一类新型1－氨基－2－羟基－3－四氢咔唑－丙烷类化合物及其抗肿瘤用途的制作方法

本发明发现一类新型1-氨基-2-羟基-3-四氢咔唑-丙烷类化合物，该类化合物可抑制多种肿瘤细胞的体内外增殖；本发明发现该类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用，属于医药技术领域。

背景技术：

恶性肿瘤是严重威胁人类健康的重大疾病，而传统化疗药物的疗效不佳，寻找新的抗肿瘤药物是医学研究的当务之急。天然产物在抗肿瘤药物发现过程中有着重要的作用和意义。本发明通过对天然产物来源的化合物进行筛选，发现了一类新型1-氨基-2-羟基-3-四氢咔唑-丙烷类化合物，该类化合物对多种肿瘤细胞具体显著治疗作用，尤其是胃肠道肿瘤，效果明显。

技术实现要素：

本发明的目的是针对上述技术问题提供了一类可抑制肿瘤的1-氨基-2-羟基-3-四氢咔唑-丙烷类化合物。

本发明另一个目的是提供上述化合物在制药中的应用。

本发明在体外细胞水平上寻找先导化合物，发现了一类结构新颖的化合物，以细胞学实验和小鼠体内实验证实了该类化合物可抑制肿瘤细胞的体内外增殖。本发明可为抗肿瘤药物的开发提供先导化合物。

本发明的目的是通过下列技术方案实现的：

一类新型1-氨基-2-羟基-3-四氢咔唑-丙烷类化合物，其结构如通式(i)所示：

其中：

r代表c4-c7的环烷基、取代环烷基、芳基或取代芳基，所述取代基为烷基、链烯基、烷氧基、亚甲二氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、卤素、硝基、羟基、羟烷基、巯基、氰基、羧基、甲酰基、氨基、烷氨基或二烷基氨基。

本发明的技术方案为：首先在细胞水平上进行初筛、复筛，发现一类体外可抑制肿瘤细胞的化合物；随后以小鼠体内实验证实该类化合物对肿瘤细胞体内生长的作用。

本发明的有益效果：

本发明在细胞水平上评价天然产物的抗肿瘤作用，随后，以小鼠体内实验验证该化合物对肿瘤细胞体内生长的抑制。经初筛，复筛，发现了一类1-氨基-2-羟基-3-四氢咔唑-丙烷类化合物，对多种肿瘤细胞，尤其是胃肠道肿瘤细胞，具有良好的抑制作用。本发明筛选出的1-氨基-2-羟基-3-四氢咔唑-丙烷类化合物可为制备抗肿瘤药提供更多选择。

附图说明

图1：4号化合物抑制多种肿瘤细胞活性的抑制曲线(n＝3)；

图2：14号化合物抑制多种肿瘤细胞活性的抑制曲线(n＝3)；

图3：14号化合物抑制小鼠s180肉瘤的体内增殖(n＝3)。

具体实施方式：

以下结合附图说明

一、检测方法

1.细胞实验

(1)取处于指数生长期状态良好的人肿瘤细胞一瓶，消化后计数，取180μl细胞悬液接种于96孔板上，2-4×10³个/孔，置恒温co2培养箱中培养24小时。

(2)第二天换入新鲜的培养液(含10％血清)，加入不同浓度的受试样品，继续培养72小时。

(3)将mtt试剂加入96孔板中，20μl/孔，培养箱中反应4小时。

(4)吸去上清液，加入dmso，150μl/孔，平板摇床上振摇5分钟。用酶联免疫检测仪在波长为570nm处测定每孔的吸光值，并计算细胞抑制。

2.小鼠体内实验

(1)选择肿瘤生长旺盛且无溃破的荷瘤小鼠，颈椎脱臼处死，在无菌条件下(超净台或接种罩)，用碘酒、酒精或新洁尔灭消毒动物皮肤，切开皮肤，剥离肿瘤。

(2)将瘤组织剪切成1.5mm3左右的小块，用套管针接种于动物一侧或双侧腋窝皮下。

(3)7天后处死动物，称体重，解剖剥离瘤块，称瘤重。

(4)计算体内抑瘤率，按下式计算

二、实验结果

1.筛选得到的该类化合物结构通式如下：

2.10μg/ml的样品对多种肿瘤细胞的抑制率(72h，％)如下：

3.样品对多种肿瘤细胞的抑制曲线及ic50值(72h)

根据初筛结果，选择效果较好的4、14号样品进行复筛，作出样品对肿瘤细胞的抑制曲线。4号样品对四种肿瘤细胞的抑制曲线如图1所示，14号样品对四种肿瘤细胞的抑制曲线如图2所示。样品的ic50值(μm)如下(n＝3)：

4.研究在细胞水平上效果最好的14号样品对于小鼠s180肉瘤的作用。设高(40mg/kg)、中(20mg/kg)、低(10mg/kg)三组剂量，每2天腹腔注射给药一次，连续给药10d。于末次给药后24h称体重，剖取瘤块，称瘤重，计算抑瘤率，给药组结果与对照组相比较，进行统计学检验分析。15mg/kg的紫杉醇作为阳性对照。统计结果见图3。可见，14号样品对小鼠s180肉瘤具有较强的抑制作用，其中40mg/kg剂量作用较为明显，并呈现剂量依赖性。对于s180肉瘤，高剂量组的药效约为阳性药紫杉醇的83％。