专利名称：一种从驱虫斑鸠菊中提取斑鸠菊大苦素的方法
技术领域：
本发明属于天然药物化学领域，特别是涉及一种从驱虫斑鸠菊中提取斑鸠菊大苦素的方法。
背景技术：
斑鸠菊大苦素(Vernodalin)为倍半萜化合物，化学名称2-Propenoic acid, 2- (hydroxymethy1)-, 5a-ethenyldecahy-dro-3, 9~bis(methylene)- 2, 8-dioxo-2H-furo[2, 3-f]benzopyran-4ylester, [3aR- (3a α , 4a α , 5a α , 9a α , 9b β )-，分子式C19H2007，分子量360. 35。高纯度斑鸠菊大苦素为无色油状物， (a)24D+125° (C=l. 35，氯仿)，溶于甲醇、乙醇、丙酮等，不溶于水、石油醚等。斑鸠菊大苦素具有抗菌杀虫、抗疟、抗肿瘤活性作用。驱虫斑鸠菊为为双子叶植物药菊科植物驱虫斑鸠菊的果实，又叫印度山茴香、艾特日拉力。驱虫斑鸠菊始载于《中国植物志》，果实味苦、性凉，有清热消炎，活血化瘀，杀虫的功能，用于治疗皮肤斑、驱虫等。现有公开的从驱虫斑鸠菊中提取斑鸠菊大苦素方法，多为科学研究，一般采用醇提，脱脂和硅胶柱层析分离等步骤。硅胶柱层析存在样品损失严重、重现性差等技术缺陷， 在工业化生产斑鸠菊大苦素中很难实现。
发明内容
本发明的目的在于解决现有技术的不足和缺陷，提供一种从驱虫斑鸠菊中提取斑鸠菊大苦素的方法。为了实现上述目的，本发明的技术方案如下
一种从驱虫斑鸠菊中提取斑鸠菊大苦素的方法，其特征在于包括以下步骤以驱虫斑鸠菊为原料，粉碎20-80目，加入萃取釜中，以无水甲醇为夹带剂，采用超临界(X)2萃取，收集萃取液，回收甲醇，得萃取物，石油醚脱脂，再以正己烷一乙酸乙酯一甲醇一水为溶剂系统，采用高速逆流色谱分离萃取物，流分减压浓缩，即得斑鸠菊大苦素。所述超临界(X)2萃取条件为萃取温度为60-65°C，萃取压力为18_23MPa，分离釜 I温度为50-60°C，压力为7-9MPa，分离釜II温度为45_50°C，压力为5_6MPa。本发明中超临界(X)2萃取时间控制在2-3小时，CO2流量控制在20-30L/h。所述的正己烧一乙酸乙酯一甲醇一水溶剂系统比例为4 (6-7) (5-6) :5。高速逆流色谱分离萃取物时，是以溶液系统上相为固定相，下相为流动相，下相溶解萃取物，设备转速控制在700-1200r/min，流动相流速为l_3ml/min。本发明优势在于方法采用超临界(X)2萃取，提取效率高、能耗低、绿色环保；方法采用高速逆流色谱分离斑鸠菊大苦素，分离过程无产品损失，制备周期短，克服了传统硅胶柱分离过程中样品死吸附、工艺繁琐、重现性差的技术缺陷。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施例。
具体实施例方式实施例1:
驱虫斑鸠菊药材粉碎80目，取IOOOg原料加入超临界CO2萃取釜中，开启设备，设定参数萃取温度为60°C，萃取压力为23MPa，分离釜I温度为60°C，压力为9MPa，分离釜II温度为45°C，压力为5MPa。通入(X)2流体，达到上述参数后，以(X)2液体20L/h流量萃取，并夹带无水甲醇300ml/h，动态萃取3h，收集萃取液，回收甲醇，石油醚洗涤3次，得25g萃取物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按比例为4 :7 :5 :5混合，取上相注入色谱管内做固定相，开启高速逆流色谱仪，调节转速为900r/min，泵入下相做流动相，流速调节为2ml/min，平衡后， 注入流动相溶解的萃取物，紫外检测器监测，收集斑鸠菊大苦素流分，合并流分减压浓缩， 得无色液体斑鸠菊大苦素，高效液相检测，含量98. 1%，收率84. 1%。 实施例2
驱虫斑鸠菊药材粉碎20目，取IOOOg原料加入超临界CO2萃取釜中，开启设备，设定参数萃取温度为65°C，萃取压力为18MPa，分离釜I温度为50°C，压力为7MPa，分离釜II温度为50°C，压力为6MPa。通入(X)2流体，达到上述参数后，以(X)2液体25L/h流量萃取，并夹带无水甲醇400ml/h，动态萃取2h，收集萃取液，回收甲醇，石油醚洗涤2次，得22g萃取物。 取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按比例为4 :6 5 :5混合，取上相注入色谱管内做固定相，开启高速逆流色谱仪，，调节转速为800r/min，流动相流速调节为3ml/min，平衡后注入流动相溶解的萃取物，紫外检测器监测，收集斑鸠菊大苦素流分，合并流分减压浓缩，得无色液体斑鸠菊大苦素，高效液相检测，含量97. 5%，收率86. 实施例3
驱虫斑鸠菊药材粉碎60目，取IOOOg原料加入超临界CO2萃取釜中，开启设备，设定参数萃取温度为60°C，萃取压力为20MPa，分离釜I温度为60°C，压力为8MPa，分离釜II温度为45°C，压力为5MPa。通入(X)2流体，达到上述参数后，以(X)2液体22L/h流量萃取，并夹带无水甲醇400ml/h，动态萃取3h，收集萃取液，回收甲醇，石油醚洗涤3次，得^g萃取物。 取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按比例为4:7 :6:5混合，取上相注入色谱管内做固定相，开启高速逆流色谱仪，调节转速为700r/min，流动相流速调节为lml/min，平衡后注入流动相溶解的萃取物，紫外检测器监测，收集斑鸠菊大苦素流分，合并流分减压浓缩，得无色液体斑鸠菊大苦素，高效液相检测，含量98. 5%，收率80. 1%。 实施例4
驱虫斑鸠菊药材粉碎60目，取2000g原料加入超临界CO2萃取釜中，开启设备，设定参数萃取温度为60°C，萃取压力为20MPa，分离釜I温度为60°C，压力为8MPa，分离釜II温度为45°C，压力为5MPa。通入(X)2流体，达到上述参数后，以(X)2液体25L/h流量萃取，并夹带无水甲醇600ml/h，动态萃取3h，收集萃取液，回收甲醇，石油醚洗涤3次，得49g萃取物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按比例为4 6 6 :5混合，取上相注入色谱管内做固定相，开启高速逆流色谱仪，调节转速为800r/min，流动相流速调节为2ml/min，平衡后注入流动相溶解的萃取物，紫外检测器监测，收集斑鸠菊大苦素流分，合并流分减压浓缩，得无色液体斑鸠菊大苦素，高效液相检测，含量98. 3%，收率84.
实施例5
驱虫斑鸠菊药材粉碎60目，取4g原料加入超临界CO2萃取釜中，开启设备，设定参数 萃取温度为60°C，萃取压力为18MPa，分离釜I温度为60°C，压力为9MPa，分离釜II温度为 450C，压力为5MPa。通入(X)2流体，达到上述参数后，以(X)2液体25L/h流量萃取，并夹带无水甲醇1000ml/h，动态萃取3h，收集萃取液，回收甲醇，石油醚洗涤3次，得94g萃取物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、7K，按比例为4 :7 :6 :5混合，取上相注入色谱管内做固定相，开启高速逆流色谱仪，调节转速为800r/min，流动相流速调节为31ml/min，平衡后注入流动相溶解的萃取物，紫外检测器监测，收集斑鸠菊大苦素流分，合并流分减压浓缩，得无色液体斑鸠菊大苦素，高效液相检测，含量97. 9%，收率82. 3%。
权利要求
1.一种从驱虫斑鸠菊中提取斑鸠菊大苦素的方法，其特征在于包括以下步骤以驱虫斑鸠菊为原料，粉碎20-80目，加入萃取釜中，以无水甲醇为夹带剂，采用超临界(X)2萃取， 收集萃取液，回收甲醇，得萃取物，石油醚脱脂，再以正己烷一乙酸乙酯一甲醇一水为溶剂系统，采用高速逆流色谱分离萃取物，流分减压浓缩，即得斑鸠菊大苦素。
2.根据权利要求1所述从驱虫斑鸠菊中提取斑鸠菊大苦素的方法，其特征在于所述超临界CO2萃取条件为萃取温度为60-65°C，萃取压力为18-23MPa，分离釜I温度为 50-60°C，压力为7-9MPa，分离釜II温度为45_50°C，压力为5_6MPa。
3.根据权利要求1所述从驱虫斑鸠菊中提取斑鸠菊大苦素的方法，其特征在于所述的正己烧一乙酸乙酯一甲醇一水溶剂系统比例为4 :(6-7) :(5-6) :5。
全文摘要
本发明属于天然药物化学领域，公开了一种从驱虫斑鸠菊中提取斑鸠菊大苦素的方法。方法是以驱虫斑鸠菊为原料，粉碎20-80目，加入萃取釜中，以无水甲醇为夹带剂，采用超临界CO2萃取，收集萃取液，回收甲醇，得萃取物，石油醚脱脂，再以正己烷—乙酸乙酯—甲醇—水为溶剂系统，采用高速逆流色谱分离萃取物，流分减压浓缩，即得斑鸠菊大苦素。本发明采用超临界CO2萃取和高速逆流色谱分离技术，高效、环保，适合工业化生产。
文档编号C07H17/04GK102329352SQ201110210040
公开日2012年1月25日 申请日期2011年7月26日 优先权日2011年7月26日
发明者刘东锋, 李法庆 申请人:苏州宝泽堂医药科技有限公司