本发明涉及农产品的深加工技术领域，尤其涉及一种具抑菌功效的脐橙精油分子蒸馏组分的制备方法。
背景技术：
脐橙以其肉质脆嫩化渣，风味浓甜芳香而闻名。脐橙果皮约占鲜果重的20％-30％，含有果胶、精油和黄酮等多种可利用成分。脐橙皮中分离得到的具有芳香气味的挥发性油状物质即为精油。其主要成分是萜烯类、倍半萜烯类以及醇类、醛类、酮类、酯类等组成的含氧化合物，其中柠檬烯是主要成分。橙精油中含多种生理活性物质，具有抗菌、抗氧化、消炎、消肿、镇痛等多种生理活性，被广泛应用在食品、医药、化工和化妆品等多个领域中，具有重要的经济价值。
冷压法是大规模制备橙精油的主要方法，是在榨汁的过程中，通过榨机的机械压力作用将橙子外果皮上的油囊细胞压破,使精油渗出，再利用碟式离心设备进行油水渣分离。冷压橙油成分复杂，含有色素、蜡及农残等不利于做抗菌保鲜剂的成分。
目前，随着人们对食品安全的关注及开发天然保鲜剂的要求，天然植物精油的抑菌作用用于食品保鲜领域具有很好的前景。橙精油是世界上产量和用量最多的天然植物精油，用分子蒸馏技术加工脐橙精油，并对其抗菌活性进行研究，开发新型的抗菌保鲜剂，还尚未有文献及专利报道。
技术实现要素：
基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种具抑菌功效的脐橙精油分子蒸馏组分的制备方法，具体步骤如下：
1)将冷压精油装入分子蒸馏装置的进料瓶中，开启冷凝器；
2)系统冷却后，设定真空度，压力稳定后，设定蒸馏温度；
3)真空度和温度均达到设定值后，调节刮膜转速，打开进料阀，控制物料流量，进行分子蒸馏，收集馏出组分。
优选地，所述步骤2)中，真空度为8.0-12.0Torr、蒸馏温度为50.0-60.0℃。
优选地，所述步骤3)中，刮膜转速为300-350r/min、物料流量为2.5-3.5mL/min。
与现有技术相比，本发明具有的有益效果在于：
1.本发明应用分子蒸馏技术将冷压橙精油进行加工，具有真空度高，加热温度低，热敏性物质不易受到破坏，蒸馏过程中不会带入任何有机溶剂的优点。
2.本发明方法制备的精油产品去除了色素、蜡及农残等物质，气味清香，成分天然，抑菌效果显著，可将其作为新的抗菌剂及食品保鲜剂的潜在来源。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步解说。
实施例1
本发明提出了一种具抑菌功效的脐橙精油分子蒸馏组分的制备方法，具体步骤如下：
1)脐橙精油的制备
采用授权中国国家发明专利(一种采用三级碟离系统回收冷压脐橙精油的方法，2014，CN102719316 B)中的方法；榨汁的同时，利用榨杯的压力和切割作用，使果皮外表层的油胞破裂释放精油。同时，上榨杯顶上的环状喷水装置喷水，将果皮和精油的混合物冲出进入螺旋输送机，经振动筛分离得到黄色泥状液。然后采用碟式离心设备进行油水渣分离，得到冷压脐橙精油，为橙色透明澄清液体。
2)脐橙精油分子蒸馏组分的制备
(1)将500mL(422.5g)冷压精油装入分子蒸馏装置的进料瓶中，开启冷凝器；
(2)系统冷却后，设定真空度8.0Torr，压力稳定后，设定蒸馏温度50.0℃；
(3)真空度和温度均达到设定值后，调节刮膜转速为300r/min，打开进料阀，控制物料流量为2.5mL/min，进行分子蒸馏，收集馏出组分，得到380.0g蒸馏产品，产率为90.0％。
实施例2
本发明提出了一种具抑菌功效的脐橙精油分子蒸馏组分的制备方法，具体步骤如下：
1)脐橙精油的制备
采用授权中国国家发明专利(一种采用三级碟离系统回收冷压脐橙精油的方法，2014，CN102719316 B)中的方法；榨汁的同时，利用榨杯的压力和切割作用，使果皮外表层的油胞破裂释放精油。同时，上榨杯顶上的环状喷水装置喷水，将果皮和精油的混合物冲出进入螺旋输送机，经振动筛分离得到黄色泥状液。然后采用碟式离心设备进行油水渣分离，得到冷压脐橙精油，为橙色透明澄清液体。
2)脐橙精油分子蒸馏组分的制备
(1)将500mL(422.5g)冷压精油装入分子蒸馏装置的进料瓶中，开启冷凝器；
(2)系统冷却后，设定真空度12.0Torr，压力稳定后，设定蒸馏温度60.0℃；
(3)真空度和温度均达到设定值后，调节刮膜转速为350r/min，打开进料阀，控制物料流量为3.5mL/min，进行分子蒸馏，收集馏出组分，得到385.3g蒸馏产品，产率为91.2％。
实施例3
本发明提出了一种具抑菌功效的脐橙精油分子蒸馏组分的制备方法，具体步骤如下：
1)脐橙精油的制备
采用授权中国国家发明专利(一种采用三级碟离系统回收冷压脐橙精油的方法，2014，CN102719316 B)中的方法；榨汁的同时，利用榨杯的压力和切割作用，使果皮外表层的油胞破裂释放精油。同时，上榨杯顶上的环状喷水装置喷水，将果皮和精油的混合物冲出进入螺旋输送机，经振动筛分离得到黄色泥状液。然后采用碟式离心设备进行油水渣分离，得到冷压脐橙精油，为橙色透明澄清液体。
2)脐橙精油分子蒸馏组分的制备
(1)将500mL(422.5g)冷压精油装入分子蒸馏装置的进料瓶中，开启冷凝器；
(2)系统冷却后，设定真空度10.0Torr，压力稳定后，设定蒸馏温度55.0℃；
(3)真空度和温度均达到设定值后，调节刮膜转速为325r/min，打开进料阀，控制物料流量为3.0mL/min，进行分子蒸馏，收集馏出组分，得到386.6g蒸馏产品，产率为91.5％。
实施例4
本发明提出了一种具抑菌功效的脐橙精油分子蒸馏组分的制备方法，具体步骤如下：
1)脐橙精油的制备
采用授权中国国家发明专利(一种采用三级碟离系统回收冷压脐橙精油的方法，2014，CN102719316 B)中的方法；榨汁的同时，利用榨杯的压力和切割作用，使果皮外表层的油胞破裂释放精油。同时，上榨杯顶上的环状喷水装置喷水，将果皮和精油的混合物冲出进入螺旋输送机，经振动筛分离得到黄色泥状液。然后采用碟式离心设备进行油水渣分离，得到冷压脐橙精油，为橙色透明澄清液体。
2)脐橙精油分子蒸馏组分的制备
(1)将500mL(422.5g)冷压精油装入分子蒸馏装置的进料瓶中，开启冷凝器；
(2)系统冷却后，设定真空度10.0Torr，压力稳定后，设定蒸馏温度60.0℃；
(3)真空度和温度均达到设定值后，调节刮膜转速为350r/min，打开进料阀，控制物料流量为3.0mL/min，进行分子蒸馏，收集馏出组分，得到393.0g蒸馏产品，产率为93.0％。
实施例5
本发明提出了一种具抑菌功效的脐橙精油分子蒸馏组分的制备方法，具体步骤如下：
1)脐橙精油的制备
采用授权中国国家发明专利(一种采用三级碟离系统回收冷压脐橙精油的方法，2014，CN102719316 B)中的方法；榨汁的同时，利用榨杯的压力和切割作用，使果皮外表层的油胞破裂释放精油。同时，上榨杯顶上的环状喷水装置喷水，将果皮和精油的混合物冲出进入螺旋输送机，经振动筛分离得到黄色泥状液。然后采用碟式离心设备进行油水渣分离，得到冷压脐橙精油，为橙色透明澄清液体。
2)脐橙精油分子蒸馏组分的制备
(1)将500mL(422.5g)冷压精油装入分子蒸馏装置的进料瓶中，开启冷凝器；
(2)系统冷却后，设定真空度9.0Torr，压力稳定后，设定蒸馏温度58.0℃；
(3)真空度和温度均达到设定值后，调节刮膜转速为320r/min，打开进料阀，控制物料流量为2.9mL/min，进行分子蒸馏，收集馏出组分，得到390.8g蒸馏产品，产率为92.5％。
以实施例4得到的脐橙精油为样本，抑菌功效研究如下：
1)抑菌实验菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌，所有菌种均购自中国微生物菌种保藏中心。
2)抑菌活性的评定标准：抑菌圈直径大于20mm为极度敏感，15-20mm时为高度敏感，10-15mm时为中度敏感，7-9mm时为低度敏感，无抑菌圈者为不敏感。
3)抑菌实验方法：
(1)将待测菌用平皿划线法在固体培养基上活化，挑取单菌落接入液体培养基中过夜培养，然后将菌液进行10倍系列稀释，细菌采用平板计数法，酵母采用显微镜直接记数法测菌体，将各菌落液浓度调至为1×106CFU/mL的菌悬液，将各种待测菌悬液各取0.15mL在相应的固体培养基上均匀涂布，制成含菌平板。在每个平皿中贴入4片5mm的圆形无菌滤纸片，并使之展平。在每个平面皿的3个滤纸片上分别滴加5μL精油，另一个滤纸片作为对照，每个菌种平行测定3次。其中金黄色葡萄球菌和大肠杆菌在37℃下培养24h后进行观察记录，酵母菌、枯草芽孢杆菌在28℃下培养48h后进行观察记录，测量抑菌圈的直径，取平均值，以抑菌圈的直径大小来评价精油的抗菌能力。
(2)将脐橙精油用溶剂二甲基亚砜(DMSO)稀释为终浓度12.5、6.25、3.125、1.56、0.78、0.39μL/mL，取5μL稀释液滴入滤纸片上，以DMSO和无菌水做空白对照。同样金黄色葡萄球菌和大肠杆菌在37℃下培养24h后进行观察记录，酵母菌、枯草芽孢杆菌在28℃下培养48h后进行观察记录，观察菌体的生长情况，每一精油浓度梯度作3组平行试验，与对照组比较，观察抑菌圈大小，以最小抑菌圈直径对应的最低精油浓度为其最低抑菌浓度。
4、抑菌实验结果：
(1)脐橙精油抑菌圈直径：
(2)脐橙精油对测试菌种的最低抑菌浓度
5、抑菌实验结论：
(1)分子蒸馏提纯后脐橙精油轻相组分对酵母菌和枯草芽孢杆菌极度敏感，对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌高度敏感。
(2)未经分子蒸馏提纯的脐橙冷榨精油粗油对酵母菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌最小抑菌浓度1.56μL/mL，对金黄色葡萄球菌的MIC为3.125μL/mL；而经过分子蒸馏提纯后的脐橙精油组分抑菌活性大大提高，其中对酵母菌的MIC值分别为0.39μL/mL，和冷压橙油相比活性提高了3倍；对大肠杆菌的抑菌活性提高了1倍。
由此可见，脐橙精油分子蒸馏组分对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和酵母菌的都有很好的抑制作用，其对真菌的抑菌活性明显优于细菌，分子蒸馏技术可提高精油组分的抑菌活性。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。