用a-b-c-d-衍生的肽和它们的治疗用途的制作方法

专利名称：用a-b-c-d-衍生的肽和它们的治疗用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及治疗性肽的领域，S卩，用A-B-C-D-衍生的新的延长肽和它们的治疗用 途。本发明特别关注的治疗性肽的实例是高血糖素样肽-I(GLP-I)和exendin-4，以及其类 似物。
背景技术：
许多不同的方法已经用于修饰治疗性肽例如GLP-I和exendin-4结构，以提供 体内的更长的作用持续时间。例如，WO 2006/097538、WO 2006/097536、WO 2006/037810、 W02006005667, W02005/027978、WO 98/08871 和 US 2001/0011071 描述了各种 GLP-1 类似 物和其衍生物。许多糖尿病患者，特别是2型糖尿病部分的患者易于产生所谓的“针头恐惧”，即， 自己注射的相当的担忧。在2型糖尿病部分中，大多数患者用口服的降血糖试剂治疗，由于 GLP-I化合物预计是这些患者将要施用的可注射的药物产品，注射的担忧可能成为临床上 非常有前景的化合物的广泛应用的严重障碍。因而，需要开发新的化合物，其可以低于每天 一次地，例如，每两天或三天一次、优选的每周一次地施用，而保持了可接受的临床概况，或 任选地通过非侵入性的施用例如肺部的、鼻部的、舌下的、口腔的或口服施用来施用。本发明的一个目的是提供长期作用的，即，具有如上所述的施用方式的肽衍生物， 例如GLP-I、exendin-4或其类似物的衍生物。本发明的另一个目的是提供具有高效价(受体亲和力)的肽衍生物，例如GLP-1、 exendin-4或其类似物的衍生物，以降低使用的治疗剂量用于每周s. c.给药一次，或作为 选择用于非侵入性的递送。进一步的目的是提供GLP-I或其类似物的衍生物，当比较存在极低浓度的人白蛋 白的情况下的亲和力与存在更高浓度的人白蛋白的情况下的亲和力时，其对GLP-I受体的 亲和力仅被部分地降低。结合亲和力方面的改变优选地是低的。本发明的另一个目的是提供肽衍生物，例如具有高白蛋白结合亲和力的GLP-I或 其类似物的衍生物，其保护所述肽免于蛋白水解降解并降低所述肽的肾脏清除。效价，特别是在存在低和高白蛋白浓度的情况下对GLP-I受体的结合亲和力的比 值，半衰期，和对白蛋白的结合亲和力，是实现具有每周施用一次的潜力，长期作用、稳定和 当然地治疗活性的肽衍生物例如GLP-I衍生物的总体目标的潜在相关的性质。本发明的肽衍生物优选地是化学上、物理上和酶学上稳定的。发明概述本发明涉及包含肽的肽衍生物，其中至少一个氨基酸残基是用A-B-C-D-衍生的， 其中A-是 其中R是低级的线性或支链烷基，例如异丁基，ρ选自由10、11、12、13和14构成 的组，d选自由0、1、2、3、4和5构成的组，和-B-选自以下构成的组
其中χ选自由0、1、2、3和4构成的组，y选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和 ？
12构成的组，或者A是
其中η选自由14、15、16、17、18和19构成的组，B选自以下构成的组 其中χ选自由0、1、2、3和4构成的组，和-C-选自以下构成的组 其中b和e各自独立地选自由O、1和2构成的组，c和f各自独立地选自由O、1和 2构成的组，条件是当c是O时b是1或2，或当c是1或2时b是0，和当f是0时6是1 或2，或当f是1或2时e是0，和
-D-附着到所述氨基酸残基上，并且是接头、代表键、或没有。本发明还涉及这些肽衍生物的组合物和用途。发明的描述
定义和特定的实施方式在本说明书中，以下术语具有所指明的含义在此使用的术语“多肽”和“肽”是指 由通过肽键连接的至少五个组成氨基酸组成的化合物。组成氨基酸可以来自由遗传密码编 码的氨基酸的组，它们可以是不由遗传密码编码的天然氨基酸，以及合成氨基酸。不由遗 传密码编码的天然氨基酸有例如Y-羧基谷氨酸、鸟氨酸、磷酸丝氨酸、D-丙氨酸和D-谷 氨酰胺。合成的氨基酸包括通过化学合成制造的氨基酸，即，由遗传密码编码的氨基酸的 D-同分异构体，例如D-丙氨酸和D-亮氨酸、Aib ( α -氨基异丁酸)、Abu ( α -氨基丁酸)、 Tle (叔-丁基甘氨酸)、β -丙氨酸、3-氨基甲基苯甲酸、邻氨基苯甲酸。22种成蛋白(proteogenic)氨基酸是丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱 氨酸、胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、羟脯氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲 硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸。因而，非成蛋白氨基酸(其也可以称为非天然氨基酸)是可以经由肽键掺入到肽 中、但是不是成蛋白氨基酸的部分。实例有Y-羧基谷氨酸、鸟氨酸、磷酸丝氨酸，D-氨基 酸，例如D-丙氨酸和D-谷氨酰胺，合成的非成蛋白氨基酸包括通过化学合成制造的氨基 酸，即，由遗传密码编码的氨基酸的D-同分异构体，例如D-丙氨酸和D-亮氨酸、Aib ( α -氨 基异丁酸)、Abu( α -氨基丁酸)、Tle (叔丁基甘氨酸)、3_氨甲基苯甲酸、邻氨基苯甲酸、 脱-氨基-组氨酸(缩写去氨基His，可选择的名称咪唑并丙酸，缩写Impr)，氨基酸的β 类似物，例如β-丙氨酸等等，D-组氨酸、2-氨基-组氨酸、β-羟基-组氨酸、高组氨酸、 Na-乙酰基-组氨酸、α-氟甲基-组氨酸、α -甲基-组氨酸、α , α-二甲基-谷氨酸、 m-CF3-苯丙氨酸(缩写m-CF3-Phe) ,α, α-二氨基丙酸(缩写Dap)、2_萘基-苏氨酸(缩 写2-萘基-Thr或-T)、3_吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸、(1_氨基环 丙基)羧酸、(1-氨基环丁基)羧酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、(ι-氨 基环庚基)羧酸或(1-氨基环辛基)羧酸。术语ε -氨基-Lys (或ε -Lys)意图表明，赖氨酸残基经由它的ε氨基基团、而非 经由(作为通常的情况)它的α氨基基团结合到肽例如GLP-I (7-37)肽或其类似物(参 见，例如，实施例53的化合物)。在此关于多肽使用的术语“类似物”是指修饰的肽，其中肽的一个或更多个氨基酸 残基被其他氨基酸残基替代，和/或其中一个或更多个氨基酸残基从肽上删除，和/或其 中一种或更多种氨基酸残基被添加到所述肽中。氨基酸残基的这种添加或删除可以在肽的 N-末端和/或在肽的C-末端发生。一种简单的系统常常用于描述类似物例如，[Arg34] GLP-I (7-37) Lys是指 GLP-I (7-37)类似物，其中位置34处的天然存在的赖氨酸被精氨酸替代，以及其中赖氨酸 添加到末端氨基酸残基，即添加到Gly37。旋光异构体没有声明的所有氨基酸被理解为是指L-同分异构体。在本发明的肽衍生物的特定的实施方式中，接头D是没有的，意味着肽仅用 A-B-C-衍生。
在另一个特定的实施方式中，接头D被包括，并且包含至少5、8、10、19、20、29、41
或至少60个非氢原子。在更进一步特定的实施方式中，所述接头的30-50 % (例如，34、38、40、41或 42%)的非氢原子由N或0原子组成。功能性质本发明的许多肽衍生物已经如实验部分所描述的被合成并测试。本发明的肽衍生物具有几种有利的和有益的性质，如在下文、参考实施例所解释 的。在第一个方面，本发明的肽衍生物具有延长的作用概况，这使得它潜在地适合于 比每日一次更低频率地施用、优选的具有每周一次、或甚至更低频率地施用的潜力。作用的 概况可以用实验动物例如小鼠或猪在药物动力学实验中评估。适合的实验在本申请的实施 例73(迷你猪)和实施例77(小鼠)中找到。如在迷你猪实施例73中描述的，(i)肽衍生物可以s. C.或i. v.，优选地s. C.施 用；(ii)猪优选的是Gdttingen迷你猪，优选的约5个月大和体重8-iokg ;(iii)动物在施 用之前优选地禁食，优选地如所描述的禁食；(iv)注射优选地如所指出的进行；(ν)测试的 动物的数量优选地如所指出的；(Vi)剂量优选地是如所指出的；和/或(Vii)还优选地如 这个实施例中所指出的采集、收集和分析血液样品。药物动力学实验如在实施例73中的，产生了所讨论的化合物对照时间的血浆浓 度分布图，在其基础上可以测定半衰期T1/2。在第一个特定的实施方式中，肽例如GLP-1、本发明的衍生物在迷你猪中s. c.施 用之后的半衰期是超过18小时，优选的超过24小时，更优选的超过28小时，再更优选的超 过30小时，最优选的超过32小时。在第二个特定的实施方式中，本发明的肽衍生物在迷你猪中s. C.施用之后的半 衰期是超过32小时，优选的超过34小时，更优选的超过36小时，再更优选的超过38小时， 最优选的超过40小时。在第三个特定的实施方式中，本发明的肽衍生物在迷你猪中s. c.施用之后的半 衰期是超过45小时，优选的超过50小时，更优选的超过55小时，再更优选的超过60小时， 最优选的超过65小时。在第四个特定的实施方式中，本发明的肽衍生物在迷你猪中s. C.施用之后的半 衰期是超过45小时，优选的超过50小时，更优选的超过55小时，再更优选的超过60小时， 最优选的超过65小时。在第五个特定的实施方式中，本发明的肽衍生物在迷你猪中s. C.施用之后的半 衰期是超过70小时，优选的超过75小时，更优选的超过80小时，再更优选的超过85小时， 最优选的超过90小时。在第六个特定的实施方式中，本发明的肽衍生物在迷你猪中s. C.施用之后的半 衰期是超过92小时，优选的超过94小时，更优选的超过96小时，再更优选的超过98小时， 最优选的超过100小时。因此，本发明的肽衍生物的示范性的半衰期时间(以小时标明的时间，h)，在 s. c.施用的迷你猪中测定的，是20-100,30-100,40-100,50-100,60-100,70-100,80-100或90-100 (小时)。 本发明的肽衍生物例如GLP-I衍生物的半衰期还可以在db/db小鼠中的剂量_反 应研究中测定，例如，如实施例77所描述的。如这个实施例中所描述的(i)小鼠优选地来 自Taconic ;(ii) 10-12周龄；(iii)对标准饲料例如Altromin 1324和自来水的自由取用； (iv)保持在24dgC ； (ν)驯化一周；(vi)根据匹配平均血糖值分配到7个组中(优选的η = 6) ； (vii)如实施例中描述的接受处理；(viii)如所描述的给药；(ix)根据所描述的方案 评估血糖，优选的如所描述的分析；和/或(χ)根据血糖vs.时间测定，优选的如实施例中 描述的测定半衰期。在第一个特定的实施方式中，肽衍生物例如本发明的GLP-I衍生物在db/db小鼠 中s. c.施用施用之后的半衰期是超过10小时，优选的超过11小时，更优选的超过12小时， 再更优选的超过13小时，最优选的超过14小时。在第二个特定的实施方式中，本发明的肽衍生物在db/db小鼠中s. C.施用之后的 半衰期是超过15小时，优选的超过16小时，更优选的超过17小时，再更优选的超过18小 时，最优选的超过19小时。在第三个特定的实施方式中，本发明的肽衍生物在db/db小鼠中s. C.施用之后的 半衰期是超过20小时，优选的超过21小时，更优选的超过22小时，再更优选的超过23小 时，最优选的超过24小时。在第四个特定的实施方式中，本发明的肽衍生物在db/db小鼠中s. C.施用之后的 半衰期是超过25小时，优选的超过26小时，更优选的超过27小时，再更优选的超过28小 时，最优选的超过29小时。在第五个特定的实施方式中，本发明的肽衍生物在db/db小鼠中s. C.施用之后的 半衰期是超过30小时，优选的超过31小时，更优选的超过32小时，再更优选的超过33小 时，最优选的超过34小时。因而，本发明的肽衍生物的示范性的半衰期时间(按小时标明的时间，h)，在 s. c.施用的 db/db 小鼠中分析的，是5-35、10-35、15-35、20-35 或 25-35 (小时)。在第二个方面，本发明的肽衍生物具有可接受的、优选的高效价(在它的受体 上)。促胰岛素试剂例如本发明的GLP-I衍生物的效价通过从如实施例74描述的剂量反应 曲线计算EC5tl值来确定。在此使用的术语“促胰岛素试剂”是指作为人类GLP-I受体的激动剂的衍生物， 艮口，刺激含有人类GLP-I受体的适合的介质中cAMP形成的衍生物(下文公开了一种这样的 介质)。在特定的实施方式中，(i)使用表达克隆的人类GLP-I受体的婴儿仓鼠肾脏(BHK) 细胞，优选的 BHK-467-12A，更优选的 BHK-467-12A(tk-tsl3) ； (ii)细胞在添加了 100IU/ mL青霉素、100μ g/mL链霉素(1 % Pen/Str印)、5%胎牛血清(FCS)和0. 5mg/mL遗传霉素 G-418(Life Technologies)的DMEM培养基中，优选的在5% C02下生长；(iii)细胞，优选 的在大约80%汇合时，在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中洗涤两次；(iv)细胞用乙二胺四乙酸的 四钠盐，例如Versene的水溶液收获；(ν)质膜通过勻质化、优选的在缓冲液1中从细胞制 备；(iv)例如，在48，OOOXg在4°C 15分钟，离心勻浆物；和/或(vii)团粒在缓冲液2中 勻质化来悬浮；步骤(vi)和(viii)优选的重复，例如更多一次或两次。
功能性受体分析可以如实施例74中描述的通过测量环化AMP (cAMP)作为对促胰 岛素试剂的刺激的反应来进行。形成的cAMP优选的通过AlphaScreen cAMP Kit(Perkin Elmer Life Sciences)来定量。孵育可以在总体积50 μ 1的缓冲液3 (50mM Tris-HCI, 5mMHEPESU0mM MgCl2, pH 7.4)和具有以下添加物的半区域96孔微量滴定板中进行lmM ATPU μ M GTP、0. 5mM 3_ 异丁基 甲基黄嘌呤(IBMX)、0· 01 % Tween_20、0· 1% BSA,6y g 膜制品、15 μ g/mL接受体珠子、与6nM生物素基-cAMP预孵育的20 μ g/mL供体珠子。测试激 动剂活性的衍生物优选的在缓冲液3中溶解和稀释。GTP对每个实验新鲜地制备。平板在室 温下在暗处缓慢搅动孵育三小时，随后在Fusion 仪器(Perkin Elmer Life Sciences)中 计数。对单独的衍生物标绘浓度_反应曲线，利用Prism，优选的版本4. 0或5. 0 (GraphPad, Carlsbad, CA)的四参数逻辑模型估计EC5tl值。在第一个特定的实施方式中，如利用cAMP分析测定的，本发明的GLP-I衍生物具 有的效价(按nM的EC5tl)低于4. 00、优选的低于3. 50、更优选的低于3. 00、再更优选的低 于2. 50和最优选的低于2. 00 (nM)。在第二个特定的实施方式中，如利用cAMP分析测定的，本发明的GLP-I衍生物具 有的效价(按nM的EC5tl)低于1.80、优选的低于1.60、更优选的低于1.40、再更优选的低 于1. 20和最优选的低于1. 00 (nM)。 在第三个特定的实施方式中，如利用cAMP分析测定的，本发明的GLP-I衍生物具 有的效价(按nM的EC5tl)低于0. 80、优选的低于0. 60、更优选的低于0. 40、再更优选的低 于0. 20和最优选的低于0. 10 (nM)。在第四个特定的实施方式中，如利用cAMP分析测定的，本发明的GLP-I衍生物具 有的效价(按nM的EC5tl)低于0. 090、优选的低于0. 080、更优选的低于0. 070、再更优选的 低于0. 060和最优选的低于0. 050 (nM)。在第五个特定的实施方式中，如利用cAMP分析测定的，本发明的GLP-I衍生物具 有的效价(按nM的EC5tl)低于0. 040、优选的低于0. 030、更优选的低于0. 020和最优选的 低于 0. 010 (nM)。因而，本发明的GLP-I衍生物的示范性的效价范围(按照nM的EC5tl，如使用 cAMP 分析测定的)是 0. 010-2. 00，0. 010-1. 80，0. 010-1. 60，0. 010-1. 40，0. 010-1. 20， 0. 010-1. 00,0. 010-0. 80,0. 010-0. 60,0. 010-0. 40,0. 010—0. 30,0. 010—0. 20,0. 010—0. 10， 和 0. 010-0. 90(nM)，优选的 0. 010-0. 40，0. 010-0. 30，0. 010-0. 20，0. 010-0. 10，和 0. 010-0. 90 (nM)。在第六个特定的实施方式中，本发明的GLP-I衍生物可以同时结合白蛋白和 GLP-I受体。例如，本发明的GLP-I衍生物可以在存在2%白蛋白的情况下以低于ΙΟΟηΜ、优 选的低于30nM的亲和力结合GLP-I受体。在第三个方面，本发明的GLP-I衍生物具有对GLP-I受体的亲和力，当比较在存在 极低浓度(例如0. 005%到0.2%)的人白蛋白的情况下的亲和力与存在2%人白蛋白的情 况下的亲和力时(高/低)，所述亲和力仅部分地降低。在这些条件下结合亲和力的改变优 选低于100倍，更优选的低于50倍，再更优选的低于30倍，最优选的低于10倍。在人白蛋 白的高浓度和低浓度下受体的结合亲和力可以如实施例75中描述的测定。在第一个特定的实施方式中，本发明的GLP-I衍生物具有的[(IC5tlAiM)高HSA]/[(IC5tlAiM)超低HSA]的比例低于500、优选的低于400、更优选的低于300、再更优选的低于 200、最优选的低于100。在第二个特定的实施方式中，本发明的GLP-I衍生物具有的[(IC5tlAiM)高HSA]/ [(IC5tlAiM)超低HSA]的比例低于90、优选的低于80、更优选的低于70、再更优选的低于69、 最优选的低于50。在第三个特定的实施方式中，本发明的GLP-I衍生物具有的[(IC5tlAiM)高HSA]/ [(IC5tlAiM)超低HSA]的比值低于40、优选的低于35、更优选的低于30、再更优选的低于25、 最优选的低于20。在第四个特定的实施方式中，本发明的GLP-I衍生物具有的[(IC5tlAiM)高HSA]/ [(IC5tlAiM)超低HSA]的比值低于15、优选的低于10、更优选的低于8、再更优选的低于5、 最优选的低于4。因此，[(IC5Q/nM)高HSA] / [ (IC5Q/nM)超低HSA]的比值的示范性的范围是2-500、 2-300、2-100、2-50、2-30、2-20和2_10。在第四个方面，本发明的肽衍生物具有高白蛋白结 合亲和力。白蛋白是指人血清白蛋白(HSA)，亲和 力可以如实施例76中描述的测定。GLP-I衍生物对人血清白蛋白(HSA)的亲和力可以通过竞争性闪烁亲近分析 (SPA)来测量，优选的通过(i)孵育链霉抗生物素蛋白-SPA珠子(例如GE Healthcare RPNQ0009)与生物素化的HSA，例如5小时；(ii)用缓冲液洗涤所述珠子；(iii)优选的在含 有 IOOmM HepesUOOmM NaClUOmM MgS04、0. 025% Tween_20、pH 7. 4 的缓冲液中，将所述混 合的珠子与125I标记的酰化的GLP-I类似物，例如N- ε 26_[2_(2_{2_[2_(2_{2_[ (S)_4_羧 基-4-(17-羧基-十七烷酰基氨基)丁酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰氨基]乙氧基}乙氧 基)乙酰基]从让8，1251-171~19，八印34]61^-1(7-37)或 N- ε 37-[2- (2-[2- ((S) ~4~ ((S) ~4~ ( 12-[4-(16-(1Η-四唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰氨基]十二烷酰基氨基)-4-羧基 丁酰氨基)-4-羧基丁酰氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基][Aib8，125I-Tyrl9，Glu22，Arg26， 34，Lys37]GLP-I (7-37)-NH2混合；(iv)将所述混合物转移到闪烁计数器例如PerkinElmer 0ptiplate-96 6005290的反应孔中(100 μ 1每孔)，利用在优选的相同缓冲液中的、GLP-I 衍生物的适合的稀释度系列的合适体积例如100 μ 1 ； (ν)在适合的孵育时间例如20小时后 离心所述平板，优选的柔和摇动，更优选的在室温下；(vi)在例如TopCoimter上对平板计 数；和/或(vii)作为GLP-I衍生物浓度的函数标绘结合的cpm。竞争曲线的EC5tl值优选 地用作衍生物对HSA的亲和力的度量。HSA结合亲和力还可以表示为表观Kd(离解平衡常 数的Kd)。在第一个特定的实施方式中，白蛋白结合亲和力(即，如使用实施例76的分析测 量的，竞争曲线的EC5tl值(按照nM))低于3000、优选的低于2500、更优选的低于2000、再 更优选的低于800和最优选的低于600 (nM)。在第二个特定的实施方式中，白蛋白结合亲和力(即，如使用实施例76的分析测 量的，竞争曲线的EC5tl值(按照nM))低于500、优选的低于400、更优选的低于300、再更优 选的低于200和最优选的低于100 (nM)。因此，本发明的GLP-I衍生物的白蛋白结合亲和力的示范性的范围(按照 nM 的 EC5tl)是1-3000，1-2500，1-2000，100-2000，200-2000，400-1500，600-1500，和 800-1500(nM)。
其他定义和特定的实施方式可以根据本发明的衍生的其他肽的实例是具有低于lOOkDa、低于50kDa或低于 lOkDa的摩尔重量的治疗性肽。可以根据本发明的衍生的其他肽的实例是Exendine 4、人生长激素、人类胰岛 素、凝血因子包括因子VII、因子VIII、因子IX、因子X、因子XIII、甲状旁腺激素、uman 促滤泡激素、血小板衍生生长因子(PDGF)、转化生长因子a (TGF-a)、转化生长因子 3 (TGF-日)、表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、生长调节素例如胰岛素生 长因子I (IGF-I)、胰岛素生长因子n (ire-n)、促红细胞生成素(EP0)、促血小板生成素 (TP0)或血管生成素、干扰素、尿激酶原、尿激酶、组织纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激 活物抑制物1、纤溶酶原激活物抑制物2、von ffillebrandt因子、细胞因子、例如白细胞介 素，如白细胞介素(IL) UIL-lRa, IL-2, IL-4，IL-5，IL-6，IL-9，IL-11，IL-12，IL-13，IL-15， IL-16，IL-17，IL-18，IL-20或IL-21、集落刺激因子(CFS)例如GM-CSF、干细胞因子、肿瘤 坏死因子例如TNF-a、淋巴细胞毒素- a、淋巴细胞毒素、⑶40L、或⑶30L、蛋白酶抑制 物例如抑酶肽、酶，例如过氧化物歧化酶、天冬酰胺酶、精氨酸酶、精氨酸脱氨酶、腺苷脱氨 酶、核糖核酸酶、过氧化氢酶、尿酸酶、胆红素氧化酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性磷酸酶、 3 -glucoronidase、嘌呤核苷磷酸化酶或巴曲酶(batroxobin)、鸦片样物质，例如内啡肽、 脑啡肽或非天然的鸦片样物质、激素或神经肽，例如降钙素、高血糖素、促胃液素、促肾上腺 皮质激素(ACTH)、胆囊收缩素、促黄体生成激素、促性腺激素释放激素、绒毛膜促性腺激素、 促皮质素释放因子、加压素、缩宫素、抗利尿激素、促甲状腺激素、促甲状腺激素释放激素、 松弛素、催乳素、肽YY、Y2受体激动剂、Y4受体激动剂、混合的Y2/Y4受体激动剂、神经肽Y、 胰腺多肽、瘦素(leptin)、CART(可卡因和安非他明调节的转录产物)、CART相关肽、脂滴包 被蛋白(perilipin)、促尿钠排泄肽、肾上腺髓质素、内皮素、胰泌素、胰淀素(amylin)、血 管活性肠肽(VIP)、垂体腺苷酸环化酶活化多肽(PACAP)、铃蟾素、铃蟾素样肽、胸腺素、肝 素结合蛋白、可溶的⑶4、下丘脑释放因子、melanotonins和其类似物、hematide和其类似 物。在此使用的术语“下游的每个氨基酸残基”是指相对于特定的氨基酸，位置朝向 C-末端的每个氨基酸。例如，Lys34、Gly35和Arg36和Gly37是GLP-1 (7-37)中Val33的 下游的每个氨基酸残基。在本发明的一个方面，根据本发明的的衍生物的C-末端可以以酸或酰胺结尾。在 优选的方面，本发明的衍生物的C-末端是酰胺。在另一个优选的方面，本发明的衍生物的 C-末端是酸。在本发明的实施方式中，最多17个氨基酸被修饰。在本发明的实施方式中，最多 15个氨基酸被修饰。在本发明的实施方式中，最多10个氨基酸被修饰。在本发明的实施方 式中，最多8个氨基酸被修饰。在本发明的实施方式中，最多7个氨基酸被修饰。在本发明 的实施方式中，最多6个氨基酸被修饰。在本发明的实施方式中，最多5个氨基酸被修饰。 在本发明的实施方式中，最多4个氨基酸被修饰。在本发明的实施方式中，最多3个氨基酸 被修饰。在本发明的实施方式中，最多2个氨基酸被修饰。在本发明的实施方式中，1个氨 基酸被修饰。在此相关于肽使用的术语“衍生物”是指化学修饰的肽或其类似物，其中至少一个取代基在未修饰的肽或其类似物中不存在，即，被共价修饰的肽。典型的修饰物是酰胺、碳 水化物、烷基基团、酰基基团、酯，等等。根据本发明的GLP-1 (7-37)的类似物的衍生物的实 例是N- e 37 {2- [2- (2_ {2_ [2_ ((R) -3-羧基3- {[1_ (19-羧基十九烷酰基)哌啶_4_羰基] 氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[去氨基 his7，glu22，arg26，arg34，lys37]GLP-1 (7-37)酰胺其中在位置37的天然存在的Gly被赖 氨酸取代，所述赖氨酸在N- ￡ 37用{2- [2- (2- {2- [2- ((R) -3-羧基3- {[1_ (19-羧基十九烷 酰基)哌啶-4-羰基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧 基}乙酰基(结构1)衍生化 结构 1
和其中在位置7的天然存在的组氨酸被去氨基His取代，在位置22的天然存在的 甘氨酸被谷氨酸取代，在位置26和34的赖氨酸被精氨酸取代。在此使用的术语“GLP-1 肽”是指 GLP-1 (7-37) (SEQ ID NO 1)或其 GLP-1 (7-37) 类似物。在本发明的一个方面，GLP-1肽选自以下构成的组[去氨基 His7, Glu22, Arg26, Arg34, Lys37]GLP-1 (7-37)酰胺，[去氨基 His7, Arg34]GLP-1-(7-37), [Aib8, Glu22, Arg26, Arg34, Lys37] GLP-1-(7-37)酰胺，[去氨基 His7，Glu22 Arg26, Arg 34，Phe (m-CF3) 28] GLP-1- (7-37)酰胺，[去氨基 His7，Glu22, Arg26, Arg34]GLP-1-(7-37)-Lys,[去氨基 His7，Glu22, Arg26, Arg34]GLP-1-(7-37)-Lys,[去氨基 His7，Arg26，Arg34，]GLP_1_ (7-37)-Lys,[去氨基 His7, Glu22, Arg26, Arg34, Lys37]GLP-1-(7-37)酰胺，[去氨基His7，Arg26, Arg34, Lys37]GLP-1-(7-37)酰胺，[去氨基 His7, Glu22, Arg26, Arg34, Lys37]GLP-1-(7-37)，[去氨基 His7, Arg26, Arg34, Lys37]GLP-1-(7-37)，[去氨基 His7, Glu22, Arg26, Glu30, Arg34, Lys37]GLP-1-(7-37)，[Aib8，Lys20，Arg26，Glu30，Thr(0-苯甲基)33，]GLP-1-(7-37)酰胺，[Aib8, Glu22, Arg26, Lys30]GLP-1-(7-37), [Aib8, Glu22, Arg26, Lys 31] GLP-1-(7-37)，[八让8，1^820，4印26，2-萘基丙氨酸28，611130，]61^-1(7-37)酰胺，[Aib8, Glu22, Arg26, Arg34, ]GLP-1-(7-37)-Lys,[Aib8, Lys20, Arg 26，2_ 萘基丙氨酸 12，Glu30，]GLP_l-(7_37)酰胺，[Aib8, Glu22, Arg26, Lys31, Arg34]GLP-1-(7-37)，[Aib8, Arg34]GLP-1-(7-37),
[Aib8, Arg34]GLP-l-(7-37)-酰胺，[Aib8, Lysl8, Arg26, Arg34]GLP-l (7-37)，[Aib8, Glu22, Arg26, Arg34, Lys37]GLP_l-(7_37)酰胺，[Aib8, Lys 26]GLP_1 (7-37)酰胺， [Aib8, Arg34]GLP-l-(7-34),[Aib8, Arg34]GLP-l-(7-35),[Aib8, Lys33, Arg34]GLP_l-(7_34)，[Aib8, Arg34]GLP-l-(7-36)酰胺，[Aib8, Lys26, Arg34]GLP_l-(7_36)酰胺，[Aib8, Glu22, Arg26, Arg34]GLP-l-(7-37) Lys,[Aib8, Lys20, Glu22, Arg26, Glu30, Pro37]GLP-l-(7-37)酰胺，[Aib8, Glu22, Arg26, Arg34, Lys37]GLP_l-(7_37)酰胺，[去氨基 His7，Glu22, Arg26, Arg34, Lys37]GLP_l-(7_37)酰胺，[去氨基His7，Arg26, Arg34, Lys37]GLP-l-(7-37)酰胺，Aib8, Glu22, Arg26, Glu30, Pro37]GLP-l-(7-37) Lys,[Aib8, Glu22, Arg26, Glu30, Pro37]GLP-l-((7_37)Lys，和[Aib8, Arg26, Arg34]GLP_l-(7_37)。在本发明的一个方面，GLP-1肽是 Argl8，Leu20, Gln34，Lys33 (N ￡ - ( Y -氨 基丁酰基(N a -十六烷酰基)))Exendin-4-(7-45)-酰胺或 Arg33，Leu20, Gln34, Lysl8(Ne -(y-氨基丁酰基(Na -十六烷酰基)))Exendin-4-(7-45)-酰胺。在此相关于肽使用的术语“衍生物”是指化学修饰的肽或其类似物，其中至少一个 取代基在未修饰的肽或其类似物中不存在，即，被共价修饰的肽。典型的修饰是酰胺、碳水 化物、烷基基团、酰基基团、酯，等等。肽例如GLP-1肽中的任何氨基酸位置可以被衍生化。在本发明的一个方面，被衍 生化的氨基酸残基包含氨基基团。在一个方面，衍生化的氨基酸残基包含氨基基团。在进 一步的方面，衍生化的氨基酸残基包含侧链中的伯氨基基团。在进一步的方面，衍生化的氨 基酸残基是赖氨酸。在本发明的一个方面，衍生化的氨基酸残基是半胱氨酸。在本发明的 一个方面，一个氨基酸残基被衍生化。在本发明的再进一步的方面中，根据本发明的衍生物 仅在一个位置衍生化，例如，仅一个氨基酸残基被衍生化。包含氨基基团的氨基酸残基的实例有赖氨酸、鸟氨酸、￡ -N-烷基化的赖氨酸，例 如e -N甲基赖氨酸、0-氨基乙基丝氨酸、0-氨基丙基丝氨酸或在侧链中含有伯或仲氨基基 团的更长的0-烷基化的丝氨酸。在本发明的进一步的方面，衍生化的氨基酸残基包含侧链 中的伯氨基基团。包含伯氨基团的氨基酸残基的实例是赖氨酸、鸟氨酸、0-氨基乙基丝氨 酸、0-氨基丙基丝氨酸、或在侧链中含有伯氨基团的更长的0-烷基化的丝氨酸。在一个实施方式中，根据本发明的的GLP-1肽的衍生物是促胰岛素试剂。在此使用的术语“促胰岛素试剂”是指一种衍生物，其是人类GLP-1受体的激动 剂，即，刺激含有人类GLP-1受体的适合的介质中cAMP的形成的衍生物(一种这样的介质 在下文公开)。促胰岛素试剂的效价通过如下描述的从剂量反应曲线计算EC5(i值来确定。表达克隆的人类GLP-1受体的婴儿仓鼠肾脏(BHK)细胞(BHK-467-12A)在DMEM培养基中重新生长，所述培养基添加了 100IU/mL青霉素、lOOyg/ml链霉素、5%胎牛血清 和0. 5mg/mL遗传霉素G_418(Life Technologies)。细胞在磷酸盐缓冲盐水中洗涤两次，用 Versene 收获。质膜通过在缓冲液 1 (20mM HEPES-Na、lOmMEDTA，pH 7. 4)中用 Ultraturrax 勻质化来从细胞中制备。勻浆物在48，000Xg在4°C离心15分钟。团粒通过在缓冲液 2(20mMHEPES-Na、0. ImM EDTA、pH7. 4)中均质化来悬浮，然后在 48，000 X g 在 4°C离心 15 分 钟。洗涤操作再一次重复。最终的团粒在缓冲液2中悬浮，立即使用用于分析，或在-80°C 保存。功能性受体分析通过测量作为对促胰岛素试剂刺激的反应的环化AMP (cAMP)来 进行。形成的 cAMP 通过 AlphaScreen cAMP 试剂盒(Perkin Elmer Life Sciences)来 定量。孵育可以在总体积50ii 1的缓冲液3(50mM Tris_HCI、5mM HEPESUOmM MgCl2、pH 7. 4)和具有以下添加物的半区域96孔微量滴定板中进行lmM ATPU U M GTP、0. 5mM 3-异 丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)、0. 01%Tween-20,0. BSA、6 y g 膜制品、15 y g/mL 接受体珠 子、与6nM生物素基-cAMP预孵育的20 u g/mL供体珠子。测试激动剂活性的衍生物在缓冲 液3中溶解和稀释。GTP对每个实验新鲜地制备。平板在室温下在暗处缓慢搅动孵育三小 时，随后在Fusion 仪器(Perkin Elmer LifeSciences)中计数。对单独的衍生物标绘浓 度_反应曲线，利用Prism，版本4. 0 (GraphPad, Carlsbad, CA)的四参数逻辑模型估计EC5(1 值。在此对于多肽使用的术语“DDP-IV保护的”是指一种多肽，其已经被化学地修饰以 使得所述衍生物对血浆肽酶二肽基氨肽酶-4(DPP-IV)有抗性。血浆中的DPP-IV已知涉及 几种肽激素，例如GLP-l、GLP-2、Exendin-4等等的降解。因而，进行了相当大的努力来开发 对DPP-IV介导的水解敏感的多肽的类似物和衍生物，以降低通过DPP-IV的降解速度。在本发明的一个方面，GLP-1肽是DPPIV保护的GLP-1肽。在本发明的一个方面，相对于利拉鲁肽(liraglutide)的稳定性，所述GLP-1肽是 对DPP-IV降解被稳定化的。在一个实施方式中，根据本发明的衍生物是DPP-IV保护的衍生物，与利拉鲁肽相 比其对于DPP-IV是更有抗性的。肽对二肽基氨肽酶IV的降解的抗性通过以下降解分析来测定肽的等分量(5nmol)在37°C在100 y L 0. 1M三乙胺-HC1缓冲液pH 7. 4中与相当 于5mU酶活性的1 y L纯化的二肽基氨肽酶IV孵育10-180分钟。通过添加5 y L的10% 三氟乙酸终止酶反应，分离肽降解产物并利用HPLC分析来定量。进行这种分析的一种方法 是混合物施加到Vydac C18 widepore (30nm孔，5 ii m颗粒)250X4. 6mm柱上，以lml/分 钟的流速用0. 三氟乙酸中线性阶式梯度的乙腈洗脱(0%乙腈3分钟，0-24%乙腈17分 钟，24-48% 乙腈 1 分钟)，根据 Siege 1 et al.，Regul.P印t. 1999 ；79 :93_102and Mentlein et al. Eur. J. Biochem. 1993 ；214 :829_35。肽和它们的降解产物可以通过它们在220nm处 (肽键)或280nm处(芳香族氨基酸)的吸光度来监测，和通过相对于标准物来积分它们的 峰面积来定量。肽被二肽基氨肽酶IV的水解的速率以引起低于10%的肽被水解的孵育时 间来估计。做为选择，肽对二肽基氨肽酶IV的降解的抗性可以通过以下降解分析来测定
肽的等分量(4nmol)在存在或缺乏1.6%人血清白蛋白的情况下，在37°C在40 y L的0. 085M Tris-HCl缓冲液pH 8. 0中与10. 9mU的纯化的二肽基氨肽酶IV孵育22小时。 在0、4和22小时之后，采集10 μ 1的样品，通过与100 μ 1的三氟乙酸混合来终止反 应。分离肽降解产物，使用HPLC分析来定量。进行这种分析的一种方法是混合物施加到 Agilent Zorbax 300SB-C18 (5 μ m 颗粒)150 X 2. Imm 柱上，以 0. 5ml/分钟的流速用具有 0. 07% TFA的从0. 三氟乙酸到100%乙腈的线性梯度在30分钟内洗脱。肽和它们的降 解产物通过它们在214nm处的吸光度来监测，通过积分它们的峰面积来定量。肽对二肽基 氨肽酶IV的稳定性作为完整肽的峰面积相对于完整肽与裂解后缺少两个氨基末端氨基酸 的降解产物的峰面积的总和来测定。在此使用的术语“药学上可接受的”是指适合于正常的药物应用，S卩，在患者中不
产生严重的有害事件，等等。在此使用的术语“赋形剂”是指通常被添加到药物组合物中的化合物，例如，缓冲 齐U、张度试剂、防腐剂，等等。在此使用的术语“有效数量”是指与没有治疗相比对于患者的治疗足以有效的剂量。在此使用的术语“药物组合物”是指一种产物，其包含根据本发明的活性衍生物以 及药物赋形剂，例如缓冲剂、防腐剂和任选地张度修饰剂和/或稳定剂。因而，药物组合物 在本领域中也称为药物制剂。在此使用的术语“疾病的治疗”是指发生了疾病、状况或病症的患者的管理和照 料。治疗的目的是对抗疾病、状况或病症。治疗包括施用根据本发明的活性衍生物来消除 或控制疾病、状况或病症，以及减轻与疾病、状况或病症相关的症状或并发症。在另一个方面，本发明涉及可以同时结合白蛋白和GLP-I受体的GLP-I肽的衍生 物。在另一个方面，本发明涉及在存在2%白蛋白的情况下以低于ΙΟΟηΜ、优选的低于 30nM的亲和力结合GLP-I受体的GLP-I肽的衍生物。在另一个方面，本发明涉及GLP-I肽的衍生物，当比较存在极低浓度(例如 0.005%到0.2% )的人白蛋白的情况下的亲和力和存在2%人白蛋白的情况下的亲和力 时，其对GLP-I受体的亲和力仅部分地降低。在这些条件下结合亲和力的改变低于50倍、 优选的低于30倍，更优选的低于10倍。在另一个方面，本发明涉及GLP-I肽的衍生物，其对于exendin-4通常所见的化学 降解、特别是氧化和脱酰胺作用是稳定的。在另一个方面，本发明涉及GLP-I肽的衍生物，其具有对受体的高效价。对于具有 低于IOOnM的白蛋白结合亲和力的非常强的白蛋白结合类似物，在cAMP分析中，GLP-I效 价是好于3微摩尔，优选的效价是好于1微摩尔。对于具有低于500nM的白蛋白结合亲和力的非常强的白蛋白结合衍生物，在cAMP 分析中，GLP-I效价是好于1微摩尔，优选的效价是好于0. 2微摩尔。在另一个方面，本发明涉及具有高白蛋白结合亲和力的GLP-I肽的衍生物。本发 明的衍生物具有低于1微摩尔的白蛋白结合亲和力。更优选的，本发明的衍生物具有低于 500nM、再更优选的低于200nM或甚至低于IOOnM的白蛋白结合亲和力。白蛋白结合亲和力可以利用以下的分析来测量
白蛋白结合分析GLP-I衍生物对人血清白蛋白(HSA)的亲和力通过竞争性闪烁亲近分析(SPA)来 测量。链霉抗生物素蛋白-SPA珠子(GE HealthcareRPNQ0009)与生物素化的HSA孵育5小 时。珠子用缓冲液洗涤来除去未结合的HSA。在含有IOOmM HepesUOOmM NaCl、IOmMMgSO4、 0. 025% Tween-20, pH 7. 4的缓冲液中，将所述珠子与125I标记的酰化的GLP-I类似物，例 如N- ε 26-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基_4-(17_羧基-十七烷酰基氨基)丁酰氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]]Aib8，125I-Tyrl9，Arg34] GLP-I (7-37)或 N- ε 37- [2- (2- [2- ((S) -4- ((S) -4-(12- [4- (16- (1Η-四唑 ~5~ 基)十六烷 酰基氨磺酰基)丁酰氨基]十二烷酰基氨基)-4-羧基丁酰氨基)-4-羧基丁酰氨基)乙氧 基]乙氧基)乙酰基][Aib8,125I-Tyrl9, Glu22, Arg26,34, Lys37]GLP _l (7-37)-NH2 混合。 混合物吸移到 Perkin Elmer Optiplate-96 6005290 (100 μ 1 每孔)的反应孔中，ΙΟΟμΙ 的 要测量的GLP-I衍生物的稀释系列添加到相同的缓冲液中。在室温下温和摇动20小时后， 平板被离心，在TopCoimter上计数。作为GLP-I衍生物浓度的函数标绘结合的cpm，竞争曲 线的EC5tl值用作衍生物对HSA的亲和力的度量。在另一个方面，本发明涉及具有高亲和力结合分离的GLP-IR受体的N-末端细胞 外结构域(nGLP-lR)的GLP-I肽衍生物。所述亲和力通过置换125I-EXendin-4(9_39)结合 nGLP-lR的能力来测量。在该分析中，Exendin-4以5nM的IC5tl值结合nGLP-lR，GLP-I (7-37) 以1120nM的IC5tl值结合nGLP-lR，利拉鲁肽以IOOOnM的IC5tl值结合nGLP-lR。在一个方 面，本发明的衍生物以比利拉鲁肽更低的IC5tl值结合nGLP-lR。更优选的，本发明的衍生物 以低于IOOnM的IC5tl值结合nGLP-lR，再更优选的低于ΙΟηΜ、或甚至低于5nM。与nGLP-lR的结合通过以下的分析测量如早先描述的制备蛋白质 nGLP-IR(Runge et al 2007)，生物素化，在链霉抗生物素蛋白包被的SPA珠子上固定。在 0. IM NaHC03中的nGLPIR利用75 μ gBNHS (Sigma H1759)生物素化为Img蛋白质。生物素 化的nGLPIR随后相对于PBS来透析。所有试剂和衍生物在具有0. 05% v/v Tween20的PBS 中稀释。结合分析在200 μ 1的最终体积中在96孔OptiPlates (PerkinElmer 6005290)中 进行。每个反应孔含有2mg的链霉抗生物素蛋白包被的SPA珠子(PerkinElmer RPNQ007)、 0. Ipmol 生物素化的 nGLPIR、50pCi125I-Exendin (9-39)和终浓度从 IOOOnM 到 0. 064nM 的测 试肽。平板在RT在摇动器上孵育3小时。SPA颗粒通过在1500rpm离心10分钟来旋转沉 降，平板在 TopCount-NXT(PerkinElmer)中计数。在另一个方面，本发明涉及GLP-I肽的衍生物，相对于利拉鲁肽，其在啮齿动物中 和在非啮齿动物模型中具有实质上改善的末端半衰期。在本发明的一个方面，相对于利拉鲁肽，在啮齿动物或在非啮齿动物模型中的终 末半衰期被改善至至少3倍。在本发明的另一个方面，相对于利拉鲁肽，在非啮齿动物模型中的终末半衰期被 改善至至少6倍。在另一个方面，本发明涉及GLP-I肽的衍生物，其在i. v.施用给大鼠后具有至少 10小时的体内半衰期。在另一个方面，本发明涉及GLP-I肽的衍生物，其在s. c.施用给迷你猪后具有至 少50小时的体内半衰期，优选的，在s. c.施用给迷你猪后具有至少80小时的体内半衰期。
在另一个方面，本发明涉及GLP-I肽的衍生物，其可以配制为适合于肺部施用的颗粒。在另一个方面，本发明涉及GLP-I肽的衍生物，其在中性pH值下，最优选的在6-8 的范围内是化学上和物理上稳定的。在另一个方面，本发明涉及GLP-I肽的衍生物，其有很少的或没有聚集的倾向。在 一个方面，当在硫黄素分析中测试时，相对于利拉鲁肽，聚集倾向被显著地改善了。在另一个方面，本发明涉及GLP-I肽的衍生物，其适合于肺部递送。这 可以是关于 对肺部制剂有用的物理或化学方面。做为选择，衍生物对于气道和肺中酶的降解是稳定的。在本发明的实施方式中，实现了上述特征的组合。在此使用的术语“白蛋白结合部分”是指与人血清白蛋白非共价地结合的残基。附 着于治疗性多肽的白蛋白结合残基一般具有低于1微摩尔的白蛋白结合亲和力，优选的低 于500nM、再更优选的低于200nM或甚至低于ΙΟΟηΜ。在含有4-40个碳原子、具有末端酸性基团的线性和分支亲脂(lipohophillic)部 分中，许多白蛋白结合残基是已知的。在此使用的术语“亲水的接头”是指将肽和白蛋白结合残基与化学部分分隔的间 隔区，所述化学部分包含至少5个非氢原子，其中它们的30-50%是N或0。在以下的式子中，来自附着的基团的末端键被认为是附着键，并且除非声明了，不 以亚甲基基团结束。组合物和药物用途本发明的另一个目的是提供包含以0. lmg/ml到25mg/ml的浓度存在的根据本发 明的衍生物的药物制剂，并且其中所述制剂具有3. 0到9. 0的pH值。制剂可以进一步包含 缓冲系统、防腐剂、张度试剂、螯合剂、稳定剂和表面活性剂。在本发明的一个实施方式中，所述药物制剂是水性制剂，即包含水的制剂。这样的 制剂一般是溶液或悬浮液。在本发明的进一步的实施方式中，所述药物制剂是水溶液。术语“水性制剂”被定义为包含至少50% w/w水的制剂。同样地，术语“水性溶液” 被定义为包含至少50% w/w水的溶液，术语“水性悬浮液”被定义为包含至少50% w/w水 的悬浮液。在另一个实施方式中，所述药物制剂是冻干的制剂，在使用前医师或患者向其中 添加溶剂和/或稀释剂。在另一个实施方式中，所述药物制剂是不需要任何在先的溶解随时可使用的干燥 的制剂(例如，冻干的或喷雾干燥的)。在进一步的方面，本发明涉及药物制剂，包含根据本发明的衍生物和缓冲剂的水 溶液，其中所述衍生物以0. lmg/ml或更高的浓度存在，并且其中所述制剂具有约3. 0到约 9.0的pH值。在本发明的另一个实施方式中，制剂的pH值是从约7. 0到约9. 5。在本发明的另 一个实施方式中，制剂的PH值是从约3.0到约7.0。在本发明的另一个实施方式中，制剂 的PH值是从约5. 0到约7. 5。在本发明的另一个实施方式中，制剂的pH值是从约7. 5到约 9.0。在本发明的另一个实施方式中，制剂的pH值是从约7.5到约8.5。在本发明的另一个实施方式中，制剂的PH值是从约6. O到约7. 5。在本发明的另一个实施方式中，制剂的pH 值是从约6. O到约7. O。在另一个实施方式中，药物制剂是8. O到8. 5。在本发明的实施方式中，每个施用的剂量含有0. Olmg-IOmg的活性衍生物。在一 个实施方式中，施用的剂量含有超过0. 05mg的活性衍生物。在一个实施方式中，施用的剂 量含有超过0. Img的活性衍生物。在一个实施方式中，施用的剂量含有达到IOmg的活性衍 生物。在一个实施方式中，施用的剂量含有达到9mg的活性衍生物。在一个实施方式中，施 用的剂量含有达到8mg的活性衍生物。在一个实施方式中，施用的剂量含有达到7mg的活 性衍生物。在一个实施方式中，施用的剂量含有达到6mg的活性衍生物。在一个实施方式 中，施用的剂量含有达到5mg的活性衍生物。在一个实施方式中，施用的剂量含有从0. 2mg 到5mg的活性衍生物。在本发明的进一步的实施方式中，所述缓冲剂选自由乙酸钠、碳酸钠、柠 檬酸盐、 双甘氨肽、组氨酸、甘氨酸、赖氨酸、精氨酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠和三(羟甲 基)_氨基甲烷、N-二 [羟乙基]甘氨酸、N-三(羟甲基)甲基甘氨酸、苹果酸、琥珀酸盐、 顺丁烯二酸、延胡索酸、酒石酸、天冬氨酸或其混合物构成的组。这些特定缓冲剂的每一个 构成了本发明的可选择的实施方式。在本发明的进一步的实施方式中，所述制剂进一步包含药学上可接受的防腐剂。 在本发明的进一步的实施方式中，防腐剂选自由苯酚、ο-甲酚、m-甲酚、ρ-甲酚、对羟基苯 甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、2-苯氧乙醇、对羟基苯甲酸丁酯、2-苯乙醇、苯甲醇、氯丁醇 和thiomerosal、溴硝丙二醇、苯甲酸、咪脲(imidurea)、chlorohexidine、脱氢醋酸钠、氯 甲酚、对羟基苯甲酸乙酯、苄索氯铵、chlorphenesine (3p-氯苯氧基丙烷_1，2- 二醇)或其 混合物构成的组。在一个实施方式中，所述防腐剂是苯酚或m-甲酚。在本发明的进一步的 实施方式中，所述防腐剂以0. lmg/ml到20mg/ml的浓度存在。在本发明的进一步的实施方 式中，所述防腐剂以0. lmg/ml到5mg/ml的浓度存在。在本发明的进一步的实施方式中，所 述防腐剂以5mg/ml到10mg/ml的浓度存在。在本发明的进一步的实施方式中，所述防腐剂 以10mg/ml到20mg/ml的浓度存在。这些特定防腐剂的每一个构成了本发明的可选择的实 施方式。防腐剂在药物组合物中的使用是技术人员公知的。为了方便起见，参考Remington The Science and Practice ofPharmacy，19th edition，1995。在本发明的进一步的实施方式中，所述制剂进一步包含等渗试剂。在本发明的进 一步的实施方式中，等渗试剂选自由盐(例如，氯化钠)、糖或糖醇、氨基酸(例如，L-甘氨 酸、L-组氨酸、精氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、色氨酸、苏氨酸)、糖醇(例如甘油醇 (甘油)、1，2_丙二醇(丙二醇)、1，3_丙二醇、1，3_ 丁二醇)聚乙二醇(例如PEG400)或其 混合物构成的组。在一个实施方式中，所述等渗试剂是丙二醇。可以使用任何糖类，例如单 糖、二糖或多糖，或水溶性的葡聚糖，包括例如果糖、葡萄糖、甘露糖、山梨糖、木糖、麦芽糖、 乳糖、蔗糖、海藻糖、葡聚糖、茁霉多糖、糊精、环糊精、alfa和beta HPCD、可溶性淀粉、羟乙 基淀粉和羧甲基纤维素-Na。在一个实施方式中，糖添加剂是蔗糖。糖醇被定义为具有至少 一个-OH基团的C4-C8烃类，包括，例如，甘露醇、山梨醇、肌醇、半乳糖醇、卫矛醇、木糖醇和 阿拉伯醇。在一个实施方式中，糖醇添加剂是甘露醇。上述的糖类或糖醇可以单独地或组 合地使用。对于使用的数量没有固定的限制，只要糖类或糖醇可溶于液体制品中，并且不会 不利地影响利用本发明的方法实现的稳定效果。在一个实施方式中，糖类或糖醇浓度在约lmg/ml和约150mg/ml之间。在本发明的进一步的实施方式中，所述等渗试剂以lmg/ml到 50mg/ml的浓度存在。在本发明的进一步的实施方式中，所述等渗试剂以lmg/ml到7mg/ml 的浓度存在。在本发明的进一步的实施方式中，所述等渗试剂以5mg/ml到7mg/ml的浓度 存在。在本发明的进一步的实施方式中，所述等渗试剂以8mg/ml到24mg/ml的浓度存在。 在本发明的进一步的实施方式中，所述等渗试剂以25mg/ml到50mg/ml的浓度存在。这些 特定等渗试剂的每一个构成了本发明的可选择的实施方式。在药物组合物中等渗试剂的 使用是技术人员公知的。为了方便起见，参考Remington :The Science and Practice of Pharmacy, 19th edition, 1995。在本发明的进一步的实施方式中，所述制剂进一步包含螯合剂。在本发明的进一 步的实施方式中，所述螯合剂选自乙二胺四乙酸(EDTA)、柠檬酸和天冬氨酸的盐和其混合 物。在本发明的进一步的实施方式中，螯合剂以0. lmg/ml到5mg/ml的浓度存在。在本发 明的进一步的实施方式中，螯合剂以0. lmg/ml到2mg/ml的浓度存在。在本发明的进一步 的实施方式中，螯合剂以2mg/ml到5mg/ml的浓度存在。这些特定螯合剂的每一个构成了 本发明的可选择的实施方式。螯合剂在药物组合物中的使用是技术人员公知的。为了方便 起见，参考 Remington :The Science and Practice of Pharmacy, 19th edition，1995。 在本发明的进一步的实施方式中，所述制剂进一步包含稳定剂。稳定剂在药物 组合物中的使用是技术人员公知的。为了方便起见，参考Remington :The Science and Practice of Pharmacy,19th edition,1995。更特别地，本发明的组合物是稳定的液体药物组合物，它的治疗活性成分包括多 肽，所述多肽在液体药物制剂的保存期间可能展现聚集物形成。“聚集物形成”是指引起寡聚体形成的多肽分子之间的物理相互作用，其可以是仍 然可溶的，或是从溶液沉淀的大的可见的聚集物。“在保存期间”意指液体药物组合物或制 剂一旦被制备，不立即施用给受试者。然而，在制备之后，它被包装用于保存，处于液态、冷 冻状态、或干燥的形式，用于以后重构成液态或适合于施用给受试者的其他形式。“干燥的 形式”意指液体药物组合物或制剂被干燥，通过冷冻干燥(即，冻干；参见，例如，Williams and Polli (1984) J. ParenteralSci. Technol. 38 :48_59)、喷雾干燥(参见 Masters (1991) in Spray-DryingHandbook(5th ed ；Longman Scientific and Technical, Essez, U.K.), pp.491-676 ；Broadhead et al. (1992)Drug Devel. Ind. Pharm. 18 1169-1206 ；and Mumenthaler et al. (1994) Pharm. Res. 11 12-20)或风干(Carpenterand Crowe (1988) Cryobiology 25 :459_470 ；and Roser (1991)Biopharm. 4 :47_53)。在液体药物组合物的保 存期间多肽的聚集物形成可能不利地影响多肽的生物学活性，引起药物组合物的治疗效力 的损失。此外，聚集物形成可以引起其他问题，例如，当含有多肽的药物组合物利用输注系 统来施用时，管道、膜或泵的阻塞。本发明的药物组合物可以进一步包含足以降低组合物的保存期间多肽的聚集物 形成的、一定数量的氨基酸碱。“氨基酸碱”是指氨基酸或氨基酸的组合，其中任何给定的 氨基酸以它的游离碱形式或以它的盐形式存在。当使用氨基酸的组合时，所有的氨基酸可 以以它们的游离碱形式存在，所有的可以以它们的盐形式存在，或某一些以它们的游离碱 形式存在而其他的以它们的盐形式存在。在一个实施方式中，在制备本发明的组合物中使 用的氨基酸是带有带电侧链的那些，例如精氨酸、赖氨酸、天冬氨酸和谷氨酸。特定氨基酸(例如，甲硫氨酸、组氨酸、咪唑、精氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、色氨酸、苏氨酸和其 混合物)的任何立体异构体(即，L、D或其混合物)或这些立体异构体的组合，可以在本发 明的药物组合物中存在，只要特定的氨基酸以它的游离碱形式或它的盐形式存在。在一个 实施方式中，使用L-立体异构体。本发明的组合物还可以用这些氨基酸的类似物来配制。 “氨基酸类似物”是指天然存在的氨基酸的衍生物，其带来在本发明的液体药物组合物的保 存期间降低多肽的聚集物形成的期望的效果。适合的精氨酸类似物包括，例如，氨基胍、鸟 氨酸和N-单乙基L-精氨酸，适合的甲硫氨酸类似物包括乙硫氨酸和buthionine，适合的半 胱氨酸类似物包括S-甲基-L半胱氨酸。对于其他氨基酸，氨基酸类似物以它们的游离碱 形式或它们的盐形式掺入到组合物中。在本发明的进一步的实施方式中，氨基酸或氨基酸 类似物以一定浓度使用，所述浓度足以防止或延缓蛋白质的聚集。
在本发明的进一步的实施方式中，甲硫氨酸(或其他含硫的氨基酸或氨基酸类似 物)可以添加来抑制甲硫氨酸残基向甲硫氨酸亚砜的氧化，当作为治疗试剂的肽是包含对 这样的氧化敏感的至少一个甲硫氨酸残基的多肽时。“抑制”是指随着时间的过去甲硫氨酸 氧化的物质的最小的积累。抑制甲硫氨酸氧化引起多肽在它的适当的分子形式的更多的存 留。可以使用甲硫氨酸的任何立体异构体(L或D)或其组合。添加的数量应当是足够抑制 甲硫氨酸残基的氧化的数量，从而甲硫氨酸亚砜的数量对于管理机构是可接受的。一般地， 这意味着组合物包含不超过约10%到约30%的甲硫氨酸亚砜。一般地，这可以通过添加甲 硫氨酸、从而添加的甲硫氨酸与甲硫氨酸残基的比例从约1 1到约1000 1，例如10 1 到约100 1，来实现。在本发明的进一步的实施方式中，所述制剂进一步包含选自高分子量聚合物或低 分子化合物的组的稳定剂。在本发明的进一步的实施方式中，稳定剂选自聚乙二醇(例如，PEG 3350)、聚乙 烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮、羧基/氧化纤维素或其衍生物(例如，HPC、HPC-SL、HPC-L和 HPMC)、环糊精、包含硫的物质如单硫代甘油、巯基乙酸和2-甲基硫乙醇和不同的盐(例如， 氯化钠)。这些特定稳定剂的每一个构成了本发明的可选择的实施方式。所述药物组合物还可以包含另外的稳定剂，其进一步增强其中的治疗活性多肽的 稳定性。本发明特别感兴趣的稳定剂包括，但不限于，甲硫氨酸和EDTA，其保护多肽对抗甲 硫氨酸氧化，以及非离子表面活性剂，其保护多肽对抗与冻融或机械剪切相关的聚集。在本发明的进一步的实施方式中，所述制剂进一步包含表面活性剂。在本发明的 另一个实施方式中，所述药物组合物包含两种不同的表面活性剂。在此使用的术语“表面活 性剂”是指包含水溶性的(亲水性的)部分、头部和脂溶性的(亲油性的)区段的任何分子 或离子。表面活性剂优选地在接触面积累，其中亲水性部分朝向水(亲水性的相)亲油性 部分朝向油或疏水的相(即，玻璃、空气、油，等等)。表面活性剂开始形成胶束的浓度被称 为临界胶束浓度或CMC。此外，表面活性剂降低了液体的表面张力。表面活性剂也称为两亲 化合物。术语“洗涤剂”是一般用于表面活性剂的异名。阴离子表面活性剂可以选自下组鹅去氧胆酸、鹅去氧胆酸钠盐、胆酸、去氢胆酸、 去氧胆酸、去氧胆酸甲酯、毛地黄皂苷、毛地黄毒苷配基、N, N-二甲基十二烷基胺N-氧化 物、多库酯钠、甘氨鹅去氧胆酸钠、甘氨胆酸水合物、甘氨脱氧胆酸一水合物、甘氨脱氧胆酸钠盐、甘氨脱氧胆酸钠盐、甘氨石胆酸3-硫酸二钠盐、甘氨石胆酸乙酯、N-十二烷酰基肌氨 酸钠盐、N-十二烷酰基肌氨酸钠盐、N-十二烷酰基肌氨酸、N-十二烷酰基肌氨酸、十二烷基 硫酸锂、LugolU-辛烷磺酸钠盐、1-辛烷磺酸钠盐、1- 丁烷磺酸钠、1-癸烷磺酸钠、1-十二 烷基磺酸钠、1-庚烷磺酸钠、1-庚烷磺酸钠、1-壬烷磺酸钠、1-丙烷磺酸钠一水合物、2-溴 乙烷磺酸钠、胆酸钠水合物、牛或绵羊胆汁、胆酸钠水合物、络胆酸钠、脱氧胆酸钠、十二烷 基硫酸钠、十二烷基硫酸钠、己烷磺酸钠、辛基硫酸钠、戊烷磺酸钠、牛磺胆酸钠、牛磺鹅脱 氧明酸钠盐、牛磺去氧胆酸钠盐一水合物、牛磺石胆酸3-硫酸盐二钠盐、牛熊去氧胆酸钠 盐、Trizma 十二烷基硫酸盐、DSS(多库酯钠、CAS登记号[577-11-7])、多库酯钙，CAS登 记号[128-49-4])、多库酯钾，CAS登记号[7491-09-0])、SDS(十二烷基硫酸钠或月桂烷基 硫酸钠)、十二烷基磷酸胆碱(F0S-胆碱-12)、癸基磷酸胆碱(F0S-胆碱-10)、壬基磷酸胆 碱(F0S-胆碱-9)、二棕榈酰磷脂酸、辛酸钠和/或熊去氧胆酸。阳离子表面活性剂可以选自下组烷基三甲基溴化铵、苯扎氯铵、苯扎氯铵、苄基 二甲基十六烷基氯化铵、苄基二甲基十四烷基氯化铵、苄基三甲基四氯碘酸铵、二甲基双 十八烷基溴化铵、十二烷基乙基二甲基溴化铵、十二烷基三甲基溴化铵、十二烷基三甲基溴 化铵、乙基十六烷基二甲基溴化铵、十六烷基三甲基溴化铵、十六烷基三甲基溴化铵、聚氧 乙烯(IO)-N-动物脂-1，3-二氨基丙烷 、通佐溴胺(Thonzoniumbromide)和/或三甲基 (十四烷基)溴化铵。非离子表面活性剂可以选自下组BigCHAP、二(聚乙二醇二 [咪唑基羰基])、 嵌段共聚物，如聚氧化乙烯/聚氧化丙烯嵌段共聚物，例如泊洛沙姆(poloxamer)、泊洛 沙姆 188 和泊洛沙姆 407、Brij 35，Brij 56，Brij 72，Brij 76，Brij 92V, Brij 97，Brij 58P,
Cremophor EL，十乙二醇单十二烷基醚、N-癸酰基N-甲基葡糖胺、η-十二烷酰基-N-甲基 葡糖酰胺、烷基-多聚葡糖苷、乙氧基化蓖麻油、七乙二醇单癸基醚、七乙二醇单十二烷基 醚、七乙二醇单十四烷基醚、六乙二醇单十二烷基醚、六乙二醇单十六烷基醚、六乙二醇单 十八烷基醚、六乙二醇单十四烷基醚、Igepal CA-630、Igepal CA-630、甲基-6-0-(N-庚基 氨基甲酰基)-beta-D-吡喃葡萄糖苷、九乙二醇单十二烷基醚、N-壬酰基_N_甲基葡糖胺、 N-壬酰基-N-甲基葡糖胺、八乙二醇单癸基醚、八乙二醇单十二烷基醚、八乙二醇单十六烷 基醚、八乙二醇单十八烷基醚、八乙二醇单十四烷基醚、辛基-β -D-吡喃葡萄糖苷、五乙二 醇单癸基醚、五乙二醇单十二烷基醚、五乙二醇单十六烷基醚、五乙二醇单己基醚、五乙二 醇单十八烷基醚、五乙二醇单辛基醚、聚乙二醇二环氧甘油醚、聚乙二醇醚W-1、聚氧乙烯 10十三烷基醚、聚氧乙烯100硬脂酸盐、聚氧乙烯20异十六烷基醚、聚氧乙烯20油基醚、 聚氧乙烯40硬脂酸盐、聚氧乙烯50硬脂酸盐、聚氧乙烯8硬脂酸盐、聚氧乙烯二(咪唑基 羰基)、聚氧乙烯25丙二醇硬脂酸盐、来自皂树属树皮的皂角苷、Span 20，Span 40，Span 60，Span 65，Span 80，Span 85，Tergitol, Type 15-S-12，Tergitol, Type 15-S-30， Tergitol,Type 15_S_5, Tergitol,Type 15_S_7, Tergitol, Type 15_S_9,Tergitol,Type NP-10,Tergitol,Type NP-4,Tergitol,Type NP-40,Tergitol,Type NP-7,Tergitol,Type NP-9，十四烷基-β -D-麦芽糖苷、四乙二醇单癸基醚、四乙二醇单十二烷基醚、四乙二醇单 十四烷基醚、三乙二醇单癸基醚、三乙二醇单十二烷基醚、三乙二醇单十六烷基醚、三乙二 醇单辛基醚、三乙二醇单十四烧基醚、Triton CF-21，Triton CF-32，Triton DF-12，Triton DF-16,Triton GR-5M,Triton QS-15,Triton QS-44,Triton X-100,Triton X-102,TritonX-15, Triton X—151，Triton X—200，Triton X—207，Triton X—100，Triton 14，Triton X-165 溶液，Triton X-305 溶液，Triton X-405，Triton X-45, Triton X-705-70, TWEEN 20，TWEEN 40, TWEEN 60, TWEEN 6, TWEEN 65，TWEEN 80，TWEEN 81, TWEEN 85，
Tyloxapol，鞘磷脂(鞘磷脂)和鞘糖脂(神经酰胺、神经节苷脂)、磷脂和/或n_十一烷基 β-D-吡喃葡萄糖苷。两性离子表面活性剂可以选自下组CHAPS、CHAPS0、3_(癸基二甲基铵)丙烷磺 酸内盐、3-(十二烷基二甲基铵)丙烷磺酸内盐、3-(十二烷基二甲基铵)丙烷磺酸内盐、 3-(N，N-二甲基肉豆蔻基铵)丙烷磺酸盐、3-(N，N-二甲基十八烷基铵)丙烷磺酸盐、3-(N， N-二甲基辛基铵)丙烷磺酸内盐、3-(N，N-二甲基棕榈基铵)丙烷磺酸盐、N-烷基N，N-二 甲基铵-1-丙烷磺酸盐、3-cholamido-l-丙基二甲基铵丙烷磺酸盐、十二烷基磷酸胆 碱、十四烷酰基溶血磷脂酰胆碱、两性试剂3-12 (N-十二烷基-N，N- 二甲基-3-铵基-1-丙 烷磺酸盐)、两性试剂3-10 (3-(癸基二甲基铵)丙烷磺酸内盐)、两性试剂3-08 (3-(辛基 二甲基铵)丙烷磺酸盐)、甘油磷脂(卵磷脂、脑磷脂、磷脂酰丝氨酸 )、甘油糖脂(吡喃半 乳糖苷)、溶血磷脂酰基和磷脂酰胆碱的烷基、烷氧基(烷基酯)、烷氧基(烷基醚)衍生物 例如，溶血磷脂酰胆碱的十二烷酰基和十四烷酰基衍生物、二棕榈酰磷脂酰胆碱、和极性首 基的修饰物，也就是胆碱、乙醇胺、磷脂酸、丝氨酸、苏氨酸、甘油、肌醇、溶血磷脂酰丝氨酸 和溶血磷脂酰苏氨酸、酰肉碱和衍生物、赖氨酸、精氨酸或组氨酸的Nbrta酰化的衍生物，或 赖氨酸或精氨酸的侧链酰化的衍生物，包含赖氨酸、精氨酸或组氨酸与中性或酸性氨基酸 的任何组合的二肽的Nbrta酰化的衍生物，包含中性氨基酸和两个带电氨基酸的任何组合的 三肽的Nbrta酰化的衍生物，或所述表面活性剂可以选自咪唑啉衍生物、长链脂肪酸和其盐 C6-C12 (例如油酸和辛酸)、N-十六烷基-N，N- 二甲基-3-铵基-1-丙烷磺酸盐、阴离子的 (烷基_芳基-磺酸盐)单价的表面活性剂、棕榈酰溶血磷脂酰基-L-丝氨酸、溶血磷脂(例 如，乙醇胺、胆碱、丝氨酸或苏氨酸的1-酰基-sn-甘油基-3-磷酸酯)或其混合物的组。在此使用的术语“烷基_多聚葡糖苷”涉及直链或分支的C5_2(|-烷基、-链烯基 或-炔基链，其被一个或更多个糖苷部分，例如麦芽糖苷、糖等等取代。这些烷基-多聚葡糖 苷的实施方式包括(6_18烷基多聚葡糖苷。这些烷基多聚葡糖苷的特定的实施方式包括偶数 的碳链，例如C6、C8、C1(1、C12、C14、C16、C18和C2tl烷基链。糖苷部分的特定实施方式包括吡喃糖 苷、吡喃葡萄糖苷、麦芽糖苷、麦芽三糖苷和蔗糖。在本发明的实施方式中，低于6个糖苷部 分附着到所述烷基基团。在本发明的实施方式中，低于5个糖苷部分附着到所述烷基基团。 在本发明的实施方式中，低于4个糖苷部分附着到所述烷基基团。在本发明的实施方式中， 低于3个糖苷部分附着到所述烷基基团。在本发明的实施方式中，低于2个糖苷部分附着 到所述烷基基团。烷基-多聚葡糖苷的具体实施方式
有烷基糖苷，例如η-癸基β-D-吡喃 葡萄糖苷、癸基β-D-吡喃麦芽糖苷、十二烷基β-D-吡喃葡萄糖苷、η-十二烷基β-D-麦 芽糖苷、η-十二烷基β-D-麦芽糖苷、η-十二烷基β-D-麦芽糖苷、十四烷基β-D-吡喃葡 萄糖苷、癸基β-D-麦芽糖苷、十六烷基β-D-麦芽糖苷、癸烷基β-D-麦芽三糖苷、十二烷 基β-D-麦芽三糖苷、十四烷基β-D-麦芽三糖苷、十六烷基β-D-麦芽三糖苷、η-十二烷 基_蔗糖、η-癸基-蔗糖、蔗糖单癸酸酯、蔗糖单月桂酸酯、蔗糖单豆蔻酸酯和蔗糖单棕榈 酸酯。表面活性剂在药物组合物中的使用是技术人员公知的。为了方便起见，参考Remington :The Science and Practice of Pharmacy，19thedition，1995。在本发明的进一步的实施方式中，所述制剂进一步包含蛋白酶抑制物，例如 EDTA(乙二胺四乙酸)和盐酸苯甲脒，但是其他商业上可获得的蛋白酶抑制物也可以使用。 蛋白酶抑制物的使用在包含蛋白酶的酶原的药物组合物中是特别有用的，以抑制自催化。
可能的是，其他成分可以存在于本发明的肽药物制剂中。这些其他成分可以包 括润湿剂、乳化剂、抗氧化剂、填充剂、张度修饰剂、螯合剂、金属离子、油质运载体、蛋白质 (例如，人血清白蛋白、明胶或蛋白质)和两性离子(例如，氨基酸，如甜菜碱、牛磺酸、精氨 酸、甘氨酸、赖氨酸和组氨酸)。当然，这些其他成分不应不利地影响本发明的药物制剂的总 体稳定性。含有根据本发明的衍生物的药物组合物可以在几个位点施用给需要这样的治疗 的患者，例如，在局部的位点，例如，皮肤和粘膜位点，在绕过吸收的位点，例如，在动脉、静 脉、心脏中施用，以及在涉及吸收的位点，例如，在皮肤、皮肤下、肌肉中或腹部内施用。根据本发明的药物组合物的施用可以通过几种施用途径，例如，舌的、舌下的、口 腔的、口中的、口服、胃肠内的、鼻部的、肺部的，例如，通过细支气管和肺泡或其组合、表皮 的、真皮的、经皮的、阴道的、直肠的、眼的，例如通过结膜、输尿管的和胃肠外的途径施用给 需要这样的治疗的患者。本发明的组合物可以在几种剂型中施用，例如，作为溶液、悬浮液、乳剂、微乳剂、 多重乳剂、泡沫、油膏剂、糊剂、硬膏剂、软膏剂、片剂、糖衣片剂、口香糖、冲洗剂、胶囊剂、 例如，硬明胶胶囊和软明胶胶囊、栓剂、直肠胶囊剂、滴剂、凝胶、喷雾剂、粉剂、气雾剂、吸入 齐U、滴眼剂、眼用软膏、眼用冲洗剂、阴道的阴道栓剂、阴道的环、阴道的软膏剂、注射溶液、 原位转化溶液，例如，原位凝胶、原位凝固、原位沉淀、原位结晶，输注溶液和植入剂。本发明的组合物可以例如，通过共价的、疏水的和静电相互作用，进一步化合于或 附着于药物载体、药物递送系统和先进的药物递送系统，以进一步增强本发明的衍生物的 稳定性、提高生物利用率、提高溶解度、降低副作用、实现本领域技术人员公知的时间治疗， 和提高患者的顺应性，或其任何组合。载体、药物递送系统和先进的药物递送系统的实例包 括但不限于，聚合物，例如纤维素和衍生物，多糖，例如葡聚糖和衍生物，淀粉和衍生物、聚 (乙烯醇)、丙烯酸酯和异丁烯酸酯聚合物、聚乳酸和聚乙醇酸和其嵌段共聚物、聚乙二醇、 载体蛋白，例如白蛋白，凝胶，例如，热凝胶化系统，例如，本领域技术人员公知的嵌段共聚 物，胶束、脂质体、微球体、纳米颗粒、液晶和其分散体、L2相和其分散体、脂质-水系统中相 特性领域技术人员公知的，聚合的胶束、多重乳液、自乳化的、自微乳化的、环糊精和其衍生 物以及树枝状高分子(dendrimers)。本发明的组合物在固体、半固体、粉剂和溶液的制剂中是有用的，用于本发明的衍 生物的肺部施用的，利用，例如，计量的剂量吸入器、干粉吸入器和喷雾器，这都是本领域技 术人员公知的设备。本发明的组合物在控制的、持续的、延长的、延迟的和缓慢释放的药物递送系统的 制剂中是特别有用的。更具体地，而不是受限的，组合物在本领域技术人员公知的胃肠外的 控制释放和持续释放系统(两种系统都引起施用数量的多倍降低)的制剂中是有用的。再 更优选的是皮下施用的控制释放和持续释放系统。不限制本发明的范围，有用的控制释放 系统和组合物的实例有水凝胶、油质凝胶、液晶、聚合的胶束、微球体、纳米颗粒。
产生对本发明的组合物有用的控制释放系统的方法包括但不限于，结晶、凝缩、 共同结晶、沉淀、共同沉淀、乳化、分散、高压勻质化、包囊、喷雾干燥、微胶囊包裹、凝聚、 相分离、溶剂蒸发来产生微球体、挤压和超临界流体过程。一般参考药物控制释放手册 (Handbook of Pharmaceutical Controlled Release)(ffise,D. L. ,ed. Marcel Dekker,New York,2000)禾口Drug and the PharmaceuticalSciences vol. 99 Protein Formulation and Delivery(MacNally, E. J. , ed. Marcel Dekker, New York,2000)。胃肠外施用可以通过凭借注射器，任选地笔样注射器的皮下的、肌肉内的、腹膜内 的或静脉内注射来进行。做为选择，胃肠外施用可以通过输注泵进行。进一步的选择是一 种组合物，其可以是溶液或悬浮液或粉剂，用于以鼻部或肺部液体或粉剂喷雾的形式施用 本发明的衍生物。作为更进一步的选择，含有本发明的衍生物的药物组合物也可以适应于 经皮的施用，例如，通过无针头的注射或来自贴片，任选地离子透入贴片，或穿粘膜的，例如 口腔的施用。本发明的衍生物可以使用适合于肺部药物递送的任何已知类型的设备、经由肺部 的途径在载体如溶液、悬浮液或干粉中施用。这些的实例包括但不限于，用于肺部药物递 送的三种一般类型的气雾剂发生器，可以包括喷射或超声喷雾器、计量给药吸入器，或干粉 吸人器(参照 Yu J, Chien Yff. Pulmonary drug delivery :Physiologic andmechanistic aspects. Crit Rev Ther Drug Carr Sys 14 (4) (1997)395—453)。根据标准的测试方法，颗粒的空气动力学直径(da)被定义为单位密度(lg/cm3)的 参考标准球状颗粒的几何当量直径。在最简单的情况下，对于球状颗粒，da作为密度比的 平方根的函数与分度圆直径(reference diameter) (d)相关，如以下描述的对非球形颗粒进行这种关系式的修改(参照Edwards DA, Ben-Jebria A, Langer R. Recent advances in pulmonary drug deliveryusing large, porous inhaled particles. J Appl Physiol 84 (2) (1998) 379—385)。术语 “MMAD” 禾口 “MMEAD” 是本领域 中很好地描述的禾口公知的(参照 Edwards DA, Ben-Jebria A, Langer R and represents ameasure of the median value of an aerodynamic particle size distribution. Recent advances in pulmonary drug delivery using large,porous inhaledparticles. J Appl Physiol 84 (2) (1998) 379-385)。质量中值空气动力学直径(MMAD)和质量中值 有效空气动力学直径(MMEAD)相互可换地使用，是统计学参数，独立于实际的形状、大小 或密度，经验性地描述了与气溶胶粒子在肺部沉积的潜力相关的气溶胶粒子的大小(参 照 Edwards DA, Ben-Jebria A, Langer R. Recent advances inpulmonary drug delivery using large,porous inhaled particles. J ApplPhysiol 84(2)(1998) 379—385)。MMAD通 常从用冲击器进行的测量来计算，冲击器是测量颗粒在空气中的惯性行为的仪器。在进一步的实施方式中，所述制剂可以通过任何已知的气溶胶化技术例如，雾化， 来气溶胶化，来实现低于10 μ m、更优选的1-5 μ m之间、最优选的1_3μπι之间的气溶胶 粒子的MMAD。优选的颗粒大小是基于用于药物向深部肺递送的最有效大小，在深部肺中 蛋白质被最佳地吸收(参照 Edwards DA, Ben-Jebria A, Langer A, Recentadvances in pulmonary drug delivery using large, porous inhaled particles. J Appl Physiol 84(2) (1998)379-385)。包含本发明的衍生物的肺制剂的深部肺沉积任选地可以通过利用吸入技术的修改方法来进一步优化，例如，但不限于缓慢吸入流动(例如，30L/分钟)、屏气和动作的定 时(timing of actuatation)。术语“稳定化的制剂”是指具有提高的物理稳定性、提高的化学稳定性或提高的物 理和化学稳定性的制剂。在此使用的术语蛋白质制剂“物理稳定性”是指，作为蛋白质暴露于热-机械应力 和/或与导致不稳定的界面和表面，例如疏水表面和界面相互作用的结果，蛋白质形成生 物学无活性的和/或不溶的蛋白质聚集物的倾向。水性蛋白质制剂的物理稳定性通过在将 填充在适合的容器(例如，药筒或管形瓶)中的制剂在不同温度下暴露于机械/物理应力 (例如，搅动)各种时间之后目视检查和/或浊度测定的方式来评估。制剂的目视检查在黑 暗背景的精确聚焦光线中进行。制剂的混浊度通过按照例如0到3的浑浊程度的目测评分 排列来表征(没有显示混浊的制剂相应于目测评分0，在日光下显示了可见的浑浊的制剂 相应于目测评分3)。当制剂在日光下显示了可见混浊时，制剂被分类为对蛋白质聚集是物 理不稳定的。做为选择，制剂的混浊度可以通过技术人员公知的简单的浊度测定来评估。水 性蛋白质制剂的物理稳定性也可以通过使用蛋白质构象状态的光谱学试剂或探针来评估。 探针优选地是小分子，其优先地结合蛋白质的非天然构象异构体。蛋白质结构的小分子光 谱学探针的一个实例是硫黄素T。硫黄素T是广泛用于淀粉样纤丝的检测的荧光染料。在 存在纤丝的情况下，可能其他蛋白质结构也一样，当与纤丝蛋白质形式结合时，硫黄素T产 生在约450nm处新的激发最大值和在 约482nm处增强的发射。未结合的硫黄素T在该波长 下是基本上没有荧光的。其他小分子可以用作蛋白质结构从天然到非天然状态改变的探针。例如，优先地 结合蛋白质的暴露的疏水块的疏水块”探针。疏水块一般包埋在天然状态的蛋白质的三级 结构内，但是当蛋白质开始解折叠或变性时被暴露。这些小分子光谱学探针的实例有芳香 族的疏水性染料，例如，蒽(antrhacene)、吖啶、菲咯啉，等等。其他的光谱学探针有氨基酸 金属络合物，例如，疏水性氨基酸例如苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸和缬氨酸等等 的钴金属络合物。在此使用的术语蛋白质制剂的“化学稳定性”是指在蛋白质结构方面的化学的共 价改变，其导致与天然蛋白质结构相比具有潜在更低的生物学效价和/或潜在提高的免疫 原性性质的化学降解产物的形成。各种化学降解产物可以取决于天然蛋白质的类型和性 质、蛋白质暴露的环境而形成。化学降解的消除极其可能不能完全避免，化学降解产物的 提高的数量常常在蛋白质制剂的保存和使用期间见到，这是本领域技术人员公知的。大多 数蛋白质易于脱酰胺作用，其中谷氨酰胺酰基或天冬酰胺酰残基中的侧链酰胺基被水解形 成游离的羧酸。其他降解途径涉及高分子量转化产物的形成，其中两种或更多种蛋白质分 子通过转酰胺基作用和/或二硫化物相互作用共价地相互结合，导致共价结合的二聚体、 寡聚体和聚合物降解产物的形成(Stability of ProteinPharmaceuticals，Ahern. Τ. J. & Manning Μ. C.，Plenum Press, New Yorkl992)。氧化(例如甲硫氨酸残基的氧化)可以作 为化学降解的另一个变体被提及。蛋白质制剂的化学稳定性可以通过在暴露于不同的环境 条件之后的各个时点测量化学降解产物的数量来评估(降解产物的形成常常可以通过例 如提高温度来加速)。每种单独的降解产物的数量常常通过取决于分子大小和/或电荷使 用各种层析技术(例如，SEC-HPLC和/或RP-HPLC)分离降解产物来测定。
因此，如上文阐述的，“稳定化的制剂”是指具有提高的物理稳定性、提高的化学稳 定性或提高的物理和化学稳定性的制剂。一般地，制剂必需在使用和保存(遵照建议的使 用和保存条件)期间是稳定的直到达到期满日期。在本发明的一个实施方式中，包含本发明的衍生物的药物制剂对于超过6周的使 用和超过3年的保存是稳定的。在本发明的另一个实施方式中，包含本发明的衍生物的药物制剂对于超过4周的 使用和超过3年的保存是稳定的。在本发明的进一步的实施方式中，包含本发明的衍生物的药物制剂对于超过4周 的使用和超过两年的保存是稳定的。在本发明的再进一步的实施方式中，包含本发明的衍生物的药物制剂对于超过2 周的使用和超过两年的保存是稳定的。在另一个方面，本发明涉及根据本发明的衍生物用于药物的制备的用途。 在一个实施方式中，根据本发明的衍生物被用于制备用于高血糖、2型糖尿病、损 害的葡萄糖耐受、1型糖尿病、肥胖、高血压、综合征X、血脂异常、认知障碍、动脉粥样硬化、 心肌梗塞、中风、冠心病和其他心血管病症、炎性肠综合征、消化不良和胃溃疡的治疗或预 防的药物。在另一个实施方式中，根据本发明的衍生物被用于制备用于延缓或防止2型糖尿 病中的疾病发展的药物。在另一个实施方式中，根据本发明的衍生物被用于制备用于降低食物摄取、降低 β-细胞细胞凋亡、提高β-细胞功能和β-细胞群集和/或用于恢复对β-细胞的葡萄糖 敏感性的药物。在本发明的一个方面，提供了提高患者中肽，例如GLP-I肽的作用时间的方法，特 征在于所述肽例如GLP-I (7-37)肽是用在此公开的A-B-C-D-衍生化的。在本发明的一个方面，提供了提高患者中肽，例如GLP-I肽的作用时间到超过约 40小时的方法，特征在于所述肽例如GLP-I (7-37)肽是用在此公开的A-B-C-D-衍生的。在本发明的一个方面，提供了包含根据本发明的衍生物和药学上可接受的赋形剂 的药物组合物。在本发明的一个方面，根据本发明的药物组合物适合于胃肠外施用。在本发明的进一步的方面，提供了根据本发明的衍生物用于药物的制备的用途。在本发明的又进一步的方面，提供了根据本发明的衍生物用于制备用于高血糖、2 型糖尿病、损害的葡萄糖耐受、1型糖尿病、肥胖、高血压、综合征X、血脂异常、认知障碍、动 脉粥样硬化、心肌梗塞、冠心病和其他心血管病症、中风、炎性肠综合征、消化不良和胃溃疡 的治疗或预防的药物的用途。在本发明的又进一步的方面，提供了根据本发明的衍生物用于制备用于延缓或防 止2型糖尿病中的疾病发展的药物的用途。使用根据本发明的衍生物的治疗还可以与第二种或更多种药理学活性物质组合， 所述药理学活性物质例如，选自抗糖尿病试剂、抗肥胖试剂、食欲调节试剂、抗高血压试剂、 用于来自或与糖尿病相关的并发症的治疗和/或预防的试剂，和用于来自或与肥胖相关 的并发症和病症的治疗和/或预防的试剂。这些药理学活性物质的实例有胰岛素、磺脲类、双胍、氯茴苯酸(meglitinides)、葡糖苷酶抑制物、高血糖素拮抗剂、DPP-IV(二肽基肽 酶-IV)抑制物、涉及葡糖异生作用和/或糖原分解的刺激的肝脏酶的抑制物、葡萄糖摄取 调节物、修饰脂质代谢的化合物，如抗高血脂试剂如HMG CoA抑制物(statins)、抑胃多肽 (GIP类似物)、降低食物摄取的化合物、RXR激动剂和作用于β-细胞的ATP依赖性钾通 道的试剂；消胆胺、考来替泊、氯贝丁酯、吉非贝齐、洛伐他汀、普伐他汀、辛伐他汀、普罗布 考、右旋甲状腺素、那格列奈(Neteglinide)、瑞格列奈(r印aglinide) ；β-阻断剂，例如阿 普洛尔、阿替洛尔、噻吗洛尔、吲哚洛尔、萘心安和美托洛尔、ACE (血管紧张肽转化酶)抑 制物，例如贝那普利、卡托普利、依那普利、福辛普利、赖诺普利、alatriopril、喹那普利和 雷米普利，钙离子通道阻断剂，例如硝苯地平、非洛地平、尼卡地平、伊拉地平、尼莫地平、地 尔硫卓和维拉帕米和α -阻断剂，例如，多沙唑嗪、乌拉地尔、哌唑嗪和特拉唑嗪；CART(可 卡因安非他明调节的转录产物)激动剂、NPY (神经肽Y)拮抗剂、PYY激动剂、Υ2受体激动 齐IJ、Υ4受体激动剂、混合的Υ2/Υ4受体激动剂、MC4(黑皮质素4)激动剂、orexin拮抗剂、 TNF(肿瘤坏死因子)激动剂、CRF(促肾上腺皮质素释放因子)激动剂、CRF BP(促肾上腺皮 质素释放因子结合蛋白)拮抗剂、皿0(01~^11激动剂、0 3激动剂、胃泌酸调节素和类似物、 MSH(促黑素细胞激素)激动剂、MCH(黑色素细胞-浓缩激素)拮抗剂、CKK (胆囊收缩素) 激动剂、血清素重新摄取抑制物、血清素和去甲肾上腺素重新摄取抑制物、混合的血清素和 产去甲肾上腺素的化合物、5HT(血清素)激动剂、铃蟾肽激动剂、神经节肽(galanin)拮抗 齐IJ、生长激素、生长激素释放化合物、TRH (促甲状腺激素释放激素 )激动剂、UCP 2或3(解 偶联蛋白质2或3)调节物、瘦素激动剂、DA激动剂(溴隐亭(bromocriptin)、doprexin)、 脂酶/淀粉酶抑制剂、RXR (类视黄醇X受体)调节物、TR β激动剂；组胺Η3拮抗剂、抑胃 多肽激动剂或拮抗剂(GIP类似物)、促胃液素和促胃液素类似物。根据本发明的衍生物的治疗还可以与手术组合，所述手术影响葡萄糖水平和/或 脂质内环境稳态，例如胃囊带术或胃旁流。要理解的是，根据本发明的衍生物与一种或更多种上述化合物以及任选地一种或 更多种进一步药理学活性物质的任何适合的组合被认为处于本发明的范围之内。制造肽和其类似物的方法取决于序列，本发明的类似物可以通过一种方法产生，所述方法包括培养含有编 码多肽的DNA序列、并且能在允许所述多肽表达的条件下在适合的营养培养基中表达所述 多肽的宿主细胞，之后从培养物回收产生的肽。用于培养细胞的培养基可以是适合于生长宿主细胞的任何常规的培养基，例如， 含有合适的添加物的最小或复合培养基。适合的培养基可以从商业的供应商获得，或可以 根据公开的配方来制备(例如，在美国典型培养物保藏所的目录中)。细胞产生的肽然后 可以通过常规步骤从培养基中回收，包括通过离心或过滤从培养基分离宿主细胞，通过盐， 例如硫酸铵来沉淀上清液或滤液的蛋白质成分，取决于所讨论的肽，通过各种层析步骤，例 如，离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析等等纯化。编码治疗多肽的DNA序列可以适当地是基因组或cDNA来源的，例如，根据标准技 术通过制备基因组或cDNA库，以及通过使用合成的寡核苷酸探针杂交来筛选编码多肽的 全部或部分的 DNA 序列(参见，例如 Sambrook，J，Fritsch，EF and Maniatis,Τ,Molecular Cloning :ALaboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York,1989)。编码多肽的DNA序列还可以通过已建立的标准方法来合成地制备，例如，Beaucage and Caruthers，Tetrahedron Letters 22 (1981)，1859-1869 所描述的亚磷酰胺方法，或 描述于 Matthes et a 1.，EMBOJournal 3 (1984)，801-805 的方法。DNA 序列还可以通过利 用特异性引物的聚合酶链式反应来制备，例如在US 4，683，202或Saiki et al. , Science 239(1988)，487-491 中描述的。DNA序列还可以插入任何载体中，所述载体可以方便地经历重组DNA操作，载体的选择常常将取决于要导入它的宿主细胞。因而，载体可以是自主复制载体，即，其作为染色 体外的实体存在的载体，其复制与染色体复制无关，例如，质粒。做为选择，载体可以是一种 载体，当被导入宿主细胞中时，其整合到宿主细胞基因组中并且与它所整合入的染色体一 起被复制。载体优选地是表达载体，其中编码肽的DNA序列可操作连接到DNA的转录所需的 其他片段，例如启动子。启动子可以是任何DNA序列，其显示了在所选的宿主细胞中的转录 活性，可以来自编码与宿主细胞同源或异源的蛋白质的基因。用于指导编码本发明的肽的 DNA在多种的宿主细胞中转录的适合的启动子的实例是本领域公知的，例如，参考Sambrook et al.,上文。如有必要，编码肽的DNA序列还可以可操作地连接到适合的终止子、多腺苷酸化 信号、转录增强子序列和翻译增强子序列。本发明的重组载体可以进一步包含允许载体在 所讨论的宿主细胞中复制的DNA序列。载体还可以包含可选择标记物，例如，其产物补足了宿主细胞中的缺陷，或赋予对 药物例如氨苄西林、卡那霉素、四环素、氯霉素、新霉素、勻霉素或甲氨蝶呤的抗性的基因。为了指导本发明的亲本肽进入宿主细胞的分泌途径，分泌信号序列(也称为前导 序列、前原序列或前序列)可以在重组载体中提供。分泌信号序列与编码肽的DNA序列按 照正确的阅读框连接。分泌信号序列通常位于编码肽的DNA序列的5'。分泌信号序列可 以是通常与肽相连的那些，或可以是来自编码其他分泌蛋白质的基因。用于分别连接编码当前的肽的DNA序列、启动子和任选地终止子和/或分泌信号 序列、以及将它们插入到含有复制必需的信息的适合的载体中的步骤，是本领域的技术人 员公知的(参见，例如，Sambrooket al.，上文)。向其中导入DNA序列或重组载体的宿主细胞可以是能够产生当前的肽的任何细 胞，包括细菌、酵母、真菌和高等真核细胞。本领域中公知的和使用的适合的宿主细胞的实 例有，无限制地，大肠杆菌、酿酒酵母或哺乳动物BHK或CHO细胞系。根据本发明的实施方式1. 一种包含肽的肽衍生物，其中至少一个氨基酸残基用A-B-C-D衍生化其中A-是 其中ρ选自由10、11、12、13和14构成的组，d选自由0、1、2、3、4和5构成的组， 禾口-B-选自以下构成的组 其中χ选自由0、1、2、3和4构成的组，y选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12 构成的组，或A 是 其中η选自由14、15、16、17、18和19构成的组，B选自以下构成的组 其中χ选自由0、1、2、3和4构成的组，和-C-选自以下构成的组
，
其中b和e各自独立地选自由0、1和2构成的组，c和f各自独立地选自由0、1和 2构成的组，条件是当c是0时b是1或2，或当c是1或2时b是0，和当f是0时6是1 或2，或当f是1或2时e是0，和-D-附着到所述氨基酸残基以及是接头。2.根据实施方式1的衍生物，其中所述肽是选自GLP-I (7-37)和GLP-I (7-37)的类似物的GLP-I肽，其中，在所述肽中，至少一个氨基酸残基用A-B-C-D-衍生化。3.根据实施方式1-2的任一项的衍生物，其中所述衍生化的氨基酸残基包含氨基基团。4.根据实施方式1-4的任一项的衍生物，其中所述衍生化的氨基酸残基是赖氨酸。5.根据实施方式1-4的任一项的衍生物，其中D选自以下构成的组 (优选这些结构的第1、3、4、5和6个，S卩，排除第2个)，其中k选自由0、1、2、3、4、 5、11和27构成的组，m选自由0、1、2、3、4、5和6构成的组，D在用*描绘的末端附着到氨
基酸残基。6.根据实施方式1-5的任一项的衍生物，其中所述GLP-I类似物包含式(I)的氨基酸序列Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Xaal6-Ser-Xaal8-Xaa19-Xaa20-Glu-Xaa2
1 θ—X&&30_L U—X&&33_ 一 一 Xa3<4o 一 一 一 一 一 一式(I)(SEQ ID No 2)其中 Xaa7是L-组氨酸、D-组氨酸、去氨基-组氨酸、2_氨基-组氨酸、β -羟基-组氨 酸、高组氨酸、N α _乙酰-组氨酸、α _氟甲基_组氨酸、α -甲基-组氨酸、3_吡啶基丙氨 酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；Xaa8 是 Ala、Gly、Val、Leu、lie、Lys、Aib、(1_ 氨基环丙基)羧酸、(1_ 氨基环丁 基)羧酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、(1-氨基环庚基)羧酸，或(1-氨 基环辛基)羧酸； Xaa16 是 Val 或 Leu ；Xaa18 是 Ser、Lys 或 Arg ；Xaa19 是 Tyr 或 Gln ；Xaa20 是 Leu、Met 或 Lys,优选的 Leu 或 Met ；Xaa22 是 Gly、Glu 或 Aib ；Xaa23 是 Gin、Glu、Lys 或 Arg ；Xaa25 是 Ala 或 Val ；Xaa26 是 Lys、Glu 或 Arg ；Xaa27 是 Glu 或 Leu ；Xaa30 是 Ala、Glu、Lys 或 Arg，优选的 Ala、Glu 或 Arg ；Xaa33 Mi Val Lys ；Xaa34 是 Lys、Glu、Asn 或 Arg ；Xaa35 是 Gly 或 Aib ；Xaa36 是 Arg、Gly 或 Lys ；Xaa37 是 Gly、Ala、Glu、Pro、Lys、酰胺或是没有的；Xaa38是Lys、Ser、酰胺或是没有的.Xaa39是Ser、Lys、酰胺或是没有的；Xaa40是Gly、酰胺或是没有的；Xaa41是Ala、酰胺或是没有的；Xaa42是Pro、酰胺或是没有的；
Xaa43是Pro、酰胺或是没有的；Xaa44是Pro、酰胺或是没有的；Xaa45是Ser、酰胺或是没有的；Xaa46是酰胺或是没有的；条件是如果Xaa
38 Λ Χ3^39、似 。、乂船41、Λ 乂船43、乂船44、或是没有白勺，
则下游的每个氨基酸残基也是没有的。7.根据实施方式1-5的任一项的衍生物，其中所述GLP-I类似物包含式(II)的氨基酸序列Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Xaal8-Tyr-Leu-Glu-Xaa22-X aa23~A 1 a~A 1 a-Xaa26-G 1 u_Phe_ 11 e-Xaa30-Trp-Leu-Va 1 -Xaa34-Xaa35-Xaa36-Xaa37-Xaa38式(II)(SEQ ID No 3)其中 Xaa7是L_组氨酸、D-组氨酸、去氨基-组氨酸、2_氨基-组氨酸、β -羟基-组氨 酸、高组氨酸、Na-乙酰-组氨酸、α-氟甲基-组氨酸、α-甲基-组氨酸、3-吡啶基丙氨 酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；Xaa8 是 Ala、Gly、Val、Leu、lie、Lys、Aib、(1_ 氨基环丙基)羧酸、(1_ 氨基环丁 基)羧酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、(1-氨基环庚基)羧酸，或(1-氨 基环辛基)羧酸；Xaa18 是 Ser、Lys 或 Arg ；Xaa22 是 Gly、Glu 或 Aib ；Xaa23 是 Gin、Glu、Lys 或 Arg ；Xaa26 是 Lys、Glu 或 Arg ；Xaa3tl 是 Ala、Glu、Lys 或 Arg，优选的 Ala、Glu 或 Arg ；Xaa34 是 Lys、Glu 或 Arg ；Xaa35 是 Gly 或 Aib ；Xaa36 是 Arg 或 Lys ；Xaa37 是 Gly、Ala、Glu 或 Lys ；
Xaa38是Lys、酰胺或是没有的。8.根据实施方式1-5的任一项的衍生物，其中所述GLP-I类似物包含式(III)的 氨基酸序列，其是在位置18、23、34、36、37或38衍生化的Xaa7-Xaa8-Xaa9-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Xaal6-Ser-Xaal8-Tyr-Leu-Glu -Glu-Xaa23-Ala-Xaa25-Arg-Xaa27-Phe-I Ie-Xaa30-Trp-Leu-Xaa33-Xaa34-Xaa35-Xaa36-X式(III)(SEQ ID No 6)其中Xaa7-Xaa8是L-组氨酸-Aib、去氨基-组氨酸-丙氨酸或去氨基-组氨酸-Aib ；Xaa9是Glu或Glu衍生物，例如α，α 二甲基-Glu ；Xaa16 是 Val 或 Leu ；Xaa18 是 Ser、Lys 或 Arg ；Xaa19 是 Tyr 或 Gln ；Xaa23 是 Gin、Glu、Lys 或 Arg ；Xaa25 是 Ala 或 Val ；Xaa27 是 Glu 或 Leu ；Xaa30 是 Ala、Glu、Arg 或没有的；Xaa33 是 Val 或 Lys ；Xaa34 是 Lys、Glu、Asn 或 Arg ；
Xaa35 是 Gly 或 Aib ；Xaa36 是 Arg 或 Ly s，Xaa37 是 Gly、Aib 或没有的Xaa38 是 Lys、Glu 或没有的Xaa39是酰胺或是没有的； 条件是如果Xaa37是没有的则Xaa38也是没有的。9.根据实施方式1-5的任一项的衍生物，其中所述GLP-I肽包含式(IV)的氨基酸 序列，其是在位置18、23、34、36、37或38用白蛋白结合残基衍生化的Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Xaal8-Tyr-Leu-Glu-Glu-Gln -Ala-Ala-Arg-Glu-Phe-I le-Xaa30_Trp-Leu-Xaa33_Xaa34_Xaa35_Xaa36-Xaa37-Xaa38-Xaa39式(IV)(SEQ ID No 7)其中Xaa7是L-组氨酸、D-组氨酸、去氨基-组氨酸、2_氨基-组氨酸、β -羟基-组氨 酸、高组氨酸、Na-乙酰-组氨酸、α-氟甲基-组氨酸、α-甲基-组氨酸、3-吡啶基丙氨 酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；Xaa8 是 Ala、Gly、Val、Leu、lie、Lys、Aib、(1_ 氨基环丙基)羧酸、(1_ 氨基环丁 基)羧酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、(1-氨基环庚基)羧酸，或(1-氨 基环辛基)羧酸；Xaa18 是 Ser、Lys 或 Arg ；Xaa30 是 Ala、Glu、Lys、Arg 或没有，优选的 Ala、Glu 或 Arg ；Xaa33 Mi Val Lys ；Xaa34 是 Lys > Glu 或 Arg ；Xaa35 是 Gly 或 Aib ；Xaa36 是 Arg 或 Ly s，Xaa37 是 Gly、Aib 或没有，Xaa38是Lys或没有，和Xaa39是酰胺或是没有的。10.根据实施方式1-9的任一项的衍生物，其中Xaa38是没有的。11.根据实施方式1-10的任一项的衍生物，其中Xaa37和Xaa38都是没有的。12.根据实施方式1-11的任一项的衍生物，其中Xaa7是去氨基_组氨酸。13.根据实施方式1-12的任一项的衍生物，其中Xaa8是六让。14. 一种包含根据实施方式1-13的任一项的衍生物和药学上可接受的赋形剂的 药物组合物。15.根据实施方式1-13的任一项的衍生物，其用于高血糖、2型糖尿病、损害的葡 萄糖耐受、1型糖尿病、肥胖、高血压、综合征X、血脂异常、认知障碍、动脉粥样硬化、心肌梗 塞、冠心病和其他心血管病症、中风、炎性肠综合征、消化不良和胃溃疡的治疗或预防。人类GLP-I (7-37)的氨基酸序列作为SEQ ID NO :1被包括在序列表中，SEQ ID N0:2-3和6-7是用于根据本发明的衍生物的GLP-l(7-37)类似物的实例。在序列表中， GLP-I (7-37)和其类似物的计数从氨基酸残基no. 1开始。因而，例如，SEQ ID NO 1的位置1相当于GLP-I (7-37)的位置7 (His)，SEQ ID NO :1的位置16相当于GLP-1 (7-37)的位置 22 (Gly)，SEQ ID NO=I的位置20相当于GLP-I (7-37)的位置26 (Lys)，对于其他位置和其 他序列也是这样。因而，本发明还，例如，在上述实施方式6中，提供了肽衍生物，其中GLP-I (7-37) 类似物包含式(I)的氨基酸序列(SEQ ID NO 2)其中Xaa7 (SEQ ID NO 2的位置no. 1)是L-组氨酸、D-组氨酸、去氨基-组氨酸、2_氨 基_组氨酸、β _羟基-组氨酸、高组氨酸、N α _乙酰-组氨酸、α _氟甲基_组氨酸、α _甲 基_组氨酸、3-吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；Xaa8(SEQ ID NO :2 中的位置 no. 2)是 Ala、Gly、Val、Leu、lie、Lys、Aib、(1_ 氨 基环丙基)羧酸、(1-氨基环丁基)羧酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、 (1-氨基环庚基)羧酸，或(1-氨基环辛基)羧酸；
Xaa16 (SEQ ID NO 2 中的位置 no. 10)是 Val 或 Leu ；Xaa18 (SEQ ID NO :2 中的位置 no. 12)是 Ser、Lys 或 Arg ；Xaa19 (SEQ ID NO :2 中的位置 no. 13)是 Tyr 或 Gln ；Xaa20 (SEQ ID NO 2 中的位置 no. 14)是 Leu、Met 或 Lys ；Xaa22 (SEQ ID NO 2 中的位置 no. 16)是 Gly、Glu 或 Aib ；Xaa23 (SEQ ID NO 2 中的位置 no. 17)是 Gin、Glu、Lys 或 Arg ；Xaa25 (SEQ ID NO 2 中的位置 no. 19)是 Ala 或 Val ；Xaa26 (SEQ ID NO 2 中的位置 no. 20)是 Lys、Glu 或 Arg ；Xaa27 (SEQ ID NO 2 中的位置 no. 21)是 Glu 或 Leu ；Xaa30 (SEQ ID NO 2 中的位置 no. 24)是 Ala、Glu、Lys 或 Arg ；Xaa33 (SEQ ID NO :2 中的位置 no. 27)是 Val 或 Lys ；Xaa34 (SEQ ID NO :2 中的位置 no. 28)是 Lys、Glu、Asn 或 Arg ；Xaa35 (SEQ ID NO 2 中的位置 no. 29)是 Gly 或 Aib ；
Xaa36 (SEQ ID NO :2 中的位置 no. 30)是 Arg, Gly 或 Lys ；Xaa37 (SEQ ID NO 2 中的位置 no. 31)是 Gly、Ala、Glu、Pro、Lys、酰胺或是没有的；Xaa38 (SEQ ID NO 2中的位置no. 32)是Lys、Ser、酰胺或是没有的。Xaa39 (SEQ ID NO 2中的位置no. 33)是Ser、Lys、酰胺或是没有的；Xaa40 (SEQ ID NO 2中的位置no. 34)是Gly、酰胺或是没有的；Xaa41 (SEQ ID NO 2中的位置no. 35)是Ala、酰胺或是没有的；Xaa42 (SEQ ID NO 2中的位置no. 36)是Pro、酰胺或是没有的；Xaa43 (SEQ ID NO 2中的位置no. 37)是Pro、酰胺或是没有的；Xaa44 (SEQ ID NO 2中的位置no. 38)是Pro、酰胺或是没有的；Xaa45 (SEQ ID NO 2中的位置no. 39)是Ser、酰胺或是没有的；Xaa46 (SEQ ID NO 2中的位置no. 40)是酰胺或是没有的；条件是如果Xaa 38、Xaa39、Xaa40、Xaa41、Xaa42、Xaa43、Xaa44、Xaa45 或 Xa&46(分力U 为 SEQ ID NO :2中的位置no. 32到40)是没有的，则每个下游的氨基酸残基也是没有的。本发明另外提供了相应于根据本发明的任何权利要求和特定实施方式的其他衍 生物、方法和其用途以及具有其内容物的药物组合物，其中相应的位置编号修改是如上所解释的进行的，在上文对实施方式6的衍生物显示了。例如，在优先权申请的权利要求 7-13 (上述实施方式7-13)中，其涉及其中GLP-I类似物包含式(II、III和IV)的氨基酸 序列(分别为SEQ ID N0:3、6和7)的本发明的特定衍生物，位置编号可以如上文解释的修 改来指相应的SEQ ID NO而代替所述式子。本发明的其他实施方式是8a. 一种GLP-I衍生物，其包含式(I)的氨基酸序列Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Xaal6-Ser-Xaal8-Xaa19-Xaa20-Glu-Xaa2 2_X&&23_Al￡l_X￡l￡l25_Xa￡l26_Xa￡l27_Phe_11 θ—X&&30_T^P-LeU-X&&33_
_Xclclgg _Χ&&40 _Χ&&41_^ ￡13-42 _^ ￡13-43 _^ ￡13-44 _^ ￡13-45 _^ ￡13-46式(I)(SEQ ID No 2)其中
Xaa7是L-组氨酸、D-组氨酸、去氨基-组氨酸、2_氨基-组氨酸、β -羟基-组 氨酸、高组氨酸、Na-乙酰-组氨酸、α-氟甲基-组氨酸、α-甲基-组氨酸、2 (3H-咪 唑-4-基)乙酰基、3-吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；Xaa8 是 Ala、Gly、Val、Leu、lie、Lys、Aib、(1_ 氨基环丙基)羧酸、(1_ 氨基环丁 基)羧酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、(1-氨基环庚基)羧酸，或(1-氨 基环辛基)羧酸；Xaa16 是 Val 或 Leu ；Xaa18 是 Ser、Lys 或 Arg ；Xaa19 是 Tyr 或 Gln ；Xaa20 是 Leu、Met 或 Lys ；Xaa22 是 Gly、Glu 或 Aib ；Xaa23 是 Gin、Glu、Lys 或 Arg ；Xaa25 是 Ala 或 Val ；Xaa26 是 Lys、Glu 或 Arg ；Xaa27 是 Glu 或 Leu ；Xaa30 是 Ala、Glu、Lys 或 Arg ；Xaa33 是 Val、Thr (0_ 苯甲基)或 Lys ；Xaa34 是 Lys、Glu、Gin、Asn 或 Arg ；Xaa35 是 Gly、Aib 或没有的；Xaa36 是 Ala、Gly、Lys 或没有的；Xaa37 是 Gly、Ala、Glu、Pro、Lys、ε -氨基-Lys、酰胺或是没有的；Xaa38是Lys、Ser、酰胺或是没有的；Xaa39是Ser、Lys、酰胺或是没有的；Xaa40是Gly、酰胺或是没有的；Xaa41是Ala、酰胺或是没有的；Xaa42是Pro、酰胺或是没有的；
Xaa43是Pro、酰胺或是没有的；
Xaa44是Pro、酰胺或是没有的；
Xaa45是Ser、酰胺或是没有的；Xaa46是酰胺或是没有的；条件是如果Xaa
38 Λ Χ3^39、似 。、乂船41、Λ 乂船43、乂船44、或是没有白勺，
则每个下游的氨基酸残基也是没有的。9a. 一种GLP-1衍生物，其包含式(II)的氨基酸序列Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Xaal8-Tyr-Leu-Glu-Xaa22-X aa23~A 1 a~A 1 a-Xaa26-G 1 u_Phe_ 11 e-Xaa30-Trp-Leu-Va 1 -Xaa34-Xaa35-Xaa36-Xaa37-Xaa38式(II)(SEQ ID No 3)其中Xaa7是L_组氨酸、D_组氨酸、去氨基-组氨酸、2_氨基-组氨酸、β -羟基-组氨 酸、高组氨酸、Na-乙酰-组氨酸、α -氟甲基-组氨酸、α -甲基-组氨酸、2 (3Η-咪唑-4-基) 乙酰基、3-吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；Xaa8 是 Ala、Gly、Val、Leu、lie、Lys、Aib、(1_ 氨基环丙基)羧酸、(1_ 氨基环丁 基)羧酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、(1-氨基环庚基)羧酸，或(1-氨 基环辛基)羧酸；Xaa18 是 Ser、Lys 或 Arg ；Xaa22 是 Gly、Glu 或 Aib ；Xaa23 是 Gin、Glu、Lys 或 Arg ；Xaa26 是 Lys、Glu 或 Arg ；Xaa30 是 Ala、Glu、Lys 或 Arg ；
Xaa34 是 Lys、Glu、Gln 或 Arg ；Xaa35 是 Gly、Aib 或没有；Xaa36 是 Arg、Lys 或没有；Xaa37 是 Gly、Ala、Glu、Pro、Lys 或 ε -氨基-Lys ；
Xaa38是Lys、酰胺或是没有的。IOa.优选的根据实施方式8a_9a的任一项的GLP-1衍生物，其中所述GLP-1类似 物包含式(III)的氨基酸序列，其是在位置18、23、26、30、31、34、36、37或38衍生化的Xaa7-Xaa8-Xaa9-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Xaal6-Ser-Xaal8-Tyr-Leu-Glu -Glu-Xaa23-Ala-Xaa25-Arg-Xaa27-Phe-I Ie-Xaa30-Trp-Leu-Xaa33-Xaa34-Xaa35-Xaa36-X式(III)(SEQ ID No 6)其中Xaa7-Xaa8是2 (3H-咪唑_4_基)乙酰-丙氨酸、L-组氨酸-Aib、去氨基-组氨 酸_丙氨酸或去氨基_组氨酸-Aib ；Xaa9是Glu或Glu衍生物，例如，α，α 二甲基-Glu ；Xaa16 是 Val 或 Leu ；Xaa18 是 Ser、Lys 或 Arg ；Xaa19 是 Tyr 或 Gln ；Xaa23 是 Gin、Glu、Lys 或 Arg ；
Xaa25 是 Ala 或 Val ；Xaa27 是 Glu 或 Leu ；Xaa30 是 Ala、Glu、Lys、Arg 或没有；Xaa33 是 Val、Thr (0_ 苯甲基)或 Lys ；Xaa34 是 Lys> Glu、Gin、Asn 或 Arg ；
Xaa35 是 Gly、Aib 或没有；Xaa36 是 Arg、Lys 或没有；Xaa37 是 Gly、Aib、Pro、ε -氨基-Lys 或没有；Xaa38 是 Lys、Glu 或没有的；Xaa39是酰胺或是没有的；条件是如果Xaa37是没有的则Xaa38也是没有的。Ila. 一种GLP-1衍生物，其包含式(IV)的氨基酸序列，其是在位置18、23、26、30、 31、34、36、37或38用白蛋白结合残基衍生化的Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Xaal8-Tyr-Leu-Glu-Glu-Gln -Ala-Ala-Arg-Glu-Phe-I le-Xaa30_Trp-Leu-Xaa33_Xaa34_Xaa35_Xaa36-Xaa37-Xaa38-Xaa39式(IV)(SEQ ID No 7)其中Xaa7是L-组氨酸、D-组氨酸、去氨基-组氨酸、2_氨基-组氨酸、β -羟基-组氨 酸、高组氨酸、Na-乙酰-组氨酸、α -氟甲基-组氨酸、α -甲基-组氨酸、2 (3Η-咪唑-4-基) 乙酰基、3-吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；Xaa8 是 Ala、Gly、Val、Leu、lie、Lys、Aib、(1_ 氨基环丙基)羧酸、(1_ 氨基环丁 基)羧酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、(1-氨基环庚基)羧酸，或(1-氨 基环辛基)羧酸；Xaa18 是 Ser、Lys 或 Arg ；Xaa30 是 Ala、Glu、Lys 或 Arg ；Xaa33 Mi Val Lys ；Xaa34 是 Lys、Glu、Gln 或 Arg ；Xaa35 是 Gly、Aib 或没有；Xaa36 是 Arg、Lys 或没有；Xaa37 是 Gly、Aib、Pro、ε -氨基-Lys 或没有；Xaa38是Lys或没有；和Xaa39是酰胺或是没有的。12a.根据实施方式8a_lla的任一项的衍生物，其中Xaa38是没有的。13a.根据实施方式8a_12a的任一项的衍生物，其中Xaa37和Xaa38都是没有的。14a.根据实施方式8a_13a的任一项的衍生物，其中Xaa7是去氨基-组氨酸。15a.根据实施方式8a_14a的任一项的衍生物，其中Xaa8是Aib。16a. GLP-1衍生物，其选自以下的N- ε 37 {2_ [2_ (2_ {2_ [2_ ((R) _3_ 羧基 _3_ {[1_ (19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_ 羰
基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[去氨基 His7, Glu22, Arg26, Ar34, Ls37JGLP-I (7-37)酰胺；N- ε 20- {2_ [2~ (2~ {2~ [2~ ((R) _3_ 羧基 _3_ {[ 1_ (19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_ 羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[Aib2， Leu14, Lys20, Gln28, Ser (0-苯甲基)39] exendin-4 (1-39)酰胺；N- ε 26 {2_ [2_ (2_ {2_ [2_ ((R) _3_ 羧基 _3_ {[1_ (19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_ 羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[去氨 基 His7，Arg34]GLP-I-(7-37)；N- ε 37 {2_ [2_ (2_ {2_ [2_ (⑶ _3_ 羧基 _3_ {[1_ (19-羧基十 九烷酰基)哌啶 _4_ 羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[Aib8， Glu22, Arg26, Arg34, Lys37]GLP-I-(7-37)酰胺；Ν-ε 23-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)-3-[1-(17-羧基十七烷酰基氨基)哌啶 _4_ 基 羰基氨基]-3-(羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰 基][Aib8, Arg26, Arg34]GLP-I-(7-37)；Ν-ε 37-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)-3-[1-(17-羧基十七烷酰基)哌啶 _4_ 基羰基 氨基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基][去 氨基 His7，Glu22 Arg26, Arg 34, Phe (m-CF3) 28]GLP-I- (7-37)酰胺；[去氨基 His7, Glu22, Arg26, Arg34]GLP-1- (7-37) -Lys (2- {2-[2- (2- {2-[2- ((S) -4-羧基-4-{[1-(19-羧基十九烷酰基)哌啶-4-羰基]氨基} 丁酰基氨基)乙氧基]乙 氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基)；N- ε 2(1 ({2- [2_ (2_ {2_ [2_ ((R) _3_ 羧基 _3_ {[ 1_ (17-羧基十七烷酰基)哌啶 _4_ 羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基)[Aib8， Lys20, Arg26, Glu30, Thr (0-苯甲基)33，]GLP-I-(7-37)酰胺；Ν-ε 30 {2-[2-(2-{2-[2-((S)-3-羧基-3-{[1-(19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[Aib8， Glu22, Arg26, Lys30]GLP-I-(7-37)；Ν-ε 31 {2-[2-(2-{2-[2-((S)-3-羧基-3-{[1-(19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_ 羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[Aib8， Glu22, Arg26, Lys 31]GLP-I-(7-37)；N- ε 2(1 ({2_ [2_ (2_ {2_ [2_ ((R) _3_ 羧基 _3_ {[ 1_ (17-羧基十七烷酰基)哌啶 _4_ 羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基)[Aib8， Lys20, Arg26, 2-萘基丙氨酸 28，Glu30, ] GLP-I (7-37)酰胺；[Aib8, Glu22, Arg26, Arg34, ]GLP-I-(7-37)Lys[2-(2-[2-(2-[2-(2-((S)-4-[1-[19-羧基十九烷酰基]哌啶-4-羰基氨基]-4-羧基丁酰氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰氨 基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]酰胺；N- ε 2(1 ({2_ [2_ (2_ {2_ [2_ ((R) _3_ 羧基 _3_ {[ 1_ (17-羧基十七烷酰基)哌啶 _4_ 羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基)[Aib8， Lys20, Ar26, 2-萘基丙氨酸 12，Glu30, ] GLP-I-(7-37)酰胺；[去氨基 His7, Glu22, Arg26, Arg34]GLP-1- (7-37) Lys [2- (2-[2- (2-[2- (2- ((S)-4-[l-[19-羧基十九烷酰基]哌啶-4-羰基氨基]-4-羧基丁酰氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]酰胺；Ν-ε 31-(2-{2-[2-(2-{2-[2-((S)_3-羧基-3-{[l-(19-羧基-十九烷酰基)哌 啶-4-羰基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰 基)[Aib8, Glu22, Arg26, Lys31, Arg34]GLP-I-(7-37)；N- ε 26-[⑶_4_羧基_4_ ({反式_4_ [ (19-羧基十九烷酰基氨基)甲基]环己烷 羰基}氨基)丁酰基][Aib8，Arg34]GLP-l-(7-37)；Ν-ε 26-{4-[(S)-4-羧基-4-({反式-4-[(19-羧基十九烷酰基氨基)甲基]环己 烷羰基}氨基)丁酰氨基]丁酰基} [Aib8，Arg34] GLP-I-(7-37)；N- ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_({反式 _4-[(19_ 羧基十九烷酰基氨 基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-37)；
N- ε 26- [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基十九烷酰基 氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰氨基]乙氧基}乙氧 基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-37)-酰胺；N- ε 18- {2_ (2_ (2_ (2_ [2_ (2_ [⑶ _4_ 羧基 _4_ ({4_ [ (19-羧基十九烷酰基氨基) 甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基)乙氧基]乙酰基)乙氧基)乙氧基)乙 酰基} [Aib8，Lys 18，Arg26, Arg34] GLP-I (7-37)；N- ε 20-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((S)-4-[反式 _4_([19-羧基十九烷酰基氨基]甲 基)环己烷羰基氨基]-4-羧基丁酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰氨基)乙氧基]乙氧 基)乙酰基][去氨基 His1, Lys20, Ser (0_ 苯甲基)33，Ser (0-苯甲基)39] exendin (1-39)；[Aib8, Glu22, Arg26, Arg34]GLP-I-(7-37)Lys[2-(2-[2-(2-[2-(2-((S)-3-[4-( [19-羧基十九烷酰基氨基]甲基)环己基羰基氨基]-3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧 基]乙酰氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]酰胺；N- ε 37- [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基十九烷酰基 氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰氨基]乙氧基}乙氧 基)乙酰基][Aib8, Glu22, Arg26, Arg34, Lys37]GLP-I-(7-37)酰胺；N- ε 37- [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基十九烷酰基 氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰氨基]乙氧基}乙氧 基)乙酰基][去氨基 His7，Glu22，Arg26, Arg34, Lys37]GLP-I-(7-37)酰胺；N- ε 37- [2~ (2_ {2_ [2~ (2_ {2_ [⑶ _4_ 羧基 _4_ ({4_ [(反式-19-羧基十九烷酰基 氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰氨基]乙氧基}乙氧 基)乙酰基][去氨基 His7, Arg26，Arg34，Lys37]GLP-I-(7-37)酰胺；N- ε 37- [2~ (2_ {2_ [2~ (2_ {2_ [⑶ _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基十九烷酰基 氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰氨基]乙氧基}乙氧 基)乙酰基][去氨基圯87，611122，六『826，六『834，1^837]61^-1-(7-37)；[去氨基 Hi s7，Glu22，Arg26，Arg34] GLP-I- (7-37) Lys [2- (2- {2- [2- (2- {2- [4-羧 基-4-({反式-4-[(19-羧基十九烷酰基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰氨基]乙 氧基}乙氧基)乙酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]-酰胺；[去氨基His7，Arg26, Arg34]GLP-I-(7-37)Lys[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)-3-[反式-4-((9-羧基十九烷酰基氨基]甲基)环己基羰基氨基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基) 乙氧基]乙酰氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]酰胺；N- ε 26[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-({4-[(19-羧基十九烷酰基氨基)甲 基]环己烷羰基}氨基)丁酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰 基[Aib8，Lys 26] GLP-I (7-37)酰胺；N- ε 26 [2_ (2_[2_ (2_[2_ (2_ (⑶ _2_[反式 _4_ ((9_ 羧基十九烷酰基氨基]甲基) 环己基羰基氨基]-4-羧基丁酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰氨基)乙氧基]乙氧基) 乙酰基][Aib8，Lys26] GLP-I (7-37)酰胺；N- ε 37- [2~ (2_ {2_ [2~ (2_ {2_ [⑶ _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基十九烷酰基 氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰氨基]乙氧基}乙氧 基)乙酰基][去氨基见87，六印26，六印34，1^837]61^-1-(7-37)；N- ε 37- [2~ (2_ {2_ [2~ (2_ {2_ [⑶ _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基十九烷酰基 氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰氨基]乙氧基}乙氧 基)乙酰基][去氨基 His7, Glu22, Arg26, Glu30, Arg34, Lys37]GLP-I-(7-37)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{4-[4-(16_(lH-四 唑-5-基)-十六烷酰基氨磺酰基)丁酰氨基]-丁酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰氨基]乙 氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-37)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4-((S)_4-羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-37)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{6-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-37)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{4-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]丁酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-34)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4-((S)_4-羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]-十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基 氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-34)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{6-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-34)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4-((S)_4-羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-35)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{6-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34]GLP-l-(7-35)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{6-[4-(16_(1Η-四唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8, Arg34]GLP-I-(7-36)酰胺；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{6-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34]GLP-l-(7-35)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Lys33，Arg34] GLP-I-(7-34)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-36)酰胺；N- ε 26-[2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基-4_((S)-4-羧基-4-{12-[4-(16-(1Η-四唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨 基]十二烷酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基} 乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Lys26，Arg34]GLP-I-(7-36) 酰胺；[Aib8, Glu22, Arg26, Arg34] GLP+(7-37) Lys [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧 基-4-((S)-4-羧基-4-{12-[4-(16-(1Η-四唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨 基]十二烷酰基氨基} “ 丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]酰胺；N-ε 20-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8, Lys20, Glu22, Arg26, Glu30, Pro37]GLP-I-(7-37) 酰胺；N-ε 37-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(lH-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Glu22，Arg26，Arg34，Lys37] GLP-I-(7-37)酰胺；N-ε 37-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4-((S)_4-羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][去氨基圯87，611122，六印26，六印34，1^837]61^-1-(7-37) 酰胺；N-ε 37-[[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4_((S)_4-羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][去氨基圯87，六印26，六印34，1^837]61^-1-(7-37)酰胺；[Aib8, Glu22, Arg26, Glu30, Pro37] GLP-I-(7-37) Lys [2-(2-{2-[4-羧 基-4-(4-羧基-4-{4-[4-(16-1H-四唑-5-基-十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]丁酰 基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]；[Aib8, Glu22, Arg26, Glu30, Pro37]GLP-I- ((7-37) Lys (2- (2- (3- (2- (2- (2- (2- (2 -(2- (2- (2- (2- (2- (2- (2- [4- (S)-羧基 ~4~ (4- (S)-羧基 ~4~ (4- {4- [ 16-(四唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基]丁酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基)丁酰基氨基]；乙氧基)乙氧 基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙 氧基)丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基)肽；N- α 37- [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基十九烷酰基 氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基} 乙氧基)乙酰基][去氨基 His7，Glu22，Arg26，Arg34，ε -Lys37]GLP-I-(7-37)；N-α 8-[2-(4-咪唑基)乙酰基]N-ε 37_[2_ (2_ {2_[2_ (2_ {2_[ (S) _4_ 羧 基-4-({反式-4-[(19-羧基十九烷酰基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Glu22，Arg26，Arg34，Lys37] GLP-I-(8-37)；[去氨基 His7，Glu22，Arg26，34]-GLP-l(7-37)-Lys-(2-{2-[2-((S)-4-羧 基-4-{[1-(19-羧基十九烷酰基)哌啶-4-羰基]氨基} 丁酰基氨基)乙氧基]乙氧基} 乙酰基)肽；[去氨基 His7，Glu22, Arg26，34]-GLP-1 (7-37)-Lys_[2-(2_ {2_[2_ (2_ {2_[4_ 羧 基-4-({4-[(19-羧基十九烷酰基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基} 乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]肽；[去氨基 His7，Glu22，Arg26，34]-GLP-I (7-37)-Lys ((S)-4-羧 基-4-(2-{2-[2-((S)-4-羧基-4-{[l-(19-羧基十九烷酰基)哌啶_4_羰基]氨基} 丁酰 基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)丁酰基)肽；[去氨基 His7，Glu22，Arg26，34]-GLP-l(7-37)-Lys-(2-(2-{2-[(S)-4-羧 基-4-(2-{2-[2-((S)-4-羧基-4-{[l-(19-羧基十九烷酰基)哌啶_4_羰基]氨基} 丁酰 基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基)肽；[去氨基 His7，Arg26，34]-GLP-l(7-37)-Lys(2-{2-[2-(2-{2-[2-((S)-4-羧 基-4-{[1-(19-羧基十九烷酰基)哌啶-4-羰基]氨基} 丁酰基氨基)乙氧基]乙氧基} 乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基)肽；Ν-ε 37-(2-{2-[2-(2-{2-[2-((5)-4-羧基-4-{[1-(19_羧基十九烷酰基)哌 啶-4-羰基]氨基} 丁酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰 基)[去氨基 His7，Arg26，Arg34，Lys37]GLP-I-(7-37)；Ν-ε 37-((S)_4-羧基-4-{[l_(19-羧基-十九烷酰基)_哌啶-4-羰基]-氨 基}-丁酰基)[去氨基见87，4印26，々印34，Lys37]GLP-I-(7-37)；[去氨基His7，Glu22，Arg26，34] -GLP-1 (7-37) -Lys- ((S) _4_羧基-4- {[1_ (19-羧 基_十九烷酰基)_哌啶-4-羰基]-氨基}_ 丁酰基)肽；N-ε 26-[2-(2-{2-[(R)-4-羧基 _4-((R)_4-羧基-4-{12-[4-(16_1Η-四 唑-5-基-十六烷酰基氨磺酰基) 丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]_[Aib8，Arg34] GLP-I (7-37)；N-ε 37-{2-[2-(2-{(S)-4-[(S)-4-(12-{4-[16-(2-叔-丁 基-2H-四 唑-5-基)-十六烷酰基氨磺酰基]丁酰基氨基}十二烷酰基氨基)-4-羧基丁酰基氨 基]-4-羧基丁酰基氨基}乙氧基)乙氧基]乙酰基}[去氨基见87，611122^印26^印34， Lys37]GLP-I(7-37)；
N-ε 37-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][去氨基圯87，六印26，六印34，1^837]61^-1-(7-37)；N- ε 37- [2~ (2_ {2_ [2~ (2_ {2_ [⑶ _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基十九烷酰基 氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基} 乙氧基)乙酰基][Aib8，Glu22，Arg26，Arg34，Lys37] GLP-I-(7-37)；[ImPr7, Arg26'34, Glu22]GLP-I- (7-37) Lys [2- (2- [2- ((S) -4- ((S) -4- (12-[4- (16-IH-四唑-5-基十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基)-4-羧基丁酰基氨 基)-4-羧基丁酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]-酰胺；Ν-ε 36-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)_3-[反式-4-((9_ 羧基十九烷酰基氨基]甲 基)环己基羰基氨基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧 基)乙酰基][Aib8，Glu22，Gln34] GLP-I-(7-37)；
Ν-ε 26-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)_3-[反式-4_((9-羧基十九烷酰基氨基]甲 基)环己基羰基氨基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧 基)乙酰基][Aib8，Glu22，Gln34] GLP-I-(7-37)；Ν-ε 18-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)_3-[反式-4_((9-羧基十九烷酰基氨基]甲 基)环己基羰基氨基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧 基)乙酰基][Aib8，22，35，Lysl8，Arg26，34]GLP-l-(7-37)；禾口Ν-ε 18-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)_3-[反式-4_((9-羧基十九烷酰基氨基]甲 基)环己基羰基氨基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧 基)乙酰基][Aib8, Lysl8, Glu22, Gln34]GLP-I-(7-37).根据本发明的其他实施方式1. 一种包含肽的肽衍生物，其中至少一个氨基酸残基用A-B-C-D衍生化其中A-是
OI-N-nA其中ρ选自由10、11、12、13和14构成的组，d选自由0、1、2、3、4和5构成的组， 禾口-B-选自以下构成的组 其中χ选自由0、1、2、3和4构成的组，y选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12 构成的组，或A 是 其中η选自由14、15、16、17、18和19构成的组，B选自以下构成的组 其中χ选自由0、1、2、3和4构成的组，和-C-选自由以下构成的组 其中b和e各自独立地选自由O、1和2构成的组，c和f各自独立地选自由O、1和 2构成的组，条件是当c是O时b是1或2，或当c是1或2时b是0，和当f是0时6是1 或2，或当f是1或2时e是0，和-D-附着到所述氨基酸残基以及是接头。2.根据实施方式1的衍生物，其中所述肽是选自GLP-I (7-37)和GLP-I (7_37)的 类似物的GLP-I肽，其中，在所述肽中，至少一个氨基酸残基用A-B-C-D-衍生化。3.根据实施方式1-2的任一项的衍生物，其中所述衍生化的氨基酸残基包含氨基基团。4.根据实施方式1-3的任一项的衍生物，其中所述衍生化的氨基酸残基包含侧链 中的伯氨基基团。
5.根据实施方式1-4的任一项的衍生物，其中所述衍生化的氨基酸残基是赖氨酸。
6.根据实施方式1-5的任一项的衍生物，其中仅一个氨基酸残基被衍生化。7.根据实施方式1-6的任一项的衍生物，其中A-是 8.根据实施方式1-7的任一项的衍生物，其中η选自由15和17构成的组，更优选 的是17。9.根据实施方式1-6的任一项的衍生物，其中A-是 10.根据实施方式1-6和9的任一项的衍生物，其中ρ选自由12、13和14构成的 组，更优选的是13。11.根据实施方式1-6和9-10的任一项的衍生物，其中d选自由0、1、2、3和4构 成的组，更优选的0、1和2，最优选的1。12.根据实施方式1-6和9-11的任一项的衍生物，其中d选自由0、1和2构成的 组，P选自由12、13或14构成的组，更优选的，d选自由1禾Π 2构成的组，P选自由13和14 构成的组，最优选的d是1和ρ是13。13.根据实施方式1-12的任一项的衍生物，其中_B_是14.根据实施方式1-12的任一项的衍生物，其中_B_是15.根据实施方式1-12的任一项的衍生物，其中_B_是 16.根据实施方式1-12的任一项的衍生物，其中-B-是 17.根据实施方式1-12和16的任一项的衍生物，其中χ选自由0、1和2构成的 组，更优选的X选自由0和1构成的组，最优选的X是1。18.根据实施方式1-6和9-12的任一项的衍生物，其中是 19.根据实施方式1-6和9-13的任一项的衍生物，其中y选自由2、3、4、5、6、7、8、 9和10构成的组，更优选的y选自由2、3、4、5、6、7和8构成的组。20.根据实施方式1-19的任一项的衍生物，其中_C_是 21.根据实施方式20的衍生物，其中c选自由0和1构成的组，b选自由1和2构 成的组，更优选的b是1和c是0。22.任何实施方式1-19的任一项的衍生物，其中_C_是 23.根据实施方式22的衍生物，其中f选自由0和1构成的组，e选自由1和2构 成的组，更优选的e是1和f是0。24.根据实施方式1-19的任一项的衍生物，其中_C_是 25.根据实施方式1-24的任一项的衍生物，其中D选自以下构成的组 其中k选自由0、1、2、3、4、5、11和27构成的组，m选自由0、1、2、3、4、5和6构成 的组，D在用*描绘的末端附着到氨基酸残基。26.根据实施方式1-25的任一项的衍生物，其中_D_是 27.根据实施方式25-26的任一项的衍生物，其中k选自由1、2、3、11和27构成的 组，更优选的k是1。28.根据实施方式25-27的任一项的衍生物，其中m选自由0、1、2、3和4构成的 组，更优选的m选自由0、1和2构成的组。29.根据实施方式29的衍生物，其中m选自由0、1、2、3和4构成的组，更优选的m 选自由0、1和2构成的组。30.根据实施方式1-25的任一项的衍生物，其中_D_是 31.根据实施方式31的衍生物，其中m选自由0、1、2、3和4构成的组，更优选的m 选自由0、1和2构成的组。32.根据实施方式1-25的任一项的衍生物，其中_D_是 33.根据实施方式33的衍生物，其中m选自由0、1、2、3和4构成的组，更优选的m 选自由0、1和2构成的组。34.根据实施方式1-25的任一项的衍生物，其中_D_是 35.根据实施方式35的衍生物，其中m选自由0、1、2、3和4构成的组，更优选的m 选自由0、1和2构成的组。36.根据实施方式1-25的任一项的衍生物，其中_D_是
37.根据实施方式37的衍生物，其中m选自由0、1、2、3和4构成的组，更优选的m 选自由0、1和2构成的组。38.根据实施方式1-38的任一项的衍生物，其中A-B_C_D-选择和组合自 39.根据实施方式1-38的任一项的衍生物，其中A-B_C_D-选择和组合自 40.根据实施方式1-40的任一项的衍生物，其中A-B_C_D-选自以下构成的组 41.根据上述实施方式的任一项的衍生物，其中所述GLP-I类似物包含式(I)的氨 基酸序列Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Xaal6-Ser-Xaal8-Xaa19-Xaa20-Glu-Xaa2 2-Xaa23-Ala-Xaa25-Xaa26-Xaa27-Phe-I Ie-Xaa30-Trp-Leu-Xaa33-Xaa34-Xaa35-Xaa36-Xaa37-Xaa38 -Xaa39^aa40-Xaa41-Xaa42-Xaa43-Xaa44-Xaa45-Xaa46式(I)(SEQ ID No 2)其中
Xaa7是L-组氨酸、D-组氨酸、去氨基-组氨酸、2_氨基-组氨酸、β -羟基-组氨 酸、高组氨酸、N α _乙酰-组氨酸、α _氟甲基_组氨酸、α -甲基-组氨酸、3_吡啶基丙氨 酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；Xaa8 是 Ala、Gly、Val、Leu、lie、Lys、Aib、(1_ 氨基环丙基)羧酸、(1_ 氨基环丁 基)羧酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、(1-氨基环庚基)羧酸，或(1-氨 基环辛基)羧酸；Xaa16 是 Val 或 Leu ；Xaa18 是 Ser、Lys 或 Arg ； Xaa19 是 Tyr 或 Gln ；Xaa20 是 Leu、Met 或 Lys ；Xaa22 是 Gly、Glu 或 Aib ；Xaa23 是 Gin、Glu、Lys 或 Arg ；Xaa25 是 Ala 或 Val ；Xaa26 是 Lys、Glu 或 Arg ；Xaa27 是 Glu 或 Leu ；Xaa30 是 Ala、Glu、Lys 或 Arg ；Xaa33 是 Val 或 Lys ；Xaa34 是 Lys、Glu、Asn 或 Arg ；Xaa35 是 Gly 或 Aib ；Xaa36 是 Arg、Gly 或 Lys ；Xaa37 是 Gly、Ala、Glu、Pro、Lys、酰胺或是没有的；Xaa38是Lys、Ser、酰胺或是没有的。Xaa39是Ser、Lys、酰胺或是没有的；Xaa40是Gly、酰胺或是没有的；Xaa41是Ala、酰胺或是没有的；Xaa42是Pro、酰胺或是没有的；Xaa43是Pro、酰胺或是没有的；Xaa44是Pro、酰胺或是没有的；Xaa45是Ser、酰胺或是没有的；Xaa46是酰胺或是没有的；条件是如果Xaa
38 Λ Χ3^39、似 。、乂船41、Λ 乂船43、乂船44、或是没有白勺，
则每个下游的氨基酸残基也是没有的。42.根据上述实施方式的任一项的衍生物，其中所述GLP-I类似物包含式(II)的
氨基酸序列Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Xaal8-Tyr-Leu-Glu-Xaa22-X aa23~A 1 a~A 1 a-Xaa26-G 1 u_Phe_ 11 e-Xaa30-Trp-Leu-Va 1 -Xaa34-Xaa35-Xaa36-Xaa37-Xaa38式(II)(SEQ ID No 3)其中Xaa7是L_组氨酸、D_组氨酸、去氨基-组氨酸、2_氨基-组氨酸、β -羟基-组氨酸、高组氨酸、Na-乙酰基-组氨酸、α-氟甲基-组氨酸、α-甲基-组氨酸、3-吡啶基丙 氨酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；Xaa8 是 Ala、Gly、Val、Leu、lie、Lys、Aib、(1_ 氨基环丙基)羧酸、(1_ 氨基环丁 基)羧酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、(1-氨基环庚基)羧酸，或(1-氨 基环辛基)羧酸；Xaa18 是 Ser、Lys 或 Arg ；Xaa22 是 Gly、Glu 或 Aib ；Xaa23 是 Gin、Glu、Lys 或 Arg ；Xaa26 是 Lys、Glu 或 Arg ；
Xaa30 是 Ala、Glu、Lys 或 Arg ；Xaa34 是 Lys、Glu 或 Arg ；Xaa35 是 Gly 或 Aib ；Xaa36 是 Arg 或 Lys ；Xaa37 是 Gly、Ala、Glu 或 Lys ；Xaa38是Lys、酰胺或是没有的。43.根据上述实施方式的任一项的衍生物，其中所述GLP-I肽是GLP_1 (A-B)，其 中A是从1到7的整数，B是从38到45的整数，以及任选地具有一个或更多个取代，其中 GLP-I肽是经由亲水性的间隔区对C-末端氨基酸残基衍生化的，任选地还对其他氨基酸残 基衍生化。44.上述实施方式的任一项的衍生物，其中所述GLP-I肽选自GLP-I (7-35)、 GLP-I (7-36)、GLP-I (7-36)-酰胺、GLP—1 (7-37)、GLP-I (7-38)、GLP-I (7-39)、GLP-I (7-40) 和GLP-I (7-41)，和任选地具有一个或更多个取代。45.根据实施方式1-45的任一项的衍生物，其是GLP-I (7-37) (SEQ ID NO 1)的 衍生物。46.根据实施方式1-45的任一项的衍生物，其是GLP-1 (7-37) (SEQID NO 1)的类 似物的衍生物。47.根据实施方式47的衍生物，其中所述GLP-I类似物包含与GLP-I (7-37) (SEQ ID NO 1)相比被取代、添加或删除的不超过十五个氨基酸残基。48.根据实施方式47的衍生物，其中所述GLP-I类似物包含与GLP-I (7-37) (SEQID NO 1)相比被取代、添加或删除的不超过十个氨基酸残基。49.根据实施方式47的衍生物，其中所述GLP-I类似物包含与GLP-I (7-37) (SEQ ID NO 1)相比被取代、添加或删除的不超过六个氨基酸残基。50.根据实施方式47的衍生物，其中所述GLP-I类似物包含与GLP-I (7-37) (SEQ ID NO 1)相比被取代、添加或删除的不超过四个氨基酸残基。51.根据实施方式51的衍生物，其中所述GLP-I类似物包含不由遗传密码编码的 不超过4个氨基酸残基。52.根据实施方式47的衍生物，其中所述GLP-I类似物包含与GLP-I (7-37) (SEQ ID NO 1)相比被取代、添加或删除的不超过3个氨基酸残基。53.根据实施方式53的衍生物，其中所述GLP-I类似物包含不由遗传密码编码的不超过3个氨基酸残基。54.根据上述实施方式的任一项的衍生物，其中所述GLP-I肽包含仅一个被衍生 化的赖氨酸残基。55.根据上述实施方式的任一项的衍生物，其中所述GLP-I肽是DPPIV保护的 GLP-I 肽。56.根据上述实施方式的任一项的衍生物，其中所述GLP-I肽是DPPIV稳定化的。57.根据上述实施方式的任一项的衍生物，其中所述GLP-I肽包含位置8中的Aib残基。58.根据上述实施方式的任一项的衍生物，其中所述GLP-I肽的位置7的氨基酸 残基选自由D-组氨酸、去氨基-组氨酸、2-氨基-组氨酸、β -羟基-组氨酸、高组氨酸、 Na-乙酰基-组氨酸、α-氟甲基-组氨酸、α-甲基-组氨酸、3-吡啶基丙氨酸、2-吡啶 基丙氨酸和4-吡啶基丙氨酸构成的组。59.根据上述实施方式的任一项的衍生物，其中所述GLP-I肽选自以下构成的组Arg34GLP-I (7-37)，Lys38Arg26l34GLP-I (7-38)，Lys38Arg26l34GLP-I (7-38) -0H, Lys36Arg26,34GLP-I (7-36) ， Aib 8,22,35GLP-I (7-37) ， Aib8,35GLP-I (7-37) ， Aib8' 22GLP-I (7-37) ， Aib8,22,35Arg26,34Lys38GLP-I (7-38) ， Aib8'35Arg26'34Lys38GLP-l (7-38)， Aib8'22Arg26'34Lys38GLP-l (7-38)，Aib8'22'35Arg26'34Lys38GLP-l (7-38)，Aib8-35Arg26' 34Lys38GLP-I (7-38)，Aib8l22l35Arg26Lys38GLP-I (7-38)，Aib8l35Arg26Lys38GLP-I (7-38)，Aib8' 22Arg26Lys38GLP-I (7-38)，Aib8l22l35Arg34Lys38GLP-I (7-38)，Aib8l35Arg34Lys38GLP-I (7-38)， Aib8l22Arg34Lys38GLP-I (7-38) ， Aib8l22l35Ala37Lys38GLP-I (7-38) ， Aib8' 35Ala37Lys38GLP-I (7-38)，Aib8l22Ala37Lys38GLP-I (7-38), Aib8'22’35Lys37GLP_l (7—37)，Aib8' 35Lys37GLP-I (7-37)和 Aib8’22Lys37GLP_l (7-38)。60.根据上述实施方式的任一项的衍生物，其中所述GLP-I肽是eXendin-4(SEQ ID NO 4)。61.根据上述实施方式的任一项的衍生物，其中所述GLP-I肽是ZP-10，S卩，HGEGT FTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPSKKKKKK-酰胺(SEQID NO 5)。62.根据上述实施方式的任一项的衍生物，其中所述GLP-I肽是 HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGX，其中 X = P 或 Y，或其片段或类似物。63.根据上述实施方式的任一项的衍生物，其中所述GLP-I肽是Argl8、Leu20、 Gln34、Lys33 (Νε-(γ -氨基 丁酰基(Να-十六烷酰基)))Exendin-4- (7-45)-酰 胺或 Arg33、Leu20、Gln34、Lysl8 (N ε - ( γ -氨基 丁酰基(N α -十六烷酰基))) Exendin-4- (7-45)-酰胺。64.根据上述实施方式的任一项的衍生物，其中所述GLP-I类似物包含式(III)的 氨基酸序列，其中在位置18、23、34、36、37或38中被衍生化Xaa7-Xaa8-Xaa9-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Xaal6-Ser-Xaal8-Tyr-Leu-Glu -Glu-Xaa23-Ala-Xaa25-Arg-Xaa27-Phe-I Ie-Xaa30-Trp-Leu-Xaa33-Xaa34-Xaa35-Xaa36-X式(III)(SEQ ID No 6)其中
Xaa7-Xaa8是L-组氨酸-Aib、去氨基-组氨酸-丙氨酸或去氨基-组氨酸-Aib ；Xaa9是Glu或Glu衍生物，例如α，α 二甲基-Glu ；
Xaa16 是 Val 或 Leu ；Xaa18 是 Ser、Lys 或 Arg ；
Xaa19 是 Tyr 或 Gln ；Xaa23 是 Gin、Glu、Lys 或 Arg ；Xaa25 是 Ala 或 Val ；Xaa27 是 Glu 或 Leu ；Xaa3tl 是 Ala、Glu、Lys、Arg 或没有；Xaa33 Mi Val Lys ；Xaa34 是 Lys、Glu、Asn 或 Arg ；Xaa35 是 Gly 或 Aib ；Xaa36 是 Arg 或 Lys，Xaa37 是 Gly、Aib 或没有Xaa38 是 Lys、Glu 或没有Xaa39是酰胺或是没有的；条件是如果Xaa37是没有的则Xaa38也是没有的。65.根据上述实施方式的任一项的衍生物，其中所述GLP-I肽包含式(IV)的氨基 酸序列，其是在位置18、23、34、36、37或38用白蛋白结合残基衍生化的Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Xaal8-Tyr-Leu-Glu-Glu-Gln -Ala-Ala-Arg-Glu-Phe-I le-Xaa30_Trp-Leu-Xaa33_Xaa34_Xaa35_Xaa36-Xaa37-Xaa38-Xaa39式(IV)(SEQ ID No 7)其中Xaa7是L-组氨酸、D-组氨酸、去氨基-组氨酸、2_氨基-组氨酸、β -羟基-组氨 酸、高组氨酸、Na-乙酰基-组氨酸、α-氟甲基-组氨酸、α-甲基-组氨酸、3-吡啶基丙 氨酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；Xaa8 是 Ala、Gly、Val、Leu、lie、Lys、Aib、(1_ 氨基环丙基)羧酸、(1_ 氨基环丁 基)羧酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、(1-氨基环庚基)羧酸，或(1-氨 基环辛基)羧酸；Xaa18 是 Ser、Lys 或 Arg ；Xaa30 是 Ala、Glu、Lys 或 Arg ；Xaa33 是 Val 或 Lys ；Xaa34 是 Lys > Glu 或 Arg ；Xaa35 是 Gly 或 Aib ；Xaa36 是 Arg 或 Lys，Xaa37 是 Gly、Aib 或没有，Xaa38是Lys或没有，和Xaa39是酰胺或是没有的。66.根据上述实施方式65-66的任一项的衍生物，其中Xaa38是没有的。
67.根据上述实施方式65-67的任一项的衍生物，其中Xaa37和Xaa38都是没有的。68.根据上述实施方式65-68的任一项的衍生物，其中与GLP-I (7-37)相比2个氨 基酸被取代。69.根据上述实施方式65-68的任一项的衍生物，其中与GLP-I (7-37)相 比3个氨 基酸被取代。70.根据上述实施方式65-68的任一项的衍生物，其中与GLP-I (7_37)相比4个氨 基酸被取代。71.根据上述实施方式65-68的任一项的衍生物，其中与GLP-I (7-37)相比5个氨 基酸被取代。72.根据上述实施方式65-68的任一项的衍生物，其中与GLP-I (7_37)相比6个氨 基酸被取代。73.根据上述实施方式65-73的任一项的衍生物，其中Xaa7是去氨基-组氨酸。74.根据上述实施方式65-74的任一项的衍生物，其中Xaa8是Aib。75.根据上述实施方式的任一项的衍生物，其选自以下构成的组Ν-ε 37 {2-[2-(2-{2-[2-((R)-3-羧基-3-{[1-(19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_ 羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[去氨 基 His7，Glu22, Arg26, Arg34, Lys37]GLP-I (7-37)酰胺；N- ε 20-{2_ [2_ (2_ {2_ [2_ ((R) _3_ 羧基-3-{[1_(19-羧基十九烷酰基)哌 啶-4-羰基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰 基[Aib2, Leul4, Lys20, Gln28, Ser (0-苯甲基)39] exendin-4 (1-39)酰胺；Ν-ε 26 {2-[2-(2-{2-[2-((R)-3-羧基-3-{[1-(19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_ 羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[去氨 基 His7，Arg34]GLP-I-(7-37)；Ν-ε 37 {2-[2-(2-{2-[2-((S)-3-羧基-3-{[1-(19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_ 羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[Aib8， Glu22, Arg26, Arg34, Lys37]GLP-I-(7-37)酰胺；Ν-ε 23-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)-3-[1-(17-羧基十七烷酰基氨基)哌啶 _4_ 基 羰基氨基]-3-(羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰 基][Aib8, Arg26, Arg34]GLP-I-(7-37)；Ν-ε 37-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)-3-[1-(17-羧基十七烷酰基)哌啶 _4_ 基羰基 氨基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基][， 去氨基 His7，Glu22 Arg26, Arg 34, Phe (m-CF3) 28]GLP-I- (7-37)酰胺；[去氨基 His7, Glu22, Arg26, Arg34]GLP-I- (7-37) -Lys (2- {2-[2- (2- {2-[2- ((S) -4-羧基-4-[[l-(19-羧基十九烷酰基)哌啶-4-羰基]氨基} 丁酰基氨基)乙氧基]乙 氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基)；N- ε 20 ({2_ [2_ (2_ {2_ [2_ ((R) _3_ 羧基-3-{[1-(17_ 羧基十七烷酰基)哌 啶-4-羰基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰 基)[Aib8, Lys20, Arg26, Glu30, Thr (0-苯甲基)33，]GLP-I-(7-37)酰胺；Ν-ε 30 {2-[2-(2-{2-[2-((S)-3-羧基-3-{[1-(19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_ 羰基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[Aib8， Glu22, Arg26, Lys30]GLP-I-(7-37)；Ν-ε 31 {2-[2-(2-{2-[2-((S)-3-羧基-3-{[1-(19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[Aib8， Glu22, Arg26, Lys 31]GLP-I-(7-37)；N- ε 20 ({2-[2-(2-{2-[2-((R)-3-羧基-3-{[1_(17-羧基十七烷酰基)哌 啶-4-羰基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰 基)[Aib8，Lys20，Arg26，2-萘基丙氨酸 28，Glu30, ]GLP-I (7-37)酰胺；[Aib8，Glu22，Arg26，Arg34, ] GLP-I- (7-37) Lys [2- (2- [2- (2- [2- (2- ((S) -4- [ 1-[ 19-羧基十九烷酰基]哌啶-4-羰基氨基]-4-羧基丁酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基 氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]酰胺；N- ε 20 ({2_ [2_ (2_ {2_ [2_ ((R) _3_ 羧基-3-{[1-(17_ 羧基十七烷酰基)哌 啶-4-羰基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰 基)[Aib8，Lys20，Arg 26，2-萘基丙氨酸 12，Glu30，]GLP-1_(7_37)酰胺；[去氨基 His7, Glu22, Arg26, Arg34]GLP-1- (7-37) Lys [2- (2-[2- (2-[2- (2- ((S)-4-[l-[19-羧基十九烷酰基]哌啶-4-羰基氨基]-4-羧基丁酰基氨基)乙氧基)乙氧基] 乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]酰胺；Ν-ε 31-(2-{2-[2-(2-{2-[2-((S)_3-羧基-3-{[l-(19-羧基-十九烷酰基)哌 啶-4-羰基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰 基)[Aib8, Glu22, Arg26, Lys31, Arg34]GLP-I-(7-37)；N- ε 26-[⑶_4_羧基_4_ ({反式_4_ [ (19-羧基十九烷酰基氨基)甲基]环己烷 羰基}氨基)丁酰基][Aib8，Arg34]GLP-l-(7-37)；N- ε 26- {4_ [⑶_4_羧基_4_ ({反式_4_ [ (19-羧基十九烷酰基氨基)甲基]环己 烷羰基}氨基)丁酰基氨基]丁酰基}[Aib8，Arg34]GLP-l-(7-37)；N- ε 26- [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基-十九烷酰基氨 基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-37)；N- ε 26- [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基-十九烷酰 基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-37)酰胺；N- ε 18- {2_ (2_ (2_ (2_ [2_ (2_ [⑶ _4_ 羧基 _4_ ({4_ [ (19-羧基十九烷酰基氨基) 甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基)乙氧基]乙酰基)乙氧基)乙氧基)乙 酰基} [Aib8，Lys 18，Arg26, Arg34] GLP-I (7-37)；N-ε 20-[2-(2-[2-(2-[2-(2-(⑶-4-[反式-4-([19-羧基十九烷酰基氨基]甲 基)环己基羰基氨基]-4-羧基丁酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧 基)乙酰基][去氨基 Hisl，Lys20，Ser(0-苯甲基)33，Ser(0-苯甲基)33]exendin(l-39)；[Aib8, Glu22, Arg26, Arg34]GLP-I-( 7-37)Lys[2-(2-[2-(2-[2-(2-((S)-3-[4-( [19-羧基十九烷酰基氨基]甲基)环己基羰基氨基]-3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧 基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]酰胺；
N- ε 37- [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基-十九烷酰 基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Glu22，Arg26, Arg34, Lys37]GLP-I-(7-37)酰胺；N- ε 37- [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基-十九烷酰 基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][去氨基 His7，Glu22，Arg26，Arg34，Lys37]GLP-I-(7-37)酰胺；N- ε 37- [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({4_ [(反式-19-羧基-十九烷酰 基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][去氨基圯87，六印26，六印34，1^837]61^-1-(7-37)酰胺； N- ε 37- [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基-十九烷酰 基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][去氨基见87，611122，六印26，六印34，1^837]61^-1-(7-37)；[去氨基 His7，Glu22，Arg26，Arg34]GLP-1- (7-37) Lys [2- (2- {2-[2- (2- {2-[4-羧 基-4-({反式-4-[(19-羧基-十九烷酰基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]-酰胺；[去氨基 Hi s7，Arg26，Arg34, ] GLP-I- (7-37) Lys [2_ (2_ [2_ (2- [2- (2- ((R) -3-[反 式-4-((9-羧基十九烷酰基氨基]甲基)环己基羰基氨基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基) 乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]酰胺；N- ε 26 [2~ (2~ {2_ [2~ (2~ {2_ [⑶ _4_ 羧基 _4_ ({4_ [ (19-羧基-十九烷酰基氨基) 甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧 基)乙酰基[Aib8, Lys 26]GLP-I (7-37)酰胺；N- ε 26 [2_ (2_[2_ (2_[2_ (2_ (⑶ _2_[反式 _4_ ((9_ 羧基十九烷酰基氨基]甲基) 环己基羰基氨基]-4-羧基丁酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基) 乙酰基][Aib8，Lys26] GLP-I (7-37)酰胺； N- ε 37- [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基-十九烷酰 基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][去氨基见87，六印26，六印34，1^837]61^-1-(7-37)；N- ε 37- [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基-十九烷酰 基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][去氨基 His7，Glu22，Arg26，Glu30，Arg34，Lys37]GLP-l-(7-37)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{4-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)-十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]-丁酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34]GLP-l-(7-37)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34]GLP-l-(7-37)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{6-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-37)；
N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{4-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]丁酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-34)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]-十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基 氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-34)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{6-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-34)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-35)；
N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{6-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34]GLP-l-(7-35)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{6-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8, Arg34]GLP-I-(7-36)酰胺；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{6-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34]GLP-l-(7-35)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Lys33，Arg34] GLP-I-(7-34)；N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-36)酰胺；N- ε 26-[2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基-4_((S)-4-羧基-4-{12-[4-(16-(1Η-四唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨 基]十二烷酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基} 乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Lys26，Arg34]GLP-I-(7-36) 酰胺；[Aib8, Glu22, Arg26, Arg34] GLP+(7-37) Lys [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧 基-4-((S)-4-羧基-4-{12-[4-(16-(1Η-四唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨 基]十二烷酰基氨基} “ 丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]酰胺；N-ε 20-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8, Lys20, Glu22, Arg26, Glu30, Pro37]GLP-I-(7-37)酰胺；N-ε 37-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Glu22，Arg26，Arg34，Lys37] GLP-I-(7-37)酰胺；N-ε 37-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][去氨基圯87，611122，六印26，六印34，1^837]61^-1-(7-37) 酰胺；N-ε 37-[[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4_((S)_4-羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][去氨基圯87，六印26，六印34，1^837]61^-1-(7-37)酰胺；[Aib8, Glu22, Arg26, Glu30, Pro37] GLP-I-(7-37) Lys [2-(2-{2-[4 -羧 基-4-(4-羧基-4-{4-[4-(16-1H-四唑-5-基-十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]丁酰 基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]；和[Aib8, Glu22, Arg26, Glu30, Pro37]GLP-I- ((7-37) Lys (2- (2- (3- (2- (2- (2- (2-(2- (2- (2- (2- (2- (2- (2- (2- [4- (S)-羧基 ~4~ (4- (S)-羧基 ~4~ (4- {4- [16-(四唑 _5_ 基) 十六烷酰基氨磺酰基]丁酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基)乙 氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基) 乙氧基)丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基)肽。76. 一种提高GLP-I肽在患者中的作用时间的方法，特征在于GLP-I (7-37)肽或其 类似物用在前述实施方式的任一项中公开的A-B-C-D-衍生化了。77. 一种提高GLP-I肽在患者中的作用时间到超过约40小时的方法，特征在于 GLP-I (7-37)肽或其类似物用在前述实施方式的任一项中公开的A-B-C-D-衍生化了。78. 一种包含根据实施方式1-76的任一项的衍生物和药学上可接受的赋形剂的 药物组合物。79.根据实施方式1-76的药物组合物，其适合于胃肠外施用。80.根据实施方式1-76的任一项的衍生物用于药物的制备的用途。81.根据实施方式1-76的任一项的衍生物用于制备用于高血糖、2型糖尿病、损害 的葡萄糖耐受、1型糖尿病、肥胖、高血压、综合征X、血脂异常、认知障碍、动脉粥样硬化、心 肌梗塞、冠心病和其他心血管病症、中风、炎性肠综合征、消化不良和胃溃疡的治疗或预防 的药物的用途。82.根据实施方式1-76的任一项的衍生物用于制备用于延缓或防止2型糖尿病中 的疾病发展的药物的用途。83.根据实施方式1-76的任一项的衍生物用于制备用于降低食物摄取、降低 β-细胞细胞凋亡、提高β-细胞功能和β-细胞群集和/或恢复对β-细胞的葡萄糖敏感 性的药物的用途。84.根据权利要求1-76的任一项的衍生物，其用于高血糖、2型糖尿病、损害的葡 萄糖耐受、1型糖尿病、肥胖、高血压、综合征X、血脂异常、认知障碍、动脉粥样硬化、心肌梗 塞、冠心病和其他心血管病症、中风、炎性肠综合征、消化不良和胃溃疡的治疗或预防。
在此引用的所有的参考文献，包括公开物、专利申请和专利通过引用合并在此，到 达如同每个参考文献被单独地和特别地指明通过引用合并、以及在此完全地阐述的程度。所有标题和副标题在此仅为了方便而使用，无论如何不应看作是限制本发明。上文描述的元素的所有其可能的变体的任何组合被本发明涵盖，除非在此另有陈 述或明显与上下文抵触。如用于描述本发明的上下文中术语“一”和“该”和类似对象的使用被认为是覆盖 了单数和复数，除非在此另有陈述或与上下文明显抵触。此处的数值范围的叙述仅仅意图充当单独指落入该范围的每个独立的值的简便 方法，除非在此另有陈述，每个独立的值被合并到说明书中，如同它是在此单独地叙述的。 除非另有说明，在此提供的所有确切数值表示相应的近似值(例如，对于特定因素或度量 来说提供的所有的确切示范性数值被认为还提供了相应的大略的度量，在合适时由“约”来 修饰)。此处描述的所有方法按照任何适合的顺序进行，除非在此另有陈述或与上下文明 显抵 触。在此提供的任何和所有实例、或示范性的措辞(如，“例如”)的使用，仅仅意图更 好地说明本发明，不构成对本发明的范围的限制，除非另有陈述。在说明书中的用语不应被 看作表示任何元素对于本发明的实践是必需的，除非也明确地声明了。此处专利文件的引用和合并仅是为了方便而进行的，不反映这些专利文件的有效 性、可专利性和/或可实施性的任何评论。对于单个元素或复数个元素使用术语如〃包含〃、“具有〃、“包括〃或〃含 有"的本发明的任何方面或实施方式的在此的描述，是意图提供对"由……组成"、“基 本上由……组成"或"基本上包含"所述特定单个元素或复数个元素的本发明的类似方 面或实施方式的支持，除非另有说明或与上下文明显地抵触(例如，在此描述的制剂包含 特定元素应当被理解为还描述了制剂由该元素组成，除非另有说明或与上下文明显地抵 触)。本发明以适用的法律所允许的最大的程度包括在此呈现的方面或权利要求中引 述的主题的所有修改体和等价物。在以下代表性的方法和实施例中进一步说明本发明，然而，无论如何其不意味着 限制本发明的范围。在上述描述和以下实施例中公开的特征可以单独地或以其任何组合地是用于以 其各种形式实现本发明的材料。
实施例使用的缩写r. t 室温DIPEA 二异丙基乙胺H2O 水CH3CN 乙腈DMF NN 二甲基甲酰胺
HBTU 2-(1Η-苯并三唑-1-基-)-l，l，3，3甲基脲鐺六氟磷酸盐
Fmoc 9H-芴_9_基甲氧羰基Boc 叔丁氧基羰基OtBu 叔丁基酯tBu 叔丁基Trt 三苯甲基Pmc 2，2，5，7，8_五甲基-色满_6_磺酰基Dde 1_ (4，4_ 二甲基_2，6_ 二氧代环亚己基)乙基ivDde 1_(4，4_ 二甲基_2，6_ 二氧代环亚己基)_3_甲基丁基Mtt 4-甲基三苯甲基Mmt 4-甲氧基三苯甲基DCM 二氯甲烷TIS 三异丙基硅烷)TFA 三氟乙酸Et2O 二乙醚NMP 1-甲基-吡咯烷-2-酮DIPEA 二异丙基乙胺HOAt I-羟基-7-氮杂苯并三唑HOBt 1-羟基苯并三唑DIC 二异丙基碳二亚胺DBU 1，8_ 二氮杂环-[5，4，0] ^烯 _7MW 分子量A 树脂结合的肽的合成SPPS 方法 A保护的肽基树脂根据Fmoc策略利用厂家提供的FastMoc UV方案以0. 25mmol 或1.Ommol规模在Applied Biosystems 433肽合成仪上合成，所述方案采用了 冊1^(2-(1!1-苯并三唑-1-基-)-1，1，3，3四甲基脲鐺六氟磷酸盐)或HATU (0-(7-氮杂苯 并三唑-1-基)-1，1，3，3_四甲基脲鐺六氟磷酸盐)介导的NMP (N-甲基吡咯烷酮)中的偶 联，以及Fmoc保护基团的脱保护的UV监测。用于肽酰胺合成的起始树脂是Rink-酰胺树 月旨，Wang或氯三苯甲基树脂用于具有羧基C-末端的肽。使用的保护的氨基酸衍生物是在 适合于ABI433A合成仪的预先称重的柱体上提供的标准的Fmoc-氨基酸(由，例如Anaspec 或Novabiochem提供)，除了非天然氨基酸例如Fmoc-Aib-OH (Fmoc-氨基异丁酸)之外。N 末端氨基酸是在α氨基基团Boc保护的(例如，Boc-His (Boc) OH用于在N-末端具有His 的肽)。在位置26的赖氨酸的ε氨基基团用附丨、馳丨、0如、丨州(16或80(3保护，取决于白 蛋白结合部分和间隔区的附着的途径。在某些情况下肽的合成可以通过使用在二肽酰胺 键上用可以在酸性条件下被裂解的基团，例如但不限于2-Fmoc-氧-4-甲氧苯甲基或2，4， 6-三甲氧基苯甲基保护的二肽来改进。在肽中存在丝氨酸或苏氨酸的情况下，可以使用伪 脯氨酸二肽(参见，例如Novobiochem 2002/2003或新版本的目录，或W. R. Sampson (1999)， J. Pep. Sci. 5，403。
SPPS 方法 B 肽合成的一种可选择的方法(方法B)是在基于微波的Liberty肽合成仪(CEM Corp.，North Carolina)上通过Fmoc化学作用。树脂是具有0. 24mmol/g的载荷的Tentagel S RAM。偶联化学作用是NMP中的DIC/HOAt，利用NMP中0. 3M的氨基酸溶液和8_10倍的 摩尔过量。偶联条件是在高达70°C 5分钟。脱保护在高达70°C下利用在NMP中的5%哌 啶。当赖氨酸侧链的化学修饰是期望的时，赖氨酸作为Lys(Mtt)来掺入。Mtt基团通过将 树脂悬浮在纯净的六氟异丙醇20分钟，随后用DCM和NMP洗涤来除去。赖氨酸的化学修饰 通过人工合成或通过在Liberty上一个或更多个自动化步骤然后人工偶联来进行。肽合成 的另一种方法是通过利用HBTU偶联的在ABI433上的Fmoc化学作用。在合成之后，树脂用 DCM洗涤并干燥，通过TFA/TIS/水(92. 5/5/2. 5)处理2小时，然后用二乙醚沉淀来从树脂 上裂解肽。肽在30%乙酸或类似的溶剂中重新溶解，在C18柱上利用乙腈/TFA通过标准的 RP-HPLC来纯化。肽的身份通过MALDI-MS确认。SPPS 方法 C
保护的肽基树脂利用制造商提供的方案根据Fmoc策略在Advanced ChemTech合 成仪(APEX 348)上合成，0. 25mmol规模，其采用匪？⑴-甲基吡咯烷酮)中DIC (二环己基碳 二亚胺)和HOBtd-羟基苯并三唑)介导的偶联。用于肽酰胺合成的起始树脂是Rink-酰 胺树脂，Wang或氯三苯甲基树脂用于具有羧基C-末端的肽。使用的保护的氨基酸衍生物 是标准的Fmoc-氨基酸(由例如Anaspec或Novabiochem提供)。N末端氨基酸是在α氨 基基团Boc保护的(例如，Boc-His (Boc) OH用于在N-末端具有His的肽)。在位置26的 赖氨酸的ε氨基基团用Mtt、Mmt、Dde、iVDde或Boc保护，取决于白蛋白结合部分和间隔区 的附着的途径。肽的合成在某些情况下可以通过使用二肽来改进，例如，来自Novabiochem 的伪脯氨酸，Fmoc-Ser (tbu) -ΨSer (Me, Me)-0H，参见，例如，Novobiochem 2002/2003 或更 新版本的目录，或 W. R. Sampson (1999)，J. Pep. Sci. 5，403。除去ivDde或Dde保护的过程树脂(0. 25mmol)置于人工摇动器/过滤装置中，用N-甲基吡咯烷酮中的2%胼处 理(20ml，2X 12分钟)来除去Dde或ivDde基团，用N-甲基吡咯烷酮洗涤(4X 20ml)。除去Mtt或Mmt-保护的过程树脂(0. 25mmol)置于人工摇动器/过滤装置中，用DCM中的2% TFA和2_3% TIS 处理(20ml，5-10分钟重复6-12次)来除去Mtt或Mmt基团，用DCM (2 X 20ml)、DCM中的 10% MeOH 禾Π 5% DIPEA(2X 20ml)和 N-甲基吡咯烷酮(4X 20ml)洗涤。除去Mtt保护的可选择的过程树脂置于注射器中，用六氟异丙醇处理2 X 10分钟来除去Mtt基团。树脂然后如 上所述用DCM和NMP洗涤。用于侧链向赖氨酸残基的附着的过程白蛋白结合残基(式I的B-U-侧链)可以通过利用标准的酰化试剂例如但不限 于DIC、H0Bt/DIC、H0At/DIC或HBTU酰化到树脂结合的肽、或在溶液中酰化到未保护的肽来 附着到肽上。附着到树脂结合的肽途径I
活化的(活性酯或对称的酸酐)白蛋白结合残基(式(I)的A-B-侧链)，例如十八 烷基二酸单_(2，5-二氧代-吡咯烷-1-基)酯(Ebashiet al. EP511600，相对于树脂结合 的肽4摩尔当量)溶于NMP(25mL)中，添加到树脂在室温下摇动过夜。过滤反应混合物，树 脂用NMP、二氯甲烷、2-丙醇、甲醇和二乙醚广泛地洗涤。途径II白蛋白结合残基(式I的A-(B)-侧链)溶于N-甲基吡咯烷酮/二氯甲烷(1 1， IOml)中。添加活化试剂例如羟基苯并三唑(HOBt)(相对于树脂4摩尔当量)和二异丙基 碳二亚胺(相对于树脂4摩尔当量)，搅动溶液15分钟。溶液添加到树脂中，添加二异丙 基乙胺(相对于树脂4摩尔当量)。树脂在室温下摇动2到24小时。树脂用N-甲基吡咯 烷酮(2 X 20ml)、N-甲基吡咯烷酮/ 二氯甲烷(1 1) (2 X 20ml)和二氯甲烷(2 X 20ml)洗 涤。途径III活化的(活性酯或对称的酸酐)白蛋白结合残基(式I的A-B侧链)例如十八烷 基二酸单-(2，5-二氧代-吡咯烷-1-基)酯(Ebashi et al. EP511600，相对于肽1-1. 5摩 尔当量)溶于有机溶剂例如乙腈、THF、DMF、DMSO或水/有机溶剂的混合物中(l_2mL)，与 10摩尔当量的DIPEA—起添加到肽在水中(10-20mL)的溶液中。对于白蛋白结合残基上的 保护基团，例如叔丁基来说，反应混合物被冻干0/N，并且分离的粗肽此后脱保护_在叔_ 丁 基基团的情况下肽溶于三氟乙酸、水和三异丙基硅烷(90 5 5)的混合物中。在30分 钟后，混合物在真空中蒸发，最后的肽通过制备型HPLC纯化。除去Fmoc保护的过程树脂(0. 25mmol)置于人工摇动器的滤瓶中，用N-甲基吡 咯烷酮/ 二氯甲烷(1 1)处理(2 X 20ml)和用N-甲基吡咯烷酮(IX 20ml)，N-甲基吡咯 烷酮中20%哌啶的溶液(3X20ml，各10分钟)处理。树脂用N-甲基吡咯烷酮(2X20ml)、 N-甲基吡咯烷酮/ 二氯甲烷(1 1) (2 X 20ml)和二氯甲烷(2 X 20ml)洗涤。肽裂解下树脂的操作通过与三氟乙酸、水和三异丙基硅烷(95 2. 5 2. 5到92 4 4)的混合物 在室温下搅动180分钟，从树脂上裂解肽。过滤裂解混合物，滤液通过氮气流浓缩成油。粗 肽用45mL 二乙醚从这种油中沉淀，用45mL 二乙醚洗涤1到3次。纯化粗肽通过半制备胡HPLC在装填了 5 μ或7 μ C-18硅的20_ X 250mm柱上 纯化。取决于肽，使用一个或两个纯化系统。TFA:在干燥之后，粗肽溶于5ml 50%乙酸H2O中，用H2O稀释到20ml，注射到柱上， 其然后用0. TFA中40-60% CH3CN的梯度IOml/分钟在40°C在50分钟期间洗脱。收集 含有肽的级分。纯化的肽在用水稀释洗脱物之后冻干。硫酸铵柱用0. 05M(NH4)2SO4中的40% CH3CN平衡，其用浓缩的H2SO4调节到pH 2.5。在干燥之后，粗肽溶于5ml 50%乙酸H2O中，用H2O稀释到20ml，注射到柱上，其然后 用 0. 05M(NH4)2SO4^pH 2. 5 中 40% -60% CH3CN 的梯度 IOml/ 分钟在 40°C在 50 分钟期间洗 脱。采集含有肽的级分，用3倍体积的H2O稀释，通过用0. 1 % TFA平衡的S印-Pak C18 柱(Waters part. # 51910)。然后用含有70% CH3CN的0. TFA洗脱，纯化的肽通过在用 水稀释洗脱物之后的冻干法来分离。获得的最终产物通过分析性RP-HPLC (滞留时间)和通过LCMS来表征。
RP-HPLC分析可以使用214nm处的UV检测、以及例如，Vydac218TP54 4. 6mmX 250mm 5 μ C-18 硅柱(The S印arations Group, Hesperia, USA)和在 42°C在例如 lml/分钟洗脱来进行。最常使用以下具体条件的一种方法03_A1_1 HPLC (方法03_A1_1)利用装备有Waters 996 二极管阵列检测器的Waters 2690 系统进行RP分析。UV检测在在42°C以lml/分钟洗脱的218TP54 4. 6mmX 250mm 5 μ C-18 硅柱(The SeperationsGroup,Hesperia)上，在 214、254、276 和 301nm 处采集。柱用 10% 的0. 5M硫酸铵平衡，其用4M硫酸调节到pH 2. 5。在注射之后，样品通过在相同的水性缓冲 液中0%到60%乙腈的梯度在50分钟期间洗脱。方法03_B1_2HPLC (方法03_B1_2)利用装备有Waters 996 二极管阵列检测器的Waters 2690系统进行RP分析。UV检测在在42 °C以0. 5ml/分钟洗脱的Zorbax 300SB C-18(4, 5X150mm,5y )上，在214、254、276和301nm处采集。柱用TFA在水中的水溶液 (0. 1% )平衡。在注射之后，样品通过在TFA在水中的水溶液(0. )中0%到60%乙腈 (+0. 1% TFA)的梯度在50分钟内洗脱。方法02_B1_1HPLC(方法02_B1_1)利用装备有Waters 2487双波带检测器的Alliance Waters 2695 系统进行 RP 分析。214nm 和 254nm 处的 UV 检测利用 Vydac 218TP53，C18，300人，5um， 3. 2mmX 250mm柱，42°C来采集。以0. 50ml/分钟的流速，用水中0-60%乙腈、95-35%水和 5%三氟乙酸(1. 0% )的线性梯度在50分钟内洗脱。方法01_B4_2HPLC (方法01_B4_2)利用装备有Waters 996 二极管阵列检测器的Waters 600S 系统进行 RP 分析。214nm、254nm 处的 UV 检测使用 Symmetry300 C18、5um、3. 9mmX 150mm, 42°C采集。用水中5-95%乙腈、90-0%水和5%三氟乙酸(1.0%)的线性梯度以1.0分钟 /分钟的流速在15分钟内洗脱。方法02_B4_4HPLC(方法02_B4_4)利用装备有Waters 2487双波带检测器的Alliance Waters 2695 系统进行 RP 分析。214nm、254nm 处的 UV 检测使用 Symmetry300 C18、5um、 3.9謹\150謹，421采集。用水中5-95%乙腈、90-0%水和5%三氟乙酸(1.0%)的线性梯 度以1. 0分钟/分钟的流速在15分钟内洗脱。方法02_B6_1HPLC(方法02_B6_1)利用装备有Waters 2487双波带检测器的Alliance Waters 2695 系统进行 RP 分析。214nm 和 254nm 处的 UV 检测利用 Vydac 218TP53，C18，300人,5um， 3. 2mmX 250mm柱，42°C来采集。以0. 50ml/分钟的流速，用水中0_90 %乙腈、95_5 %水和 5%三氟乙酸(1. 0% )的线性梯度在50分钟内洗脱。方法03_B6_1HPLC (方法03_B1_1)利用装备有Waters 996 二极管阵列检测器的Waters 2690 系统进行 RP 分析。UV 检测在 218TP54 4. 6mmX250mm 5μ018 硅柱(The Seperations Group, Hesperia)上，在214、254、276和301nm处采集，其在42°C以lml/分钟洗脱。柱用水中TFA的水溶液(0. )中5%乙腈(+0. TFA)来平衡。在注射之后，样品通过在TFA 在水中的水溶液(0. )中0%到90%乙腈(+0. 1% TFA)的梯度在50分钟内洗脱。做为选择，可以如上述进行制备梯度洗脱，其中化合物洗脱的乙腈的百分比是标 注的。通过MALDI鉴定身份。使用以下设备LCMS ^h d3 Sciex API 100 Single quadropole M if ft、Perkin ElmerSeries 200Quard泵、Perkin Elmer Series 200 自动进样器、AppliedBiosystems 785A UV检测器、 Sedex 75蒸发光散射检测器组成的装备上进行。仪器控制和数据获取通过在Windows 2000计算机上的SciexSample控制软件进 行。HPLC泵连接到含有以下的两个洗脱液贮备池 A 水中0. 05%三氟乙酸B 乙腈中0.05%三氟乙酸分析在室温下通过在柱上注射合适数量的样品(优选的20 μ L)来进行，所述柱用 乙腈梯度来洗脱。使用的HPLC条件、检测器设置和质谱仪设置在下表中给出。柱Waters Xterra MS C—18 X 3mm id 5ym梯度以1. 5ml/分钟在7. 5分钟期间5% -90%乙腈线性检测210nm(来自DAD的模拟输出)ELS (来自ELS的模拟输出)，40°CMS电离作用方式API-ES做为选择，LCMS在由 Hewlett Packard 系列 1100 G1312A BinPump、Hewlett Packard 系列 IlOOColumn compartment、Hewlett Packard 系列 1100 G1315A DAD 二极管 阵列检测器、Hewlett Packard系列1100MSD和Sedere 75蒸发光散射检测器组成的、由HP Chemstation软件控制的装备上进行。HPLC泵连接到含有以下的两个洗脱液贮备池A 水中的 IOmM NH4OHB :90% 乙腈中的 IOmM NH4OH分析在23°C下通过在柱上注射合适数量的样品(优选的20μ L)来进行，所述柱用 A和B的梯度来洗脱。使用的HPLC条件、检测器设置和质谱仪设置在下表中给出。柱 Waters Xterra MS C—18 X 3mm id 5ym梯度以1. 5ml/分钟在6. 5分钟期间5% -100%乙腈检测210nm(来自DAD的模拟输出)ELS (来自ELS的模拟输出)MS 电离作用方式 API-ES。扫描 IOO-IOOOamu 步进 0. IamuMALDI-MS 肽的分子量利用基质辅助的激光解吸飞行时间质谱法(MALDI-MS)来测定，记录 在Microflex (Bruker)上。使用α -氰-4-羟基-肉桂酸的基质。分析HPLC条件(方法I)
用0. 1 % TFA/H20 平衡柱(Xterra TM MS C18, 5um, 4, 6 X 150mm 柱，P7N 186 000490)，在 25 分钟期间通过 0 % CH3CN/0. 1 % TFA/H20 到 60 % CH3CN/0. 1 % TFA/H20 的梯 度、随后在5分钟期间从60 %到100 %的梯度洗脱。在本发明的实例中，命名和结构图是指对天然的氨基酸使用单字母符号，例如，H是L-组氨酸、A是L-丙氨酸，等等。氨 基酸的三字母缩写也可以使用，例如His是L-组氨酸、Ala是L-丙氨酸，等等。对于非天 然的氨基酸，使用三字母缩写，例如，Aib是氨基异丁酸。氨基酸的位置可以用氨基酸符号 之后的上标数字来表示，例如Lys37或Lys37。N-末端氨基基团可以表示为NH2或H。C-末 端羧基基团可以表示为-OH或-C00H。C-末端酰胺基标记为-NH2。子结构 都是指HiS-Aib-Glu-Gly-Thr-Phe。赖氨酸的ε氨基基团可以用希腊符号ε或拼写的“印silon”来描述。以下实施例中的结构在一些情况下是组合了氨基异丁酸的三字母缩写Aib的天 然氨基酸的单字母符号的组合。在某些情况下，一些氨基酸以展开的完整结构显示。因而 被衍生化的赖氨酸可以显示为实施例1中的展开的完整结构，其中在位置38的赖氨酸是展 开的。在实施例1中，位置37中的精氨酸和位置38中展开的赖氨酸之间的氮(具有标出 的H)因而是连接两个氨基酸的肽键的氮。根据上文的过程，以下衍生物作为本发明的非限制性实例被制备实施例1N- ε 37 {2_ [2_ (2_ {2_ [2_ ((R) _3_ 羧基 _3_ {[1_ (19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_ 羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[去氨基His7，Glu22, Arg26, Arg34, Lys37JGLP-I (7-37)酰胺 制备方法AHPLC 方法 B6RT = 35，49minLCMS :m/z = 1096，2 (M+3H)3+计算的MW = 4380,0
实施例2N- ε 20- {2_ [2~ (2~ {2~ [2~ ((R) _3_ 羧基 _3_ {[ 1_ (19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_ 羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[Aib2，Leu14,Lys20, Gln28, Ser (0_ 苯甲基)39J exendin-4 (1-39)酰胺 制备方法ΑHPLC 方法 Β6 RT = 37. 63minLCMS :m/z = 1705. 9 (M+3H)3+计算的MW = 5113. 9实施例3 N-ε 26 {2- [2~ (2~ {2~ [2~ ((R) _3_ 羧基 _3_ {[ 1_ (19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_ 羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[去氨 基 His7，Arg34]GLP-I-(7-37) 制备方法AHPLC 方法 B6 RT = 36，45minLCMS :m/z = 1404. 3 (M+3H)3+计算的MW = 4209. 8实施例4N- ε 37 {2_ [2_ (2_ {2_ [2_ (⑶ _3_ 羧基 _3_ {[1_ (19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_ 羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[Aib8， Glu22, Arg26, Arg34, Lys37]GLP-I-(7-37)酰胺 制备方法B肽在66%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认的结构计算的MW = 4409. 1实施例5Ν-ε 23-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)-3-[1-(17-羧基十七烷酰基氨基)哌啶 _4_ 基 羰基氨基]-3-(羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰 基][Aib8, Arg26, Arg34]GLP-I-(7-37) 制备方法AHPLC 方法 02_B6_4 RT = 9. 32minLCMS :m/z = (M+3H) 3+1413. 8计算的MW = 4238. 8实施例6Ν-ε 37-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)-3-[1-(17-羧基十七烷酰基)哌啶 _4_ 基羰基 氨基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基][去 氨基 His7，Glu22 Arg26, Arg34, Phe (m-CF3) 28]GLP-I-(7-37)酰胺 制备方法Α
HPLC 方法 01_B6_2 RT = 11. 92minLCMS :m/z = 1474. 8 (M+3H)3+
计算的MW = 4420. 0实施例7[去氨基 His7, Glu22, Arg26, Arg34]GLP-I- (7-37) -Lys (2- {2-[2- (2- {2-[2- ((S) -4-羧基-4-{[1-(19-羧基十九烷酰基)哌啶-4-羰基]氨基} 丁酰基氨基)乙氧基]乙 氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基) 制备方法B类似于方法A制备肽，只是使用CEM Liberty肽合成仪，从fmoc-Lys (mtt) -wang 树脂开始。N-末端胺是用Boc基团保护的。利用六氟-2-丙醇从赖氨酸除去Mtt，侧链使 用fmoc-化学作用在CEMLiberty肽合成仪上制备。HPLC 方法 03_B6_1 RT = 35. 50minLCMS :m/z = 1114. 0 (M+4H)4+计算的(M)= 4452. 1实施例8 N- ε 2(1 ({2- [2~ (2~ {2~ [2~ ((R) _3_ 羧基 _3_ {[ 1_ (17-羧基十七烷酰基)哌啶 _4_ 羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基)[Aib8， Lys20, Arg26, Glu30, Thr (0-苯甲基)33，]GLP-I-(7-37)酰胺 制备方法AHPLC 方法 B6 RT = 32. 49minLCMS :m/z = 1459. O (M+3H)3+计算的MW = 4375. O实施例9
Ν-ε 30 {2-[2-(2-{2-[2-((S)-3-羧基-3-{[1-(19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[Aib8， Glu22, Arg26, Lys30]GLP-I-(7-37) 制备方法肽在来自Advanced Chemtech的Apex396上制备，最终产物通过分析性 HPLC 禾口 MALDI-MS 来表征。HPLC (方法I)参见上文的描述RT = 27, 6minMALDI-MS 4367. 9实施例10Ν-ε 31 {2-[2-(2-{2-[2-((S)-3-羧基-3-{[1-(19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[Aib8， Glu22, Arg26, Lys 31]GLP-I-(7-37)
H-H-NsJ-E GTFTSDVSSYLEEQAAREF I A-Nx^f]-L VKGR
H3CxCH3H ο制备方法肽在来自Advanced Chemtech的Apex396上制备，最终产物通过分析性 HPLC 禾口 MALDI-MS 来表征。HPLC (方法A)参见上文的描述RT = 28, 4minMALDI-MS 4252. 5实施例11N- ε 20 ({2- [2_ (2_ {2_ [2_ ((R) _3_ 羧基 _3_ {[ 1_ (17-羧基十七烷酰基)哌啶 _4_ 羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基)[Aib8， Lys20, Arg26, 2-萘基丙氨酸 28，Glu30] GLP-I (7-37)酰胺 制备方法-A[1016]HPLC 方法 B6:RT = 32. 31minLCMS :m/z = 1445. 0 (M+3H)3+计算的MW = 4332. 9实施例12 [Aib8, Glu22, Arg26, Arg34, ]GLP-I- (7-37) Lys [2- (2-[2- (2-[2- (2-((S) -4-[1-[ 19-羧基十九烷酰基]哌啶-4-羰基氨基]-4-羧基丁酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基 氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]酰胺 [1022] 制备方法AHPLC 方法 02_B4_4 RT = 9. 73minLCMS :m/z = (M/3)+l = 1494. 9 禾口 (M/4)+l = 1120. 9 ； (SciexlOOAPI)计算的MW = 4480.1实施例13N- ε 2(1 ({2- [2_ (2_ {2_ [2_ ((R) _3_ 羧基 _3_ {[ 1_ (17-羧基十七烷酰基)哌啶 _4_ 羰 基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基)[Aib8， Lys20, Arg26, 2-萘基丙氨酸 12，Glu30, ] GLP-I-(7-37)酰胺 制备方法AHPLC 方法 B6:RT = 30. 70minLCMS :m/z = 1084. 0 (M+4H)4+计算的MW = 4332. 9实施例14[去氨基 His7, Glu22, Arg26, Arg34]GLP-I- (7-37) Lys [2- (2-[2- (2-[2- (2- ((S)-4-[l-[19-羧基十九烷酰基]哌啶-4-羰基氨基]-4-羧基丁酰基氨基)乙氧基)乙氧基] 乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]酰胺[1038] 制备方法A，和实施例72HPLC 方法 02_B6_4 RT = 9. 95minLCMS :m/z = 1484. (M+3H)3+计算的MW = 4451. 1实施例15Ν-ε 31-(2-{2-[2-(2-{2-[2-((S)_3-羧基-3-{[l-(19-羧基-十九烷酰基)哌 啶-4-羰基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰 基)[Aib8, Glu22, Arg26, Lys31, Arg34]GLP-I-(7-37) 制备方法B，和实施例72肽在66%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4280. 9实施例16N- ε 26-[⑶-4-羧基_4_({反式_4_[ (19-羧基十九烷酰基氨基)甲基]环己烷 羰基}氨基)丁酰基][Aib8, Arg34]GLP-I-(7-37) 制备方法Β，和实施例72肽在69%乙腈下洗脱。[1056]通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 3990. 6实施例17N- ε 26- {4_ [⑶_4_羧基_4_ ({反式_4_ [ (19-羧基十九烷酰基氨基)甲基]环己 烷羰基}氨基)丁酰基氨基]丁酰基} [Aib8，Arg34] GLP-I-(7-37) 制备方法B肽在70%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4075. 7实施例18N- ε 26- [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基-十九烷酰基氨 基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-37) 制备方法B，和实施例72肽在68%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4135. 8实施例19N- ε 26- [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基-十九烷酰 基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-37)-酰胺 制备方法B，和实施例72肽在70%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4279. 9实施例20N- ε 18- {2_ (2_ (2_ (2_ [2_ (2_ [⑶ _4_ 羧基 _4_ ({4_ [ (19-羧基十九烷酰基氨基) 甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基)乙氧基]乙酰基)乙氧基)乙氧基)乙 酰基} [Aib8, Lys 18，Arg26, Arg34]GLP-I (7-37) 制备方法肽在来自Advanced Chemtech的Apex396上制备，最终产物通过分析性 HPLC 和 MALDI-MS 来表征。HPLC (方法 B6)RT = 34. IminLCMS :m/z = XX (M+4H)4+ 1088计算的MW = 4350.0实施例21N- ε 20-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((S)-4-[反式 _4-([19_ 羧基十九烷酰基氨基]甲 基)环己基羰基氨基]-4-羧基丁酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙 氧基)乙酰基][去氨基 His1, Lys20, Ser (0-苯甲基)33，Ser (0-苯甲基)39] exendin (1-39) 制备方法AHPLC 方法 B6:RT = 39. 22minLCMS :m/z = 1736. 9 (M+3H)3+计算的MW = 5207. 0实施例22[1096][Aib8, Glu22, Arg26, Arg34]GLP-I-(7-37)Lys[2-(2-[2-(2-[2-(2-((S)-3-[4-( [19-羧基十九烷酰基氨基]甲基)环己基羰基氨基]-3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧 基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]酰胺 制备方法B肽在68%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4494. 2实施例23N- ε 37- [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基-十九烷酰 基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Glu22，Arg26，Arg34，Lys37] GLP-I-(7-37)酰胺 制备方法B肽在67%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4451. 1实施例24N-ε 37- [2~ (2~ {2_ [2~ (2~ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基-十九烷酰 基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][去氨基 His7，Glu22，Arg26，Arg34，Lys37]GLP-I-(7-37)酰胺 制备方法B肽在68%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4422. 1实施例25N-ε 37- [2~ (2~ {2_ [2~ (2~ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({4_ [(反式-19-羧基-十九烷酰 基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][去氨基 His7, Arg26，Arg34，Lys37]GLP-I-(7-37)酰胺 制备方法B肽在68%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4350. 0实施例26N- ε 37- [2~ (2~ {2_ [2~ (2~ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基-十九烷酰 基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][去氨基圯87，611122，六『826，六『834，1^837]61^-1-(7-37) 制备方法B[1127]肽在69%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4423. 1实施例27[去氨基 His7,Glu22,Arg26,Arg34]GLP-I- (7-37) Lys [2- (2- {2-[2- (2- {2-[4-羧 基-4-({反式-4-[(19-羧基-十九烷酰基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]-酰胺 制备方法B肽在68%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4479. 1实施例28[去氨基His7，Arg26, Arg34]GLP-I-(7-37)Lys[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)-3-[反 式-4-((9-羧基十九烷酰基氨基]甲基)环己基羰基氨基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基) 乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]酰胺 制备方法:AHPLC 方法 B6:RT = 35. 25minLCMS :m/z = 1469. O (M+3H)3+计算的MW = 4407. 1实施例29N- ε 26 [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({4_ [ (19-羧基-十九烷酰基氨基) 甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧 基)乙酰基[Aib8, Lys 26]GLP-I (7-37)酰胺[1147] 制备方法方法CHPLC 方法 01_Β4_2 RT = 11. 26minLCMS :m/z = XX (M+4H) 4+1071计算的MW = 4279. 9实施例30N- ε 26 [2_ (2_[2_ (2_[2_ (2_ ((S) _2_[反式 _4_ ((9_ 羧基十九烷酰基氨基]甲基) 环己基羰基氨基]-4-羧基丁酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基) 乙酰基][Aib8，Lys26] GLP-I (7-37)酰胺 制备方法方法CHPLC 方法 01_Β4_2 RT = 11. IlminLCMS :m/z = XX (M+4H) 4+1103计算的MW = 4409. 1实施例31N- ε 37- [2~ (2~ {2_ [2~ (2~ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基-十九烷酰 基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][去氨基见87，六印26，六印34，1^837]61^-1-(7-37) 制备方法B肽在71%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4351. O实施例32N- ε 37- [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基-十九烷酰 基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][去氨基 His7, Glu22, Arg26, Glu30, Arg34, Lys37]GLP-I-(7-37) 制备方法B肽在68%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4481. 1实施例33N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{4-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)-十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]-丁酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34]GLP-l-(7-37) 肽在62%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4341. 9实施例34 [1182]N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34]GLP-l-(7-37) N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{6-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-37) 实施例36N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{4-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]丁酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8, Arg34]GLP-I-(7-34)[1196] 制备方法B肽在66%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4071. 6实施例37N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]-十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基 氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-34) 制备方法B肽在68%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4183. 8实施例38N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{6-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8, Arg34]GLP-I-(7-34) 制备方法B肽在67%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4099. 7实施例39N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-35) 制备方法B肽在70%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4240. 9实施例40N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{6-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34]GLP-l-(7-35) 制备方法B肽在66%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4156. 7实施例41N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{6-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-36)酰胺 制备方法B肽在66%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4311. 9实施例42N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶ _4_ 羧基-4-{6-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34]GLP-l-(7-35) 制备方法B肽在66%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4128. 7实施例43N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Lys33，Arg34] GLP-I-(7-34) 制备方法Β肽在68%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4113. 7实施例44N-ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4-((S)_4-羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-36)酰胺 制备方法B肽在66%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4396. 1实施例45N- ε 26-[2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基-4_((S)-4-羧基-4-{12-[4-(16-(1Η-四唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基} 乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Lys26，Arg34] GLP-I-(7-36) 酰胺 制备方法B肽在65%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 5121. 9实施例46[Aib8, Glu22, Arg26, Arg34] GLP-卜(7-37) Lys [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧 基-4-((S)-4-羧基-4-{12-[4-(16-(1Η-四唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨 基]十二烷酰基氨基} “ 丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]酰胺 制备方法B肽在65%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4681. 4实施例47N-ε 20-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8, Lys20, Glu22, Arg26, Glu30, Pro37]GLP-I-(7-37) 酰胺 制备方法B肽在62%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4638. 3实施例48N-ε 37-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Glu22，Arg26，Arg34，Lys37] GLP-I-(7-37)酰胺 制备方法B肽在69%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4624. 3实施例49N-ε 37-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][去氨基圯87，611122，六印26，六印34，1^837]61^-1-(7-37) 酰胺 制备方法B肽在65%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4595. 3实施例50N-ε 37-[[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4_((S)_4-羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][去氨基圯87，六印26，六印34，1^37]61^-1-(7-37)酰胺 制备方法Β肽在66%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4523. 2实施例51[Aib8, Glu22, Arg26, Glu30, Pro37] GLP-I-(7-37) Lys [2-(2-{2-[4-羧 基-4-(4-羧基-4-{4-[4-(16-1H-四唑-5-基-十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]丁酰 基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基] 制备方法方法Α，只是使用8-10倍摩尔过量的氨基酸、DIC和H0At/H0Bt(l 1) 在来自Advanced Chemtech的Apex396上制备肽，Mtt基团用六氟异丙醇脱保护。硫胺接头 的附着在两个步骤中实现；利用DIC和H0At/H0Bt(l 1)，4-氨磺酰丁酸(3倍过量)首先 偶联树脂。然后，在NMP中与羰基二咪唑混合的16-(1H-四唑-5-基)十六酸(3倍过量) 添加到树脂中，随后添加DBU。HPLC 方法 B6:RT = 29. 8minLCMS :m/z = 1161. 2 (M+4H)4+计算的MW = 4640. 2实施例52[Aib8, Glu22, Arg26, Glu30, Pro37]GLP-I- ((7-37) Lys (2- (2- (3- (2- (2- (2- (2-(2- (2- (2- (2- (2- (2- (2- (2- [4- (S)-羧基 ~4~ (4- (S)-羧基 ~4~ (4- {4- [16-(四唑 _5_ 基)
十六烷酰基氨磺酰基]丁酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基)乙 氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基) 乙氧基)丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基)肽 制备方法肽在来自Advanced Chemtech的Apex396上制备，硫代酰胺接头的附着 在两个步骤中实现。利用DIC和H0At/H0Bt(l 1)，4-氨磺酰丁酸首先偶联树脂。然后， 在NMP中与羰基二咪唑混合的16-(1H-四唑-5-基)十六酸添加到树脂中，随后添加DBU。 其他的是与实施例小节开始处描述的相同的方案。[1311]HPLC (方法 B6)RT = 30minLCMS :m/z = XX (M+4H)4+ 1274计算的(M+H)+= 5096实施例53N- α 37- [2~ (2_ {2_ [2~ (2_ {2_ [⑶ _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基十九烷酰基 氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基} 乙氧基)乙酰基][去氨基 His7，Glu22，Arg26，Arg34，ε -Lys37]GLP-I-(7-37) 制备方法Β，按照如实施例7所描述的类似的方式。HPLC 方法 02_Β6_1 RT = 37. 05min LCMS :m/z = 1106. 3 (M+4H)4+计算的(M)= 4423. 1实施例54N-α 8-[2-(4-咪唑基)乙酰基]N-ε 37-[2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧 基-4-({反式-4-[(19-羧基十九烷酰基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Glu22，Arg26，Arg34，Lys37] GLP-I-(8-37) 制备方法B肽在68%乙腈下洗脱。通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4409. 1实施例55[1331][去氨基 His7，Glu22，Arg26，34]-GLP-l(7-37)-Lys-(2-{2-[2-((S)-4-羧 基-4-{[1-(19-羧基十九烷酰基)哌啶-4-羰基]氨基} 丁酰基氨基)乙氧基]乙氧基} 乙酰基)肽 制备方法Β，按照如实施例7所描述的类似的方式。HPLC 方法 03_Β6_1 RT = 35. 58minLCMS :m/z = 1077. 8 (M+4H)4+计算的(M)= 4306. 9实施例56[去氨基 His7，Glu22, Arg26，34]-GLP-1 (7-37)-Lys_[2-(2_ {2_[2_ (2_ {2_[4_ 羧 基-4-({4-[(19-羧基十九烷酰基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基} 乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]肽 制备方法B，按照如实施例7所描述的类似的方式。HPLC 方法 02_B6_1 RT = 34. 40minLCMS :m/z = 1120. 8 (M+4H)4+计算的(M)= 4480. 1实施例57[去氨基 His7，Glu22，Arg26，34]-GLP-I (7-37)-Lys ((S)-4-羧 基-4-(2-{2-[2-((S)-4-羧基-4-{[l-(19-羧基十九烷酰基)哌啶_4_羰基]氨基} 丁酰 基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)丁酰基)肽[1348] 制备方法B，按照如实施例7所描述的类似的方式。HPLC 方法 03_B6_1 RT = 35. 14minLCMS :m/z = (M+4H)4+计算的(M)= 4436. 0实施例58[去氨基 His7，Glu22，Arg26，34]-GLP-l(7-37)-Lys-(2-(2-{2-[(S)-4-羧 基-4-(2-{2-[2-((S)-4-羧基-4-{[l-(19-羧基十九烷酰基)哌啶_4_羰基]氨基} 丁酰 基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基)肽 制备方法B，按照如实施例7所描述的类似方式。HPLC 方法 03_B6_1 RT = 34. 92minLCMS :m/z = 1146. 3 (M+4H)4+计算的(M)= 4581. 2实施例59[去氨基 His7，Arg26，34]-GLP-l(7-37)-Lys(2-{2-[2-(2-{2-[2-((S)-4-羧 基-4-{[1-(19-羧基十九烷酰基)哌啶-4-羰基]氨基} 丁酰基氨基)乙氧基]乙氧基} 乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基)肽 制备方法B，按照如实施例7所描述的类似的方式。HPLC 方法 03_B6_1 RT = 35. 39minLCMS :m/z = 1095. 8 (M+4H)4+计算的(M)= 4380. 0实施例60 制备方法Β，按照如实施例7所描述的类似的方式。HPLC 方法 03_Α1_1 RT = 35. 73minLCMS :m/z = 1081. 3 (M+4H)4+计算的(M)= 4323. 0实施例61Ν-ε 37-((S)_4-羧基-4-{[l-(19-羧基-十九烷酰基)_哌啶-4-羰基]-氨 基}_ 丁酰基)[去氨基 His7，Arg26，Arg34，Lys37]GLP-I-(7-37) 制备方法B，按照如实施例7所描述的类似的方式。HPLC 方法 03_B6_1 RT = 36. 28minLCMS :m/z = 1009. 5 (M+4H)4+计算的(M)= 4032. 6实施例62[去氨基 His7，Glu22，Arg26，34] -GLP-1 (7-37) -Lys- ((S) _4_羧基 ~4~ {[1_ (19-羧
基_十九烷酰基)_哌啶-4-羰基]-氨基}_ 丁酰基)肽 制备方法Β，按照如实施例7所描述的类似的方式。HPLC 方法 03_Β6_1 RT = 36. 06minLCMS :m/z = 1041. O (M+4H)4+计算的(M)= 4161. 8实施例63N-ε 26-[2-(2-{2-[(R)-4-羧基 _4-((R)_4-羧基-4-{12-[4-(16_1Η-四 唑-5-基-十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]_[Aib8，Arg34] GLP-I (7-37) 制备方法Β肽在70%乙腈下洗脱通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4454. 1实施例64N- ε 37-{2-[2-(2-{(S)-4-[(S)-4-(12-{4-[16-(2-叔-丁 基 _2H_ 四 唑-5-基)-十六烷酰基氨磺酰基]丁酰基氨基}十二烷酰基氨基)-4-羧基丁酰基氨 基]-4-羧基丁酰基氨基}乙氧基)乙氧基]乙酰基}[去氨基见87，611122^印26^印34， Lys37]GLP-I(7-37) 制备方法B肽在74%乙腈下洗脱通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4652. 4实施例65N-ε 37-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶_4_ 羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四 唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][去氨基圯87，六印26，六印34，1^837]61^-1-(7-37) 制备方法B肽在65%乙腈下洗脱。[1413]通过MALDI-MS确认结构计算的MW = 4524. 2实施例66N- ε 37- [2~ (2_ {2_ [2~ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基十九烷酰基 氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基} 乙氧基)乙酰基][Aib8, Glu22, Arg26, Arg34, Lys37]GLP-I-(7-37) 制备类似于SPPS方法B。HPLC 方法 02_B6_1 RT = 33. 58minLCMS :m/z = 1114(M+4H)4+计算的(M)= 4451. 1实施例67[ImPr7, Arg26'34, Glu22]GLP-I- (7-37) Lys [2- (2- [2- ((S) -4- ((S) -4- (12-[4- (16-IH-四唑-5-基十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基)-4-羧基丁酰基氨 基)-4-羧基丁酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]-酰胺
hPn 制备方法Α肽在61%乙腈下洗脱结构通过LC-MS确认计算的MW :(Μ/3)+1 = 1550. 8 和(M/4)+l = 1163. 1 ； (SciexlOOAPI)发现的MW :(Μ/3)+1 = 1551. 9 禾口 (M/4)+l = 1164. 3 ； (SciexlOOAPI)实施例68Ν-ε 36-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)_3-[反式-4-((9_ 羧基十九烷酰基氨基]甲 基)环己基羰基氨基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧 基)乙酰基][Aib8, Glu22, Gln34]GLP-I-(7-37) 制备方法AHPLC (方法 B6)RT = 36. 8minMS-TOF :m/z = 4468计算的(M+H)+= 4469实施例69Ν-ε 26-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)_3-[反式-4_((9-羧基十九烷酰基氨基]甲 基)环己基羰基氨基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧 基)乙酰基][Aib8, Glu22, Gln34]GLP-I-(7-37) 制备方法ΑHPLC (方法 Β4)RT = 11. 4minLCMS :m/z = 1433 (M+3H)3+计算的(M+H)+= 4296. 9实施例70Ν-ε 18-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)_3-[反式-4-((9_ 羧基十九烷酰基氨基]甲 基)环己基羰基氨基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧 基)乙酰基][Aib8，22，35，Lysl8, Arg26, 34]GLP-I-(7-37) 制备方法AHPLC (方法 B4)[1452]RT = 11. OminLCMS :m/z = 1459 (M+3H)3+计算的(M+H)+= 4378. 1实施例71Ν-ε 18-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)_3-[反式-4_((9-羧基十九烷酰基氨基]甲 基)环己基羰基氨基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧 基)乙酰基][Aib8, Lysl8, Glu22, Gln34]GLP-I-(7-37) 制备方法AHPLC (方法 B4)RT = 11. 4minMS-TOF :m/z = 4338计算的(M+H)+= 4338基于微波的Liberty 肽合成仪(CEM Corp.，North Carolina) A-B-C-D-衍生化的 Lys GLP-I类似物的0. 125mMol合成。实施例72 肽酰胺的合成一般注意事项。用于肽酰胺合成的起始树脂是Rink-酰胺树脂，Wang或氯三苯甲 基树脂用于具有羧基C-末端的肽。实施例19 中 N- ε 26-[2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4-[(19_ 羧 基十九烷酰基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]衍生化的合成步骤1在肽序列完成后，从Lys的ε氨基基团上除去mtt保护，FMOC 8_氨基_3，6_ 二氧 杂辛酸/HOAT在NMP (2. 5mL)中的0. 3M溶液添加到树脂，随后添加NMP中DIC的0. 75M溶 液(Iml)。反应加热到70-75度5分钟，随后用NMP洗涤(4X 7ml)。步骤2步骤1中获得的树脂用NMP中5 %哌啶(7ml)脱保护，加热30秒，导出，用 NMP(7ml)洗涤，随后添加另外的NMP中的5%哌啶(7ml)，70_75度加热3分钟，随后用NMP 洗涤(4 X 7ml)。FMOC 8-氨基_3，6_ 二氧杂辛酸/HOAT在NMP中的0. 3M溶液(2. 5ml)添加到树 月旨，随后添加NMP中DIC的0. 75M溶液(Iml)。反应加热到70-75度5分钟，随后用NMP洗 涤(4 X 7ml)。步骤3步骤2中获得的树脂用NMP中5 %哌啶(7ml)进行Fmoc脱保护，加热30秒，导出， 用NMP (7ml)洗涤，随后添加另外的NMP中的5%哌啶(7ml)，70-75度加热3分钟，随后用NMP 洗涤(4 X 7ml)。FMOC-Glu-OTBU/HOAT在NMP中的0· 3M溶液(2. 5ml)添加到树脂，随后添加NMP中 DIC的0. 75M溶液(Iml)。反应加热到70-75度5分钟，随后用NMP洗涤(4X 7ml)。 [1475]步骤4步骤3中获得的树脂用NMP中5 %哌啶(7ml)进行Fmoc脱保护，加热30秒，导出， 用NMP (7ml)洗涤，随后添加另外的NMP中的5%哌啶(7ml)，70-75度加热3分钟，随后用 NMP 洗涤(4 X 7ml)。FMOC-氨甲环酸/HOAT在NMP中的0. 3M溶液(2. 5ml)添加到树脂，随后添加NMP 中DIC的0. 75M溶液(Iml)。反应加热到70-75度5分钟，随后用NMP洗涤(4X 7ml)。步骤5步骤4中获得的树脂用NMP中5 %哌啶(7ml)进行Fmoc脱保护，加热30秒，导出， 用NMP (7ml)洗涤，随后添加另外的NMP中的5%哌啶(7ml)，70-75度加热3分钟，随后用 NMP 洗涤(4 X 7ml)。二十烷二酸单叔丁酯和HOAT在NMP中的0. 3M溶液(2. 5ml)添加到树脂，随后添加 NMP中DIC的0. 75M溶液(Iml)。反应加热到70-75度5分钟，随后用NMP洗涤(4X 7ml)。步骤6叔丁酯保护的除去和从树脂上裂解步骤5中获得的树脂用DCM洗涤(4X 7ml)并干燥。干燥的树脂从Liberty上取 下，用TFA/TIS水(92.5/5/2.5)处理2h，从树脂上裂解肽并除去叔丁基酯保护基团。滤出 树脂，肽用二乙醚沉淀，通过离心分离。肽在30%乙酸或备选的溶剂混合物中再溶解，利用 所描述的方法之一纯化。实施例14 中[2-(2-[2-(2-[2-(2-((S)-4-[1_[ 19-羧基十九烷酰基]哌啶-4-羰 基氨基]-4-羧基丁酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基] 衍生化的合成步骤7在肽序列完成之后，从Lys的ε氨基基团除去mtt保护，如步骤1_3描述的修饰 树脂。树脂用NMP中5%哌啶(7ml)进行Fmoc脱保护，加热30秒，导出，用NMP (7ml)洗涤， 随后添加另外的NMP中的5%哌啶(7ml)，70-75度加热3分钟，随后用NMP洗涤(4X 7ml)。FMOC-六氢异烟酸/HOAT在NMP中的0. 3M溶液(2. 5ml)添加到树脂，随后添加NMP 中DIC的0. 75M溶液(Iml)。反应加热到70-75度5分钟，随后用NMP洗涤(4X 7ml)。步骤8步骤7中获得的树脂用NMP中5 %哌啶(7ml)进行Fmoc脱保护，加热30秒，导出， 用NMP(7ml)洗涤，随后添加另外的NMP中的5%哌啶(7ml)，70_75度加热3分钟，随后用 NMP 洗涤(4 X 7ml)。二十烷二酸单叔-丁酯/HOAT在NMP中的0. 3M溶液(2. 5ml)添加到树脂，随后添 加NMP中DIC的0. 75M溶液(Iml)。反应加热到70-75度5分钟，随后用NMP洗涤(4X 7ml), 随后是如步骤6中描述的裂解操作。实施例 15 中 N- ε 31- (2- {2_ [2_ (2_ {2_ [2_ ((S) _3_ 羧基 _3_ {[1_ (19-羧基-十九
烷酰基)哌啶-4-羰基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基)衍生化的合成步骤9步骤2中获得的树脂用NMP中5 %哌啶(7ml)进行Fmoc脱保护，加热30秒，导出， 用NMP (7ml)洗涤，随后添加另外的NMP中的5%哌啶(7ml)，70-75度加热3分钟，随后用 NMP 洗涤(4 X 7ml)。FMOC-Asp-OTBU/HOAT在NMP中的0. 3M溶液(2. 5ml)添加到树脂，随后添加NMP中 DIC的0. 75M溶液(Iml)。反应加热到70-75度5分钟，随后用NMP洗涤(4X 7ml)。步骤10 步骤9中获得的树脂之后进行步骤7附着FMOC六氢异烟酸，之后进行步骤8附着 二十烷二酸单叔丁酯，最后通过如步骤6中描述的脱保护来合成。实施例18 中 N- ε 26- [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧 基-十九烷酰基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基 氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]衍生化的合成步骤11N- ε 26- [2_ (2_ {2_ [2_ (2_ {2_ [ (S) _4_ 羧基 _4_ ({反式 _4_ [ (19-羧基-十九烷酰 基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基]衍生化在步骤1-3-4-5和6后获得。实施例16中N- ε 26-[⑶_4_羧基_4_ ({反式_4_ [ (19-羧基十九烷酰基氨基) 甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基]衍生化的合成步骤12在Mtt脱保护之后，FMOC-Glu-OTBU/HOAT在NMP中的0. 3M溶液(2. 5ml)添加到 树脂，随后添加NMP中DIC的0. 75M溶液(Iml)。反应加热到70-75度5分钟，随后用NMP 洗涤(4 X 7ml)，随后是步骤4-5和6。步骤13对于所描述的白蛋白结合物的A部分的附着，可以使用步骤8中的操作，用合适的 A作为酸来替换二十烷二酸单叔丁酯。步骤14对于所描述的白蛋白结合物的B部分的附着，可以使用步骤7中的操作，用合适的 B作为酸来替换FMOC-六氢异烟酸。步骤15对于所描述的白蛋白结合物的C部分的附着，可以使用步骤9中的操作，用合适的 C作为酸来替换FM0C-Asp-0TBU。步骤16对于所描述的白蛋白结合物的D部分的附着，可以使用步骤1中的操作，用合适的 D作为酸来替换FMOC 8-氨基-3，6- 二氧杂辛酸。生物学发现在i. v.或s. c.施用后GLP-I衍生物的延长本发明的许多GLP-I衍生物的延长可以通过使用如下所述的方法在向健康猪sc 施用之后监视其血浆浓度来确定。为了比较，也可以跟踪sc.施用之后GLP-I (7-37)在血 浆中的浓度。本发明的其他GLP-I衍生物的延长可以以同样的方法测定。[1513]实施例73 迷你猪中的药物动力学测试许多本发明的GLP-I 衍生物(实施例 1，2，5，7，9，10，14，16，17，18，19，20，23，24， 25，26，27，28，31，33，34，35，49，50，52，59，和63的化合物)经历迷你猪中的药物动力学测
试。利拉鲁肽被包括在测试中用于比较的目的。 一般地，测试物质溶于适合于皮下或静脉内施用的载体中。在当前的研究中，皮下 地施用测试物质。每个动物接受2nmol/kg体重的剂量，调整浓度从而给药体积是大约1ml， 使用以下载体具有0. 05% w/v Tween 80的50mM磷酸盐缓冲液(pH大约8)。在来自EllegaardGijttingen Minipigs ApS 的雄性Gdttingen迷你猪中进行研
究。在动物进入研究前容许的驯化期是大约6-10天。在驯化期的开始，迷你猪约5月龄， 体重范围7-10kg。研究在室温设置在21_23°C、相对湿度彡50%的适合的动物房中进行。房间被照 亮，给出12小时光线和12小时黑暗的周期。光线是从06. 00到18. OOh0动物置于有稻草作为床的围栏中，每个围栏中六只一起。在研究期间动物自由摄取民用质量的饮用水，但是在给药前一天的大约下午4点 开始禁食，直到给药后约12小时。动物在到达时和在给药当天称重。动物接受单次皮下注射。在颈部的右侧、离耳朵约5-7cm、离颈部中间约7-9cm处 给予皮下注射。用针头上的止动器给予注射，容许0. 5cm针头引入。每个测试物质一般给予三只动物，但在某些情况下给予两只或更多只动物。从每只动物获得采用12-16个采样点的全血浆浓度_时间分布。根据以下时间表 采集血液样品在静脉内施用之后(在本研究中不适用)给药前(0)、注射后0. 17 (10 分钟)、0. 5，1，2，4，6，8，12，24，48，72，96，和 120 小 时。在某些情况下，还有注射后168小时和240小时。皮下施用之后给药前(0)、注射后0. 5，1，2，4，6，8，12，24，48，72，96，和 120 小时。在每个采样时间，从每个动物抽取l_2ml血液。血液样品采自颈静脉。在某些情 况下，还有注射后168小时和240小时。血液样品采集到含有缓冲液的试管中，用于稳定化以免GLP-I衍生物的酶促降 解。适合的缓冲液的实例是EDTA(二 -钠)0· 18M ；抑酶肽15000KIE/ml、Val-Pyr 0. 30mM 和pH值调节到7. 4，或直接采集到EDTA测试管中(即，Sarstedt Micro试管1. 3mL K3E)。 血液样品在离心前优选地在冰上保持最大20分钟。利用离心分离血浆(例如，在4°C, 10分钟，1500G)，立即转移到Micronic试管。 约200 μ 1血浆转移到每个Micronic试管。血浆保存在_20°C直到被分析。利用适合的分 析来分析血浆样品GLP-I衍生物的含量，例如，免疫分析，例如，ELISA、RIA、RRA或LCMS分 析，如下文所述。对于LCMS分析，血浆样品通过在LTQ-Orbitrap质谱仪(ThermoFisher Scientiifc, Bremen)上通过LC-MS分析，Accela HPLC泵和自动进样器连接到其上(都来 自ThermoFisher)。质谱仪装备有电喷界面，其以正电离作用方式运作。在选定的离子监测方式下，用5Da的窗口和30000的分辨率进行分析。对于定量，以5ppm的准确度提取五 个最强烈的同位素峰。在Jupiter Proteo柱(4 μ) 90A (50 X 2. Omm ID)上进行梯度洗脱。 移动相由乙腈中的A.O. 甲酸和B.O. 甲酸组成，流动速度是0.3ml/分钟。血浆样品 用有机溶剂沉淀。对于血浆标准物的构建，将化合物掺入血浆中，如样品一样处理血浆标准 物。如标准物一样制备质量对照，具有20%的接受指标。通过例如药物动力学分析来分析血浆浓度_时间分布。适合的分析工具的实例是 利用 WinNonlin Professional 5. O (Pharsight Inc.，MountainView, CA, USA)的(NCA)。 使用来自每个动物的个体血浆浓度_时间分布进行NCA，计算终末半衰期(T1/2)。除了两个化合物之外，所有测试的本发 明的GLP-I衍生物具有在迷你猪中皮下施 用后19-101小时范围内的半衰期。除了三种化合物之外，所有测试的本发明的GLP-I衍生 物具有在迷你猪中皮下施用后29-101小时范围内的半衰期。比较性化合物利拉鲁肽的半 衰期是18小时。本发明的选择的衍生物可以在丹麦长白猪中测试GLP-I衍牛物在猪中的药物动力学测试猪(50%杜洛克猪、25%约克夏猪、25%丹麦长白猪，约40kg)在实验开始时禁食。 对每只猪，施用处于50 μ M等渗溶液(5mM磷酸盐、pH7. 4，0. 02 %Tween _20 (Merck)、 45mg/ml甘露醇(无热原的，Novo Nordi sk)中的0. 5nmol测试衍生物每公斤体重。从颈静脉 中的导管抽取血液样品。5ml的血液样品注入含有175 μ 1以下溶液的钢化玻璃瓶中0. 18Μ EDTA、15000KIE/ml 抑酶肽(NovoNordisk)和 0. 30mM缬氨酸-Pyrrolidide (Novo Nordisk)， PH 7.4。在30分钟内，样品在5-6000*g离心10分钟。温度保持在4°C。上清液吸移到不 同的玻璃瓶中，保持在负20°C待用。肽的血浆浓度利用不同单克隆或多克隆抗体在夹心ELISA中、或通过RIA来测定。 抗体的选择取决于GLP-I衍生物。取决于所选择的特定GLP-I衍生物，达到血浆中的峰值 浓度的时间在大范围内变动。96孔微滴定板中夹心ELISA的一般分析方案包被缓冲液(PBS)磷酸盐缓冲盐水，pH7. 2洗涤-缓冲液(PBS-wash) 磷酸盐缓冲盐水，0. 05% v/v Tween 20，ρΗ 7. 2分析-缓冲液(BSA-buffer)磷酸盐缓冲盐水，10g/l牛血清白蛋白(Fluka 05477) ,0. 05% v/v Tween 20，ρΗ7.2链霉抗生物素蛋白_缓冲液磷酸盐缓冲盐水，0. 5Μ NaCl,0. 05% ν/νTween 20, ρΗ 7. 2标准物血浆-基质中单独的衍生物A-TNP无义抗体AMDEX链霉抗生物素-辣根过氧化酶(Amersham RPN4401V)TMB-底物3，3，，5，5，四甲基联苯胺(< 0.02% )，过氧化氢[1553]如下进行分析(体积/反应孔)1.)用100 μ 1 PBS-缓冲液中5 μ g/ml的捕获抗体包被 孵育 o/n，4°C參 5x PBS-wash 在最少30分钟内用最后的洗涤封闭 然后清空平板2.) 20 μ 1 样品 + 在具有 10 μ g/ml A-TNP 的 100 μ 1 BSA-缓冲液中 lg/ml 的生物 素化的检测抗体 室温，在摇动器上孵育2h □ 5x PBS-wash，然后清空平板3. ) 100 μ 1的链霉抗生物素蛋白_缓冲液中的AMDEX 1 8000 室温，在摇动器上孵育45-60分钟· 5x PBS-wash，然后清空平板4. ) 100 μ 1 TMB-底物 在摇动器上在室温下孵育χ分钟 用 100 μ 1 4Μ H3PO4 终止反应读取450nm处的吸光度，620nm的作为参考样品中的的浓度从标准曲线计算。RIA的一般分析方案DB-缓冲液80mM磷酸盐缓冲液、0. 人血清白蛋白、IOmMEDTA，0. 6mM 硫柳汞，pH 7. 5FAM-缓冲液40mM磷酸盐缓冲液、0. 人血清白蛋白、0. 6mM硫柳汞，pH 7.5活性炭 40mM磷酸盐缓冲液、0. 6mM硫柳汞，16. 7%牛血浆、15g/l活性碳、pH 7. 5 (使用前在4°C混合悬浮液至少1小时)标准物血浆-基质中单独的衍生物分析在minisorp试管12X75mm(体积/试管)中如下进行 混合-在4°C孵育30分钟-在3000rpm离心30分钟-在将上清液转移到新试管 中之后立即地用塞子封闭，在Y计数器上计数1分钟。样品中的的浓度从单独的标准曲线计算。GLP-1放射受体分析(RRA)所述方法是利用LEADseeker成像颗粒的放射测量的-配体结合分析。分析由以 下组成含有GLP-1受体的膜片段、未标记的GLP-1类似物、用1251标记的人类GLP-1、以及 用麦胚凝集素(WGA)包被的PS LEADseeker颗粒。冷的和1251标记的GLP-1将竞争与受体 的结合。当添加LEADseeker颗粒时，它们将经由WGA残基结合膜片段上的碳水化物残基。 1251分子与LEADseeker颗粒之间的接近引起来自颗粒的光发射。LEADseeker将成像发射 光，它将与样品中存在的GLP-1类似物的数量逆相关。试剂&材料动物血浆的预处理动物血浆在56°C热处理4小时，在10. OOOrpm离心10分钟。 以后，添加Val-Pyr(lOiiM)和抑酶肽(500KIE/ml)，保存在< _18°C待用。GLP-1类似物校准物GLP_1类似物掺入热处理过的血浆中，产生从约1 P M到lpM 的稀释度系列。GLP-1RRA 分析缓冲液25mM Na-HEPES(pH = 7. 5)、2. 5mMCaCl2、ImM MgCl2、50mM NaCl、0. 卵清蛋白、0. 003% tween 20,0. 005% bacitracin,0. 05% NaN3。GLP-1受体悬浮液GLP_1受体膜片段从稳定地表达人类胰腺GLP_1受体的婴儿仓 鼠肾脏(BHK)细胞纯化。保存在<-80°C待用。WGA偶联的聚苯乙烯LEADseeker成像珠子(RPNQ0260，Amersham)珠子用 GLP-1RRA分析缓冲液重构到13. 3mg/ml的浓度。然后添加GLP-1受体膜悬浮液，使用之前 翻滚冷孵育(2-8°C )至少1小时。[125I]-GLP-l(7-36)酰胺(Novo Nordisk A/S)。保存在<_18°C待用。乙醇 99. 9% vol (De Dansk Spritfabrikker A/S)保存在< _18°C待用。Multiscreen Solvinert 0. 45um 疏水性 PTFE 平板(MSRPN0450，Millipore Corp.)聚丙烯平板(cat. no. 650201，Greiner Bio-One)
116[1594]白色聚苯乙烯 384 孔平板(cat. no. 781075，Greiner Bio-One)设备 [1596]水平板混合器具有标准的摇摆_桶微量滴定板转子部件的离心机UltraVap-Drydown 样品浓缩机(Porvair)LEADseeker 多形式成像系统(Amersham)分析过程样品制备在化学可比较的接受者平板(S卩，聚丙烯平板)上固定Multiscreen Solvinert滤板来采集滤液。添加150 u L冰冷的乙醇99. 9%到Multiscreen Solvinert滤板的空反应孔 中，随后添加50 yl的校准物或血浆样品。将保存盖置于滤板上。在水平板混合器上在18_22°C孵育15分钟。将带有盖子的组装的滤器和接受平板置于标准摇摆桶微量滴定板转子部件中。然 后在1500rpm在接受平板的空反应孔中采集滤液2分钟。通过使用UltraVap和加热的(40°C )N2干燥滤液持续时间15分钟。通过向每个 反应孔添加100 Pi GLP-1RRA分析缓冲液重构干燥的材料。在水平混合器上孵育5分钟。GLP-1放射受体分析使用以下吸移方案和白色聚苯乙烯384孔平板 35u L GLP-1 RRA 分析缓冲液 SiiL重构的滤液。
10uL[125I]-GLP-1(7-36)酰胺.储备溶液在使用前在GLP-1 RRA分析缓冲液 中稀释至20. OOOcpm/孔。 预包被到WGA-聚苯乙烯LEADseeker成像珠子(0. 2mg/孔)的15 ii L GLP-1受 体膜片段( 0.5i!g/孔)封闭平板，在18_22°C孵育过夜通过使用LEADseeker 多形式成像系统检测每个反应孔的光发射持续10分钟。实施例74 表达克隆的人类GLP-1受体的细胞系中cAMP形成的刺激许多本发明的GLP-1衍生物(实施例1-28、31-37和39-71)的效价如下所述来测 定，即，在含有人类GLP-1受体的介质中环化AMP(cAMP)的形成的刺激。为了比较，还测定 了利拉鲁肽的效价。来自表达人类GLP-1受体的稳定转染的细胞系BHK467-12A(tk-tsl3)的纯化的质 膜用所讨论的GLP-1衍生物刺激，cAMP生产的效价使用来自Perkin Elmer Life Sciences 的AlphaScreenTM cAMP分析试剂盒测定。稳定转染的细胞系在NN A/S，Denmark制备，选择高表达克隆用于筛选。细胞在 DMEM,5% FCS、1 % Pen/Strep (青霉素/链霉素)和0. 5mg/ml的选择标记物G418中在5% C02下生长。在近似80%汇合的细胞用PBS(磷酸盐缓冲盐水)洗涤两次，用VerSene(乙二胺 四乙酸的四钠盐的水溶液)收获，在lOOOrpm离心5分钟，除去上清液。其他步骤全部在冰
117上进行。细胞团通过 Ultrathurax 在 10mL 缓冲液 1 (20mM Na-HEPES、10mM EDTA、pH = 7. 4) 勻化20-30秒，在20. OOOrpm离心15分钟，团粒重悬浮在10ml缓冲液2 (20mM Na-HEPES、 0. ImM EDTA、pH = 7. 4)中。悬浮液勻化20-30秒，在20. OOOrpm离心15分钟。缓冲液2
中的悬浮，均质化和离心重复一次，膜重悬浮在缓冲液2中，准备用于进一步分析或保存 在-80 °C。功能性受体分析通过由AlphaScreen技术测量肽诱导的cAMP生产来进行。 AlphaScreen技术的基本原理是内源的cAMP和外源添加的生物素-cAMP之间的竞争。cAMP 的捕获通过利用与接受体珠子缀合的特异性抗体来实现。形成的cAMP在AlphaFusion微 量培养板分析仪上计数和测量。利用Graph-Pad Prisme软件(版本5)计算EC5(1值。除了六种化合物之外，发现所有测试的本发明的GLP-1衍生物具有低于4. 00的效 价(EC50)。实施例75 在高和低白蛋白下对GLP-1受体的亲和力GLP-1肽对人类GLP-1受体的结合亲和力通过它从受体上替换125I_GLP_1的方式 来测量。为了测试肽与白蛋白的结合，用低浓度的白蛋白(0.005%，相应于追踪物中它的 余量)以及用高浓度的白蛋白(添加2.0%)进行分析。在结合亲和力、IC5(I方面的变动是所讨论的肽与白蛋白结合的指示，从而是所讨论 的肽在动物模型中潜在延长的药物动力学分布的预测。条件物种(体外)仓鼠生物学终点受体结合分析方法SPA受体:GLP_1受体细胞系:BHKtk-tsl3膜纯化细胞(近似地80%汇合)在PBS中洗涤两次，收获(PBS+EDTA或Versene)，之后它 们通过在lOOOrpm离心5分钟来分离。细胞/细胞团必需在随后的步骤中尽可能保持在冰 上。细胞团在适合的数量的缓冲液1 (取决于细胞的数量，但例如，10ml)中用Ultrathurrax 勻化20-30秒。组织勻浆在20000rpm离心15分钟。团粒在10mL缓冲液2中重悬浮(勻 化的)并重新离心。这个步骤再次重复。产生的团粒重悬浮在缓冲液2中，测定蛋白质浓 度。膜保存在-80°C。缓冲液1 :20mM Na-HEPES+lOmM EDTA, pH 7. 4缓冲液2 :20mM Na-HEPES+0. ImM EDTA, pH 7. 4结合分析SPA 测试化合物/肽、膜、SPA-颗粒和[1251]在分析缓冲液中稀释。25 iU (微升)的 测试化合物/肽添加到Optiplate中。添加HSA( “高白蛋白”实验)或缓冲液(“低白蛋 白”实验)(50iU)。添加5-10iig蛋白质/样品(50iU)相应于0. 1-0. 2mg蛋白质/ml (优 选地对每种膜制品优化的)。添加SPA-颗粒(麦胚凝集素SPA珠子)RPNQ 0001) 0. 5mg/反应孔(50u 1)0开始用[I25]-GLP-1(终浓度0. 05nM，相应于49. 880DPM，25iil)孵育。平板 用PlateSealer密封。在30°C孵育120分钟，同时摇动。离心平板(1500rpm, 10分钟)，在 Topcounter 中计数。分析缓冲液50mMHEPES5mM EGTA5mM MgCl20. 005% Tween 20pH 7. 4HSA 是 SIGMA A1653。作为从受体替换50%的125I-GLP_1时的浓度从曲线读取IC5(1值，确定[(IC5Q/nM) 高HSA]/[(IC5(1/nM)超低HSA]的比值。二十一种测试的GLP-1衍生物具有低于10的比值， 十二种在10-30的范围内，十二种在30-50的范围内，十四种在50-100的范围内。实施例76 白蛋白结合亲和力许多本发明的GLP-1衍生物(实施例1-2、4_16、22-28、31和33-71)对人血清白 蛋白(HSA)的亲和力通过如以下描述的竞争闪烁亲近分析(SPA)来测量。链霉抗生物素蛋白-SPA珠子(GE Healthcare RPNQ0009)与生物素化的HSA孵 育5小时。珠子用缓冲液洗涤来除去未结合的HSA。珠子与1251标记的酰化的GLP-1类似 物(N-e 37-[2-(2-[2-((S)-4-((S)-4-(12-[4-(16-(lH-四唑 _5_ 基)十六烷酰基氨磺酰 基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基)-4-羧基丁酰基氨基)-4-羧基丁酰基氨基)乙氧基] 乙氧基)乙酰基][Aib8,125I-Tyrl9, Glu22, Arg26, Arg34, Lys37]GLP-1 (7-37) -NH2)在含有 lOOmM HepesUOOmM NaClUOmM MgS04、0. 025% Tween-20、pH 7. 4 的缓冲液中混合。混合 物吸移到 Perkin Elmer 0ptiplate-966005290 (100 u 1 每孔)的反应孔中，100 ii 1 的要测 量的GLP-1衍生物的稀释系列添加到相同的缓冲液中。在室温下温和摇动20小时后，平板 被离心，在TopCoimter上计数。作为GLP-1衍生物浓度的函数标绘结合的cpm，竞争曲线的 EC50值用作衍生物对HSA的亲和力的度量。各种本发明的GLP-1衍生物的白蛋白结合亲和力(EC5(1，按nM)如以下的表中所示。表1 白蛋白结合亲和力 从表1可见的是，几种本发明的GLP-1衍生物具有高白蛋白结合亲和力，相应于低 于2000nM的EC5Q(EC5Q越低，白蛋白结合亲和力越高)。[1653]实施例77 :db/db小鼠中的剂量_反应研究许多本发明的GLP-1 衍生物(实施例 1,7,14,16,22,23,24,26,27,28. 31,33,46, 47，48，49，50，53，和59的化合物)如下文描述的在肥胖的糖尿病性的小鼠模型(db/db小 鼠)中的剂量-反应研究中测试。五十只10-12 周龄的 db/db 小鼠(Taconic，Denmark)根据 NovoNordisk 的标准 的动物福利规则圈养，自由摄取标准食物(例如，Altromin 1324，Brogaarden, Gentofte， Denmark)和自来水，保持在24°C。在1周的驯化之后，评估基础血糖两次。根据平均血糖 值，选择42只小鼠用于进一步的实验，分配到具有匹配的血糖水平的7个组中(n = 6)。小 鼠在3-6天持续时间的实验中使用达4次，之后它们被安乐死。接受治疗的七个组如下1:载体、s. c2 :GLP-1 衍生物，0. 3nmol/kg, s. c.3 GLP-1 衍生物，lnmol/kg, s. c.4 GLP-1 衍生物，3nmol/kg, s. c.5 GLP-1 衍生物，lOnmol/kg, s. c.6 GLP-1 衍生物，30nmol/kg, s. c.7 GLP-1 衍生物，lOOnmol/kg, s. c.载体50mM磷酸盐，0. 05% tween 80，pH 8。GLP-1衍生物溶于载体中，例如，到 0. 05,0. 17,0. 5、1. 7、5和17nmol/ml的浓度，重量50g的小鼠每只s. c.施用300微升(6ml/ kg)。在给药的当天，所讨论的化合物在大约上午9点给药(0时)。在_l/2h (上午8点 30)评估血糖，之后对小鼠称重。在给药的当天评估血糖几次，通常在1、3和6小时(上午 10点、上午12点和下午3点)。在接下来几天，在给药后24、48、72和96小时(即，在第2、3、4、5天的上午9点)
评估血糖，随后称重。在某些研究中，在给药后120h (第6天)进一步评估血糖和体重。小鼠在数字秤上独立地称重。用于血糖测量的样品从有意识的小鼠的尾部尖端毛细血管获得。10iU血液 采集到肝素化的毛细血管中，转移到500 ill葡萄糖缓冲液(EBI0缓冲溶液，Eppendorf, Germany)中。葡萄糖浓度使用葡萄糖氧化酶方法测量(葡萄糖分析仪Biosen 5040，EKF Diagnostic, GmbH, Barleben, Germany)。样品保持在室温达lh直到分析时。如果分析必 需被推迟，样品保持在4°C最多24小时。根据以下数学模型计算半衰期(T1/2)假定(1)化合物从血浆中的消失是单指数的；(2)对血糖的影响(deltaBG)可以通过标准的S形剂量反应曲线来描述；(3)吸收和分布的前6个小时被忽视，仅拟合葡萄糖从底部向基线(最小到0)的 返回。然后葡萄糖反应(Y)(例如deltaBG)可以由以下方程式描述Y =底部 + (顶部-底部)/ (1+ 剂量 *exp (-ln2*t/Tl/2) /ED50)，其中变量 ED50 和
120T1/2如下定义ED50是对BG产生半最大效果的剂量(按nmol/kg)。T1/2是半衰期(按小时)；以下是全局常数顶部(在回到基线葡萄糖后的反应)和底部(在最大葡萄糖下落的反应)；以下 是每个数据集(每个剂量)的常数剂量(施用的剂量(按nmol/kg))。所有数据集同时地拟合。测试的所有化合物具有在12-35小时的范围内的半衰期(T1/2)。
权利要求
一种包含肽的肽衍生物，其中至少一个氨基酸残基用A-B-C-D-衍生化其中A-是其中R是低级的线性或支链烷基，p选自由10、11、12、13和14构成的组，d选自由0、1、2、3、4和5构成的组，和-B-选自以下构成的组其中x选自由0、1、2、3和4构成的组，y选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12构成的组，或A是其中n选自由14、15、16、17、18和19构成的组，B选自以下构成的组其中x选自由0、1、2、3和4构成的组，和-C-选自以下构成的组其中b和e各自独立地选自由0、1和2构成的组，c和f各自独立地选自由0、1和2构成的组，条件是当c是0时b是1或2，或当c是1或2时b是0，和当f是0时e是1或2，或当f是1或2时e是0，知-D-附着到所述氨基酸残基上，并且是接头、代表键、或没有。FPA00001122832100011.tif,FPA00001122832100012.tif,FPA00001122832100013.tif,FPA00001122832100021.tif,FPA00001122832100022.tif
2，或当f是1或2时e是0，知-D-附着到所述氨基酸残基上，并且是接头、代表键、或没有。2.根据权利要求1的衍生物，其中至少一个氨基酸残基用A-B-C-衍生化。
3.根据权利要求1-2的任一项的衍生物，其中所述肽是选自GLP-I(7-37)和 GLP-I (7-37)的类似物的GLP-I肽，其中，在所述肽中，至少一个氨基酸残基用A-B-C-或 A-B-C-D-衍生化。
4.根据权利要求1-3的任一项的衍生物，其中所述衍生化的氨基酸残基包含氨基基团。
5.根据权利要求1-4的任一项的衍生物，其中所述衍生化的氨基酸残基是赖氨酸。
6.根据权利要求1和3-5的任一项的衍生物，其中所述接头包含至少5个非氢原子，其 30-50%是 N 或 O。
7.根据权利要求1和3-6的任一项的衍生物，其中D选自以下构成的组 其中k选自由0、1、2、3、4、5、11和27构成的组，m选自由0、1、2、3、4、5和6构成的组，D在用*描绘的末端附着到氨基酸残基。
8.根据权利要求1-7的任一项的衍生物，其中所述GLP-I类似物包含式(I)的氨基酸 序列Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Xaal6-Ser-Xaal8-Xaa19-Xaa20-Glu-Xaa22-Xa ￡l23_Al￡l_X￡l￡l25_Xa￡l26_Xa￡l27_Phe_11 θ—Χ&&βθ_T^P-L U—Χ&&β3_已39 __X&&41_^ ￡13-42 _^ ￡13-43 _^ ￡13-44 _^ ￡13-45 _^ ￡13-46式(I) (SEQ ID No 2)其中Xaa7是L-组氨酸、D-组氨酸、去氨基-组氨酸、2_氨基-组氨酸、β -羟基-组氨酸、高 组氨酸、N α -乙酰基-组氨酸、α -氟甲基-组氨酸、α -甲基-组氨酸、2 (3Η_咪唑_4_基) 乙酰基、3-吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；父&&8是41&、617、￥&1、1^11、116、1^8、八让、(1_氨基环丙基)羧酸、(1_氨基环丁基)羧 酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、(1-氨基环庚基)羧酸，或(ι-氨基环 辛基)羧酸；Xaa16 是 Val 或 Leu ； Xaa18 是 Ser λ Lys 或 Arg ； Xaa19 是 Tyr 或 Gln ； Xaa20 是 Leuλ Met 或 Lys ； 是 Gly、Glu 或 Aib ； Xaa23 是 Gin、Glu、Lys 或 Arg ； Xaa25 是 Ala 或 Val ； Xaa26 是 Lys、Glu 或 Arg ； Xaa27 是 Glu 或 Leu ； Xaa30 是 Ala、Glu、Lys 或 Arg ； Xaa33 是 Val、Thr (O-苯甲基)或 Lys ； Xaa34 是 Lys> Glu、Gin、Asn 或 Arg ； Xaa35 是617、Aib 或没有； Xaa36 是 Ala、Gly、Lys 或没有；Xaa37 是 Gly、Ala、Glu、Pro、Lys, ε -氨基-Lys、酰胺或是没有的；Xaa38是Lys、Ser、酰胺或是没有的；Xaa39是Ser、Lys、酰胺或是没有的；Xaa40是Gly、酰胺或是没有的；Xaa41是Ala、酰胺或是没有的；Xaa42是Pro、酰胺或是没有的；Xaa43是Pro、酰胺或是没有的；Xaa44是Pro、酰胺或是没有的；Xaa45是Ser、酰胺或是没有的；Xaa46是酰胺或是没有的；条件是如果Xaa8、Xaa39 λ Xaa40^ Xaa41 λ Xaa42 λ Xaa^3、Xaa44^ Xaa45 Xaa46 i、HfitJ，JSlI-^r 个下游的氨基酸残基也是没有的。
9.根据权利要求1-7的任一项的衍生物，其中所述GLP-I类似物包含式(II)的氨基酸 序列Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Xaal8-Tyr-Leu-Glu-Xaa22-Xaa23-A1 a~A 1 a-Xaa26-G 1 u_Phe_ 11 e-Xaa30-Trp-Leu-Va 1 -Xaa34-Xaa35-Xaa36-Xaa37-Xaa38 式(II) (SEQ ID No 3) 其中Xaa7是L-组氨酸、D-组氨酸、去氨基-组氨酸、2_氨基-组氨酸、β -羟基-组氨酸、高 组氨酸、Να_乙酰基-组氨酸、α -氟甲基-组氨酸、α -甲基-组氨酸、2(3Η_咪唑_4_基) 乙酰基、3-吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；父&&8是41&、617、￥&1、1^11、116、1^8、八让、(1_氨基环丙基)羧酸、(1_氨基环丁基)羧 酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、(1-氨基环庚基)羧酸，或(ι-氨基环 辛基)羧酸；Xaa18 是 Ser λ Lys 或 Arg ； 是 Gly、Glu 或 Aib ； Xaa23 是 Gin、Glu、Lys 或 Arg ； Xaa26 是 Lys、Glu 或 Arg ； Xaa30 是 Ala、Glu、Lys 或 Arg ； Xaa34 是 Lys> Glu、Gln 或 Arg ； Xaa35 是617、Aib 或没有； Xaa36 是 Arg、Lys 或没有；Xaa37 是 Gly、Ala、Glu、Pro、Lys 或 ε -氨基-Lys ； Xaa38是Lys、酰胺或是没有的。
10.根据权利要求1-7的任一项的衍生物，其中所述GLP-I类似物包含式(III)的氨基 酸序列，其是在位置18、23、26、30、31、34、36、37或38衍生化的Xaa7-Xaa8-Xaa9-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Xaal6-Ser-Xaal8-Tyr-Leu-Glu-Glu-Xaa23-Ala-Xaa25-Arg-Xaa27-Phe-Ile-Xaa30_Trp-Leu-Xaa33_Xaa34_Xaa35_Xaa36-Xaa37-Xaa38-Xaa39 式(III) (SEQ ID No 6) 其中Xaa7-Xaa8是2 (3H-咪唑_4_基)乙酰-丙氨酸、L-组氨酸-Aib、去氨基-组氨酸-丙 氨酸或去氨基_组氨酸-Aib ；Xaa9是Glu或Glu衍生物，例如，α , α 二甲基-Glu;Xaa16 是 Val 或 Leu ；Xaa18 是 Ser、Lys 或 Arg ；Xaa19 是 Tyr 或 Gln ；Xaa23 是 Gin、Glu、Lys 或 Arg ；Xaa25 是 Ala 或 Val ；Xaa27 是 Glu 或 Leu ；Xaa30 是 Ala、Glu、Lys> Arg 或没有；Xaa33 是 Val、Thr (O-苯甲基)或 Lys ；Xaa34 是 Lys> Glu、Gin、Asn 或 Arg ；Xaa35 是 Gly、Aib 或没有；Xaa36 是 Arg、Lys 或没有；Xaa37Is Gly, Aib, Pro, ε -氨基-Lys,或没有；Xaa38 是 Lys、Glu 或没有；Xaa39是酰胺或是没有的；条件是如果Xaa37是没有的则Xaa38也是没有的。
11.根据权利要求1-7的任一项的衍生物，其中所述GLP-I肽包含式(IV)的氨基酸序 列，其是在位置18、23、26、30、31、34、36、37或38用白蛋白结合残基衍生化的Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Xaal8-Tyr-Leu-Glu-Glu-Gln-Ala - Ala-Arg-Glu-Phe-Ile-Xaa30_Trp-Leu-Xaa33_Xaa34_Xaa35_Xaa36-Xaa37-Xaa38-Xaa39 式(IV) (SEQ ID No 7) 其中Xaa7是L-组氨酸、D-组氨酸、去氨基-组氨酸、2_氨基-组氨酸、β -羟基-组氨酸、高 组氨酸、Να_乙酰基-组氨酸、α -氟甲基-组氨酸、α -甲基-组氨酸、2(3Η_咪唑_4_基) 乙酰基、3-吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；父&&8是41&、617、￥&1、1^11、116、1^8、八让、(1_氨基环丙基)羧酸、(1_氨基环丁基)羧 酸、(1-氨基环戊基)羧酸、(1-氨基环己基)羧酸、(1-氨基环庚基)羧酸，或(ι-氨基环 辛基)羧酸；Xaa18 是 Ser、Lys 或 Arg ；Xaa30 是 Ala、Glu、Lys 或 Arg ；Xaa33 是 Val 或 Lys ；Xaa34 是 Lys> Glu、Gln 或 Arg ；Xaa35 是617、Aib 或没有；Xaa36 是 Arg、Lys 或没有；Xaa37 是 Gly、Aib、Pro、ε -氨基-Lys 或没有；Xaa38是Lys或没有；和Xaa39是酰胺或是没有的。
12.根据权利要求1-11的任一项的衍生物，其中Xaa38是没有的。
13.根据权利要求1-12的任一项的衍生物，其中Xaa37和Xaa38都是没有的。
14.根据权利要求1-13的任一项的衍生物，其中Xaa7是去氨基-组氨酸。
15.根据权利要求1-14的任一项的衍生物，其中Xaa8是Aib。
16.根据权利要求1-15的任一项的衍生物，其选自以下N- ε 37 {2- [2- (2- {2- [2_ ((R) _3_ 羧基-3- {[1_ (19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_ 羰基] 氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[去氨基 His7, Glu22, Arg26, Arg34, Lys37JGLP-I (7-37)酰胺；N- ε 20- {2- [2- (2- {2- [2_ ((R) _3_ 羧基-3- {[1_ (19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_ 羰基] 氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[Aib2，Leu14， Lys20, Gln28, Ser (O-苯甲基)39J exendin-4 (1-39)酰胺；N- ε 26 {2- [2- (2- {2- [2_ ((R) _3_ 羧基-3- {[1_ (19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_ 羰基] 氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[去氨基 His7, Arg34]GLP-I-(7-37)；N- ε 37 {2- [2- (2_ {2_ [2_ (⑶-3-羧基-3- {[1_ (19-羧基十九烷酰基)哌啶_4_羰基] 氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[Aib8，Glu22， Arg26, Arg34, Lys37] GLP-I-(7-37)酰胺；N- ε 23- [2- (2- [2_ (2_ [2_ (2- ((R) -3- [ 1- (17-羧基十七烷酰基氨基)哌啶_4_基羰基 氨基]-3-(羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基] [Aib8，Arg26，Arg34] GLP-I-(7-37)；N-￡37-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)-3-[l-(17-羧基十七烷酰基)哌啶 _4_ 基羰基氨 基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基][去 氨基 His7，Glu22 Arg26, Arg34, Phe (m-CF3) 28]GLP-I-(7-37) 酰胺；[去氨基 His7，Glu22, Arg26, Arg34]GLP-I- (7-37) -Lys (2- {2-[2- (2- {2-[2- ((S) -4-羧基-4-{[1-(19-羧基十九烷酰基)哌啶-4-羰基]氨基} 丁酰基氨基)乙氧基]乙氧 基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基)；N- ε 2° ({2- [2- (2- {2- [2_ ((R) _3_ 羧基-3- {[1_ (17-羧基十七烷酰基)哌啶 _4_ 羰基] 氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基)[Aib8， Lys20, Arg26, Glu30, Thr (O-苯甲基)33，]GLP-I-(7-37)酰胺；N- ε 30 {2- [2- (2_ {2_ [2_ (⑶-3-羧基-3- {[1_ (19-羧基十九烷酰基)哌啶_4_羰基] 氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[Aib8，Glu22， Arg26, Lys30]GLP-I-(7-37)；N-ε 31 {2- [2- (2_ {2_ [2_ (⑶-3-羧基-3- {[1_ (19-羧基十九烷酰基)哌啶_4_羰基] 氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基[Aib8，Glu22， Arg26, Lys 31] GLP-I-(7-37)；N- ε 2° ({2- [2- (2- {2- [2_ ((R) _3_ 羧基-3- {[1_ (17-羧基十七烷酰基)哌啶 _4_ 羰基] 氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基)[Aib8， Lys20, Arg26, 2-萘基丙氨酸 28，Glu30] GLP-I (7-37)酰胺；[Aib8, Glu22, Arg26, Arg34, ]GLP-I-(7-37)Lys[2-(2-[2-(2-[2-(2-((S)-4-[1-[19-羧基十九烷酰基]哌啶-4-羰基氨基]-4-羧基丁酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨 基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]酰胺；N- ε 2° ({2- [2- (2- {2- [2_ ((R) _3_ 羧基-3- {[1_ (17-羧基十七烷酰基)哌啶 _4_ 羰基] 氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基)[Aib8， Lys20, Arg26, 2-萘基丙氨酸 12，Glu30] GLP-I-(7-37)酰胺；[去氨基 His7, Glu22, Arg26, Arg34]GLP-I- (7-37) Lys [2- (2-[2- (2-[2- (2- ((S) -4-[1 -[19-羧基十九烷酰基]哌啶-4-羰基氨基]-4-羧基丁酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰 基氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]酰胺；N- ε 31-(2-{2-[2-(2-{2-[2-((S)-3-羧基-3-{[1-(19_ 羧基-十九烷酰基)哌 啶-4-羰基]氨基}丙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰 基)[Aib8, Glu22, Arg26, Lys31, Arg34]GLP-I-(7-37)；N- ε 26- [ (S) -4-羧基_4_ ({反式_4_ [ (19-羧基十九烷酰基氨基)甲基]环己烷羰基} 氨基)丁酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-37)；N- ε 26- {4- [ (S) ~4~羧基_4_ ({反式_4_ [ (19-羧基十九烷酰基氨基)甲基]环己烷羰 基}氨基)丁酰基氨基]丁酰基} [Aib8, Arg34]GLP-I-(7-37)；N- ε 26- [2- (2- {2_ [⑶_4_羧基_4_ ({反式_4_ [ (19-羧基-十九烷酰基氨基)甲基] 环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34]GLP-l-(7-37)；N- ε 26- [2- (2- {2_ [2_ (2_ {2- [ (S) -4-羧基 _4_ ({反式-4- [ (19-羧基-十九烷酰基氨 基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙 氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-37)-酰胺；Ν-ε 18-{2-(2-(2-(2-[2-(2-[(S)-4-羧基-4-({4-[(19-羧基十九烷酰基氨基)甲 基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基)乙氧基]乙酰基)乙氧基)乙氧基)乙酰 基} [Aib8, Lysl8, Arg26, Arg34]GLP-I (7-37)；N-e2°-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((S)-4-[反式-4-([19-羧基十九烷酰基氨基]甲基)环 己基羰基氨基]-4-羧基丁酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基) 乙酰基][去氨基 His1, Lys20, Ser (O-苯甲基)33，Ser (O-苯甲基)39] exendin (1-39)；[Aib8, Glu22, Arg26, Arg34]GLP-I-(7-37)Lys[2-(2-[2-(2-[2-(2-((S)-3-[4-([19-羧基十九烷酰基氨基]甲基)环己基羰基氨基]-3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基] 乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]酰胺； N- ε 37- [2- (2- {2_ [2_ (2_ {2- [ (S) ~4~ 羧基-4- ({反式 _4_ [ (19-羧基-十九烷酰基氨 基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙 氧基)乙酰基][Aib8，Glu22，Arg26, Arg34, Lys37] GLP-I-(7-37)酰胺；N- ε 37- [2- (2- {2_ [2_ (2_ {2- [ (S) ~4~ 羧基-4- ({反式 _4_ [ (19-羧基-十九烷酰基氨 基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙 氧基)乙酰基][去氨基 His7，Glu22，Arg26, Arg34, Lys37]GLP-I-(7-37)酰胺；N- ε 37- [2- (2- {2_ [2_ (2_ {2- [ (S) ~4~ 羧基 ~4~ ({4-[(反式-19-羧基-十九烷酰基氨 基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙 氧基)乙酰基][去氨基 His7, Arg26，Arg34，Lys37]GLP-I-(7-37)酰胺；N- ε 37- [2- (2- {2_ [2_ (2_ {2- [ (S) ~4~ 羧基-4- ({反式 _4_ [ (19-羧基-十九烷酰基氨 基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙 氧基)乙酰基][去氨基圯87，611122，六印26，六印34，1^837]61^-1-(7-37)；[去氨基 His7, Glu22, Arg26, Arg34]GLP-I-(7-37)Lys[2-(2-{2-[2-(2-{2-[4-羧 基-4-({反式-4-[(19-羧基-十九烷酰基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基] 乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]-酰胺；[去氨 S His7, Arg26, Arg34] GLP-I-(7-37) Lys [2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)-3-[反 式-4-((9-羧基十九烷酰基氨基]甲基)环己基羰基氨基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基) 乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]酰胺；N- ε 26 [2- (2- {2_ [2_ (2_ {2- [ (S) -4-羧基 _4_ ({4- [ (19-羧基-十九烷酰基氨基)甲 基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基) 乙酰基[Aib8，Lys 26] GLP-I (7-37)酰胺；N- ε 26 [2- (2- [2_ (2_ [2_ (2- ((S) -2-[反式-4- ((9-羧基十九烷酰基氨基]甲基)环己 基羰基氨基]-4-羧基丁酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙 酰基][Aib8，Lys26] GLP-I (7-37)酰胺；N- ε 37- [2- (2- {2_ [2_ (2_ {2- [ (S) ~4~ 羧基-4- ({反式 _4_ [ (19-羧基-十九烷酰基氨 基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙 氧基)乙酰基][去氨基见87，六印26，六印34，1^837]61^-1-(7-37)；N- ε 37- [2- (2- {2_ [2_ (2_ {2- [ (S) -4-羧基 _4_ ({反式-4- [ (19-羧基-十九烷酰基氨 基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙 氧基)乙酰基][去氨基 His7，Glu22，Arg26，Glu30，Arg34，Lys37]GLP-l-(7-37)；N- ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-((S)_4-羧基-4-{4-[4-(16-(1H-四 唑-5-基)-十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]-丁酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34]GLP-l-(7-37)；N- ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-{12-[4-(16-(1Η-四唑 _5_ 基) 十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-37)；N- ε 26- [2- (2- {2_ [ (S) ~4~ 羧基 _4_ ((S) ~4~ 羧基-4- {6- [4- (16- (1Η-四唑-5-基) 十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙 氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-37)；N- ε 26- [2- (2- {2_ [ (S) ~4~ 羧基 _4_ ((S) ~4~ 羧基-4- {4- [4- (16- (1Η-四唑-5-基) 十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]丁酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙 氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-34)；N- ε 26- [2- (2- {2_ [ (S) ~4~ 羧基-4- ((S) ~4~ 羧基-4- {12- [4- (16- (1Η-四唑-5-基) 十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]_十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-34)；N- ε 26- [2- (2- {2_ [ (S) ~4~ 羧基 _4_ ((S) ~4~ 羧基-4- {6- [4- (16- (1Η-四唑-5-基) 十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙 氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-34)；N- ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-{12-[4-(16-(1Η-四唑 _5_ 基) 十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-35)；N- ε 26- [2- (2- {2_ [ (S) ~4~ 羧基 _4_ ((S) ~4~ 羧基-4- {6- [4- (16- (1Η-四唑-5-基) 十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙 氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-35)；N- ε 26- [2- (2- {2_ [ (S) ~4~ 羧基 _4_ ((S) ~4~ 羧基-4- {6- [4- (16- (1Η-四唑-5-基) 十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙 氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-36)酰胺；N- ε 26- [2- (2- {2_ [ (S) ~4~ 羧基 _4_ ((S) ~4~ 羧基-4- {6- [4- (16- (1Η-四唑-5-基) 十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]己酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙 氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-35)；N- ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-{12-[4-(16-(1Η-四唑 _5_ 基) 十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Lys33, Arg34]GLP-I-(7-34)；N- ε 26-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-{12-[4-(16-(1Η-四唑 _5_ 基) 十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Arg34] GLP-I-(7-36)酰胺；N-ε 26-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-羧 基-4-((S)-4-羧基-4-{12-[4-(16-(1Η-四唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基] 十二烷酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙 氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Lys26，Arg34] GLP-I-(7-36) 酰胺；[Aib8, Glu22, Arg26, Arg34]GLP-I- (7-37) Lys [2- (2- {2-[ (S) -4-羧基-4- ((S) -4-羧 基-4-{12-[4-(16-(1Η-四唑-5-基)十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨 基} “丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]酰胺；N- ε 20-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-{12-[4-(16-(1Η-四唑 _5_ 基) 十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][Aib8, Lys20, Glu22, Arg26, Glu30, Pro37]GLP-I-(7-37)酰胺；N- ε 37-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-{12-[4-(16-(1H-四唑 _5_ 基) 十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][Aib8，Glu22，Arg26, Arg34, Lys37] GLP-I-(7-37)酰胺； N- ε 37- [2- (2- {2_ [ (S) ~4~ 羧基-4- ((S) ~4~ 羧基-4- {12- [4- (16- (1Η-四唑-5-基) 十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][去氨基圯87，611122，六印26，六印34，1^837]61^-1-(7-37)酰胺；N- ε 37-[[2-(2-{2-[(S)-4-羧基 _4_(⑶-4-羧基-4-{12-[4-(16_(1Η-四唑 _5_ 基) 十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][去氨基 His7，Arg26，Arg34，Lys37]GLP-I-(7-37)酰胺；[Aib8, Glu22, Arg26, Glu30, Pro37]GLP-I-(7-37)Lys[2-(2-{2-[4-羧基-4-(4-羧 基-4-{4-[4-(16-1Η-四唑-5-基-十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]丁酰基氨基} 丁 酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]；[Aib8, Glu22, Arg26, Glu30, Pro37]GLP-I- ((7-37) Lys (2- (2- (3- (2- (2- (2- (2- (2- (2-(2- (2- (2- (2- (2- (2- [4- (S)-羧基-4- (4- (S)-羧基-4- (4- {4- [ 16-(四唑-5-基)十六烷酰 基氨磺酰基]丁酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨基)丁酰基氨基]；乙氧基)乙氧基)乙 氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基) 丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基)肽；N-a37-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-({反式-4-[(19-羧基十九烷酰基氨 基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙 氧基)乙酰基][去氨基 His7，Glu22，Arg26，Arg34，ε -Lys37]GLP-I-(7-37)；N- α 8- [2- (4-咪唑基)乙酰基]N- ε 37- [2~ (2_ {2_ [2~ (2_ {2_ [ (S) ~4~ 羧基 _4_ ({反 式-4-[(19-羧基十九烷酰基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧 基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基][Glu22，Arg26，Arg34，Lys37] GLP-I-(8-37)； [去氨基 His7, Glu22, Arg26,34]-GLP-I(7-37)-Lys-(2-{2-[2-((S)-4-羧 基-4-{[1-(19-羧基十九烷酰基)哌啶-4-羰基]氨基} 丁酰基氨基)乙氧基]乙氧基} 乙酰基)肽；[去氨基 His7，Glu22，Arg26，34]-GLP-l(7-37)-Lys-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[4-羧基-4-({4-[(19-羧基十九烷酰基氨基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基} 乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]肽；[去氨基 His7，Glu22，Arg26，34]-GLP-I (7-37)-Lys ( (S)-4-羧 基-4-(2-{2-[2-((S)-4-羧基-4-{[l-(19-羧基十九烷酰基)哌啶_4_羰基]氨基} 丁酰 基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)丁酰基)肽；[去氨基 His7, Glu22, Arg26,34]-GLP-I(7-37)-Lys-(2-(2-{2-[(S)-4-羧 基-4-(2-{2-[2-((S)-4-羧基-4-{[1-(19-羧基十九烷酰基)哌啶_4_羰基]氨基} 丁酰 基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基)肽；[去氨基 His7，Arg26，34]-GLP-l(7-37)-Lys(2-{2-[2-(2-{2-[2-((S)-4-羧 基-4-{[1-(19-羧基十九烷酰基)哌啶-4-羰基]氨基} 丁酰基氨基)乙氧基]乙氧基} 乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基)肽；N- ε 37- (2- {2- [2_ (2_ {2_ [2- ((S) -4-羧基 _4_ {[ 1- (19-羧基十九烷酰基)哌啶 _4_ 羰 基]氨基} 丁酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙酰基)[去 氨基 His7, Arg26, Arg34, Lys37]GLP-I-(7-37)；N- ε 37-(⑶-4-羧基-4- {[1_ (19-羧基-十九烷酰基)-哌啶_4_羰基]-氨基} - 丁 酰基)[去氨基 His7，Arg26, Arg34, Lys37]GLP-I-(7-37)；[去氨基 His7，Glu22, Arg26, 34] -GLP-I (7-37) -Lys- ((S) -4-羧基-4- {[1- (19-羧 基_十九烷酰基)“哌啶-4-羰基]-氨基} _ 丁酰基)肽；N- ε 26-[2-(2-{2-[(R)-4-羧基-4-((R)-4-羧基-4-{12-[4-(16-1H-四 唑-5-基-十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基} 丁酰基氨基)丁酰基氨 基]乙氧基}乙氧基)乙酰基]_[Aib8，Arg34] GLP-I (7-37)；N- ε 37-{2-[2-(2-{(S)-4-[(S)-4-(12-{4-[16-(2-叔丁基-2Η-四唑 _5_ 基)-十六 烷酰基氨磺酰基]丁酰基氨基}十二烷酰基氨基)-4-羧基丁酰基氨基]-4-羧基丁酰基氨 基}乙氧基)乙氧基]乙酰基}[去氨基圯87，611122，六印26，六印34，1^837]61^-1(7-37)； N- ε 37-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-{12-[4-(16-(1Η-四唑 _5_ 基) 十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基}丁酰基氨基)丁酰基氨基]乙氧 基}乙氧基)乙酰基][去氨基圯87，六印26，六印34，1^837]61^-1-(7-37)；^￡37-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(幻-4-羧基-4-({反式-4-[(19-羧基十九烷酰基氨 基)甲基]环己烷羰基}氨基)丁酰基氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基氨基]乙氧基}乙 氧基)乙酰基][Aib8，Glu22，Arg26，Arg34，Lys37] GLP-I-(7-37)；[ImPr7, Arg26'34, Glu22] GLP-I- (7-37) Lys [2- (2-[2- ((S) -4- ((S) -4- (12- [4- (16—1H -四唑-5-基十六烷酰基氨磺酰基)丁酰基氨基]十二烷酰基氨基)-4-羧基丁酰基氨 基)-4-羧基丁酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙酰基]-酰胺；N-ε 36-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)-3-[反式-4-((9-羧基十九烷酰基氨基]甲基)环己基羰基氨基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙 酰基][Aib8, Glu22, Gln34]GLP-I-(7-37)；N-ε 26-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)-3-[反式-4-((9-羧基十九烷酰基氨基]甲基)环己基羰基氨基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙 酰基][Aib8, Glu22, Gln34]GLP-I-(7-37)；N-ε 18-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)-3-[反式-4-((9-羧基十九烷酰基氨基]甲基)环 己基羰基氨基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙 酰基][Aib8，22，35，Lys 18, Arg26, 34] GLP-I- (7-37)；禾口N-ε 18-[2-(2-[2-(2-[2-(2-((R)-3-[反式-4-((9-羧基十九烷酰基氨基]甲基)环 己基羰基氨基]3-羧基丙酰基氨基)乙氧基)乙氧基]乙酰基氨基)乙氧基]乙氧基)乙 酰基][Aib8, Lys 18，Glu22, Gln34]GLP-I-(7-37)。
17.一种药物组合物，包含根据权利要求1-16的任一项的衍生物或其药学上可接受的 盐、酰胺、烷基或酯，以及药学上可接受的赋形剂。
18.用作药物的根据权利要求1-16的任一项的衍生物，或根据权利要求17的药物组合物。
19.根据权利要求1-16的任一项的衍生物，或根据权利要求17的药物组合物，其用于 高血糖、2型糖尿病、损害的葡萄糖耐受、1型糖尿病、肥胖、高血压、综合征X、血脂异常、认 知障碍、动脉粥样硬化、心肌梗塞、冠心病和其他心血管病症、中风、炎性肠综合征、消化不 良和胃溃疡的治疗或预防。
20.根据权利要求1-16的任一项的衍生物，或根据权利要求17的药物组合物在制造用 于治疗或预防高血糖、2型糖尿病、损害的葡萄糖耐受、1型糖尿病、肥胖、高血压、综合征X、 血脂异常、认知障碍、动脉粥样硬化、心肌梗塞、冠心病和其他心血管病症、中风、炎性肠综 合征、消化不良和胃溃疡的药物中的用途。
21.一种通过施用药学上活性数量的根据权利要求1-16的任一项的衍生物或根据权 利要求17的药物组合物来治疗或预防高血糖、2型糖尿病、损害的葡萄糖耐受、1型糖尿病、 肥胖、高血压、综合征X、血脂异常、认知障碍、动脉粥样硬化、心肌梗塞、冠心病和其他心血 管病症、中风、炎性肠综合征、消化不良和胃溃疡的方法。
全文摘要
本发明涉及延长的肽衍生物，例如高血糖素样肽-1(GLP-1)、exendin-4和其类似物，以及其治疗用途。本发明的肽衍生物包含其中至少一个氨基酸残基用A-B-C-或A-B-C-D-衍生化的肽。这些化合物在2型糖尿病和相关的疾病的治疗或预防中是有用的。所述化合物是强力的，具有在存在高/低白蛋白浓度的情况下对GLP-1受体的结合亲和力的低比值，具有长半衰期，并具有与白蛋白结合的高亲和力，所有这些对于实现具有每周一次施用的潜力的长效、稳定和活性的GLP-1衍生物的总体目标是潜在相关的。
文档编号C07K14/605GK101842109SQ200880114377
公开日2010年9月22日 申请日期2008年9月5日 优先权日2007年9月5日
发明者H·索格森, J·刘, J·斯佩茨勒, L·沙弗, P·W·加里贝, S·伦奇, S·奥斯特加尔德, T·克鲁斯 申请人:诺沃-诺迪斯克有限公司