳液体，将所述三种无机营养剂的混合粉与其混合搅 拌均匀，使其溶解；
[0031] C.将50 %经过消毒的无菌水与10%的糖蜜进行混合，进行搅拌均匀，使其溶解， 再与上两种混合物混合；
[0032] D.将总量79%三种ABC成分的混合物，放入发酵灌里，加入21 %的一级菌种，进行 二次发酵。发酵温度控制在25-28°C，经过96小时培养，待菌孢数达到2亿/克时，亦可停 止发酵，待温度自然降至15°C左右，质量已达标准的成品，可以放入贮存罐中保存；
[0033] E.将成品装入贮罐内放置20天，在常温下使其进行后发酵过程，加入稳定剂再进 行小包装成品分装入库。
[0034] 所述步骤还包括：筛选细菌类、放线菌类，真菌类，酵母菌类和乳酸菌类菌种；试 管斜面菌种培养；摇床三角瓶液体菌种培养，单类菌种10升玻璃发酵罐培养，第一次多菌 种混合100升发酵-无机营养物制备-海洋海藻物质制备，，第二次1000升混合物发酵，质 检镜检，贮存大罐后自然后期发酵，添加稳定剂，装瓶入库。
[0035] 本发明清毒剂是将无机营养物质和可清除土壤毒素的微生物菌团结合在一起的 一种液体肥料型土壤清毒剂。
[0036] 本微生物产品修复土壤的机理是：土壤遭有机污染物侵蚀后，降解过程有生物和 非生物降解两个途径。这些过程包括光解作用，化学分解，植物根系和土壤微生物的生物转 化。参与生物修复作用的土壤微生物量可达几千万/克以上，并有多种酶系统参与。本产 品是用大量的活性菌起作用，促使有机污染物快速降解。微生物修复的主要机理为矿化作 用、共代谢作用和氧化偶合作用反应。微生物需要有机或无机碳源、氧、氮、磷、硫一些微量 元素，水分和能源以维持其自身活性和繁殖，扩大菌体的同时利用了有害污染物作为营养 物，消化及分解。
[0037] 大部分进入土壤的农药和工业有害物质都是微生物可利用的营养和能源。所以微 生物能对它们通过矿化作用、共代谢作用和氧化偶合作用将其分解和消化。在微生物分解 有害物质时产生不同的酶参与分解的反应。例如真菌、放线菌和细菌的部分菌类可以产生 过氧化物酶、漆酶和酪氨和酪氨酸酶。过氧化物酶包括一个复合的血红蛋白基因，在有过氧 化氢的条件下氧化酚类、芳香族类和各种化合物。上述3种酶在生物反应过程中能将有害 污染消除或转化为无毒物质，从而净化土壤。
[0038] 本发明提供的土壤环境生物清毒剂，还含有一定量的无机营养物质，以提高土壤 缺乏的有益农作物的营养元素，在清除土壤残毒的同时，增强植物旺盛生长，促进生态平衡 和生态恢复。
[0039] 无机营养物质是：硼砂2%，硝酸铵4%，硝酸钾3%，占总含量为9%。硼砂属微量 元素，除供给植物营养体外，还可以对土壤中分解尿素的尿酶起到控制作用，减速尿素类肥 料的分解流失，并起到缓释长效的作用。硝酸铵含有36 %氮素是植物必需的大量营养元素， 对作物生长是重要作用。硝酸钾也是大量元素，可增加产品外观色泽，增加甜度和抗倒伏等 作用。
[0040] 本发明还提供一种海洋藻类植物制品--海藻精（Sargassum)，它含有较强的植 物激素、活性碘，海藻多糖，酚类多聚化合物，甘露醇等，能够有效的促进植物细胞分裂与生 长。还含有氮、鳞、钾、钙、镁、锌、钴、硼、钥等微量元素，对提高植物抗寒、抗盐碱、抗倒伏， 提高产量和品质有明显作用。海藻精内还富含红藻和褐藻（phaeodactylum)等海藻胶酸 (Alginicacid)可作为土壤环境生物清毒剂产品的稳定剂和凝聚剂。
【具体实施方式】
[0041] 实施例1
[0042] 土壤环境生物清毒剂的制备
[0043](一）一级液体微生物菌剂的培养和配制。
[0044]本发明筛选出酵母菌Cyptococcushumicolus(Daszewska)Golubev土 生隐球 酵母（无性阶段为土生假丝酵母Candidahumicola(Daszewska)DiddensetIodder) (ACCC20248 -中国农科院土肥所一美国典型培养物中心ATCC36992，用于生产赖氨 酸，培养基 13, 26°C)、嗜酸乳酸菌Lactobacillusacidophilus(Moro)Bergeyet al. (ACCC10637 -中国农科院土肥所一轻工业食品发酵研究所IFFI6006。培养基5, 37°C)、 放线菌Nocardiacoralline(Bergeyetal.)WaksmanandHenrici珊瑚色诺卡氏菌 (ACCC40100-中国科学院微生物研究所：=AS4. 1037 ;工业污水净化（氧化丙烯腈）；培养 基：0012 ;培养温度：28°C。）、光合细菌Agrobacteriumradiobacter(Betjerinckandvan Deldenl902)Connl942放射形土壤杆菌（ACCC02525 -南京农业大学环境微生物菌种保藏 中心；原始编号：X9,NAECC1701 ;在无机盐培养基中降解30mg/L西维因，降解率为100%， 且能继续降解1-奈酚，降解率为100% ;分离地点：江苏省徐州；培养基0033 ;30°C)、真菌 TrichodermakoningiiOuden.康宁木酶（ACCC30388-中国农业科学院土肥所一山东梁山 石棉厂；纤维素酶生产用菌；培养基：〇〇15 ;培养温度：25~28°C)。
[0045]具体地：把获得的酵母菌（Cyptococcushumicolus(Daszewska)Golubev土生隐 球酵母ACCC20248)乳酸菌（Lactobacillusacidophilus(Moro)Bergeyetal.ACCC10637) 放线菌（Nocardiacoralline珊瑚色诺卡氏菌ACCC40100)光合菌（Agrobacterium radiobacter放射形土壤杆菌ACCC02525)和真菌（TrichodermakoningiiOuden.康宁木 酶ACCC30388)进行平板分离和镜检，确认纯度合格以后，进行分类培养。
[0046] 培养方法是：先将适宜的培养基原料清精选后，按比例配制，加热溶为一起，搅拌 均匀后装瓶。在经过高压灭菌，菌种接种等工序，将制备好的斜面菌种进行培养一周。再进 入摇床三角瓶液体菌种培养，液体菌种温度保持在25°C-28°C的培养室内进行摇动培养。 五-六天菌液达到2亿/克菌孢数量后，再进行菌类混合发酵的第一次发酵进程。发酵的 菌液亦可作为二级液体发酵时所需要的液体种用菌液。
[0047] 也可将10%的菌液以上方法进二次、三次扩大培养，以满足二级液体生产的需要 数量。
[0048] (2)二级扩大发酵及清毒剂制备的方法。
[0049] 配料：首先将硼砂，硝酸铵和硝酸钾结晶固体物质磨成粉，便于在以后工艺和生产 过程中溶解。再按比例称量混合。具体比例是：硼砂含2%，硝酸铵含4%，硝酸钾含3%。 混合粉总重量9%。
[0050]B将海洋藻类制品的海藻酸纳液体，称量为10%。再将A的三种无机营养剂的混 合粉与其混合搅拌均匀，使其溶解。
[0051]C.将50 %经过消毒的无菌水与10%的糖蜜进行混合，进行搅拌均匀，使其溶解， 再与上两种混合物混合。糖蜜是蔗糖生产中的副产品，可以食用，品质可靠。
[0052] D.将总量79%三种ABC成分的混合物，放入发酵灌里，加入21%的一级菌种，进行 二次发酵。发酵温度控制在25-28°C