一种小球藻培养基的制作方法

本发明属于藻类生物培养领域，特别涉及一种小球藻培养基。

背景技术：

小球藻(chlorellavulgaris)是一种生长迅速的藻类，属于绿藻门小球藻属普生性单细胞绿藻。小球藻是高效的光合植物，以光合自养生长繁殖。因为小球藻细胞内含有丰富的蛋白质、多糖、脂类、维生素、矿物质、叶绿素及小球藻生长因子等，所以被认为是一种具有重要经济价值的生物资源，随着生物技术的迅猛发展，小球藻在许多领域都得到了广泛的应用和认可。

作为第一个被人工培养的微藻，小球藻自二十世纪六十年代培养以来，培养方式已从当初的自养形式，向混养和异养形式过渡。应用范围也涉及动物饵料、化妆品原料、保健品、生物质能源、油脂原料、治理污水、治理有害气体等许多方面，可以说是渗透到了人们日常的生产和生活。

在水产养殖领域，尤其是水产生物饵料培养领域，小球藻是水产养殖中鱼虾的优质开口饵料，并且有改良水体，快速有效抑制养殖水体中的亚硝酸盐氮、氨氮等有害物质的含量，同时可以提高水体溶氧的浓度，维持水体适宜ph值，增强养殖水体的稳定性，所以在养殖生产中越来越受到重视。

在小球藻培养过程中，培养基对于小球藻的培养具有至关重要的作用，目前小球藻常用的培养基是bg11培养基，bg11培养基的配方为nano31.5g/l，k2hpo4.3h2o0.04g/l，mgso4.7h2o0.075g/l，cacl2.2h2o0.036g/l，柠檬酸0.006g/l，柠檬酸铁胺0.006g/l，edtana20.001g/l，na2co30.02g/l，微量元素溶液1ml/l(由h3bo3、mncl2.4h2o、znso4.7h2o、na2mno4.2h2o、cuso4.5h2o、co(no3)2.6h2o配制)，加纯净水至1l，用hcl和naoh调节ph值至7.0。购买bg11培养基价格比较昂贵；配制时成分复杂，配制过程复杂，不适用于养殖一线和基层的简易小球藻培养方式。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种小球藻培养的培养基，本发明的培养基配制方便，价格低廉，适用于养殖一线和基层的简易小球藻培养方式；并且培养效果优于常用的bg11培养基。

在一种实施方式中，本发明提供一种小球藻培养基，所述培养基包括：葡萄糖0.2-2g/l，nano30.2-1g/l，k2hpo4.3h2o0.05-0.10g/l，mgso4.7h2o0.05-0.10g/l，cacl2.2h2o0.01-0.05g/l，土壤浸出液20-80ml/l。土壤浸出液就是用水溶解的土壤中能溶于水的物质所得到的溶液，土壤中含有多种物质，诸如一些无机盐等等。

在一种实施方式中，本发明提供一种小球藻培养基，所述培养基包括：葡萄糖0.5-2g/l，nano30.5-1g/l，k2hpo4.3h2o0.05-0.10g/l，mgso4.7h2o0.05-0.10g/l，cacl2.2h2o0.01-0.05g/l，土壤浸出液20-50ml/l。

在一种实施方式中，本发明提供一种小球藻培养基，所述培养基包括：葡萄糖0.5-2g/l，nano30.5-1g/l，k2hpo4.3h2o0.05-0.10g/l，mgso4.7h2o0.05-0.10g/l，cacl2.2h2o0.01-0.05g/l，土壤浸出液50-80ml/l。

在一种实施方式中，本发明提供一种小球藻培养基，所述培养基包括上述培养基和bg11培养基。

在一种实施方式中，本发明提供一种小球藻培养基，所述培养基包括上述培养基和bg11培养基，它们的比例为1:1-2:1。

本发明的小球藻培养基成分简单，配制过程简单，成本低廉，适用于养殖一线和基层的简易小球藻培养方式。与常用的bg11培养基相比，培养效果更好，产量更高。

附图说明

为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请中记载的一些实施例，对于本领域普通技术人员来说，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。

图1为四种培养基培养小球藻的效果对比图。

具体实施方式

为了使本领域技术领域人员更好地理解本申请中的技术方案，下面将结合下面结合实施例对本发明作进一步说明，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都应当属于本申请保护的范围。

实施例1

本发明方法所述的小球藻(chlorellavulgaris)，购于中国科学院水生生物研究所藻种库。选用20l透明桶培养小球藻，使用bg11培养基，进行小球藻培养，接种小球藻藻量为15％，总培养藻液体积为20l，接种后的初始od值为0.154，平均气温为24.5℃，培养1天、2天、3天和5天后藻类的od值分别为0.196、0.247、0.463、0.981。其中a培养基的具体配方为葡萄糖0.5g/l，nano31g/l，k2hpo4.3h2o0.05g/l，mgso4.7h2o0.075g/l，cacl2.2h2o0.015g/l，土壤浸出液20ml/l，加纯净水至1l。

实施例2

本发明方法所述的小球藻(chlorellavulgaris)，购于中国科学院水生生物研究所藻种库。选用20l透明桶培养小球藻，使用bg11：a培养基＝1:1，进行小球藻培养，接种小球藻藻量为15％，总培养藻液体积为20l，接种后的初始od值为0.151，平均气温为24.5℃，培养1天、2天、3天和5天后藻类的od值分别为0.177、0.298、0.563、1.121。其中a培养基的具体配方为葡萄糖0.5g/l，nano31g/l，k2hpo4.3h2o0.05g/l，mgso4.7h2o0.075g/l，cacl2.2h2o0.015g/l，土壤浸出液20ml/l，加纯净水至1l。

实施例3

本发明方法所述的小球藻(chlorellavulgaris)，购于中国科学院水生生物研究所藻种库。选用20l透明桶培养小球藻，使用bg11：a培养基＝1:2，进行小球藻培养，接种小球藻藻量为15％，总培养藻液体积为20l，接种后的初始od值为0.153，平均气温为24.5℃，培养1天、2天、3天和5天后藻类的od值分别为0.206、0.403、0.768、1.323。其中a培养基的具体配方为葡萄糖0.5g，nano31g/l，k2hpo4.3h2o0.05g/l，mgso4.7h2o0.075g/l，cacl2.2h2o0.015g/l，土壤浸出液20ml/l，加纯净水至1l。

实施例4

本发明方法所述的小球藻(chlorellavulgaris)，购于中国科学院水生生物研究所藻种库。选用20l透明桶培养小球藻，使用a培养基，进行小球藻培养，接种小球藻藻量为15％，总培养藻液体积为20l，接种后的初始od值为0.150，平均气温为24.5℃，培养1天、2天、3天和5天后藻类的od值分别为0.232、0.504、0.808、1.421。其中a培养基的具体配方为葡萄糖0.5g，nano31g/l，k2hpo4.3h2o0.05g/l，mgso4.7h2o0.075g/l，cacl2.2h2o0.015g/l，土壤浸出液20ml/l，加纯净水至1l。

实施例1、2、3、4四种培养基培养的小球藻的效果对比见图1。从图1可看出：与bg11培养基相比较，a培养基所占比例越大，小球藻生长越好。

实施例5

本发明方法所述的小球藻(chlorellavulgaris)，购于中国科学院水生生物研究所藻种库。选用50l白色塑料桶培养小球藻，使用a培养基，进行小球藻培养，接种小球藻藻量为10％，总培养藻液体积为50l，接种后的初始od值为0.130，平均气温为24.5℃，培养1天、2天、3天和5天后藻类的od值分别为0.202、0.315、0.758、1.491。其中a培养基的具体配方为葡萄糖2g/l，nano30.2g/l，k2hpo4.3h2o0.05g/l，mgso4.7h2o0.05g/l，cacl2.2h2o0.01g/l，土壤浸出液50ml/l，加纯净水至1l。

实施例6

本发明方法所述的小球藻(chlorellavulgaris)，购于中国科学院水生生物研究所藻种库。选用50l白色塑料桶培养小球藻，使用a培养基，进行小球藻培养，接种小球藻藻量为20％，总培养藻液体积为50l，接种后的初始od值为0.183，平均气温为24.5℃，培养1天、2天、3天和5天后藻类的od值分别为0.276、0.580、0.937、1.549。其中a培养基的具体配方为葡萄糖0.2g/l，nano30.5g/l，k2hpo4.3h2o0.1g/l，mgso4.7h2o0.10g/l，cacl2.2h2o0.05g/l，土壤浸出液80ml/l，加纯净水至1l。

应该理解到披露的本发明不仅仅限于描述的特定的方法、方案和物质，因为这些均可变化。还应理解这里所用的术语仅仅是为了描述特定的实施方式方案的目的，而不是意欲限制本发明的范围，本发明的范围仅受限于所附的权利要求。

本领域的技术人员还将认识到，或者能够确认使用不超过常规实验，在本文中所述的本发明的具体的实施方案的许多等价物。这些等价物也包含在所附的权利要求中。