专利名称：三七三醇皂苷的制备方法及其应用的制作方法
技术领域：
本发明是关于一种药用植物的提取方法及其应用，更特别的是关于一种从三七中提取三七三醇皂苷的制备方法及其应用。
背景技术：
三七是传统中医学中常用的中药，中国药典记载其功能为散瘀、止血、消肿、镇痛。
三七三醇皂苷是单味中药三七(又名田七，人参三七)的皂苷提取物，是三七活血化瘀有效部位，含有三七中全部的三醇类皂苷，主要成份为人参皂苷Rg1、Re、及三七皂苷R1，有少量的Rb1、Rd等。
三七别名田七、人参三七，为五加科人参属Panaxnotoginseng(Burk)F.H.Chen的根茎，产于云南、广西。三七为常用中药之一，其生物活性和药理作用的主要成分为皂苷类。药理实验结果表明，三七总皂苷能增加动脉血流量、扩张血管、降低动脉血压及心肌耗氧量，提高肌体功能及对缺氧的耐受力，并有抑止血小板聚集、降低血粘度等作用。
血瘀症的治疗，中医有许多宝贵的治法及经验，三七是其中一个重要药物。在心脑血管疾病(如动脉粥样硬化及血栓性疾病)方面，抗血小板类药的地位日益引起人们的瞩目，其中具代表性的是环氧酶抑制剂阿司匹林，它阻止血小板内TX的合成，同时也影响PG，但也正因为这种对酶的不可逆的抑制，造成出血危险，是其带本质的弱点。人们期待着一种对TX更具专属性的抗血小板聚集药，也是当今这类药研究中的热点。三七三醇皂苷只影响TX的活性而不影响PG的活性，显示了其作用特点。国外学者近几年发现人参皂苷Rg1具有抗血小板作用，且正常人体50毫克有效。其作用机理有的学者推论是作用于血小板膜TXA2受体与TXA2的结合部及其之后的部位。有的学者认为是作用于抑制肾上腺素和凝血酶引起的第二相细胞内钙离子的增加，不同于阿司匹林。
近十多年以来，心脑血管疾病已成为严重危害人民身体健康的重要疾病，发病率呈逐年升高的趋势。为了更好的开发我国的传统中药资源，提高中药制剂的内在质量和市场竞争力，对疗效肯定、安全性好的中药品种进行开发，将具有重要的现实意义。
本发明人经多年研究发现，三七总皂苷中的许多成份对抗血小板聚集、防止血栓形成是无效的，真正有作用的是三七三醇皂苷等，有关三七三醇皂苷的制备方法、质量要求、性质，本专利所涉及的相关药理作用以及对人体的作用均未见报道。
发明内容
本发明的目的之一是克服现有技术存在的缺陷，提供一种从三七中提取三七三醇皂苷的生产方法。
本发明的第二个目的是提供一种能预防和治疗心脑血管栓塞性疾病的三七三醇皂苷的制备方法。
本发明的第三个目的是提供一种三七三醇皂苷的应用。
本发明的这些以及其它目的将通过下面的详细描述来进一步体现和说明。
本发明的三七三醇皂苷的制备方法，包括下列步骤
A、取三七粉碎过一号筛，加浓度为50-90％的乙醇浸泡12-30小时，然后均匀压实填入渗漉桶；B、用药材量6-12倍量的60％乙醇渗漉至流出液无皂苷反应，流速为3-7毫升/分钟每千克药材；C、在真空度为0.04-0.1Mpa，温度为50-55℃时减压浓缩渗漉液，回收乙醇，浓缩后的药液无醇味，相对密度在1.06-1.12；D、将浓缩至无醇味后的渗漉液加水至3-6倍量，离心，取清液上柱，滴加速度为3-7毫升/分钟每千克药材；E、经水洗树脂柱后用40％乙醇洗脱，收集40％乙醇洗脱液，过滤，减压浓缩，在55℃时真空干燥，研磨成粉状。
进一步的，本发明的三七三醇皂苷的制备方法，包括下列步骤A、取三七粉碎过一号筛，加浓度为60-90％的乙醇浸泡20-28小时、然后均匀压实填入渗漉桶；B、用药材量8-10倍量的60％乙醇渗漉至流出液无皂苷反应，流速为4-6毫升/分钟每千克药材；C、在真空度为0.05-0.06Mpa，温度为50-55℃时减压浓缩渗漉液，回收乙醇，浓缩后的药液无醇味，相对密度在1.06-1.12；D、将浓缩至无醇味后的渗漉液加水至5-6倍量，离心，取清液上柱，滴加速度为4-6毫升/分钟每千克药材；E、经水洗树脂柱后用40％乙醇洗脱，收集40％乙醇洗脱液，过滤，减压浓缩，在55℃时真空干燥，研磨成粉状。
较好的是，本发明的三七三醇皂苷的制备方法，包括下列步骤A、取三七粉碎过一号筛，加浓度为60％的乙醇浸泡24小时、然后均匀压实填入渗漉桶；B、用药材量10倍量的60％乙醇渗漉至流出液无皂苷反应，流速为5毫升/分钟每千克药材；C、在真空度为0.06Mpa，温度为55℃时减压浓缩渗漉液，回收乙醇，浓缩后的药液无醇味，相对密度在1.06-1.12；D、将浓缩至无醇味后的渗漉液加水至5倍量，离心，取清液上柱，滴加速度为5毫升/分钟每千克药材；E、经水洗树脂柱后用40％乙醇洗脱，收集40％乙醇洗脱液，过滤，减压浓缩，在55℃时真空干燥，研磨成粉状。
在本发明的三七三醇皂苷的制备方法中，渗漉时浸泡液先流尽齐液面，后滴加60％乙醇，控制上下流速相当，不能干柱；在柱层析步骤中用8-10倍量水洗后，再用8-10倍量40％乙醇洗，控制滴加与流出速度相适宜，同样也不能出现干柱；三七三醇皂苷从第一色带开始收集，以TLC鉴别控制收集三七三醇皂苷部分，待不显色即为完成。
在本发明中，将使用过的大孔吸附树脂分离柱以1％盐酸或硫酸乙醇液浸泡12小时，继用蒸馏水冲洗至中性，即可再次使用；大孔吸附树脂的柱径与柱高之比为30∶160，所述的大孔吸附树脂为苯乙烯型共聚体，型号为D-101。
用本发明的制备方法所提取的三七三醇皂苷提取物包含了三七中的所有三七三醇类皂苷，其中人参皂苷Rg1、Re及三七皂苷R1含量依次为58-74％、5.5-8.0％、11.0-14.0，总量为78-89％，产品的有机溶剂残留量达到药品级标准，苯小于2ppm，甲苯、二乙苯分别小于20ppm。所制备的三七三醇皂苷可用于治疗心脑血管栓塞性疾病。
用本发明的方法提取的三七三醇皂苷含量高、质量稳定，色泽好，以其为原料制成的中药制剂将完全能满足现代化中药的要求，并且成本低、三七三醇皂苷损失少；与传统的溶剂萃取法相比，工艺流程中不使用毒性和易挥发的有机溶剂，安全可靠，大大简化了生产工艺。
用本发明的方法提取的三七三醇皂苷对实验性脑缺血、脑梗塞动物具有明显的保护作用，并可明显改善其功能和行为障碍。降低脑血管阻力，增加犬颈内动脉血流量。既可抑制ADP、AA、胶原诱导的大鼠血小板聚集，又可抑制ADP、AA、PAF和凝血酶诱导的人体血小板聚集。同时可降低大鼠全血粘度和红细胞压积，抑制血栓形成。并具有改善微循环的作用。
本发明采用三七总皂苷中的精华-三七三醇类皂苷，因此疗效较普通采用三七总皂苷的药物高许多，并且生物利用度高、携带及给药、服用方便和吸收快，据研究统计，疗效较普通以三七总皂苷为主要成分的中药高50％以上。
以下结合实施例详述本发明，但实施例仅用于说明并不能限制本发明的范围。
在本发明中，若非特指，所有的份、百分比均为重量单位，所有的设备和原材料等均可从市场购得或是本行业常用的。
具体实施例方式
例1三七三醇皂苷(PTS)的化学成分①、三七皂苷C1、D1的分离薄层硅胶(10-40μ青岛海洋化工厂生产)干法装柱(¤42*400mm)。PTS溶于稀醇，拌入薄层硅胶，低温晾干，装入柱顶，氯仿-甲醇-水(65∶35∶10)下相为展开溶剂，自动分样接收器接收，每份20毫升。薄层色谱鉴定，在高效薄层硅胶板(青岛海洋化工厂生产)上点样、水平展开槽上展开，展开溶剂同于柱色谱的展开剂系统，展开后晾干、硫酸乙醇溶液喷雾，105℃烘烤5分钟，或电热吹风机热风烘，取色谱斑点相同的流份合并，Rf值与对照品人参皂苷Rg1一致，蒸除溶剂。
②、人参皂苷Rg1的鉴定经过乙醇—丁酮重结晶，干燥，得到的样品经测试熔点、元素分析、经外光谱13c核磁共振谱测定的及TLC和HPLC色谱分析，该化合物与标准品一致，与文献值一致，确定从三七三醇皂苷中分离的单体化合物为人参皂苷Rg1。
(a)熔点190-192℃191-192.5℃(b)元素分析本院分析室采用CH自动分析仪测定分子式C42H72O14.2H2O理论值(％)C60.22 H9.15实验值(％)C60.27 H9.28与人参皂苷Rg1分子式、C、H测试结果一致。
(c)红外分光谱红外光谱仪(IR171D FTIR)样品的红外光谱图与对照品人参皂苷Rg1的一致。
MaxIRVKBr cm-1，3400(-OH)，1630(c＝c)(d)13C核磁共振谱北京药物所Bruker AM-500仪测试样品及对照品人参皂苷Rg1的13CNMR图谱相同。
皂苷苷元及糖的化学位移值。两者一致。
表5-7人参皂苷Rg1及三七皂苷C1的13CNMR化学位移值e、色谱鉴定供试品溶液三七皂苷C1(分离所得)甲醇溶液2毫克/毫升，PTS甲醇溶液2毫克/毫升。
对照品溶液人参皂苷Rg1，中国药品生物制品检定所提供，甲醇溶液2毫克/毫升。
TLS法取供试品及对照品溶液在高效硅胶板(青岛海洋化工厂生产)上点样7μl，水平展开仪上展开，展距8-9厘米，取出晾干，10％浓硫酸乙醇溶液喷雾，105℃烘烤5分钟，三七皂苷C1与人参皂苷Rg1的Rf值相同。PTS中含有主要成分的Rf值与人参皂苷Rg1相同。
HPLC法三七皂苷C1，人参皂苷Rg1对照品在岛津LC-6AHPLC仪上测试柱WATERS Carbhydrate ¤3.9*300毫米柱压98公斤/厘米2纸速3毫米/分钟流动相乙腈—水(85∶15)结果表明三七皂苷C1为一个单纯化合物，其保留时间与人参皂苷Rg1相同。
以上数据及PLC、HPLC定性鉴定，从三七根中分离得到的三七皂苷C1即为人参皂苷Rg1。
化学名(3β，6α，12β)-3，12-dihydroxydamanar-24-ene-6、20-dylbis-β-D-Glucopyrannoside，即(3β，6α，12β)-3，12-二羟基哒玛烷-24-烯-6、20-双--β-D-吡喃葡萄糖苷。
结构式为
R1＝R2＝Glu③PTS的化学组成生产试制生产产品含量平均值为Rg164.92％，Re7.79％，R112.6％，总和为85.31％。
PTS的化学组成，用TLCS法测定Rg1、D1、Rb1斑点，双波长扫描。
Rg1为对照品计算，见表1表1PTS的化学组成(％)
定性表明PTS中含有少量色素、糖及一些氨基酸，将PTS溶于水，经大孔吸附树脂吸附，不含皂苷的水洗液流经足够量的732[H]树脂柱，流出液不成茚三酮反应，浓缩至干得极少一点黄色物质，称不准重量，用氨水洗脱732树脂柱，浓缩至干，其中含有氨基酸、干燥至恒重，与投入的PTS量计算百分比见表2，该物质经氨基酸分析仪(WATERS-HPLC-AAA系统)分析含有苏氨酸、丝氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、色氨酸等七种AA。
表2PTS水分含量(药典方法测定)
总之PTS中可测定含量成分总和约85％，三七二醇皂苷类(Rb1、Rd类)约6％，732[H]树脂吸附物，氨基酸、肽等约2-3％，水分5-7％。
④三七皂苷D1经分析鉴定为已知成份人参皂苷Re及三七皂苷R1的混合物。
4、PTS的理化性质外观三七三醇皂苷为黄棕色粉末，无嗅，味微苦。
溶解度按中国药典(2000年版附录9溶解度试验法)测试，PTS的溶解度为溶于水、稀乙醇；微溶于乙醇、甲醇；极微溶于丙酮。在乙酸乙酯，氯仿、石油醚中几乎不溶。
熔点本品为一个混合物，熔点范围波动较大，四批样品m.p.180-184℃之间。
批号040326m.p.180-184℃040409m.p.180.0-182.5℃040414m.p.182.0-184.0℃
040427m.p.181.0-183.0℃5、放大试验放大试验，五批每批投料4公斤三七，结果如下表3三七三醇皂苷放大试验数据
十批生产试制产品收率及含量测定结果如下表4三七三醇皂苷生产试制收率含量表
例2按以下步骤制备三七三醇皂苷A、取三七粉碎过一号筛，加浓度为60％的乙醇浸泡14小时，然后均匀，压实填入渗漉桶；B、用药材量6倍量的60％乙醇渗漉至流出液无皂苷反应，流速为3毫升/分钟每千克药材，渗漉时浸泡液先流尽齐液面，后滴加60％乙醇，控制上下流速相当，不能干柱；C、在真空度为0.04Mpa，温度为50-55℃时减压浓缩渗漉液，回收乙醇，浓缩后的药液无醇味，相对密度在1.06-1.12；D、将浓缩至无醇味后的渗漉液加水至3倍量，离心，取清液上柱，滴加速度为3毫升/分钟每千克药材，用9倍量水洗后，再用9倍量40％乙醇洗，控制滴加与流出速度相适宜，不能出现干柱，三七三醇皂苷从第一色带开始收集，以TLC鉴别控制收集三七三醇皂苷部分，待不显色即为完成；E、经水洗树脂柱后用40％乙醇洗脱，收集40％乙醇洗脱液，过滤，减压浓缩，在55℃时真空干燥，研磨成粉状；F、使用过的大孔吸附树脂分离柱以1％盐硫酸乙醇液浸泡过夜，继用蒸馏水冲洗至中性，即可再次使用，大孔吸附树脂的柱径与柱高之比为30∶160，为苯乙烯型共聚体，型号为D-101。
例3按以下步骤制备三七三醇皂苷A、取三七粉碎过一号筛，加浓度为90％的乙醇浸泡28小时，然后均匀，压实填入渗漉桶；B、用药材量12倍量的60％乙醇渗漉至流出液无皂苷反应，流速为7毫升/分钟每千克药材，渗漉时浸泡液先流尽齐液面，后滴加60％乙醇，控制上下流速相当，不能干柱；C、在真空度为0.08Mpa，温度为50-55℃时减压浓缩渗漉液，回收乙醇，浓缩后的药液无醇味，相对密度在1.06-1.12；D、将浓缩至无醇味后的渗漉液加水至6倍量，离心，取清液上柱，滴加速度为7毫升/分钟每千克药材，用8倍量水洗后，再用8倍量40％乙醇洗，控制滴加与流出速度相适宜，不能出现干柱，三七三醇皂苷从第一色带开始收集，以TLC鉴别控制收集三七三醇皂苷部分，待不显色即为完成；E、经水洗树脂柱后用40％乙醇洗脱，收集40％乙醇洗脱液，过滤，减压浓缩，在55℃时真空干燥，研磨成粉状；F、使用过的大孔吸附树脂分离柱以1％硫酸乙醇液冲洗，直至用蒸馏水冲洗至中性，即可再次使用，大孔吸附树脂的柱径与柱高之比为30∶160，为苯乙烯型共聚体，型号为D-101。
例4按以下步骤制备三七三醇皂苷A、取三七粉碎过一号筛，加浓度为75％的乙醇浸没泡24小时，然后均匀压实填入渗漉桶；B、用药材量10倍量的60％乙醇渗漉至流出液无皂苷反应，流速为5毫升/分钟每千克药材，渗漉时浸泡液先流尽齐液面，后滴加60％乙醇，控制上下流速相当，不能干柱；C、在真空度为0.06Mpa，温度为50-55℃时减压浓缩渗漉液，回收乙醇，浓缩后的药液无醇味，相对密度在1.06-1.12；D、将浓缩至无醇味后的渗漉液加水至5倍量，离心，取清液上柱，滴加速度为5毫升/分钟每千克药材，用10倍量水洗后，再用10倍量40％乙醇洗，控制滴加与流出速度相适宜，不能出现干柱，三七三醇皂苷从第一色带开始收集，以TLC鉴别控制收集三七三醇皂苷部分，待不显色即为完成；E、经水洗树脂柱后用40％乙醇洗脱，收集40％乙醇洗脱液，过滤，减压浓缩，在55℃时真空干燥，研磨成粉状；F、使用过的大孔吸附树脂分离柱以1％硫酸乙醇液冲洗，直至用蒸馏水冲洗至中性，即可再次使用，大孔吸附树脂的柱径与柱高之比为30∶160，为苯乙烯型共聚体，型号为D-101。
通过三七三醇皂苷药效学试验表明本品对实验性脑缺血、脑梗塞动物具有明显的保护作用，并可明显改善其功能和行为障碍。降低脑血管阻力，增加犬颈内动脉血流量。既可抑制AD、PAA、胶原诱导的大鼠血小板聚集，又可抑制ADP、AA、PAF和凝血酶诱导的人体血小板聚集。同时可降低大鼠全血粘度和经细胞压积，抑制血栓形成。并具有改善微循环的作用。
例5三七三醇皂苷对大鼠中脑动脉阻塞致脑梗塞的保护作用一、试验目的本试验用灼断大鼠大脑中动脉引起脑梗塞的方法，观察三七三醇皂苷(预防给药组；阻塞后给药治疗组)对局部脑缺血引起的脑功能障碍和梗塞范围的影响。为临床应用该药治疗缺血性脑血管病提供药理依据。
二、试验材料药物三七三醇皂苷浅棕色粉末，人参皂苷Rg1含量68.3％，批号040316，由本院植化室提供，实验前用蒸馏水配成一定浓度(50、25、12.5毫克/毫升)的溶液使用。
尼莫地平天津中央药厂生产。实验前用0.5％阿拉伯胶浆配成一定浓度的混悬液做阳性对照药用。
动物大鼠雄性Wistar，体重250～300克，由本院动物房提供，合格证号津实动设施准第001号。
三、方法与结果1.预防给药实验按动物体重随机分为5组，每组10只，灌胃给药。
(1)缺血对照组灌服蒸馏水4毫升/公斤/日，(2)阳性药对照组尼莫地平50毫克/公斤/日，(3)(4)(5)组分别灌服三七三醇皂苷200、100、50毫克/公斤/日，各组均连续给药7天，于末次给药2小时后，腹腔注射水合氯醛350毫克/公斤麻醉，按阻断大白鼠中脑动脉法[1]暴露出右侧大脑中动脉，在手术显微镜(上海医用光学仪器厂)下，用高频电刀将大脑中动脉灼断，术后，回笼饲养，室温保持在26～27℃，24小时后进行动物行为评分，结果见表1，以此作为脑功能障碍的指标。然后断头取脑，在手术显微镜下证实动物大脑中动脉阻断后放入冷盐水中，10分钟后，取嗅球、小脑及低位脑干。沿冠状面切成5片，将脑切片置于含有1.5毫升4％红四氮唑及0.1毫升1MK2HPO4的5毫升染色液中，避光，37℃温孵30分钟后，取出放入10％福尔马林液中，避光保存，正常组织呈玫瑰红色，缺血区呈白色，将白色组织仔细挖下称重，计算梗塞组织重量占大脑半球重量的百分比，以此比值评价药效，结果见表5。
评分标准[2]如下①提鼠尾，离开地面约1尺，观察两前肢活动情况。正常动物两前肢前伸，对称，手术后缺血脑半球对侧前肢内旋和内收，视程度不同，评0～4分；②将动物置平滑地面上，分别推双肩向对侧移动，检查阻力，正常大鼠双侧阻力对称，向手术对侧推动时阻力下降者，根据下降程度不同，评为0～3分③牵拉两前肢，正常对称，手术后对侧前肢无力，评0～3分。
④动物有不停的向一侧转圈者，加1分。
根据以上标准评分，满分为11分。分数越高，动物的行为障碍越严重。
表5预防给药三七三醇皂苷对阻断大鼠大脑中动脉所致行为障碍的影响 ***P＜0.001(与缺血对照组比较)，采用两组均数的统计分析-t值法进行统计处理。
采用盲法进行评分，结果从表5可见缺血对照组行为障碍最严重，三七三醇皂苷高、中剂量组明显改善行为障碍，低剂量组无明显影响，尼莫地平亦明显降低行为评分。
表6预防给药三七三醇皂苷对阻断大鼠大脑中动脉脑梗塞面积的影响 *P＜0.05，**P＜0.01(与缺血对照组比较)从表6结果可见，三七三醇皂苷和尼莫地平预防给药对阻断大鼠大脑中动脉引起的脑梗塞有明显疗效。脑梗塞组织百分比分别减少了54.2％(P＜0.01)、44.6％(P＜0.05)、25％、33.3％(P＜0.05)，和行为改善的结果一致。
2.治疗给药实验取健康大白鼠50只，腹腔注射水合氯醛350毫升/公斤麻醉，同上法进行大鼠大脑中动脉阻断手术，术后回笼饲养，于术后4小时将大鼠按症状轻重均分为5组，每组10只，灌胃给药。①缺血对照组灌服蒸馏水4毫升/公斤日，②阳性药对照组尼莫地平50毫升/公斤/日，③、④、⑤组分别灌服三七三醇皂苷200、100、50毫升/公斤/日，各组均连续给药六天，并于分组后，每天上午对动物进行行为评分，连续六天，结果见表7，于第七天将动物断头取脑，同前法计算梗塞组织重量占大脑半球重量的百分比，结果见表8。
表7三七三醇皂苷对阻断大鼠大脑中动脉所致行为障碍的影响
*P＜0.05、**P＜0.01(与缺血对照组比较)t值法进行统计处理，n为动物数。
从表7结果可见，三七三醇皂苷高剂量组于给药第5、6天明显改善行为障碍，中、低剂量组有降低行为评分趋势，但无统计学差别，尼莫地平于第5、6天亦明显降低行为评分。
表8三七三醇皂苷对阻断大鼠大脑中动脉脑梗塞面积的影响
*P＜0.05(与缺血对照组比较)表8结果可见，三七三醇皂苷和尼莫地平对阻断大鼠大脑中动脉引起的脑梗塞亦有明显的疗效，脑梗塞组织百分比分别减少了37.1％(P＜0.05)、28.8％、14.3％、31％(P＜0.05)和行为改善结果一致。
四、小结1、三七三醇皂苷预防给药(200、100、50毫克/公斤/日)，尼莫地平(50毫克/公斤/日)连续灌胃给药7天，使阻断大鼠大脑中动脉所致脑梗塞有明显疗效，脑梗塞组织百分比分别减少了54.2％(P＜0.01)、44.6％(P＜0.05)、25％、33.3％(P＜0.05)，明显改善其行为障碍。
2、三七三醇皂苷阻塞后给药的治疗组(200、100、50毫克/公斤/日)、尼莫地平(50毫克/公斤/日)连续灌胃给药6天，使阻断大鼠大脑中动脉所致脑梗塞的梗塞组织百分比分别减少了37.1％(P＜0.05)、28.8％、14.3％、31％(P＜0.05)，亦明显改善脑梗塞大鼠的行为障碍。
实验结果表明三七三醇皂苷对大鼠局部脑缺血有保护作用。
权利要求
1.一种三七三醇皂苷的制备方法，其特征在于包括下列步骤A、取三七粉碎过一号筛，加浓度为50-90％的乙醇浸泡12-30小时，然后均匀压实填入渗漉桶；B、用药材量6-12倍量的60％乙醇渗漉至流出液无皂苷反应，流速为3-7毫升/分钟每千克药材；C、在真空度为0.04-0.1Mpa，温度为50-55℃时减压浓缩渗漉液，回收乙醇，浓缩后的药液无醇味，相对密度在1.06-1.12；D、将浓缩至无醇味后的渗漉液加水至3-6倍量，离心，取清液上柱，滴加速度为3-7毫升/分钟每千克药材；E、经水洗树脂柱后用40％乙醇洗脱，收集40％乙醇洗脱液，过滤，减压浓缩，在55℃时真空干燥，研磨成粉状。
2.根据权利要求1所述的三七三醇皂苷的制备方法，其特征在于包括下列步骤A、取三七粉碎过一号筛，加浓度为60-90％的乙醇浸泡20-28小时、然后均匀压实填入渗漉桶；B、用药材量8-10倍量的60％乙醇渗漉至流出液无皂苷反应，流速为4-6毫升/分钟每千克药材；C、在真空度为0.05-0.06Mpa，温度为50-55℃时减压浓缩渗漉液，回收乙醇，浓缩后的药液无醇味，相对密度在1.06-1.12；D、将浓缩至无醇味后的渗漉液加水至5-6倍量，离心，取清液上柱，滴加速度为4-6毫升/分钟每千克药材；E、经水洗树脂柱后用40％乙醇洗脱，收集40％乙醇洗脱液，过滤，减压浓缩，在55℃时真空干燥，研磨成粉状。
3.根据权利要求1所述的三七三醇皂苷的制备方法，其特征在于包括下列步骤A、取三七粉碎过一号筛，加浓度为60％的乙醇浸泡24小时、然后均匀压实填入渗漉桶；B、用药材量10倍量的60％乙醇渗漉至流出液无皂苷反应，流速为4-5毫升/分钟每千克药材；C、在真空度为0.06Mpa，温度为55℃时减压浓缩渗漉液，回收乙醇，浓缩后的药液无醇味，相对密度在1.06-1.12；D、将浓缩至无醇味后的渗漉液加水至5倍量，离心，取清液上柱，滴加速度为5毫升/分钟每千克药材；E、经水洗树脂柱后用40％乙醇洗脱，收集40％乙醇洗脱液，过滤，减压浓缩，在55℃时真空干燥，研磨成粉状。
4.根据权利要求1-3所述的三七三醇皂苷的制备方法，其特征在于渗漉时浸泡液先流尽齐液面，后滴加60％乙醇，控制上下流速相当。
5.根据权利要求1-3所述的三七三醇皂苷的制备方法，其特征在于在柱层析步骤中用8-10倍量水洗后，再用8-10倍量40％乙醇洗，控制滴加与流出速度相适宜，不能出现干柱。
6.根据权利要求1-3所述的三七三醇皂苷的制备方法，其特征在于三七三醇皂苷从第一色带开始收集，以TLC鉴别控制收集三七三醇皂苷部分，待不显色即为完成。
7.根据权利要求1-3所述的三七三醇皂苷的制备方法，其特征在于将使用过的大孔吸附树脂分离柱以1％盐酸乙醇或1％硫酸乙醇液浸泡过夜，继用蒸馏水冲洗至中性，即可再次使用。
8.根据权利要求1-3所述的三七三醇皂苷的制备方法，其特征在于大孔吸附树脂为苯乙烯型共聚体，型号为D-101，其柱径与柱高之比为30∶160。
9.根据权利要求1-3所述的三七三醇皂苷的制备方法，其特征在于所提取的三七三醇皂苷提取物包含了三七中的所有三七三醇类皂苷，其中人参皂苷Rg1、Re及三七皂苷R1含量依次为58-74％、5.5-8.0％、11.0-14.0，总量为78-89％，产品的有机溶剂残留量达到药品级标准，苯小于2ppm，甲苯、二乙烯苯分别小于20ppm。
10.根据权利要求1-9之一所制备的三七三醇皂苷的应用，其特征在于可用于治疗心脑血管栓塞性疾病。
全文摘要
本发明公开了一种三七三醇皂苷的生产制备方法及其应用，包括取三七粉碎，加浓度为50－90％的乙醇浸泡、渗漉，收集渗漉液，渗漉液减压浓缩，浓缩液用蒸馏水稀释，缓慢加到大孔吸附树脂分离柱中，用40％乙醇洗脱，收集40％乙醇洗脱液，然后再精制得三七三醇皂苷等步骤。用本发明的方法提取的产品包括了三七中全部三七三醇类皂苷，其中人参皂苷Rg156－79％、人参皂苷Re5.0－7.5％、三七皂苷R
文档编号C07J9/00GK1699397SQ200510075040
公开日2005年11月23日 申请日期2005年6月8日 优先权日2004年8月4日
发明者李明劲 申请人:李明劲