专利名称：西罗莫司粗晶的制备方法
西罗莫司粗晶的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种药物的制备方法，尤其涉及一种西罗莫司粗晶的制备方法。背景技术：
西罗莫司(sirolimus)又称雷帕霉素(rapamycin)，1975年，由力口拿大Ayerst 实验室的Vezina等人从太平洋fesler岛土壤样品中分离的吸水链霉菌(Str印tomyees hygroscopicus)发酵液中首次得到。西罗莫司是一种亲脂性含氮36元大环内酯类抗生素， 分子式C51H79NO13,分子量914. 2，其结构式如下1977年Morris等人首先发现西罗莫司具有免疫抑制作用，1989年开始把西罗莫司作为治疗器官移植的排斥反应的新药进行使用。它是目前世界上最新的强效免疫抑制剂，它的免疫抑制活性比现行临床广泛使用的环孢素强数十倍，不但毒性低、用量小， 而且与环孢素有协同免疫抑制作用，在临床上西罗莫司与环孢素联合使用。与环孢素和 Π(506(他克莫司)相比，西罗莫司是一种疗效好、低毒、无肾毒性的免疫抑制剂。1991年， 在酵母中发现了雷帕霉素的作用靶点并命名为“雷帕霉素靶点(TOR)”。其在哺乳动物中发现的唯一的同质体后来被克隆，称为“哺乳类动物雷帕霉素靶点(mTOR)”。现在雷帕霉素不但作为器官移植抗排斥药物和治疗冠状动脉再狭窄的支架涂层在临床上应用，而且已经在实验室中被证实可抑制许多癌细胞的生长，包括横纹肌肉瘤、神经母细胞瘤、肺小细胞癌、 骨癌、胰脏癌、白血病癌细胞及B细胞淋巴癌等。西罗莫司具有异构体B和异构体C，其中异构体B为主要活性成分，两种异构体的结构式如下
权利要求
1.一种西罗莫司粗晶的制备方法，其特征在于将西罗莫司菌丝体的浸提液采用下述步骤进行操作(1)吸附将西罗莫司菌丝体的浸提液减压浓缩成浓缩物，接着浓缩物中加入固体吸附剂，并搅拌、静置，然后倾浙除去液体得到残余物，其中，固体吸附剂加入量以所述浸提液的体积为标准，每升浸提液加入0. 001 0. 005kg固体吸附剂；(2)萃取加入浸提液体积的0.05 0. 5倍的有机溶剂至经过(1)处理所得的残余物中，并搅拌，然后过滤或离心除去固体，再将所得溶液静置以使溶液分为水、有机溶液两层， 并除去水层以获得有机溶液；(3)洗涤浓缩加入饱和食盐水至经过( 处理所得有机溶液中，饱和食盐水与有机溶液的体积比为0.1 1 1，对有机溶液进行洗涤，并除去水层，得到剩余物；再加无水硫酸钠至上述剩余物中干燥3小时，然后过滤以获得滤液，最后将滤液减压浓缩，得黑褐色油状物；(4)洗涤加非极性溶剂至经过C3)处理所得的油状物中，并搅拌、静置，然后除去非极性溶剂以获得残留物，其中，非极性溶剂与油状物的体积比为0. 5 3 1 ；(5)结晶加结晶溶剂至经过(4)处理所得的残留物中，并搅拌溶解，即获得西罗莫司溶液，结晶溶剂与所述残留物的体积比为0.5 3 1 ；接着将西罗莫司溶液在室温下放置 2 10h，然后过滤除去液体，得到西罗莫司晶体；(6)洗晶干燥用所述结晶溶剂洗涤( 中获得的西罗莫司晶体三次，然后将洗涤后的西罗莫司晶体置于45°C下减压干燥4h，即得产品；(7)检测采用高效液相色谱对(6)中获得的产品的纯度进行检测。
2.如权利要求1所述的西罗莫司粗晶的制备方法，其特征在于所述固体吸附剂为硅藻土、硅胶中的一种或几种；所述有机溶剂为乙酸乙酯、二氯甲烷、甲苯、乙酸丁酯、乙酸异丙酯中的一种或几种；所述非极性溶剂为石油醚、己烷、庚烷、环己烷、戊烷中的一种或几种；所述结晶溶剂为乙醚、甲基叔丁基醚、异丙醚、丙醚中的一种或几种。
3.如权利要求1所述的西罗莫司粗晶的制备方法，其特征在于所述高效液相色谱的检测条件为色谱柱为Kromasil C18柱；色谱柱规格是5 μ m、4. 6mmX 250mm ；流动相为甲醇、乙腈和水组成的混合溶液，且各组成成分的体积比为甲醇乙腈水=70 15 30 ； 检测波长277nm ；柱温40°C ；流速lml/min。
全文摘要
本发明提供了一种西罗莫司粗晶的制备方法，包括吸附、萃取、洗涤浓缩、洗涤、结晶、洗晶干燥等步骤，即可得到西罗莫司粗晶，本发明不需要经过柱层析等一系列繁杂工序，而是通过简单常规的实验操作就可得到西罗莫司粗晶，操作简单，可进行工业化生产。本发明极大程度地提高了西罗莫司的纯度和含量，并提高了西罗莫司中异构体B与异构体C的比值。目前市场上未见西罗莫司以粗晶形式存在的产品，采用本发明制得的西罗莫司粗晶具有方便储存和运输的优点，大大便利了广大研发人员或生产人员。
文档编号C07D498/18GK102372726SQ201110350009
公开日2012年3月14日 申请日期2011年11月8日 优先权日2011年11月8日
发明者余辉, 杨国新, 程元荣, 金东伟, 陈夏琴, 陈有钟, 黄捷 申请人:福建省微生物研究所