1.一种两次bio-bar-code核酸检测技术,包括如下步骤:
(1)磁珠探针、待测DNA和第一组纳米金探针混合,杂交;
(2)分离磁珠,洗涤,加洗脱液,继续保温杂交,磁分离,洗涤;
(3)重新悬浮沉淀,加入第二组纳米金探针,混合,杂交;
(4)分离磁珠,洗涤,加洗脱液,去磁珠,检测上清液。
2.根据权利要求1所述的一种两次bio-bar-code核酸检测技术,其特征在于:所述的磁珠颗粒大小是0.5~1.5μm,纳米金颗粒大小是30nm,待测DNA浓度是10fm-100pm。
3.根据权利要求1所述的一种两次bio-bar-code核酸检测技术,其特征在于:所述的磁珠探针是一端为生物素修饰,一端为非生物素修饰的探针,长度为30~50个碱基。
4.根据权利要求1所述的一种两次bio-bar-code核酸检测技术,其特征在于:所述的第一组纳米金探针是指一端为巯基修饰,一端为非巯基修饰的探针;第二组纳米金探针是指一端为巯基修饰,一端为荧光修饰的探针。
5.根据权利要求1所述的一种两次bio-bar-code核酸检测技术,其特征在于:所述的杂交温度是30-55℃,时间是5-60分钟。
6.根据权利要求5所述的一种两次bio-bar-code核酸检测技术,其特征在于:所述的杂交温度是55℃,时间是15分钟。