本发明涉及玻片染色液领域，尤其是一种乳酸酚棉蓝染色液及其制备方法。
背景技术：
真菌属于真核生物，没有质体，营养方式为吸收，无吞噬作用，通常其细胞壁含有甲壳质和β-葡聚糖。可引起人类、动物的疾病，称为真菌病，还可引起植物的疾病、人类过敏性疾病和真菌毒素中毒症。
在医学领域，为了了解真菌的结构，通常需要对载有真菌的玻片进行染色。现有的而普通封片胶（中性树脂）的方法只适用于干片的封片，无法对染色后的湿片进行封片，适用范围受到了限制，且染色后的保持时间较短。
技术实现要素：
本发明提供一种乳酸酚棉蓝染色液及其制备方法，能很好地永久保存真菌湿片或玻片培养，适用范围更广、保存时间更久。
根据本发明的第一方面，本发明提供一种乳酸酚棉蓝染色液，包括10-15份pva、20-40份乳酸、20-40份苯酚和0.05-0.1份苯胺蓝。
优选的，pva、乳酸、苯酚和苯胺蓝的最佳质量比是12:30:30:0.075。
根据本发明的第二方面，本发明提供一种乳酸酚棉蓝染色液的制备方法，包括如下步骤：将10-15份pva粉末加入盛有水的容器中，对容器进行加热，同时，使用磁棒来搅拌；再依次加入20-40份乳酸、20-40份苯酚结晶、0.05-0.1份苯胺蓝；持续对溶液进行加热并使用磁棒搅拌混匀溶液，直至温度达70-90℃，停止加热，制得乳酸酚棉蓝染色液。
优选的，pva、乳酸、苯酚和苯胺蓝的最佳质量比是12:30:30:0.075。
优选的，容器中盛放的为去离子水。
优选的，加热至80℃时，停止加热。
优选的，还包括如下步骤：将制备的乳酸酚棉蓝染色液分装到滴瓶中，盖紧瓶盖，室温保存。
本发明的有益效果是：
1.可以对染色后的湿片和干片进行封片，适用范围更广。
2.能很好地永久保存真菌湿片或玻片培养，在平坦的表面晾干至少24小时，这些封片剂永久存在，不会溶解于乙醚、二甲苯或乙醇。经固定的真菌结构可以清晰的维持数年，保存效果更好。
3.可以在显微镜的低倍、高倍以及油镜下观察真菌菌丝及孢子结构，而原有的染色方法只能低倍和高倍下观察。
4.集染色的功能和可保存备检功能于一体,普通染液只有染色功能。
具体实施方式
下面通过具体实施方式对本发明作进一步详细说明。
本发明提供一种乳酸酚棉蓝染色液，包括10-15份pva、20-40份乳酸、20-40份苯酚和0.05-0.1份苯胺蓝。其中，pva试剂用作加强染色层与玻理之间的粘附力，密封阻隔染色层与空气接触氧化。苯酚试剂用作固定增强菌丝、孢子与染色剂的亲和力，提高染色效果，另有消毒作用。乳酸试剂用作调节ph，增加溶解性。苯胺蓝试剂作为着色剂，起到染色的作用。
本发明还提供一种乳酸酚棉蓝染色液的制备方法，包括如下步骤：将10-15份pva粉末加入盛有水的容器中，容器具体可以是烧杯、试管等。对容器进行加热，具体可以将烧杯放置到加热板上。同时，使用磁棒来搅拌，吸附溶液中的金属离子。再依次加入20-40份乳酸、20-40份苯酚结晶、0.05-0.1份苯胺蓝；持续对溶液进行加热并使用磁棒搅拌混匀溶液，直至温度达70-90℃，停止加热，制得乳酸酚棉蓝染色液。其中，可以在容器中加入一个温度计来检测温度。容器中盛放的为去离子水，防止水中的金属离子影响染色液的染色效果。在停止加热后，可将制备的乳酸酚棉蓝染色液进行冷却，之后分装到滴瓶中，盖紧瓶盖，室温保存。
实施例1：
一种乳酸酚棉蓝染色液，包括10份pva、20份乳酸、20份苯酚和0.05份苯胺蓝。
对应的，该实施例的乳酸酚棉蓝染色液的制备方法如下：
将10份pva粉末加入50m的去离子水的烧杯里，把烧杯放在加热的可以搅拌的板上，加入一个磁棒用来混匀；烧杯中放入一个温度计来监测温度；依次加入20份乳酸、20份苯酚结晶和0.05份苯胺蓝。加热并混匀溶液直至温度达70、75、80、85或90℃，从加热板上移除。将制备的乳酸酚棉蓝染色液分装到小的滴瓶中，盖紧瓶盖，室温保存。
实施例2：
一种乳酸酚棉蓝染色液，包括12份pva、30份乳酸、30份苯酚和0.075份苯胺蓝。
对应的，该实施例的乳酸酚棉蓝染色液的制备方法如下：
将12份pva粉末加入50m的去离子水的烧杯里，把烧杯放在加热的可以搅拌的板上，加入一个磁棒用来混匀；烧杯中放入一个温度计来监测温度；依次加入30份乳酸、30份苯酚结晶和0.075份苯胺蓝。加热并混匀溶液直至温度达70、75、80、85或90℃，从加热板上移除。将制备的乳酸酚棉蓝染色液分装到小的滴瓶中，盖紧瓶盖，室温保存。
实施例3：
一种乳酸酚棉蓝染色液，包括15份pva、40份乳酸、40份苯酚和0.1份苯胺蓝。
对应的，该实施例的乳酸酚棉蓝染色液的制备方法如下：
将15份pva粉末加入50m的去离子水的烧杯里，把烧杯放在加热的可以搅拌的板上，加入一个磁棒用来混匀；烧杯中放入一个温度计来监测温度；依次加入40份乳酸、40份苯酚结晶和0.1份苯胺蓝。加热并混匀溶液直至温度达72、76、84、87或90℃，从加热板上移除。将制备的乳酸酚棉蓝染色液分装到小的滴瓶中，盖紧瓶盖，室温保存。
以上内容是结合具体的实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换。