本发明属于生物医药领域，具体涉及一种氟伐他汀钠脱水代谢物的制备方法。
背景技术：
氟伐他汀钠(Fluvastatin sodium)，化学名为[3R*,5S*-(E)]-(±)-7-[3-(4-氟苯基)-1-异丙基-1H-吲哚-2-基]-3,5-二羟基-6-庚烯酸钠，是继洛伐他汀、普伐他汀和辛伐他汀之后开发的第4个HMG-CoA还原酶抑制。它的吲哚环仿拟辅酶，甲羟戊酸内酯链模拟产物甲羟戊酸，可以同时阻断HMG-CoA底物和产物，起到内源性胆固醇合成限速酶的作用，进而抑制甲羟戊酸生成胆固醇，并刺激肝脏内高亲和力的低密度脂蛋白(LDL)受体生成增多，最终使血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平及总胆固醇(TC)水平下降。
氟伐他汀是两个羟基处于同方向的一对cis异构体，其中(3R,5S)-型有药理活性，而(3S,5R)-型无药理活性。氟伐他汀英文制剂名为Lescol(来适可)，由瑞士Sandoz公司开发，并于1993年在瑞士投产，1994年1月首先在英国上市，随后在美国、加拿大、新西兰等多国上市，1997年在我国注册。对原发性高胆固醇血症具显著疗效，明显降低冠心病发病率和死亡率，广泛在病人中使用。
本发明的目的是为了利用现在所拥有的技术条件，提供一种路线合理，可操作性强，产物易提纯，纯度高，收率高的合成一种氟伐他汀代谢物的方法，本文所得的目标产物，未见文献报道。在一些实例中，母体化合物会引起相关的毒性，而也有实例表明，代谢产物才是引起毒性的主因。基因改变有可能是由于产生了药物代谢产物这一原因引起的，但也有可能是因组织损伤引起，此外，代谢产物与其它受体之间的相互作用也可能导致基因改变。
本发明所合成的化合物为氟伐他汀钠生物代谢提供测试样品，可以应用于临床药代动力学方面的研究，从而更加准确和方便地了解氟伐他汀钠在人体内的代谢过程。
技术实现要素：
发明目的：本发明的目的是提供一种工艺设计合理，后处理简单、原料价廉易得的氟伐他汀钠脱水代谢物的制备方法。本发明制备得到的目标产物纯度可达99％以上，可用于药代动力学研究，为氟伐他汀的代谢机理研究提供测试样品，具有重要的应用价值。
技术方案：为了实现以上目的，本发明采取以下技术方案：
一种氟伐他汀钠脱水代谢物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(A)将氟伐二醇在室温条件下，选择性氧化5位羟基为酮基，提纯得到化合物(1)；
(B)取步骤(A)制备得到的化合物(1)溶于有机溶剂中，加入咪唑，用硅醚保护基保护3位羟基，处理提纯得到化合物(2)；
(C)取步骤(B)得到的化合物(2)溶于甲醇，室温下用硼氢化钠还原得到化合物(3)；
(D)取步骤(C)得到的化合物(3)溶于有机溶剂中，加入有机碱，在催化剂存在条件下，与苯甲酰氯室温下反应，处理提纯得到化合物(4)；
(E)取步骤(D)得到的化合物(4)溶于四氢呋喃中，加入碱和钯催化剂，发生消除反应，调节pH值到酸性，萃取后结晶得到化合物(5)；
(F)取步骤(E)得到的化合物(5)溶于四氢呋喃中，加入脱硅醚试剂，提纯得到化合物(6)；
(G)取步骤(F)得到的化合物(6)用NaOH水解，提纯得到目标分子化合物(7)；
作为优选方案，以上所述的氟伐他汀钠脱水代谢物的制备方法，步骤(A)所述的氧化剂为二氧化锰或二氯二氰基苯醌，特别优选二氧化锰，反应溶剂为四氢呋喃或二氯甲烷；氟伐二醇与氧化剂的摩尔用量比为1:1～5，特别优选1：3。氟伐二醇与氧化剂的摩尔用量比的筛选实验，如下表：
作为优选方案，以上所述的氟伐他汀钠脱水代谢物的制备方法，步骤(B)所述的硅醚保护基为四甲基硅烷或叔丁基二甲基氯硅烷(TBDSCl)，特别优选TBDSCl，反应溶剂为二甲基甲酰胺或二氯甲烷；化合物(1)与硅醚保护基的摩尔用量比为1:1～5，特别优选1：2.5；化合物(1)与咪唑的摩尔用量比为1:1～5，特别优选1：3。
化合物(1)与咪唑的摩尔用量比的筛选实验如下：
作为优选方案，以上所述的氟伐他汀钠脱水代谢物的制备方法，步骤(C)中，化合物(2)与还原剂硼氢化钠的摩尔用量比为1:0.5～3，特别优选1：2。
作为优选方案，以上所述的氟伐他汀钠脱水代谢物的制备方法，步骤(D)所述的催化剂为4-二甲氨基吡啶(DMAP)，所用的有机碱为三乙胺，化合物(3)和苯甲酰氯的摩尔用量比为1：1～10，特别优选1：6，反应时间为6～18小时。
化合物(3)和苯甲酰氯的摩尔用量比的筛选实验如下表：
作为优选方案，以上所述的氟伐他汀钠脱水代谢物的制备方法，步骤(E)所述的碱为三乙胺或者二异丙基乙胺；所用的钯催化剂为氯化钯或者四三苯基膦钯，钯催化剂与化合物(4)的摩尔比为1:0.01～0.5，特别优选1：0.2，25℃搅拌反应10小时。
作为优选方案，以上所述的氟伐他汀钠脱水代谢物的制备方法，步骤(F)所述的脱硅醚试剂为KF、KOH或者四丁基氟化铵，特别优选四丁基氟化铵，化合物(5)和四丁基氟化铵的摩尔用量比为1：1～10，特别优选1：7，60℃反应6～12小时。
化合物(5)和四丁基氟化铵的摩尔用量筛选实验如下表：
作为优选方案，以上所述的氟伐他汀钠脱水代谢物的制备方法，步骤(G)中化合物(6)和NaOH的摩尔用量比为1：1～5，特别优选1：3，38℃反应4～8小时。
有益效果：本发明提供的氟伐他汀钠脱水代谢物的制备方法和现有技术相比具有以下优点：
本发明提供的氟伐他汀钠脱水代谢物的制备方法，通过大量实验筛选出最优的反应条件和最佳的反应步骤，路线设计合理，可操作性强，制备得到的产物纯度高达99.9％以上，得率高，为氟伐他汀的代谢机理研究提供测试样品，可用于探究该药物在生物体内的代谢过程，在临床药代动力学研究中具有重要研究价值。
附图说明
附图1为本发明提供的氟伐他汀钠脱水代谢物制备方法的合成路线图。
具体实施方式
为了更好地理解本发明，以下结合路线图对本发明做进一步详细描述。实施例所描述的物料配比及其结果仅用于说明本发明，而不应以此限制本发明的保护范围。
实施例1
如图1所示，一种氟伐他汀钠脱水代谢物的制备方法，其包括以下步骤：
步骤(A)：中间产物(1)的制备
20g氟伐二醇溶于400mL THF中，加入11.1g二氧化锰，室温搅拌12小时后，反应完全，抽滤除去二氧化锰，固体用THF洗涤，滤液浓缩，用色谱柱提纯得到化合物(1)，产率85.33％。
步骤(B)：中间产物(2)的制备
取12g化合物(1)溶于120mL二氯甲烷，加入5.3g咪唑和9.7g叔丁基二甲基氯硅烷，室温反应18小时，TLC显示反应完全，反应液依次用水、0.5N盐酸和氯化钠水溶液洗涤后，无水硫酸钠干燥，浓缩干用硅胶色谱柱提纯得到油状物化合物(2)13.6g，产率91％。MS:602[M+Na+]。
步骤(C)：中间产物(3)的制备
取13.6g化合物(2)溶于136mL二氯甲烷，冰浴下分批加入1.8g硼氢化钠，反应液于25℃搅拌1小时，点板反应完全，加水淬灭反应，水相继续用二氯甲烷萃取两次，硫酸钠干燥后浓缩得到化合物(3)13g，产率95.26％。MS:581[M+Na+]。
步骤(D)：中间产物(4)的制备
取13g化合物(3)溶于130mL二氯甲烷，加入9g三乙胺和18.8g苯甲酰氯，所得反应液于25℃搅拌12小时，100mL水淬灭反应，饱和氯化钠洗涤后，有机相用硫酸钠干燥、浓缩得到淡黄色油状物，用色谱柱提纯得到化合物(4)13g，产率85.32％。MS:708[M+Na+]。
步骤(E)：中间产物(5)的制备
4.38g四三苯基膦钯和1g三乙胺溶于130mL THF中，13g化合物(4)的130mL THF溶液缓慢滴加到上述溶液中，25℃搅拌10小时，薄层色谱显示反应完全，把THF浓缩干，然后加入100mL水，水相用乙酸乙酯萃取，有机相干燥后浓缩得到12g黑色油状物，硅胶柱提纯得到10g化合物(5)，产率93.5％。MS:586[M+Na+]。
步骤(F)：中间产物(6)的制备
取9g化合物(5)溶于68mL THF，加入112mL的TBAF溶液，加热到60℃反应12小时，薄层色谱显示反应完全，反应液冷却后加入100mL水，旋蒸除去THF，水相用二氯甲烷萃取，粗产物用色谱柱提纯得到6g化合物(6)，产率83.6％。
MS:472[M+Na+]；1H NMR:(400MHz,DMSO-d6):δ1.38(s,9H),1.60(dd,6H),2.3(dd,2H),4.35(m,1H),4.9(m,1H),5.1(dd,1H),5.65(dd,1H),6.2-6.5(m,2H),6.75(d,2H),7.0-7.7(Ar-H,8H).
步骤(G)：目标化合物(7)的制备
取2.5g化合物(6)溶于25mL THF，加入1.1g氢氧化钠，加热到38℃反应5小时，薄层色谱显示反应完全，反应液冷却后加入15mL水，旋蒸除去THF，水相用乙酸乙酯洗两次，蒸干得到2g化合物(7)，产率86.6％，HPLC：99.91％。
化合物(7)MS:392[M-H-]；1H NMR:(400MHz,CD3OD):δ1.65(d,6H),2.35(d,2H),4.47(m,1H),4.85-4.94(m,1H),5.62-5.68(dd,1H),6.25-6.37(m,2H),6.65(d,1H),7.02(t,1H),7.1-7.2(m,3H),7.4(m,3H),7.6(d,1H).
本发明的上述实例是经过大量试验优化后的实例，任何在本路线基础上对条件进行优化都视为本发明所保护的范围。