一种麦迪霉素的制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种抗生素的制备方法，尤其涉及一种高纯度麦迪霉素的制备方法。本发明使用陶瓷膜过滤器直接过滤麦迪霉素发酵液，滤液经萃取及转相，最后将转相液用特殊的结晶方式结晶，再用离心机分离结晶混悬液，晶体经干燥得到高纯度麦迪霉素成品，具有如下优点和积极效果：过滤速度快，滤液质量好，收率高；成品质量好；方法便捷，适合工业化生产。
【专利说明】一种麦迪霉素的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于制药领域，涉及一种抗生素的制备方法，尤其涉及一种高纯度麦迪霉素的制备方法。
【背景技术】[0002]麦迪霉素(Midecamycin)分子式为C41H67NO15,分子量为813.97，是一种16元大环内酯类抗生素。
[0003]传统方法生产麦迪霉素是将发酵液加入硫酸锌、黄血盐板框压滤，压滤液经过萃取及转相，再在碱性条件下升温结晶，将晶体分离后经干燥得到成品。传统方法有几下几个缺点:1)传统的板框过滤耗费大量的人力和物力；2)发酵液预处理加入硫酸锌，使滤渣中含有大量有毒元素锌，污染环境；3)板框过滤不能除去大分子可溶性蛋白质，糖类，色素等杂质，滤液质量差，在后续萃取时易发生乳化，影响产品质量和收率。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于克服传统方法存在的问题，提供一种工艺简单、环保、能得到高纯度的麦迪霉素的制备方法。
[0005]本发明的高纯度麦迪霉素的制备方法，其步骤包括:
[0006]I)将麦迪霉素发酵液先调至pH为4.0~5.0的酸性，用陶瓷膜过滤器过滤。
[0007]2)将上述滤液调至碱性，加入滤液体积10%~15%的萃取剂在45~50°C的条件下萃取。
[0008]3)将上述萃取液在pH2.0~2.5的酸溶液中转相。
[0009]4)将转相液调至碱性,萃取后,再逐渐滴加纯化水至有大量晶体析出。
[0010]5)将结晶混悬液分离，洗涤，干燥后得到麦迪霉素成品。
[0011]根据上述制备方法，其中步骤I)中，调节发酵液pH的酸可以是盐酸，硫酸等无机酸。所用的陶瓷膜的孔径大小为0.01~0.1 μ m。过滤完成后，为了确保收率，要用约I~2倍体积的已调至pH4.0~5.0的纯化水溶液顶水，全收集滤过液。
[0012]在步骤2)中,应用氢氧化钠溶液将滤液的pH调至8.5~9.0,加入乙酸丁酯萃取，静置分层后，麦迪霉素转入上层有机相中，弃下层滤液。
[0013]在步骤3)中，所用的酸溶液可以是盐酸，硫酸和草酸。加入pH2.0~2.5，体积约为萃取液的15%~20%的酸溶液后，静置分层，麦迪霉素又转入下层水相中，分出下层溶液。
[0014]在步骤4)中，加入氢氧化钠溶液调溶液的pH至8.0~8.5，加入约为转相液体积10%~15%的乙酸丁酯45~50°C的条件下萃取，得到萃取液后，在常温下，逐渐滴加纯化水至有大量白色晶体析出。
[0015]在步骤5)中，结晶混悬液用离心机分离后，为更好地去除杂质，需用约为潮晶质量I~2倍体积的50%的乙酸丁酯溶液洗涤晶体。[0016]本发明使用陶瓷膜过滤器直接过滤麦迪霉素发酵液，滤液经萃取及转相，最后将转相液用特殊的结晶方式结晶，再用离心机分离结晶混悬液，晶体经干燥得到高纯度麦迪霉素成品，具有如下优点和积极效果:[0017]1.过滤速度快，滤液质量好，收率高。
[0018]相较于传统的预处理步骤和板框过滤，用陶瓷膜过滤法得到的滤液质量好，颜色浅，收率高。由于陶瓷膜过滤除去了大分子蛋白质，色素等物质，在后续萃取时不易出现乳化现象，再提高萃取液质量的同时也提高了萃取步骤的收率。
[0019]2.成品质量好
[0020]转相液经特殊方式结晶而非常规的碱结晶，得到的成品纯度更高，且生物效价更高，且成品颜色更白。
[0021]3.方法便捷，适合工业化生产。
[0022]采用本方法生产麦迪霉素，操作简单，无需昂贵设备，符合生产实际需要，具有工业化价值。
【具体实施方式】
[0023]以下通过【具体实施方式】的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。
[0024]实施例一:
[0025]将麦迪霉素发酵液用盐酸调至pH4.0，投入孔径大小为0.1 μ m的陶瓷膜过滤器中，过滤完成后,为了确保收率,用2倍体积的已调至pH4.0~5.0的纯化水溶液顶水，全收集滤过液。取滤液150L，滤液用氢氧化钠溶液调至pH8.5，加入15L乙酸丁酯搅拌均匀并升温至45°C，静置分层后，麦迪霉素转入上层有机相中，弃下层滤液。加入pH2.0~2.5的草酸溶液约3L，搅拌均匀静置分层后，麦迪霉素又转入下层水相中，分出下层溶液。将转相液用氢氧化钠溶液调至溶液的PH为8.0，加入乙酸丁酯400ml，45°C的条件下萃取，得到萃取液后，在常温下逐渐滴加PH6.0~8.0的纯化水至有大量白色晶体析出。用离心机分离结晶混悬液，得到潮晶。50%的乙酸丁酯溶液分两次洗涤晶体，再将晶体干燥得到麦迪霉素成品，经检测麦迪霉素有效Al组份的色谱纯度高达94%，晶体颜色白，颗粒大小均匀。
[0026]实施例二:
[0027]将麦迪霉素发酵液用盐酸调至pH5.0,投入孔径大小为0.1 μ m的陶瓷膜过滤器中，过滤完成后,为了确保收率,用2倍体积的已调至pH4.0~5.0的纯化水溶液顶水，全收集滤过液。取滤液100L，滤液用氢氧化钠溶液调至pH9.0，加入15L乙酸丁酯搅拌均匀并升温至50°C，静置分层后，麦迪霉素转入上层有机相中，弃下层滤液。加入pH2.0~2.5的盐酸溶液3L，搅拌均匀静置分层后，麦迪霉素又转入下层水相中，分出下层溶液。将转相液用氢氧化钠溶液调至溶液的PH为8.5，加入乙酸丁酯450ml，50°C的条件下萃取，得到萃取液后，在常温下逐渐滴加PH6.0~8.0的纯化水至有大量白色晶体析出。用离心机分离结晶混悬液，得到潮晶用50%的乙酸丁酯溶液分两次洗涤晶体，再将晶体干燥得到麦迪霉素成品，经检测麦迪霉素有效Al组份的色谱纯度可高达93.8%，晶体颜色白，颗粒大小均匀。
[0028]实施例三:[0029]将麦迪霉素发酵液用硫酸调至pH4.5，投入孔径大小为0.1 μ m的陶瓷膜过滤器中，过滤完成后,为了确保收率,用2倍体积的已调至pH4.0~5.0的纯化水溶液顶水，全收集滤过液。取滤液500L，滤液用氢氧化钠溶液调至pH8.7，加入75L乙酸丁酯搅拌均匀并升温至48°C，静置分层后，麦迪霉素转入上层有机相中，弃下层滤液。加入pH2.0~2.5的硫酸溶液15L，搅拌均匀静置分层后，麦迪霉素又转入下层水相中，分出下层溶液。将转相液用氢氧化钠溶液调至溶液的PH为8.3，加入乙酸丁酯2000ml，48°C的条件下萃取，得到萃取液后，在常温下逐渐滴加PH6.0~8.0的纯化水至有大量白色晶体析出。用离心机分离结晶混悬液，得到潮晶用50%的乙酸丁酯溶液分两次洗涤晶体，再将晶体干燥得到麦迪霉素成品， 经检测麦迪霉素有效Al组份的色谱纯度可高达94.3%，晶体颜色白，颗粒大小均匀。
【权利要求】
1.一种高纯度麦迪霉素的制备方法，包括以下步骤: 1)将麦迪霉素发酵液先调至酸性，用陶瓷膜过滤器过滤； 2)将上述滤液调至碱性，加入萃取剂萃取； 3)将上述萃取液在酸性水溶液中转相； 4)将转相液调至碱性，萃取后，再逐渐滴加纯化水至有大量晶体析出； 5)分离晶体，洗涤，干燥得到麦迪霉素成品。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤I)中，通过无机酸将发酵液PH调至4.0~5.0,所述无机酸包括盐酸,硫酸。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤I)中，所用的陶瓷膜的孔径大小为0.01 ~0.1 μ m。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤I)中，过滤完成后， 用I~2倍体积的pH已调至4.0~5.0的纯化水溶液顶水,全收集滤过液。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中，通过碱性溶液将滤液pH调至8.5~9.0，所述碱性溶液包括氢氧化钠溶液。
6.如权利要求1所述的方法 ，其特征在于，步骤2)和/或4)所述萃取剂选自乙酸丁酯；萃取剂体积为滤液体积10%~15%。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)中，所述酸性水溶液pH为2.0~2.5，酸性水溶液的体积为萃取液的15%~20%，所述酸性水溶液包括盐酸，硫酸和草酸。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)中，通过碱性溶液将转相液pH调至8.0~8.5，所述碱性溶液包括氢氧化钠溶液。
9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)中，纯化水pH为6.0~8.0，于常温下滴加。
10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤5)中，晶体用离心机分离后，用潮晶质量I~2倍体积50%浓度的乙酸丁酯溶液洗涤晶体。
【文档编号】C07H17/08GK103665073SQ201210322438
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2012年9月3日 优先权日:2012年9月3日
【发明者】肖祖梅, 张洪兰 申请人:北大方正集团有限公司, 北大国际医院集团重庆大新药业股份有限公司, 北大国际医院集团有限公司