本发明涉及一种分离芦荟甙的方法，具体涉及一种酶解去杂分离芦荟甙的方法。
背景技术：
芦荟甙是一种蒽醌类化合物，广泛的应用于药品、化妆品和保健品等各个领域。
根据文献报道，芦荟甙在卢拉索芦荟中的含量大约在1%-1.5%之间，长期以来，产品处于求大于供的期货市场。主要的原因是分离技术有相当大的难度，其中芦荟原料中含有大量的多糖类杂质与芦荟甙伴生。这导致了该产品的分离难度非常大，而芦荟甙本身是一种C=C健的葡萄糖甙，而非普通糖甙的C=O键，本发明也是结合这一特殊的结构，利用葡萄糖甙酶将其他部分杂质完全酶解掉，而将芦荟甙保留下来。
芦荟甙因为市场的特新性以及国内外厂家对工艺路线的严格保密性，所以已经申请的专利并不多。
技术实现要素：
为了克服上述现有技术的不足，本发明的目的是提供一种生产过程不受季节及温度影响，环保清洁，无酸碱排放，低能耗，生产成本低的酶解去杂分离芦荟甙的方法。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：
一种酶解去杂分离芦荟甙的方法，包括以下步骤：
1）酶解过程：
按质量比，将新鲜的卢拉索芦荟原料，加入0.5%的葡萄糖甙酶，在45℃～55℃的环境下,保温酶解12小时，烘干；
2）提取过程：
给步骤1）得到质量比的粗品I加入 8倍量的醋酸乙酯，加热沸腾提取三次，每次1小时，合并提取液，将提取液浓缩到原溶液的 1倍量冷却到室温过滤，干燥得粗品II；
3）精制过程：
按质量比，将步骤2）干燥所得的粗品II，8倍量30%乙醇搅拌75度溶解，再加入0.１５倍量的活性碳，在５５℃～6５℃脱色1小时，趁热过滤浓缩到一倍量，放置过夜结晶，得到类精品；
4）重结晶过程：
将步骤3)获得的类精品，用７.5～8倍量乙醇75度溶解1小时，趁热过滤浓缩到1倍量，放置过夜结晶，过滤,得到精品；
5)干燥过程：
将步骤4）得到的精品，放置于真空干燥箱中，55℃干燥8小时，即得芦荟甙精品。
所述的提取溶剂为醋酸乙酯。
本发明与现有技术相比，具有以下优点：
1）葡萄糖甙酶的使用，将大部分糖甙类杂质去除掉。而将芦荟甙保留了下来，缩短了工艺流程；
2）相比常规的树脂分离或者其他过柱分离，大大降低了生产成本；
3）酶的使用非常的安全并且环保，相比有些酸水洗脱去杂，保护了环境；
4）操作简单，节约溶剂大大降低了生产成本；
5）该方法的产品得率达70%以上，高于常规分离50%-60%的水平，产品纯度在99.0%以上，最高可达99.9%，各类溶剂得回收率可达92%以上，废水BOD在100以下，适合工业化生产循环用水，广泛用于植物提取行业。
附图说明
图1为本发明的工艺流程图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明内容做进一步详细叙述：
如图1所示，一种酶解去杂分离芦荟甙的方法，包括以下步骤：
1）酶解过程：
按质量比，将新鲜的卢拉索芦荟原料，加入千分之五的葡萄糖甙酶，投入到反应锅中，搅拌半小时，保温在45℃～55℃的环境下, 每2小时充分搅拌一次，保温酶解12小时，过滤。固体部分在75℃真空干燥6小时。至水分5%一下，得到粗品I
2）提取过程：
给步骤1）得到的粗品I加入质量比8倍量的醋酸乙酯，加热沸腾提取三次，每次1小时，合并提取液，浓缩到粗品（质量体积比） 1倍量，冷却到室温并放置8小时以上，过滤，在75℃真空干燥3小时，得粗品II；
3）精制过程：
按质量比，将步骤3）干燥所得的粗品II，加入（重量比）７.5～8.5倍量30%乙醇加热至沸腾0.5小时，搅拌溶解，再加入粗品重量0.１５～０.２5倍量的活性碳，在５５℃～6５℃脱色1小时，趁热过滤浓缩到粗品II（重量：体积）2倍量，放置过夜结晶；时间不得小于12小时。
4）重结晶过程：
将步骤4）获得的类精品，用７.5～8.5倍量乙醇溶解趁热过滤浓缩到1倍量，放置过夜结晶，过滤；
5）干燥过程：
将步骤5）得到的精品，放置于真空干燥箱中，55℃真空干燥8小时，即得芦荟甙精品。
所述的提取溶剂为醋酸乙酯。
酶解条件的确定：
作为葡萄糖甙酶解反应，最重要的是3个参数的确定。酶解温度、酶解时间和酶的使用量。通过不同温度、不同时间、不同的酶使用量。酶解后，通过对酶解产物进行醋酸乙酯提取后烘干，检测芦荟甙含量。确定那个条件除杂效果明显。含量越高说明除杂效果越明显。
最佳酶解温度的确定；
首先确定添加重量比为1%的葡萄糖甙酶这个参数以及酶解的时间为8小时，通过对酶解产物用醋酸乙酯提取获得干物质进行含量检测，获得如下一组数据。
数据分析： 温度20度---45度，因为温度不够，杂质没有被酶解掉，
55度---60度 ，温度过高，酶失活。杂质没有被酶解。
我们确定最佳的酶解去杂温度为45度---55度
最佳酶解时间的确定
发明人在温度为50度，添加1%的葡萄糖甙酶。通过对酶解产物用醋酸乙酯提取获得干物质进行含量检测，获得如下一组数据。
考虑到检测的误差，发明人观测到在酶解12小时，检测到的芦荟甙含量最高，并且伴随时间的增加，芦荟甙含量未见增加。发明人最终确定12小时为酶解杂质的最佳时间。
最佳酶使用量的确定
发明在人45—55度的条件下，对原料进行酶解12小时，通过添加不同的酶使用量，获得如下一组数据。
通过核算成本，发明人最终确定添加量为0.5%为最佳酶使用量。
通过以上分析，发明人最终确定葡萄糖甙酶去杂分离芦荟甙，最佳的条件为：
45—55度，反应12小时，酶使用量为0.5%。
成品的规格要求：
样品经HPLC检测，芦荟甙含量不低于98.0%； 干燥失重不高于2.0％；水份含量不高于1%；有机溶剂含量不高于0.5%。
通过对原料杂质的全方位分析，发现库拉索芦荟中含有大量C=0键的葡萄糖甙类杂质，而芦荟甙是C=C键的葡萄糖甙类结构，并且结构非常稳定。通过杂质与目标产品结构的差异性，用葡萄糖甙酶先将里面的杂质进行水解，让其转化为其他类别的物质，更有利于后段的分离。 大大的提高了芦荟甙的得率，缩短了工艺，具有成本低、效率高、易操作的特点。
实施例：
申请人对新鲜的库拉索芦荟获取了1.6吨原料，检测芦荟甙含量为1.22% 并对这批原料采用不同投料量的生产加工。
实施例1：
取原料100公斤， 加入0.5公斤葡萄糖甙酶，500升反应釜中，保温搅拌 半小时，保温在45℃～55℃的环境下, 每2小时充分搅拌一次，保温酶解12小时，过滤。固体部分在75℃真空干燥6小时。至水分5%一下，得到粗品I，32.6公斤。
将得到的粗品I共32.6公斤加入260升的醋酸乙酯，加热沸腾提取三次，每次1小时。 合并提取液，浓缩到32.6升，冷却到室温并放置8小时以上，过滤，在75℃真空干燥3小时，得粗品II共3.1公斤；
将所得的粗品II，加入24.8升30%乙醇加热至沸腾0.5小时，搅拌溶解，再加入粗品重量0.１５倍量的活性碳，在５５℃～6５℃脱色1小时，趁热过滤浓缩到 6.2升，放置过夜结晶；时间不得小于12小时，过滤。再用24.8升乙醇溶解趁热过滤浓缩到 3.1升，放置过夜结晶，过滤；产品放置于真空干燥箱中，55℃真空干燥8小时，得芦荟甙精品890克。含量检测98.71%。
实施例2：
取原料300公斤， 加入1.5公斤葡萄糖甙酶，500升反应釜中，保温搅拌 半小时，保温在45℃～55℃的环境下, 每2小时充分搅拌一次，保温酶解12小时，过滤。固体部分在75℃真空干燥6小时。至水分5%一下，得到粗品I，100.3公斤。
将得到的粗品I共100.3公斤加入800升的醋酸乙酯，加热沸腾提取三次，每次1小时。 合并提取液，浓缩到100升，冷却到室温并放置8小时以上，过滤，在75℃真空干燥3小时，得粗品II共9.4公斤；
将所得的粗品II，加入75.2升30%乙醇加热至沸腾0.5小时，搅拌溶解，再加入粗品重量0.１５倍量的活性碳，在５５℃～6５℃脱色1小时，趁热过滤浓缩到 18.8升，放置过夜结晶；时间不得小于12小时，过滤。再用75.2升乙醇溶解趁热过滤浓缩到 9.4升，放置过夜结晶，过滤；产品放置于真空干燥箱中，55℃真空干燥8小时，得芦荟甙精品2650克。含量检测98.63%
实施例3：
取原料500公斤， 加入2.5公斤葡萄糖甙酶，1000升反应釜中，保温搅拌 半小时，保温在45℃～55℃的环境下, 每2小时充分搅拌一次，保温酶解12小时，过滤。固体部分在75℃真空干燥6小时。至水分5%一下，得到粗品I，163公斤。
将得到的粗品I共163公斤加入1300升的醋酸乙酯，加热沸腾提取三次，每次1小时。 合并提取液，浓缩到163升，冷却到室温并放置8小时以上，过滤，在75℃真空干燥3小时，得粗品II共15.6公斤；
将所得的粗品II，加入125升30%乙醇加热至沸腾0.5小时，搅拌溶解，再加入粗品重量0.１５倍量的活性碳，在５５℃～6５℃脱色1小时，趁热过滤浓缩到 31.2升，放置过夜结晶；时间不得小于12小时，过滤。再用125升乙醇溶解趁热过滤浓缩到15.6升，放置过夜结晶，过滤；产品放置于真空干燥箱中，55℃真空干燥8小时，得芦荟甙精品4450克。含量检测98.92%。