用于治疗因子在伤口环境中的结合的适体改性的聚合材料的制作方法
【专利摘要】本发明提供了适体改性的聚合物及其材料，这些聚合物和材料可以用于在一个伤口床中的多种因子的结合。例如，这些适体改性的材料可以是轭合至聚合物泡沫材料的多肽。这类材料可以用于例如敷件、伤口插入物、或垫。
【专利说明】用于治疗因子在伤口环境中的结合的适体改性的聚合材料
[0001]本申请要求于2011年4月29日提交的美国临时申请序列号61/518，148的优先权，该申请的全部内容通过引用结合在此。
1.发明领域
[0002]本披露总体上涉及伤口愈合以及伤口处理疗法。更具体地说，但不是以限制的方式，本披露涉及改性的材料，例如，用于因子在伤口床中的可逆结合的甲硅烷基改性的聚氨酯泡沫。
2.【背景技术】
[0003]临床研究和实践已经显示，在一个组织部位附近提供减压增进并且加速了在该组织部位处的新组织的生长。这种现象的应用很多，但施加减压已在处理伤口方面特别成功。这种处理(在医学界时常称为“负压伤口疗法”、“减压疗法”、或“真空疗法”)提供了大量的优点，包括更快速的愈合以及增加的肉芽组织的生成。负压伤口疗法的主要临床益处之一是它有效地消除伤口渗出物、从而减少水肿并且允许组织减压的能力。负压伤口疗法可能并不总是能够区分从伤口去除的有害与有益因子。用于解决这一点的涂层如胶原、PVA、PEG、以及纤维蛋白原经常具有不是共价的、不均匀的、或非靶特异性的缺点。典型地，它们不能在一个特定部位结合蛋白质并且将它们以允许活性部位保留它的功能的方式呈递给细胞。因此，将允许分子以一种共价的方式进行结合，规定可以结合的化合物的类型、结合它们的化学反应、和/或将蛋白质呈递给细胞的取向(例如，用于在一种敷件、伤口插入物、垫等等中使用)的改进将是非常令人希望的。
概述
`[0004]本披露提供了可以用于因子(如来自一个伤口床)的结合的新型材料，包括适体(例如，多肽)改性的聚合物。在一些实施例中，这些因子是内源性的。在其他实施例中，它们是外源性的。在一些实施例中，该结合是可逆的，在其他实施例中，它是不可逆的。
[0005]在一些实施例中，提供一种多肽，该多肽包含与SEQ ID NO:2 (P16 ；GHQGQHIGQMS)一致的一个氨基酸序列、与SEQ ID NO:2至少90% —致的一个序列，或相对于SEQ ID N0:2包含1、2、或3个氨基酸取代或缺失的一个序列。在一些方面，该氨基酸序列进一步包含一个氨基或羧基末端Cys残基(例如，这些实施例的一种多肽的氨基或羧基末端包含一个PEG间隔基-半胱氨酸残基)。例如，该氨基酸序列可以在该C-末端处包含序列AEEAc-Cys-NH2。在仍然另外的方面，提供了一种伤口敷件，该伤口敷件包括轭合至这些实施例的一种多肽的一种聚合物泡沫衬底，该多肽如包含SEQ ID NO: 2 (GHQGQHIGQMS)的氨基酸序列的或与SEQ ID N0:2至少90% —致的一个序列的一种多肽。
[0006]在某些实施例中，提供一种伤口敷件，该伤口敷件包括轭合至一种多肽的一种聚合物泡沫衬底，其中该多肽包含与SEQ ID NO:1 (P22 ;NAIQEARRLLNLSRD) —致的一个氨基酸序列、与SEQ ID NO:1至少90% —致的一个序列，或相对于SEQ ID NO:1包含1、2、或3个
氨基酸取代或缺失的一个序列。在一些方面，该氨基酸序列进一步包含一个氨基或羧基末端Cys残基(例如，这些实施例的一种多肽的氨基或羧基末端包含一个PEG间隔基-半胱氨酸残基)。例如，该氨基酸序列可以在该C-末端处包含序列AEEAc-Cys-NH2。
[0007]在一些实施例中，这些实施例的一种多肽共价附接至一种聚合物泡沫(例如，以便形成一种伤口敷件)。在一些方面，一种多肽通过一个硫醚连接基附接至该聚合物泡沫。例如，该连接基可以是一个EMCS衍生的连接基或一个磺基-EMCS衍生的连接基。在一些方面，该硫醚连接基包含该多肽中的一个Cys残基，如该多肽的一个AEEAc-Cys-NH2序列中的一个Cys残基。在仍然另外的方面，一种多肽与一种聚合物泡沫之间的一个连接基可以是一个甲硅烷基衍生的连接基(例如，衍生自氨基十一烷基三乙氧基硅烷或氨基丙基二异丙基乙氧基娃烧的一个取代的甲娃烧基)。在仍然另外的方面，这些实施例的一种多肽经由一种非共价结合(如通过一种生物素-抗生物素蛋白结合)附接至一种聚合物泡沫。
[0008]在某些方面，这些实施例的一种伤口敷件进一步包含结合至该伤口敷件的一种生长因子、趋化因子或细胞因子(例如，经由与这些实施例的多肽的相互作用而结合至该伤口敷件)。在一些方面，该生长因子是粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。在某些方面，该生长因子是血管内皮生长因子(VEGF)。
[0009]在一些实施例中，这些实施例的一种多肽附接至一种聚合物泡沫，从而形成一种伤口敷件。例如，该聚合物泡沫衬底可以是一种网状的开孔型泡沫。聚合物泡沫的实例包括，但不限于，包含以下各物的泡沫衬底:聚乙烯醇、聚氨酯、聚丙烯、聚苯乙烯、多元醇、泊洛沙姆、氨基糖苷、氨基糖、或这些中的一个或多个的组合。
[0010]在另外的实施例中，提供了一种用于结合生长因子、趋化因子或细胞因子的方法，该方法包括将包含该生长因子、趋化因子或细胞因子的一种流体(如体液)与根据实施例的伤口敷件相接触，从而结合该生长因子、趋化因子或细胞因子。在一些方面，这些实施例的一种伤口敷件被适配用于将负压施加至一个伤口部位。在另外的方面，一种方法包括去除与该伤口敷件相接触的流体中的一些或全部。在仍然另外的方面，这些实施例的一种方法进一步包括将该伤口敷件与至.少一种第二流体相接触，其中结合至该伤口敷件的生长因子、趋化因子或细胞因子中的一些或全部被洗脱到该第二流体之中。在某些方面，这些实施例的一种方法被定义为一种体外方法。
[0011]在又另外的实施例中，提供了一种用于处理伤口的组合物，该组合物包含根据这些实施例的一种伤口敷件。在一些方面，提供了一种用于处理伤口的方法，该方法包括将一个伤口部位与这些实施例的一种伤口敷件相接触。在某些方面，这些实施例的一种方法进一步包括将负压施加至该伤口部位。
[0012]任意本发明的系统和/或方法的任意实施例可以由或基本上由任意所描述的步骤、元件和/或特征组成(而不是包含/包括/含有/具有任意所描述的步骤、元件和/或特征)。因此，在任意权利要求中，术语“由……组成”或“基本上由……组成”可以代替上述任意的开放式连系动词，以便改变给定权利要求的范围，否则所述范围为使用开放式连系动词将为的范围。
[0013]本披露的其他目标、特征以及优点将从以下详细说明变得清楚。然而，应当理解，这种详细说明和这些具体实例虽然指示了本发明的具体实施例，但它们仅仅是通过说明的方式给出的，因为从这种详细说明在本发明的精神和范围内的不同变化和修改对于本领域的那些普通技术人员而言将变得很清楚。应注意仅仅因为一种具体化合物归属于一个具体通式并不意味着它不能还属于另一个通式。
附图简要说明
[0014]通过举例方式而不是限制性方式说明了以下附图。为了简明和清楚，在显现给定结构的每幅图中没有总是标记该给定结构的每个特征。相同参考数字不必要指示相同结构。而是，相同参考数字可以用于指示类似特征或具有类似功能的特征，不相同参考数字同样可以如此。
[0015]图1描绘了本发明的伤口敷件的一个实施例的侧视图，该伤口敷件具有本发明的改性的伤口插入物中的一种并且被联接至一个伤口部位和一个伤口处理设备。
[0016]图2描绘了图2的改性的伤口插入物的放大侧视图。
[0017]图3描绘了一个伤口处理设备的一个实施例的示意方块图，该伤口处理设备可以包括和/或联接至和/或与本发明的伤口敷件和/或改性的伤口插入物一起使用。
[0018]图4描绘了根据本发明的一些实施例的示意图。在这个侧视图中，一种具有自由羟基基团的、基于聚氨酯的聚合物用一种R’ -(CH2)n-Si (OH)3试剂进行改性。
[0019]图5描绘了使用邻苯二甲醛(OPA)测定来比较甲硅烷基化的30phr壳聚糖泡沫(“30PHR Si”)与甲硅烷基化的网状开孔型泡沫(“R0CF”)的自由氨基的数目的结果。在两种情况下，甲硅烷基化基团都是来自化合物602 (氨基丙基二异丙基乙氧基硅烷)的(H2N(CH2)3) (1-Pr)2S1-。这些结果是根据相对荧光单位(RFU)来提供。OPA单独是用于胺的灵敏检测试剂，它还用作对照。
[0020]图6描绘了比较用来自化合物630 (氨基十一烷基三乙氧基硅烷)的基团(H2N(CH2)11) (EtO)2S1-甲硅烷基化并且用Texas Re小:处理的网状开孔型泡沫与非甲硅烷基化的网状开孔型泡沫(“ R0CF”)(单独地和与Texas Red?—起)的相对荧光单位(“RFU”)的结果。这些结果根据相对荧光单位(RFU)来提供。还分析了 PBSJP I3BS中的ROCF以确保这些材料的自体荧光不会使RFU读数偏错。PBS是磷酸盐缓冲盐水。
[0021]图7描绘了基于甲苯二异氰酸酯(TDI)、壳聚糖、以及VOranolTM3010三元醇的聚合的一种聚氨酯的三个重复单元。
[0022]图8:用化合物602进行甲硅烷基化，30PHR壳聚糖/P_22捕获更多的粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。简单地说，将333ng/mL的GM-CSF与这些样品一起孵育24小时。将未结合的蛋白质洗掉，然后将这些样品用一种基于咪唑的缓冲液(El)进行洗脱。将这些样品经由与PBS进行缓冲液交换来进行净化，并且通过ELISA进行量化。结果指示具有P-22的阳性样品捕获299pg/mL的GM-CSF，而30PHR单独结合124pg/mL。
[0023]图9A和图9B提供硅烷化的ROCF与德克萨斯红(Texas Red)荧光染料的图像。图9A示出一个亮视野图像，该图像示出-Si 1/R0CF在普通光中的取向和形态。图9B示出轭合至630的德克萨斯红的TRITC成像，该成像示出该染料与-Sil的成功轭合。这提供了 630成功地沉积在该ROCF上的证据。两个图像都是在20X放大倍数下取得的。
[0024]图10提供一个适体改性的聚合物泡沫实施例的一部分的结构和连结性信息，该适体改性的聚合物泡沫实施例包含一种寡肽(P16 ；SEQ ID NO: 2)、一个AEEAc-Cys连接基、一个EMCS连接基、一个取代的甲硅烷基、以及基于PEG化的三元醇和甲苯二异氰酸酯的一个聚氨酯主链。
[0025]图11提供P22/GM-CSF实验的洗脱结果。P22是从巴赫姆美国公司(BachemAmericas Inc.)的2010肽目录获得的。P22是以一种抑制性方式结合GM-CSF的GM-CSF拮抗剂。简单地说，将330nmol P22经由磺基-EMCS化学轭合至一种基于聚氨酯的ROCF。将该P22-连接基-泡沫构建体与I μ g GM-CSF 一起孵育过夜、洗涤五次、并且经受严格洗脱。洗脱之前的洗涤显示非特异性地结合的蛋白质被减少至可忽略的水平(〈100pg/mL)。在洗脱时，具有最多捕获肽的样品S3超过ROCF单独达49%。结合至R0CF/P22的GM-CSF的总量(608pg/mL)大于非特异性地结合至阴性对照Cl的GM-CSF的量(376pg/mL)。样品SI至S3都包含肽-连接基-泡沫，其中磺基-EMCS浓度从SI至S3增加(Sl=IO X磺基-EMCS+P22 ；S2=25X磺基-EMCS+P22并且S3=50X磺基-EMCS+P22)，Cl是ROCF单独，C2是硅烷化的R0CF+EMCS-P22,并且C3是硅烷化的R0CF-EMCS+P22。没有可供用于这个实验的阳性对照，因为还没有技术证明将肽共价地轭合至聚氨酯。然而，基于实验结果，之后开发阳性对照用于随后的实验。数据作为平均值土标准偏差给出。
[0026]图12提供一个适体改性的聚合物泡沫实施例的一部分的结构和连结性信息，该适体改性的聚合物泡沫实施例包含一种寡肽(P16 ；SEQ ID NO: 2)、一个AEEAc-Cys连接基、一个EMCS连接基、一个取代的甲硅烷基，以及基于PEG化的三元醇、甲苯二异氰酸酯以及壳聚糖低聚物的一种聚氨酯-共聚物。
[0027]图13提供一个适体改性的聚合物泡沫实施例的一部分的结构和连结性信息，该适体改性的聚合物泡沫实施例包含一种寡肽(P16 ；SEQ ID NO: 2)、一个AEEAc-Cys连接基、一个EMCS连接基，以及基于PEG化的三元醇、甲苯二异氰酸酯以及壳聚糖低聚物的一种聚氨酯-共聚物。
[0028]图14示出ROCF在具有P16 (针对VEGF的从头设计的捕获肽)共价结合至它的情况下捕获 82% 以上的 VEGF。Cl 是 ROCF 单独；C2 是 R0CF+EMCS-P16 ；C3 是 R0CF-EMCS+P16 ；C4是硅烷化的ROCF单独；C5=硅烷化的R0CF+EMCS-P16 ；C6是硅烷化的R0CF-EMCS+P16 ；SI是50X磺基-EMCS+P16 ;并且S2是100X磺基-EMCS+P16。W=最终的后续PBS洗涤。El=50mM Tris、80mM NaCl、250mM咪唑，45分钟。W5(左)示出在最终PBS洗涤中非特异性地保留在ROCF中的VEGF (pg/m L)。El (右)指示在最后一次洗涤之后用一种有机溶剂从该泡沫和肽移走的VEGF的量。洗脱数据指示S2 (P16-连接基-泡沫)比C4 (硅烷化的ROCF)(具有最丰富的结合的VEGF的阴性对照)多结合82%的VEGF。S2结合584pg/mL，而C4结合321pg/m。S2具有最高浓度的EMCS并且因此最多共价结合的P16。这个数据显示共价连接至泡沫的P16的量与由该泡沫捕捉的靶蛋白的量之间的强相关性。数据作为平均值土标准偏差给出。
[0029]图15示出用于与负压伤口疗法(NPWT)结合使用的一种敷件中的一种适体改性的聚合物。在这个实施例中，该适体对于MCPl (巨噬细胞的趋化性分子)有选择性。这种改性的敷件可以用于刺激巨噬细胞迁移至伤口中、并且由此使该伤口从慢性进展至愈合状态。
[0030]图16提供一个适体改性的聚合物泡沫实施例的一部分的结构和连结性信息，该适体改性的聚合物泡沫实施例包含共价附接至基于PEG化的三元醇、甲苯二异氰酸酯以及壳聚糖低聚物的一种聚氨酯-共聚物的一种寡肽(P16 ;SEQ ID N0:2)。
[0031]图17描绘了根据本发明的一些实施例的示意图。在这个侧视图中，用特别设计的蛋白质改性的一种插入物显示以不同解离常数(Kd值)结合至不同因子。在这个实施例中，将该改性的插入物用含有多种试剂(例如，用于伤口清洁、促进愈合、溶液稳定性等等的试剂)的处理溶液(计量的团注剂(bolus))进行冲洗(连续地或间断地)。块箭头(blockairow)标记的“渗出物”表示离开该材料的混合物，该混合物包含处理溶液和来自可能与敷件相接触的伤口的渗出物。
[0032]图18——使溶液中的VEGF通过连接至一种抗VEGF抗体的珠粒。在使该溶液通过这些珠粒之后，离心沉淀(spun down)并且洗漆这些珠粒。这些洗漆的珠粒然后用于内皮细胞迁移测定。这个实验的结果显示在3小时之后，与没有抗体的珠粒相比，多2倍的细胞迁移朝向结合至该抗体(和VEGF)的这些珠粒。
说明性实施例的说明
[0033]在一些方面，本披露提供适体改性的材料，在一些实施例中，这些材料可以用作用于捕捉和浓缩伤口环境中的特定因子(例如，引发一种生物反应如血管生成的因子)的伤口插入物，或用于将生物分子或生物活性化合物递送至一个伤口床。在一些实施例中，这些因子是内源性的。在其他实施例中，它们是外源性的。在一些实施例中，该结合是可逆的，在其他实施例中，它是不可逆的。
[0034]在一个方面，本发明提供适体功能化的伤口敷件，这些伤口敷件包括:(a) 一个衬底；以及(b)共价附接至该聚合物泡沫的一种适体。在一些实施例中，该衬底是一种聚合物泡沫。在一些实施例中，该适体包含一种多肽、一种小分子粘合剂、一种树枝状聚合物、一种纳米颗粒、和/或一种寡核苷酸。在一些实施例中，所述适体是一种多肽。在一些实施例中，该多肽是合成的。在一些实施例中，该多肽是天然的。
[0035]在一些实施例中，该多肽共价附接至该聚合物泡沫。在一些实施例中，该多肽的C末端包含一个PEG间隔基-半胱氨酸残基。在一些实施例中，该适体通过一个连接基附接至该聚合物泡沫。在一些实施例中，该连接基是一个EMCS衍生的连接基或一个磺基-EMCS衍生的连接基。在一些实施例中，该连接基是一个取代的甲硅烷基衍生的连接基。在一些实施例中，该取代的甲硅烷基衍生的连接基是衍生自化合物630(氨基十一烷基三乙氧基硅烷)。在一些实施例中，该取代的甲硅烷基衍生的连接基是衍生自化合物602 (氨基丙基二异丙基乙氧基硅烷)。在一些实施例中，该连接基包含一个第一和第二连接基，其中该第一连接基是一个EMCS衍生的连接基或一个磺基-EMCS衍生的连接基，并且该第二连接基是一个取代的甲硅烷基衍生的连接基。
[0036]在一些实施例中，该连接基通过一个氧原子结合至该聚合物泡沫。在一些实施例中，该连接基通过一个氮原子结合至该聚合物泡沫。在一些实施例中，该适体被配置成结合至伤口环境中的内源性或外源性因子。在一些实施例中，该结合是不可逆的。在一些实施例中，该结合是可逆的。在一些实施例中，该适体被配置成结合至血管内皮生长因子。在一些实施例中，该适体被配置成结合至血小板衍生的生长因子。在一些实施例中，该适体被配置成结合至成纤维细胞生长因子。在一些实施例中，该适体被配置成结合至角质化细胞生长因子。在一些实施例中，该适体被配置成结合至粒细胞巨噬细胞集落刺激因子。
[0037]在一些实施例中，该衬底是一种网状开孔型泡沫。在一些实施例中，该衬底包含聚乙烯醇、聚氨酯、聚丙烯、聚苯乙烯、多元醇、泊洛沙姆、氨基糖苷、氨基糖、或这些中的一个或多个的组合。在一些实施例中，该聚合物泡沫包含一种第一单体亚单元。在一些实施例中，该第一单体亚单元是一种二异氰酸酯。在一些实施例中，该二异氰酸酯是甲苯二异氰酸酯、亚甲基二苯基二异氰酸酯、或赖氨酸二异氰酸乙酯。在一些实施例中，该聚合物泡沫进一步包含一种第二单体亚单元。在一些实施例中，该第二单体是一种三元醇。在一些实施例中，该三元醇是一种PEG化的甘油。在一些实施例中，该聚合物泡沫进一步包含一种第三单体亚单元。在一些实施例中，该第三单体亚单元是一种氨基糖苷。在一些实施例中，该氨基糖苷是壳聚糖。在一些实施例中，该氨基糖苷是葡糖胺。在一些实施例中，该第三单体亚单元是新霉素(neomycin)。在一些实施例中，该第三单体亚单元是地贝卡星(dibekacin)。在一些实施例中，该第三单体亚单元是卡那霉素(kanamycin)。在一些实施例中，该第三单体亚单元是妥布霉素(tobramycin)ο在一些实施例中，该第三单体亚单元是链霉素(streptomycin)。在一些实施例中，该第三单体亚单元是庆大霉素(gentamicin)。在一些实施例中，该聚合物泡沫进一步包含一种低聚物亚单元。在一些实施例中，该低聚物亚单元是一种基于壳聚糖的低聚物。在一些实施例中，该低聚物亚单元是一种基于葡糖胺的低聚物。
[0038]在另一方面，本发明提供适体改性的聚合物，其中该聚合物主链包含具有以下化学式的一个第一重复单元:
【权利要求】
1.一种伤口敷件，包括轭合至一种多肽的一种聚合物泡沫衬底，其中该多肽包含与P22 (SEQ ID NO:1)至少90%—致的一个序列。
2.如权利要求1所述的伤口敷件，其中该多肽共价附接至该聚合物泡沫。
3.如权利要求1所述的伤口敷件，其中该多肽的氨基或羧基末端包含一个PEG间隔基-半胱氨酸残基。
4.如权利要求3所述的伤口敷件，其中该多肽通过一个硫醚键附接至该聚合物泡沫。
5.如权利要求4所述的伤口敷件，其中连接基是EMCS衍生的一个连接基或磺基-EMCS衍生的一个连接基。
6.如权利要求5所述的伤口敷件，其中该聚合物泡沫包含一个取代的甲硅烷基衍生的连接基。
7.如权利要求6所述的伤口敷件，其中该取代的甲硅烷基衍生的连接基是衍生自氨基十一烧基二乙氧基娃烧或氣基丙基 异丙基乙氧基娃烧。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的伤口敷件，进一步包含结合至该伤口敷件的一种生长因子、趋化因子或细胞因子。
9.如权利要求8所述的伤口敷件，其中该生长因子是粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。
10.根据权利要求·1至9中任一项所述的伤口敷件，其中该聚合物泡沫衬底是一种网状的开孔型泡沫。
11.根据权利要求1至9中任一项所述的伤口敷件，其中该聚合物泡沫衬底包含聚乙烯醇、聚氨酯、聚丙烯、聚苯乙烯、多元醇、泊洛沙姆、氨基糖苷、氨基糖、或这些中的一个或多个的组合。
12.一种多肽，包含SEQ ID NO:2 (GHQGQHIGQMS)的氨基酸序列。
13.如权利要求12所述的多肽，进一步包含一个氨基或羧基末端Cys残基。
14.如权利要求12所述的多肽，在该C末端处进一步包含序列AEEAc-Cys-NH2。
15.一种伤口敷件，包含轭合至一种多肽的一种聚合物泡沫衬底，其中该多肽包含根据权利要求13或14所述的一个序列。
16.如权利要求15所述的伤口敷件，其中该多肽共价附接至该聚合物泡沫。
17.如权利要求16所述的伤口敷件，其中该多肽通过一个硫醚键附接至该聚合物泡沫。
18.如权利要求17所述的伤口敷件，其中连接基是EMCS衍生的一个连接基或磺基-EMCS衍生的一个连接基。
19.如权利要求16所述的伤口敷件，其中该聚合物泡沫包含一个取代的甲硅烷基衍生的连接基。
20.如权利要求19所述的伤口敷件，其中该取代的甲硅烷基衍生的连接基是衍生自氨基十一烧基二乙氧基娃烧或氣基丙基 异丙基乙氧基娃烧。
21.根据权利要求15至20中任一项所述的伤口敷件，进一步包含结合至该伤口敷件的一种生长因子、趋化因子或细胞因子。
22.如权利要求21所述的伤口敷件，其中该生长因子是血管内皮生长因子(VEGF)。
23.根据权利要求15至22中任一项所述的伤口敷件，其中该聚合物泡沫衬底是一种网状的开孔型泡沫。
24.根据权利要求15至23中任一项所述的伤口敷件，其中该聚合物泡沫衬底包含聚乙烯醇、聚氨酯、聚丙烯、聚苯乙烯、多元醇、泊洛沙姆、氨基糖苷、氨基糖、或这些中的一个或多个的组合。
25.—种用于处理伤口的方法,该方法包括将一个伤口部位与如权利要求1至11或15至24中任一项所述的伤口敷件相接触。
26.一种用于结合生长因子、趋化因子或细胞因子的方法，该方法包括: (a)将包含该生长因子、趋化因子或细胞因子的一种流体与如权利要求1至11或15至24中任一项所述的伤口敷件相接触，从而将该生长因子、趋化因子或细胞因子结合至该伤口敷件。
27.如权利要求26所述的方法，进一步包括: (b)将该伤口敷件与至少一种第二流体相接触，其中结合至该伤口敷件的该生长因子、趋化因子或细胞因子中的一些`或全部被洗脱到至该第二流体之中。
【文档编号】C07K14/78GK103443117SQ201280013075
【公开日】2013年12月11日 申请日期:2012年4月27日 优先权日:2011年4月29日
【发明者】詹姆斯·卡里奇, 迪维·艾伦, 艾米·麦克纳尔蒂, 安东尼·莱瑟兹, 克里斯托弗·卡罗尔, 道格拉斯·汉森, 托德·鲁德曼 申请人:凯希特许有限公司