一种米铂的制备方法
【专利摘要】本发明属于医药【技术领域】，本发明公开了一种米铂的制备方法，该方法以十四酸和顺-二硝酸-[（1R,2R）-1,2-环己二胺]二水合铂溶液为原料，制备得到米铂粗品；米铂粗品经过精制获得米铂。本发明制备方法得到的米铂，经过稳定性试验，表明其异构体、杂质以及米铂含量变化小，具有非常好的稳定性。
【专利说明】一种米铂的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于医药【技术领域】，具体涉及一种米钼的制备方法。
【背景技术】
[0002]米钼由日本国立癌症中心研究所的前田等发明，为脂溶性钼类抗癌药物，在超液化碘油中混悬性好，经肝动脉给药后积聚于肿瘤局部，缓慢释放钼成分，不仅提高了病变局部的抗肿瘤效果，还减轻了全身性不良反应。其作用机制与其他钼类药物相似，通过产生烷化结合物作用于DNA，形成链内和链间交联，从而抑制DNA的合成及复制，抑制肿瘤的生长。动物研究表明，米钼混悬液TACE后可靶向积聚于肿瘤组织缓释活性成分，发挥良好的抗肿瘤效果，抗癌活性优于净司他丁斯酯。临床研究显示，米钼组和净司他丁斯酯组的TEV比例分别为26.5%(22/83) ,17.9%(7/39);两组的2年生存率分别为75.9,70.3% ；3年生存率分别为58.4%、48.7%，两药疗效类似。与净司他丁斯酯比较，米钼组未见肝血管损伤(不影响再次治疗)，对肝胆系统的不可逆性损伤(对预后带来不利影响)减少，安全性优于净司他丁斯酯。[0003]目前，肝癌治疗药物远未满足临床需求，作为应用于TACE的新型肝细胞癌治疗药物，米钼具有广阔的开发前景。米钼原料药的合成方法有很多种:专利W01994014470以顺-(1R，2R)-1，2-环已二胺与碘亚钼酸钾反应制得顺-[(1R，2R)-1，2-环已二胺]-二碘合钼，再在氯仿中与十四酸银反应除去形成的碘化银，溶液经浓缩处理得到米钼；该方法中十四酸银没有市售品，需要自行合成。并且，最后一步用到十四酸银容易造成产品的银含量超标，并且不易处理。另外，顺-[(1R，2R)_ 1，2-环已二胺]-二碘合钼价格较高，导致生产成本增加不利于生产。日本专利JP11315088和JP200483508报道将顺式-二氯-[(IR，2R)-1，2-环己二胺]合钼经硝酸银水解后，加入氯仿和正十四碳酸，氢氧化钾，反应2小时后，取氯仿层，冷却结晶制得米钼；该方法直接将十四酸与中间体反应，由于十四酸的反应能力低于十四酸钠所以造成转化效率降低，需要反应时间较长。而且反应中使用氯仿和水的体系很容易造成反应完毕后分液困难，这也给生产带来很大的麻烦。
【发明内容】
[0004]基于上述原因， 申请人:研究发现，在以十四酸或其盐作为原料合成米钼原料中，会产生一个较大的杂质，该杂质与米钼结构相近，在后续的精制过程中很难去除，因此，我们科研人员经过若干次创造性试验，意外发现，采用一定体积比的乙醇与异丙醇体系，在一定温度下反应得到米钼粗品，米钼粗品先用氯仿，接着使用水，再用氯仿，最后采用一定体积比的甲醇-水，获得米钼，该方法得到的米钼具有单个杂质均小于0.1%，总杂质含量低的优点；稳定性试验表明，本发明制备方法得到的米钼，单个杂质含量、总杂质含量、米钼含量变化率小。
[0005]本发明通过下述方案实现的。
[0006]一种米钼的制备方法，以十四酸和顺-二硝酸_[ (IR, 2R) -1, 2-环己二胺]二水合钼溶液为原料，制备得到米钼粗品；米钼粗品经过精制获得米钼。
[0007]上述所述的制备方法包括:取十四酸，加入95%乙醇，于50-55 °C搅拌溶解，加入1.135摩尔/升氢氧化钠溶液，于50- 550C下搅拌反应2.5h，搅拌下，滴加顺-二硝酸-[(IR，2R) -1, 2-环己二胺]二水合钼溶液，滴毕，加入异丙醇，于50-55°C下继续搅拌反应18h，停止搅拌，冷却至20-25°C，继续搅拌30分钟，过滤，滤饼用水和甲醇洗涤后，40-45°C减压干燥，得白色固体即米钼粗品。上述所述的一种米钼的制备方法，95%乙醇与异丙醇的体积比为5:1。
[0008]其中顺-二硝酸_[ (IR, 2R)-1, 2-环己二胺]二水合钼溶液的制备方法为:取顺式-[(IR，2R)-1, 2-环己二胺-二氯]合钼加，加水，于20-25°C搅拌0.5小时，将1.05摩尔/升硝酸银的水溶液避光下滴入，于20-25°C下继续避光搅拌反应48h，将反应生成的淡黄色沉淀过滤，滤饼用水洗涤后，合并滤液，滤液用0.2微米的微孔滤膜过滤，向滤液中加入
0.168摩尔/升碘化钠水溶液于20-25°C搅拌24小时后，冷却至10°C以下，静置3小时，用
0.2微米的微孔滤膜过滤，滤毕，向滤液中加入活性炭，于20-25°C搅拌I小时，抽滤，用水洗涤，滤液用0.2微米滤膜过滤，得到滤液为顺-二硝酸_[ (IR，2R)-1, 2-环己二胺]二水合钼溶液。
[0009]其中米钼粗品经过精制获得米钼的制备方法为:取米钼粗品，加入氯仿，于20-25°C搅拌I小时，过滤，重复两次，将滤饼加入50°C热水，于50°C下搅拌I小时，过滤，重复3次，滤饼加入氯仿，65°C加热回流30分钟，冷却至50°C，加入活性炭，于此温度下搅拌30分钟，过滤，滤液冷却至20-25°C，滴加体积比为1000:49的甲醇-水溶液，滴加完毕后，于20- 25°C搅拌3小时，静置12小时，过滤，滤饼用甲醇淋洗，50°C真空干燥，得到米钼。
[0010]一、检测分析方法
[0011]【异构体】取本品适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含1.0mg的溶液，作为供试品溶液。精密量取1ml，置100mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录VD)测定。色谱柱:SUMICHIRAL0A-2500(
4.6mmX250mm5ym);以正己烷-甲醇-乙醇(97:3:0.5)为流动相；柱温:30°C，检测波长:216nm,流速:0.8ml/min。另取异构体I，米钼和异构体2适量,加流动相溶解并稀释制成每Iml中各约含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。取对照品溶液10 μ I注入液相色谱仪，记录色谱图，异构体1、米钼和异构体2依次流出，米钼与两异构体的分离度应符合要求，理论板数按米钼峰计算不低于2000。取对照溶液10 μ I注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使米钼色谱峰的峰高约为满量程的10%，再精密量取供试品溶液与对照溶液各10 μ I分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液的色谱图中如有两异构体峰，其峰面积均不得大于对照溶液主峰面积的1/10 (0.1%)。
[0012]【有关物质】取本品约10mg，置IOml量瓶中，加混合溶剂(正己烷:乙醇=4: I)Iml振摇使溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液(本液配制后必须立即进样)；精密量取Iml，置100mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液(5小时内稳定)。照含量测定项下的色谱条件，取对照溶液20 μ I注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的10%，再精密量取供试品溶液与对照溶液各20 μ 1，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的4倍，供试品溶液色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1/10 (0.1%)，相对保留时间为0.7-1.2的杂质面积不得大于对照溶液主峰面积的1/12.5 (0.08%);各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的1/2 (0.5%)ο
[0013]【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录VD)测定
[0014]色谱条件与系统适用性试验色谱柱:Inertsil 0DS-3250_X4.6_5 μ m ;以甲醇-乙醇(80: 20)为流动相；检测波长为216nm;柱温为40°C。理论板数按米钼峰计算不得低于3000。
[0015]测定法溶液临用新制取本品约10mg，精密称定，置100mL量瓶中，加混合溶剂(正己烷:乙醇=4: l)lml振摇使溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取20 μ I注入液相色谱仪，记录色谱图；另取米钼对照品，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。
[0016]二、稳定性试验
[0017]取实施例1和实施例2精制米钼原料药，按照本发明公开的检测方法进行检测，按照下述试验:
[0018](I)光照试验:取样品，疏松平摊于小培养皿中，厚度约5mm。将其置于药品强光照射试验箱，于照度4500Lx±500Lx条件下放置10天，在第10天取样，检测，结果与O月数据相比较。
[0019](2)高温试验:取样品，置于小烧杯中，密封膜封口。将其置于电热鼓风干燥箱，在600C ±1°C条件下放置10天，于第10天取样检测，结果与O月数据相比较。
[0020](3) 高湿试验:取样品，置于小烧杯中，分别置于盛有NaCl饱和溶液和KN03饱和溶液的密闭干燥器，湿度条件分别为RH75%。将其分别置于电热鼓风干燥箱，在25°C ±1°C条件下放置10天，于第10天取样检测，结果与O月数据相比较。
[0021]表1强光照射影响因素试验结果
[0022]
【权利要求】
1.一种米钼的制备方法，其特征在于:以十四酸和顺-二硝酸-[(1R，2R)-1，2-环己二胺]二水合钼溶液为原料，制备得到米钼粗品；米钼粗品经过精制获得米钼。
2.根据权利要求1所述的一种米钼的制备方法，其中制备方法包括:取十四酸，加入95%乙醇，于50-55°C搅拌溶解，加入1.135摩尔/升氢氧化钠溶液，于50_55°C下搅拌反应2.5h，搅拌下，滴加顺-二硝酸_[ (IR, 2R)-1, 2-环己二胺]二水合钼溶液，滴毕，加入异丙醇，于50-55°C下继续搅拌反应18h，停止搅拌，冷却至20-25°C，继续搅拌30分钟，过滤，滤饼用水和甲醇洗涤后，40-45°C减压干燥，得白色固体即米钼粗品。
3.根据权利I或2所述的一种米钼的制备方法，其中顺-二硝酸-[(IR，2R)-1,2-环己二胺]二水合钼溶液的制备方法为:取顺式-[(IR，2R)-1, 2-环己二胺-二氯]合钼加，加水，于20-25°C搅拌0.5小时，将1.05摩尔/升硝酸银的水溶液避光下滴入，于20_25°C下继续避光搅拌反应48h，将反应生成的淡黄色沉淀过滤，滤饼用水洗涤后,合并滤液,滤液用0.2微米的微孔滤膜过滤，向滤液中加入0.168摩尔/升碘化钠水溶液于20-25°C搅拌24小时后，冷却至10°C以下，静置3小时，用0.2微米的微孔滤膜过滤，滤毕，向滤液中加入活性炭，于20-25°C搅拌I小时，抽滤，用水洗涤，滤液用0.2微米滤膜过滤，得到滤液为顺-二硝酸-[(1R，2R)-1，2-环己二胺]二水合钼溶液。
4.根据权利要求1所述的一种米钼的制备方法，其中米钼粗品经过精制获得米钼的制备方法为:取米钼粗品，加入氯仿，于20-25°C搅拌I小时，过滤，重复两次，将滤饼加入50°C热水，于50°C下搅拌1小时，过滤，重复3次，滤饼加入氯仿，65°C加热回流30分钟，冷却至50°C，加入活性炭，于此温度下搅拌30分钟，过滤，滤液冷却至20-25°C，滴加体积比为1000:49的甲醇-水溶液，滴加完毕后，于20-25°C搅拌3小时，静置12小时，过滤，滤饼用甲醇淋洗，50°C真空干燥，得到米钼。
5.根据权利要求2所述的一种米钼的制备方法，其中95%乙醇与异丙醇的体积比为5:1o
【文档编号】C07F15/00GK103910762SQ201410151902
【公开日】2014年7月9日 申请日期:2014年4月16日 优先权日:2014年4月16日
【发明者】高红云, 于新影, 姜海全, 王蕾, 刘实 申请人:北京美迪康信医药科技有限公司, 哈尔滨誉衡药业股份有限公司