一种高岭土吸附法从绝经期妇女尿液中提取尿促性素的方法
【专利摘要】本发明公开了一种高岭土吸附法从绝经期或绝经期后妇女的尿中提取尿促性素的方法。利用尿促性素蛋白质在等电点溶解度最低的特性，在高岭土吸附工序中，通过调尿液的pH值，使尿促性素易沉淀析出。技术方案是通过在绝经期妇女尿液中加入高岭土吸附、沉淀、脱附、沉淀、脱水、干燥步骤来实现从尿液中提取尿促性素。
【专利说明】一种高岭土吸附法从绝经期妇女尿液中提取尿促性素的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物【技术领域】，具体地说涉及从绝经期妇女尿液中分离尿促性素方法。
【背景技术】
[0002]尿促性素是由人脑下垂体前叶部分分泌的一种糖蛋白促性腺激素，一般是从绝经期或绝经期后妇女的尿中经提取纯化而制得。妇女在行经期间HMG的含量有所波动，但较低，只有妇女进入绝经期或之后的十几年中，其尿中HMG的含量方达到高峰(60-100iu / L尿)，并能维持在一个稳定的水平上，HMG含有卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)，其所含比例近似1:1。
[0003]临床主要用于治疗妇女因功能性不排卵所致的不育症；男性因激素水平低下所引起的精子过少或活力不足。另外，还用于治疗诸如妇女闭经、月经不调、男女之性机能失调等症。
[0004]至今为止，尚未有关于尿促性素提取方法方面的研究资料及专利文献。
【发明内容】
[0005]本发明公开了一种高岭土吸附法从绝经期或绝经期后妇女的尿中经提取尿促性素的方法。利用尿促性素蛋白质在等电点溶解度最低的特性，在高岭土吸附工序中，通过调尿液的PH值，使尿促性素易沉`淀析出。技术方案是通过在绝经期妇女尿液中加入高岭土吸附、沉淀、脱附、沉淀、脱水、干燥步骤来实现从尿液中提取尿促性素粗制品。
[0006]在发明的技术方案中，还具有以下技术特征:所述高岭土吸附法包括如下步骤:
[0007]1、吸附工序:
[0008]1.1将送来的尿液，称重过滤，输送到反应罐中；
[0009]1.2待尿液温度为4_15°C条件下，缓慢加入醋酸，调节pH至3.0-4.5。
[0010]1.3计量尿液的总体积，按120-80:0.9-0.5 (L:Kg)比例加高岭土，搅拌15分钟，使高岭土全部溶解，在搅拌的同时，测定PH，保持pH在3.5-4.8之间；
[0011]1.4搅拌吸附1.5-2小时后，静置分层；
[0012]1.5将沉淀物放离心机中甩干得干吸附物。
[0013]2.脱附工序:
[0014]2.1将干吸附物称重，加入配好的脱附液，保持pH在10.0-11.8之间，搅拌1.5小时；离心，取上层清液；
[0015]2.2沉淀物按2.1重复操作一次，得上层清液；
[0016]2.3合并二次上清液，调pH至7.5-9.0，离心取上清液，将渣子去掉；
[0017]2.4上清液用醋酸调pH至4.5-6.0，加2倍量丙酮，搅拌均匀，静置沉淀；
[0018]2.5弃去上层废液，底部絮状沉淀物用离心机离心，再用适量丙酮脱水两次，再离心。
[0019]2.6将沉淀物置于用五氧化二磷作吸水剂的真空干燥箱中真空干燥。即得尿促性素粗制品。
[0020]与现有技术相比，本发明的优点和积极效果是:
[0021]利用尿促性素蛋白质在等电点溶解度最低的特性，在高岭土吸附
[0022]工序中，通过调尿液的pH值，使尿促性素易沉淀析出。技术方案是通过在绝经期妇女尿液中加入高岭土吸附、沉淀、脱附、沉淀、脱水、干燥步骤来实现从尿液中提取尿促性素粗制品。
【具体实施方式】
[0023]实施例1
[0024]1、吸附工序:
[0025]1.1取合格尿液IOT用二层纱布过滤，滤入陶瓷缸中；
[0026]1.2在不断搅拌的同时，以缓慢的速度加入醋酸，调节尿液pH到4.1，加50公斤高岭土，搅拌约120分钟，使高岭土全部溶解。在搅拌的同时，测定pH，保持pH在4.1-4.5之间；
[0027]1.3离心脱水，取白色沉淀物；
[0028]1.4用ρΗ4.5酸水洗涤二次，脱水，得高岭土吸附物80kg。
`[0029]2、脱附工序:
[0030]2.1将脱水后的高岭土吸附物放在搪瓷桶中，加入配好的脱附液，调节pH并保持在10.0-11.8之间，搅拌洗脱90分钟；离心，取上层清液；
[0031]2.2沉淀物按2.1 ;重复操作一次，得上层清液；
[0032]2.3合并二次洗脱液，用醋酸调pH至8.5，静置60分钟，离心取上清液，将渣子弃去;
[0033]2.4上清液用醋酸调pH至5.0，加2倍量丙酮，稍搅拌后，放置过夜；
[0034]2.5次日，弃去上层液体，过滤底部絮状沉淀物,待过滤物即将抽干时,加入少量丙酮洗涤一次，再抽干。
[0035]2.6将过滤物取出，置用工业无水氯化钙或五氧化二磷作干燥剂的真空干燥器中干燥，得干燥物。
[0036]2.7将干燥物研磨成粉末即得粗制品400g，置干燥器中，阴凉处保存。
[0037]以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于。
【权利要求】
1.本发明公开了一种高岭土吸附法从从绝经期或绝经期后妇女的尿中提取尿促性素的方法，其特征在于所述高岭土吸附法包括如下步骤: (1)吸附工序:将尿液过滤后，调节PH值，然后按比例加入高岭土，搅拌，调节pH后静置，甩干得干吸附物； (2)脱附工序:将干吸附物加入脱附液，搅拌并调节pH值，离心，取上清液；将离心渣再加入脱附液，搅拌并调节PH值，离心，取上清液；合并两次上清液，调pH，离心取上清液，调PH后加丙酮，搅拌，静置，离心，并用丙酮脱水，最后将沉淀物真空干燥，得尿促性素粗制品。
2.根据权利要求书1(1)所述，其特征在于:将尿液经纱网过滤后，在4-15°C条件下缓慢加入醋酸，调节PH值至3.0-4.5。
3.根据权利要求书1(1)所述，其特征在于:计量尿液的总体积，按(120-80):(0.9-0.5) (L:Kg)的比例加高岭土，搅拌15分；调节pH值:3.5-4.8，搅拌1.5-2.0小时。
4.根据权利要求书3所述，其特征在于:计量尿液的总体积，按(110-100):(0.6-0.4)(L:Kg)的比例加高岭土，搅拌15分；调节pH值:4.0-4.5，搅拌1.5-2.0小时。
5.根据权利要求书1(2)所述，其特征在于:调节pH:10.0-11.8，搅拌1.5小时；离心，取上清液，将离心渣再加入脱附液，调节PH在10.0-11.8，搅拌1.5小时，离心，取上清液。
6.根据权利要求书5所述，其特征在于:调节pH:10.5-11.0，搅拌1.5小时；离心，取上清液，将离心渣再加入脱附液，调节PH在10.5-11.0，搅拌1.5小时，离心，取上清液。
7.根据权利要求书1(2)所述，其特征在于:合并两次上清液，用酸调节pH值至7.5-9.0，离心，取上清液，再用酸调pH值至4.5-6.0后，加两倍量的丙酮，搅拌均匀，静置沉淀，弃去上层废液，底部絮状沉淀物用离心机离心，再用丙酮脱水两次，离心后，将沉淀物真空干燥即得尿促性素粗制品。
8.一种由权利要 求1-7任意之一所述的制备方法制备得到的尿促性素粗制品。
【文档编号】C07K14/59GK103804487SQ201310625497
【公开日】2014年5月21日 申请日期:2013年11月24日 优先权日:2013年11月24日
【发明者】刘乃山, 葛翠凤, 刘翠珍, 刘君 申请人:青岛康原药业有限公司