本发明涉及修复离子型稀土尾矿的技术，具体的说是一种以乳糖精制废水为原料培养植物促生细菌制备稀土尾矿改良菌剂的技术。属于生物技术领域。
背景技术：
离子型稀土矿床的稀土元素浓度较低，一般是在几十到几百个ppm，这使得其很难有效分离。根据相关报道，使用原位浸取技术(在稀土矿山顶部凿洞，然后用氯化钠、硫酸铵等电解质溶液从山顶注入)，从离子型稀土矿床中获得1t稀土氧化物，需要以300m2面植物为代价，并且其有2000t尾矿排放至附近山谷或河流。稀土资源的开发造成大面积植被破坏，容易引发水土流失，对生态环境的破坏不可忽视，同时，稀土矿开采使用的堆浸、原位浸取等方法会使土壤的活性消失，不利于植物生长。因此，稀土尾矿的有效资源化利用对生态环境的重要性不言而喻。
本专利涉及到的保藏编号为：CCTCC M 2013283的Bacillus amyloliquefaciens H47的解淀粉芽孢杆菌有很好的植物促生特性。根际植物促生细菌是能够定植在植物根系，并对植物生长发育有利的细菌。市售地衣芽孢杆菌和市售短小芽孢杆菌与Bacillus amyloliquefaciens H47组成混合菌剂可协助Bacillus amyloliquefaciens H47促进植物生长。目前培养植物促生细菌的原料成本高昂，不利于植物促生菌剂的大规模应用。因此研究和建立以乳糖精制废水为原料培养植物促生细菌制备稀土尾矿改良菌剂的技术有重要意义。
乳糖废水是乳糖精制过程中产生的废水来自镇江康富生物工程有限公司，其pH在3.8左右，蛋白含量1.2％，乳糖的含量大约为3％。如果直接将其排放到环境中，造成环境污染。
技术实现要素：
本发明以乳糖精制废水为原料培养植物促生细菌制备稀土尾矿改良菌剂的技术。以保藏编号为：CCTCC M 2013283的Bacillus amyloliquefaciens H47的解淀粉芽孢杆菌、市售地衣芽孢杆菌和市售短小芽孢杆菌为植物促生菌剂，通过对乳糖精制废水预处理后加入植物促生菌进行扩大培养，即得到大量具有改善土壤理化状况、促进植物生长的离子型稀土尾矿原位修复的植物促生菌剂。该方法对植物在离子型尾矿的生长有明显的促进作用。乳糖精制废水得到合理利用，变废为宝，价格低廉且简便易行。
本发明的技术方案：
用2013年6月24日保存于中国典型培养物保藏中心的保藏编号为：CCTCC M 2013283的Bacillus amyloliquefaciens H47的解淀粉芽孢杆菌，市售地衣芽孢杆菌，市售短小芽孢杆菌混合植物促生菌剂，以乳糖精制废水为原料培养植物促生细菌，制备稀土尾矿改良菌剂的技术。工艺为：
1)将保藏编号为CCTCC M 2013283的Bacillus amyloliquefaciens H47、市售地衣芽孢杆菌、市售短小芽孢杆菌等菌种活化并制备成植物促生菌剂：
(1)在三种菌种斜面分别取一环在PDA平板上划线接菌丝，在培养箱中30℃培养20小时；
(2)在PDA平板上挑取三种菌种单菌落分别接入装有LB液体培养基的三角瓶中，准备若干份，摇床培养，培养条件：转速200r/min，温度30℃，恒温培养20小时，即得到植物促生菌剂扩大培养的种子。
2)乳糖精制废水预处理：调节乳糖精制废水含水量至60—75％，调节PH至7.0，装在耐高温的塑料袋中，121℃灭菌30分钟。
3)将上述发酵菌液混合后按比例1:10(v/w)接入处理好的乳糖精制废水培养基中，保持水分50—70％，在25—30℃条件下增值2—3天，即得扩大培养的植物促生细菌改良菌剂。
本发明的有益效果：
1)本发明以乳糖精制废水为原料培养植物促生细菌制备的稀土尾矿改良菌剂，可以利用植物促生菌解铵增加土壤肥力。还可作为一种保水剂，促进土壤团粒结构形成，防止土壤板结；破坏土壤毛细现象，防止土壤水分蒸发。
2)本发明用乳糖精制废水为原料培养植物促生细菌，来源广泛价格低廉，菌种增殖速度快，而且还可作为肥料，为植物提供各种营养物质。
3)本发明使得乳糖精制废水得到合理利用，变废为宝。
4)本发明的工艺简单，生产成本低，易于推广。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完善地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
1)将保藏编号为CCTCC M 2013283的Bacillus amyloliquefaciens H47、市售地衣芽孢杆菌、市售短小芽孢杆菌等菌种活化并制备成植物促生菌剂：
(1)在三种菌种斜面分别取一环在PDA平板上划线接菌丝，在培养箱中30℃培养20小时；
(2)在PDA平板上挑取三种菌种单菌落分别接入装有50ml LB液体培养液的250ml三角瓶中，每个菌接种12个，摇床培养，培养条件：转速175r/min，温度30℃，恒温培养35小时，即得到植物促生菌剂扩大培养的种子。
2)乳糖精制废水预处理：称取3千克乳糖精制废水调节含水量至60％，调节PH至7.0，装在耐高温的塑料袋中，121℃灭菌30分钟。
3)将上述发酵菌液按1:1:1混合后按比例1:10(v/w)接入处理好的乳糖精制废水培养基中，保持水分50％，在30℃条件下增值2—3天，即得扩大培养的植物促生细菌改良菌剂。
实施例2
1)将保藏编号为CCTCC M 2013283的Bacillus amyloliquefaciens H47、市售地衣芽孢杆菌、市售短小芽孢杆菌等菌种活化并制备成植物促生菌剂：
(1)在三种菌种斜面分别取一环在PDA平板上划线接菌丝，在培养箱中30℃培养18小时；
(2)在PDA平板上挑取三种菌种单菌落分别接入装有50ml LB液体培养液的250ml三角瓶中，每个菌接种12个，摇床培养，培养条件：转速220r/min，温度32℃，恒温培养28小时，即得到植物促生菌剂扩大培养的种子。
2)乳糖精制废水预处理：称取3千克乳糖精制废水调节含水量至70％，调节PH至7.0，装在耐高温的塑料袋中，121℃灭菌30分钟。
3)将上述发酵菌液按1:2:1混合后按比例1:10(v/w)接入处理好的乳糖精制废水培养基中，保持水分60％，在30℃条件下增值2—3天，即得扩大培养的植物促生细菌改良菌剂。
实施例3
1)将保藏编号为CCTCC M 2013283的Bacillus amyloliquefaciens H47、市售地衣芽孢杆菌、市售短小芽孢杆菌等菌种活化并制备成植物促生菌剂：
(1)在三种菌种斜面分别取一环在PDA平板上划线接菌丝，在培养箱中30℃培养22小时；
(2)在PDA平板上挑取三种菌种单菌落分别接入装有50ml LB液体培养液的250ml三角瓶中，每个菌接种12个，摇床培养，培养条件：转速200r/min，温度26℃，恒温培养30小时，即得到植物促生菌剂扩大培养的种子。
2)乳糖精制废水预处理：称取3千克乳糖精制废水调节含水量65％，调节PH至7.0，装在耐高温的塑料袋中，121℃灭菌30分钟。
3)将上述发酵菌液按1:1:2混合后按比例1:10(v/w)接入处理好的乳糖精制废水培养基中，保持水分55％，在30℃条件下增值2—3天，即得扩大培养的植物促生细菌改良菌剂。
实施例4
1)将保藏编号为CCTCC M 2013283的Bacillus amyloliquefaciens H47、市售地衣芽孢杆菌、市售短小芽孢杆菌等菌种活化并制备成植物促生菌剂：
(1)在三种菌种斜面分别取一环在PDA平板上划线接菌丝，在培养箱中30℃培养21小时；
(2)在PDA平板上挑取三种菌种单菌落分别接入装有50ml LB液体培养液的250ml三角瓶中，每个菌接种12个，摇床培养，培养条件：转速180r/min，温度26℃，恒温培养30小时，即得到植物促生菌剂扩大培养的种子。
2)乳糖精制废水预处理：称取3千克乳糖精制废水调节含水量至60％，调节PH至7.0，装在耐高温的塑料袋中，121℃灭菌30分钟。
3)将上述发酵菌液按2:1:1混合后按比例1:10(v/w)接入处理好的乳糖精制废水培养基中，保持水分50％，在30℃条件下增值2—3天，即得扩大培养的植物促生细菌改良菌剂。
本发明中，混合菌的比例、接种量、乳糖精制废水培养基含水量等等不限于实施例所举的组合，可根据实际情况选择不同的组合。
以上所述仅为本发明的较佳实例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的思路和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。