，经过96小时培养，待菌孢数达到2亿/克时，亦可停 止发酵，待温度自然降至15°C左右，质量已达标准的成品，可以放入贮存罐中保存。
[0053] E.将成品装入贮罐内放置20天，在常温下使其进行后发酵过程，加入稳定剂再进 行小包装成品分装入库。
[0054] (3)工艺流程：
[0055] 筛选细菌类、放线菌类，真菌类，酵母菌类和乳酸菌类菌种，试管斜面菌种培养，摇 床三角瓶液体菌种培养，单类菌种10升玻璃发酵罐培养，第一次多菌种混合1〇〇升发酵，无 机营养物制备-海洋海藻物质制备，第二次1000升混合物发酵，质检镜检，贮存大罐后自然 后期发酵，添加稳定剂，装小瓶，入库。
[0056] 实施例2
[0057] -种土壤环境生物清毒剂配方，单位kg:包括实施例1的微生物菌剂21，无机营养 物质9,海藻精10。糖蜜助剂60;所述无机营养物质为硼砂：硝酸铵：硝酸钾2 : 4 : 3。
[0058] 实施例3
[0059] 验证实施例1制备的土壤环境生物清毒剂的使用效果
[0060] A、实施例1本发明生物消毒剂对重金属等有毒物质的消除作用：
[0061] 对玉米生产中的重金属测试结果原平基点实验
[0062]
[0063] 玉米试验结果表明：施用土壤环境生物清毒剂的玉米，果穗含有毒重金属镉、铬、 铅分别减少了 〇? 〇166、0. 077 和 0? 050,分别下降了L66%、7. 7%、5%。
[0064] 对马铃薯中重金属测试结果神池基点实验
[0065]
[0066] 马铃薯试验表明：施用土壤环境生物清毒剂的马铃薯含重金属镉、铬、铅和酮分别 减少了 0? 0175、0. 1305、0. 0475 和 0? 0725,分别下降了I. 75%、13. 05%、4. 75%、7. 25%。
[0067] B、实施例1本发明生物消毒剂对玉米马铃薯增产作用试验效果
[0068] 对玉米田肥效试验结果表代县西关试点
[0069]
[0070] 试验经方差分析，处理间F值=51. 809,大于FaQ1 = 29. 46,经L、S、D、检验，实清 毒剂的马铃薯比不施的差异达到极为显著水平。
[0071] 本发明选取的五种具有较强清除土壤中有毒污染成分的菌种，使其保持较强的活 性。试验调查表明，施用土壤环境生物清毒剂肥料以后，在30天-50天时间内，农药等有害 物质残留可消失85~90%，连续使用几次亦可清除100%。
[0072] 对马铃薯田肥效试验结果表苛岚阳蒿试点
[0073]
[0074] 试验经方差分析，处理间F值=51. 809,大于Fa01 = 29. 46,经L、S、D、检验，实清 毒剂的马铃薯比不施的差异达到极为显著水平。
【主权项】
1. 一种多功能土壤环境生物清毒剂，是选自至少以下三种不同类微生物制备而成的 微生物菌剂：酵母菌 Sccharomyces sp、乳酸菌 Acerobacterlinium、放线菌 Actinomyces alboc rustisus、光合细菌 Rhodopsendnoonaspalustris 和真菌 Phanerocheele Chrsosporiuru。2. 根据权利要求1的多功能土壤环境生物清毒剂，所述微生物菌分别是酵母菌 Cyptococcus humicolus (Daszewska) Golubev 土生隐球酵母（ACCC20248 -中国农科院土 肥所一美国典型培养物中心ATCC3699)、嗜酸乳酸菌Lactobacillus acidophilus (Moro) Bergey et al.(ACCC10637 -中国农科院土肥所一轻工业食品发酵研究所IFFI6006)、 放线菌 Nocardia coralline (Bergey et al. ) Waksman and Henrici 珊瑚色诺卡氏 菌（ACCC40100 -中国科学院微生物研究所：=AS4. 1037)、光合细菌Agrobacterium radiobacter (Betjerinck and van Deldenl902)Connl942 放射形土壤杆菌（ACCC02525 - 南京农业大学环境微生物菌种保藏中心；原始编号：X9, NAECC1701 ;)、真菌Trichoderma koningii Ouden.康宁木酶（ACCC30388 -中国农业科学院土肥所一山东梁山石棉厂）。3. 根据权利要求1或2的多功能土壤环境生物清毒剂，还包括以下重量份无机营养组 分：硼砂1-3,硝酸铵3-5,硝酸钾2-4,所述无机营养组分占清毒剂总含量的6-9%。4. 根据权利要求3的多功能土壤环境生物清毒剂，还包括以下重量份无机营养组分： 硼砂2,硝酸铵4,硝酸钾3。5. 根据权利要求1、2或3的多功能土壤环境生物清毒剂，还包括海洋藻类植物制品海 藻精（Sargassum),占生物清毒剂总含量的10%。6. 根据权利要求5的多功能土壤环境生物清毒剂，还包括海洋藻类植物制品海藻精 (Sargassum),占生物清毒剂总含量的60 %。7. -种多功能土壤环境生物清毒剂，包括以下重量份组分：权利要求1-2之一的微生 物菌剂18-24 ;无机营养组分8-10,所述无机营养组分包括硼砂1-3,硝酸铵3-5,硝酸钾 2-4 ;、海洋生物制品海藻精（Sargassum) 8-12 ;糖蜜助剂50-70。8. 根据权利要求7的一种多功能土壤环境生物清毒剂，包括以下重量份组分：权利要 求1-2之一的微生物菌剂21 ;无机营养组分9,所述无机营养组分包括硼砂2,硝酸铵4,硝 酸钾3、海洋生物制品海藻精（Sargassum) 10 ;糖蜜助剂50-70。9. 一种权利要求1-8之一的多功能土壤环境生物清毒剂的制备方法，包括 (1) 一级液体微生物剂的培养和配制： 把获得的酵母菌（Cyptococcus humicolus (Daszewska)Golubev 土生隐球酵母 ACCC20248)乳酸菌（Lactobacillus acidophilus (Moro)B ergey et al.ACCC10637) 放线菌（Nocardia coralline 珊瑚色诺卡氏菌 ACCC40100)光合菌（Agrobacterium radiobacter 放射形土壤杆菌 ACCC02525)和真菌（Trichoderma koningii Ouden.康宁木 酶ACCC30388)进行平板分离和镜检，进行分类培养； 所述培养方法是：先将适宜的培养基原料精选后，按比例配制，加热溶为一起，搅拌均 匀后装瓶；再经过高压灭菌，菌种接，将制备好的斜面菌种进行培养一周；再进入摇床三角 瓶液体菌种培养，液体菌种温度保持在25°C _28°C的培养室内进行摇动培养；五-六天菌液 达到2亿/克菌孢数量后，再进行菌类混合发酵的第一次发酵进程；发酵好的多菌液可作为 二级液体发酵时所需要的液体种用菌液； 或将10%的菌液以上方法进二次、三次扩大培养，以满足二级液体生产的需要数量； (2)二级扩大发酵及清毒剂制备的方法： 配料:A首先将硼砂，硝酸铵和硝酸钾结晶固体物质磨成粉，按比例混合。 B取海洋藻类制品的海藻酸纳液体，将所述三种无机营养剂的混合粉与其混合搅拌均 匀，使其溶解； C. 将50%经过消毒的无菌水与10%的糖蜜进行混合，进行搅拌均匀，使其溶解，再与 上两种混合物混合； D. 将总量79%三种ABC成分的混合物，放入发酵灌里，加入21 %的一级菌种，进行二次 发酵。发酵温度控制在25-28°C，经过96小时培养，待菌孢数达到2亿/克时，亦可停止发 酵，待温度自然降至15°C左右，质量已达标准的成品，可以放入贮存罐中保存； E. 将成品装入贮罐内放置20天，在常温下使其进行后发酵过程，加入稳定剂再进行小 包装成品分装入库。10.根据权利要求9的多功能土壤环境生物清毒剂的制备方法，所述步骤包括：筛选细 菌类、放线菌类，真菌类，酵母菌类和乳酸菌类菌种；试管斜面菌种培养；摇床三角瓶液体 菌种培养，单类菌种10升玻璃发酵罐培养，第一次多菌种混合1〇〇升发酵_无机营养物制 备-海洋海藻物质制备，，第二次1000升混合物发酵，质检镜检，贮存大罐后自然后期发酵， 添加稳定剂，装瓶入库。
【专利摘要】本发明公开了一种土壤环境生物清毒剂，是由选自至少以下三种不同类微生物制备而成的微生物菌剂：酵母菌、乳酸菌、放线菌、光合细菌和真菌；该一次发酵菌剂物质还可与无机营养增产物质、海洋藻类生物激素物质二次混合发酵后制成的清毒剂成品。经过多项试验表明，该清毒剂具有较快、较强的清除降解土壤中多种残毒和有害重金属的作用，同时又有明显的促进农作物增产的作用。
【IPC分类】C05G3/00
【公开号】CN105084998
【申请号】CN201410208764
【发明人】段一皋, 王羲元
【申请人】段一皋, 王羲元
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2014年5月19日