技术领域本发明涉及实验海洋生物学领域，特别是海洋尖尾藻的简易培养方法，为海洋尖尾藻实验生态学及其资源化利用提供简易的培养方法。
背景技术：
海洋尖尾藻是世界广布的一种赤潮微藻，目前已成为国际上室内海洋生物实验的模式海洋浮游生物，原来认为它是以硅藻、绿藻、隐藻、甲藻和细菌等活体作为其主要饵料进行杂食生活的异养鞭毛藻。海洋尖尾藻是一种异养型海洋甲藻，目前国内外对于海洋尖尾藻的研究并不多见。对海洋尖尾藻研究较少的一个重要原因即为培养方法难以掌握，究竟选用何种饵料以及选用何种培养条件是突破该瓶颈的关键所在。国内只有中国海洋大学以细菌为饵料培养了采自青岛太平角潮池的海洋尖尾藻以及河北农业大学以亚心形扁藻(Platymonassubcordiformis)等海洋微藻为饵料培养了采自秦皇岛近海的海洋尖尾藻。国内外研究表明，海洋尖尾藻能够摄食硅藻、绿藻、隐藻、金藻、细菌以及柱形宽水蚤(Temorastylifera)无节幼体等活体生物。现有技术中利用活体饵料培养海洋尖尾藻中遇到各种问题，包括：细菌培养易污染且保种条件要求高，饵料藻种类、饵料藻和海洋尖尾藻之间浓度配比、培养条件等不易掌握。缺少一种同时具备易得性、经济性、高效性和环境友好的饵料。
技术实现要素：
本发明的目的旨在解决现有技术的问题，本发明发现海洋尖尾藻不仅仅摄食上述活体饵料，煮熟鲜鸡蛋蛋黄匀浆后饲喂亦能满足其生长繁殖需求且生长旺盛。从而提供一种培养海洋尖尾藻饵料，其是一种同时具备易得性、经济性、高效性和环境友好的饵料；同时本发明公开一种海洋尖尾藻的简易培养方法，即适用于以鸡蛋蛋黄这种非活体饵料培养高浓度海洋尖尾藻的方法，其核心问题是具有较强适口性鸡蛋蛋黄培养液母液的制备以及培养条件的探索。该方法以煮熟鲜鸡蛋蛋黄为饵料培养海洋尖尾藻，对于海洋尖尾藻而言，首先配制蛋黄饵料培养液，然后再将其培养在含有蛋黄饵料的培养液内，最后将培养容器放置在光照培养箱内，调节温度、光照时间和光照强度即可。方法简单、饵料极易获得且用量少成本低、易维护、所需仪器设备常规实验室均具备，可实现海洋尖尾藻的长期培养。具体的，本发明首先公开了一种海洋尖尾藻的蛋黄饵料，即f/2培养液中加入蛋黄，使蛋黄浓度达10～50mg/L即可。其中，所述f/2培养液可以由常规实验方法配制，也可以由商业途径购买获得。所述蛋黄饵料的制备方法具体为：无菌条件下，取煮熟鲜鸡蛋，剥取蛋黄放入灭菌玻璃匀浆器内，加灭菌f/2培养液研磨匀浆，用灭菌f/2培养液冲洗匀浆器，匀浆液经过灭菌500～800目筛即可，饵料母液的浓度可以为1.0×104～5.0×104mg/L，培养海洋尖尾藻时，可以将饵料母液稀释至工作浓度10～50mg/L使用；饵料母液置4℃冰箱保存备用。本发明还公开了一种海洋尖尾藻的简易培养方法。具体以上文所述的蛋黄饵料培养海洋尖尾藻；所述海洋尖尾藻的培养条件是：温度18～25℃，光强2000～4000lx，光暗比L∶D＝(12～14h)：(10～12h)，盐度4～60，定时摇动培养至培养液颜色发生明显变化。培养液颜色最开始呈现的是蛋黄的乳白色，待接种海洋尖尾藻后，密度低时培养液是无色的，海洋尖尾藻高密度时(密度达到1.0×105cell/L左右)才能显出粉红色。本发明具有以下有益效果：1)鸡蛋蛋黄国内极易获得，且成本低，培养后可获得较大浓度，完全能够满足需要；2)所需培养条件在一般实验室均可满足，且运行成本低，易维护；3)可实现海洋尖尾藻的长期培养；即，在长期培养过程中，待海洋尖尾藻达到高密度后，饵料迅速减少，然后再添加饵料即可。4)可为海洋尖尾藻实验生态学及其资源化利用提供简易的培养方法。5)采用本发明，方法简单，易维护，可为海洋尖尾藻实验生态学及其资源化利用提供优质藻种。具体实施方式海洋尖尾藻的培养方法：将1000ml三角瓶中加入800mlf/2培养液，灭菌后利用移液器定量加入蛋黄饵料培养液母液至蛋黄浓度达10mg/L～50mg/L，摇匀，然后将培养液分装在四个250ml三角瓶内，每瓶培养液约200ml，最后在每个250ml三角瓶内分别接种海洋尖尾藻至250ml后将其置于光照培养箱内进行培养，培养条件：温度18-25℃，光强2000～4000lx，光暗比L∶D＝(12～14h)：(10～12h)，每日早晚定时各摇动培养瓶一次。培养过程中逐日观察培养液颜色变化并在颜色发生变化时拍照，并用显微镜检查海洋尖尾藻生长情况。所述的f/2培养液，配方如下：*f/2微量元素溶液配方**f/2维生素溶液配方实施例11)饵料选择。选择煮熟的新鲜鸡蛋蛋黄作为海洋尖尾藻的蛋黄饵料；2)蛋黄饵料培养液母液配制。利用灭菌f/2培养液配制母液，将整个鸡蛋煮熟后在超净工作台内进行如下步骤：剥掉蛋壳、去掉蛋清部分，定量称取蛋黄后放入灭菌玻璃匀浆器内，再在玻璃匀浆器内注入定量灭菌f/2培养液，将蛋黄仔细研磨匀浆，然后连续用定量灭菌f/2培养液冲洗匀浆器，匀浆液经过灭菌500目不锈钢细胞筛后全部注入具封口膜的灭菌三角瓶中作为培养液母液并置4℃冰箱保存备用。3)蛋黄饵料培养液配制及接种海洋尖尾藻。以无菌操作方式在盛有220mlf/2培养液的250ml三角瓶中加入蛋黄饵料培养液母液，摇匀后接种海洋尖尾藻培养液至250ml，得到乳白色的最初培养液，培养液中最初蛋黄饵料浓度为50mg/L；4)培养海洋尖尾藻。将3)中盛有最初培养液的三角瓶置于光照培养箱内培养，培养条件：温度20℃，光强3500lx，光暗比L∶D＝12h：12h，盐度60，每日早晚各定时摇动培养瓶一次。培养过程中逐日观察培养液颜色变化并在颜色发生变化时拍照，并用显微镜检查海洋尖尾藻生长情况(是否存活)。培养10天后得到浅色(淡粉红色)培养液，海洋尖尾藻密度可达3.12×105cell/L。颜色从乳白色变为淡粉红色，说明在设置的培养条件下，海洋尖尾藻已经培养成功。待培养液颜色逐渐由粉红色变淡至无色(意味着培养液中的蛋黄饵料量迅速减少)后再添加蛋黄饵料50mg/L继续培养，如此重复添加饵料可实现海洋尖尾藻的长期培养。实施例2与实施例1不同之处在于：所选用于培养海洋尖尾藻的最初蛋黄饵料浓度为10mg/L，培养条件：温度18℃，光强2000lx，光暗比L∶D＝10h：14h，盐度4，其余操作方法和步骤与实施例1相同。培养10天后得浅色(淡粉红色)培养液，海洋尖尾藻密度可达1.57×105cell/L。颜色从乳白色变为淡粉红色说明，在设置的培养条件下，海洋尖尾藻已经培养成功。实施例3与实施例1不同之处在于：所选用于培养海洋尖尾藻的蛋黄匀浆液经过800目不锈钢细胞筛，培养条件：温度20℃，光强4000lx，光暗比L∶D＝14h：10h，盐度30，其余操作方法和步骤与实施例1相同。培养10天后得到浅色(淡粉红色)培养液，海洋尖尾藻密度可达7.08×105cell/L。颜色从乳白色变为淡粉红色说明，在设置的培养条件下，海洋尖尾藻已经培养成功。实施例4与实施例1不同之处在于：所选用于培养海洋尖尾藻的蛋黄匀浆液经过800目不锈钢细胞筛，培养液中最初蛋黄饵料浓度为10mg/L，培养条件：温度25℃，光强3500lx，盐度28，其余操作方法和步骤与实施例1相同。培养10天后得到浅色(淡粉红色)培养液，海洋尖尾藻密度可达5.46×105cell/L。颜色从乳白色变为淡粉红色说明，在设置的培养条件下，海洋尖尾藻已经培养成功。