本发属于植物成分提取领域，尤其涉及一种从红豆杉中提取紫杉醇、10-去乙酰基巴卡丁Ⅲ和红杉醇的方法。
背景技术：
紫杉醇是从红豆杉植物上提取的一种化合物，主要适用于治疗卵巢癌和乳腺癌，以及肺癌、大肠癌、黑色素瘤、头颈部癌、淋巴瘤、脑瘤等，是继阿霉素后最有效的抗癌新药之一
10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(简称10-DABⅢ)，在欧洲红豆杉植物的枝叶中含量较高，由其合成紫杉醇或多西紫杉醇的工艺非常成熟，因此10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ已成为紫杉烷药物半合成的主要前体化合物。
红杉醇是肌醇的甲基衍生物，红豆杉中含有另外一种成分为红杉醇，红杉醇具有明显的降血糖作用，且毒性较低，可应用于治疗糖尿病。
现有初分离紫杉醇的方法大多为实验室小试方法，较难工业化。例如授权公告号为CN1123569C的“从红豆杉植物细胞培养液中初分离紫杉醇的方法”专利，公开的初分离紫杉醇的方法是：在红豆杉细胞培养液中加入絮凝剂，搅拌均匀便迅速絮凝澄清，经过滤后得到富集紫杉醇的浓缩物。该方法的主要缺点是：1.所用原料为红豆杉植物细胞培养液，并未工业化生产，无法大量的获得；2.并未处理在初分离的过程中产生的大量植物细胞培养废液，对环境会产生一定影响。
技术实现要素：
本发明的目的是为了提供一种能够对红豆杉中多种有效物质进行同时提取的红豆杉有效物质的提取方法。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种从红豆杉中提取紫杉醇、10-去乙酰基巴卡丁Ⅲ和红杉醇的方法包括步骤：
A.溶液提取：将红豆杉用甲醇或乙醇水溶液在35-60℃下搅拌提取，然后过滤得到滤液；
B.絮凝：将得到的滤液冷却至15-30℃，然后加入絮凝剂搅拌均匀后静置，絮凝澄清；
C.纯化：将絮凝后的混合物进行过滤，得到滤液和滤饼，滤饼真空干燥得到粗品，粗品用柱层析或重结晶方法进行分离纯化后的得产品。
进一步的，所述步骤A中红豆杉为粉碎至30-300目的粉末，
进一步的，所述步骤A中甲醇或乙醇水溶液的体积分数为10-40％。
进一步的，所述甲醇或乙醇水溶液体积/mL为红豆杉重量/g的10-30倍。即1g红豆杉需用10-30mL甲醇或乙醇水溶液进行提取。
进一步的，所述步骤A中搅拌提取的时间为2-6小时。
进一步的，所述絮凝剂为聚丙烯酰胺和硫酸铝溶液的混合液，其质量浓度为0.01-0.5％的聚丙烯酰胺水溶液和质量浓度为2-15％的硫酸铝水溶液，聚丙烯酰胺分子量为300万，加入的聚丙烯酰胺水溶液为加入絮凝剂前滤液重量的0.5-5％，加入的硫酸铝水溶液为加入絮凝剂前滤液重量的0.5-5％。
进一步的，所述絮凝剂的用量为为红豆杉重量的0.005-0.02倍。
进一步的，所述步骤C中过滤所得的滤液套用至下一批次的提取。也就是把滤液作为下一批物料的提取用的溶剂进行套用，这样可以大大降低废液处理成本，同时提高提取溶剂的利用率。
本发明具有如下有益效果：
1.本发明方法以红豆杉为原料，采用絮凝沉降法从红豆杉中提取紫杉醇、10-去乙酰基巴卡丁Ⅲ和红杉醇，粗品中紫杉醇的收率为85.6％-97.2％，10-去乙酰基巴卡丁Ⅲ的收率为90.3％-95.3％，红杉醇的收率为88.7％-93.8％。
2.本发明方法进行滤液套用，减少了甲醇和乙醇的损失，降低了对环境的污染，节约了回收甲醇或乙醇所需的能量。
3.本发明方法以低浓度的甲醇或乙醇作为提取剂，在提取的过程中，较大程度的降低了脂溶性杂质的溶出量，对紫杉醇、10-去乙酰基巴卡丁Ⅲ和红杉醇的溶出量降低较少，从而降低了提取液中杂质的量，使得到的粗品中有用物质含量更高，方便后续纯化处理。
4.本发明方法所用生产设备为常规设备，生产条件易实施，操作方便适合工业化生产。
本发明可广泛应用于从红豆杉中提取紫杉醇、10-去乙酰基巴卡丁Ⅲ和红杉醇，采用本发明方法生产的紫杉醇可应用于治疗卵巢癌和乳腺癌，生产的10-去乙酰基巴卡丁Ⅲ可用于紫杉醇、多西他赛的合成原料，生产的红杉醇可用于治疗糖尿病，应用于医药领用中。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。所述实施例仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
实施例一
将粉碎至300目的红豆杉用体积/mL为红豆杉重量/g10倍的、体积分数为10％的甲醇水溶液进行加热至35℃下搅拌提取2小时，然后过滤得到滤液；将滤液冷却至15℃，然后加入质量为红豆杉重量的0.005倍的絮凝剂，搅拌均匀后静置，絮凝澄清；所述絮凝剂为聚丙烯酰胺与硫酸铝溶液的组合，其质量浓度为0.01％的聚丙烯酰胺水溶液和质量浓度为2％的硫酸铝水溶液，聚丙烯酰胺分子量为300万，加入的聚丙烯酰胺水溶液为加入絮凝剂前滤液重量的0.5％，加入的硫酸铝水溶液为加入絮凝剂前滤液重量的0.5％。
将絮凝后的混合物进行过滤，得到滤液和滤饼，滤液套用至下一批次的提取，滤饼真空干燥得到粗品，粗品中紫杉醇的收率为85.6％，10-去乙酰基巴卡丁Ⅲ的收率为90.3％，红杉醇的收率为88.7％。
粗品用柱层析进行分离纯化，最终得到紫杉醇、10-去乙酰基巴卡丁Ⅲ和红杉醇产品。
实施例二
将粉碎至30目的红豆杉用体积/mL为红豆杉重量/g30倍的、体积分数为40％的乙醇水溶液进行加热至60℃下搅拌提取6小时，然后过滤得到滤液；将得到的滤液冷却至30℃，然后加入质量为红豆杉重量的0.02倍的絮凝剂，搅拌均匀后静置，絮凝澄清；所述絮凝剂为聚丙烯酰胺与硫酸铝溶液的组合，其质量浓度为0.5％的聚丙烯酰胺水溶液和质量浓度为15％的硫酸铝水溶液，聚丙烯酰胺分子量为300万，加入的聚丙烯酰胺水溶液为加入絮凝剂前滤液重量的5％，加入的硫酸铝水溶液为加入絮凝剂前滤液重量的5％。
将絮凝后的混合物进行过滤，得到滤液和滤饼，滤液套用至下一批次的提取，滤饼真空干燥得到粗品，粗品中紫杉醇的收率为97.2％，10-去乙酰基巴卡丁Ⅲ的收率为95.3％，红杉醇的收率为93.8％。
粗品用重结晶方法进行分离纯化，最终得到紫杉醇、10-去乙酰基巴卡丁Ⅲ和红杉醇产品。
实施例三
将粉碎至200目的红豆杉用用体积/mL为红豆杉重量/g20倍的、体积分数为30％的甲醇水溶液进行加热至50℃下搅拌提取4小时，然后过滤得到滤液；将得到的滤液冷却至25℃，然后加入质量为红豆杉重量的0.01倍的絮凝剂，搅拌均匀后静置，絮凝澄清；所述絮凝剂为聚丙烯酰胺与硫酸铝溶液的组合，其质量浓度为0.15％的聚丙烯酰胺水溶液和质量浓度为4％的硫酸铝水溶液，聚丙烯酰胺分子量为300万，加入的聚丙烯酰胺水溶液为加入絮凝剂前滤液重量的1.3％，加入的硫酸铝水溶液为加入絮凝剂前滤液重量的1.3％。
将絮凝后的混合物进行过滤，得到滤液和滤饼，滤液套用至下一批次的提取，滤饼真空干燥得到粗品，粗品中紫杉醇的收率为94.5％，10-去乙酰基巴卡丁Ⅲ的收率为93.8％，红杉醇的收率为91.9％。
粗品用重结晶方法进行分离纯化，最终得到紫杉醇、10-去乙酰基巴卡丁Ⅲ和红杉醇产品。