含有酞嗪-1(2H)-酮结构的PARP抑制剂、其制法及医药用途的制作方法

本发明涉及药物化学领域，具体涉及一类4-(4-氟-3-(1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡嗪-2-羰基)苄基)酞嗪-1(2h)-酮类衍生物，它们的制备方法，以及含有这些化合物的药物组合物及其在抗肿瘤方面的用途。

背景技术：

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(parp)是存在于多数真核细胞中的一个多功能蛋白质翻译后修饰酶，目前该家族已被发现的亚型共18个，其中parp-1所占比例最大，涉及到对中风、神经退行性疾病、心肌缺血、癌症、炎症和糖尿病等疾病的治疗，在dna损伤修复中起主导作用。parp-1与parp-2结构非常相似，许多抑制剂对两者同时有效，也有对parp-1/-2选择性抑制研究的报道，但损伤修复过程近90％的功能是由parp-1完成的。parp-1能识别并结合到dna发生损伤的缺口部位，并迅速催化nad⁺分解成尼克酰胺和adp-核糖，再以adp-核糖为底物，使核受体蛋白与adp-核糖形成多聚物从而启动dna的损伤修复。parp-1抑制剂作为增敏剂来提高抗肿瘤药物疗效具有良好的前景，由于大部分抗肿瘤药都是以造成dna损伤的机制来抑制肿瘤细胞的生长，而parp-1可以修复损伤的dna使被抑制的肿瘤细胞产生一定的耐药性，因此通过parp-1抑制剂与化疗药物的联用能达到降低给药量和增强疗效的作用。同时，有临床前研究表明，parp-1抑制剂在brca1/2基因突变的肿瘤中发挥了合成致死的作用，使其除了可作为一般肿瘤的放化疗增敏剂外，还可作为某些如brca1/2突变肿瘤的单一治疗剂。奥拉帕尼于2014年由美国fda和欧洲ema批准上市，这是第一个临床应用的parp-1抑制剂。

技术实现要素：

本发明公开了一类通式(i)的化合物，药效学试验结果显示，本发明的化合物或其药学上可接受的盐可作为肿瘤的单一治疗剂，或者与其它抗肿瘤药物联用，从而达到提高现有抗肿瘤药物疗效并降低剂量和毒性的作用。

其中r可以是单取代、双取代或三取代，r代表h、f、cl、br、och3、ch3、或

r优选代表f、ch3、或

本发明优选的部分化合物如下：

本发明通式(i)化合物可用下列方法制备：

其中当r为h、f、cl、br、och3、ch3时，包括：

如果从起始原料ii制备，方法包括：

其中：

由化合物ii与甘氨酸经缩合-环合反应制备化合物iii的过程，所用的酸选自3mol/l～10mol/l盐酸，优先5mol/l～6mol/l盐酸；反应温度为80℃～115℃，优先95℃～105℃。

由化合物iii与1,2-二溴乙烷反应制备化合物iv的过程，所用的碱为20％～60％氢氧化钠，优先40％～50％氢氧化钠；相转移催化剂选自四丁基溴化铵、四丁基碘化铵、苄基三乙基氯化铵、四丁基硫酸氢铵、三辛基甲基氯化铵、十二烷基三甲基氯化铵或十四烷基三甲基氯化铵，优选四丁基溴化铵；反应溶剂选自n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺或二甲亚砜，优选n,n-二甲基甲酰胺；反应温度为10℃～50℃，优选20℃～30℃。

由化合物iv与化合物v反应制备化合物i的过程，所用的缩合剂选自六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷(pybop)、1-羟基苯并三唑(hobt)/1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(edci)、二环己基碳二亚胺(dcc)或n,n'-羰基二咪唑(cdi)，优先pybop；缚酸剂选自三乙胺、n,n-二异丙基乙胺(diea)、4-二甲氨基吡啶(dmap)、吡啶、醋酸钠、碳酸钠或碳酸钾，优选diea。反应溶剂选自n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺或二甲亚砜，优选n,n-二甲基甲酰胺；反应温度为10℃～50℃，优选20℃～30℃。

当r代表时，本发明的部分化合物(i)可用下列方法制备(如i-9)：

如果从起始原料iv制备，包括：

由化合物vi经还原制备化合物vii的过程，所用的还原剂选自铁粉/浓盐酸、铁粉/氯化铵、锌粉/浓盐酸、氯化亚锡、氢气/钯碳、甲酸铵/钯碳、氢气/雷尼镍或水合肼/雷尼镍，优选氢气/钯碳；溶剂选自甲醇、乙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、乙腈或任意两者混合溶剂，优选甲醇。

由化合物vii与n-苄氧羰基甘氨酸反应制备化合物viii的过程，所用的缩合剂选自pybop、hobt/edci、dcc或cdi，优先cdi；溶剂选自二氯甲烷、氯仿、乙腈、四氢呋喃、1,4-二氧六环、n,n-二甲基甲酰胺或乙二醇二甲醚，优选乙腈；反应温度为25℃～80℃，优选40℃～50℃。

由化合物viii经过脱除苄氧羰基制备化合物ix的过程，所用的还原剂选自氢气/钯碳或甲酸铵/钯碳，优选氢气/钯碳；溶剂选自甲醇、乙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、乙腈或任意两者混合溶剂，优选甲醇。

由化合物ix与1,2-二溴乙烷反应制备化合物x的过程，所用的碱为20％～60％氢氧化钠，优先40％～50％氢氧化钠；相转移催化剂选自四丁基溴化铵、四丁基碘化铵、苄基三乙基氯化铵、四丁基硫酸氢铵、三辛基甲基氯化铵、十二烷基三甲基氯化铵或十四烷基三甲基氯化铵，优选四丁基溴化铵；反应溶剂选自n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺或二甲亚砜，优选n,n-二甲基甲酰胺；反应温度为10℃～50℃，优选20℃～30℃。

由化合物x与化合物v反应制备目标化合物i-9的过程，所用的缩合剂选自pybop、hobt/edci、dcc或cdi，优先pybop；缚酸剂选自三乙胺、diea、dmap、吡啶、醋酸钠、碳酸钠或碳酸钾，优选diea；反应溶剂选自n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺或二甲亚砜，优选n,n-二甲基甲酰胺；反应温度为10℃～50℃，优选20℃～30℃。

当r代表时，本发明的部分化合物(i)可用下列方法制备(如i-10)：

由化合物x与三氯氧磷反应制备化合物xi的过程，反应溶剂选自乙腈、二氧六环、甲苯或三氯氧磷，优选三氯氧磷；反应温度为80℃～120℃，优选100℃～110℃。

由化合物xi与化合物v反应制备化合物xii的过程，所用的缩合剂选自pybop、hobt/edci、dcc或cdi，优先pybop；缚酸剂选自三乙胺、diea、dmap、吡啶、醋酸钠、碳酸钠或碳酸钾，优选diea；反应溶剂选自n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺或二甲亚砜，优选n,n-二甲基甲酰胺；反应温度为10℃～50℃，优选20℃～30℃。

由化合物xii通过pinner脒合成法制备目标化合物i-10的过程，是将化合物xii溶于溶剂中，通入氯化氢气体，反应结束后减压蒸除溶剂，残留物中加入溶剂溶解，再加入氨源进行氨解反应得到i-10。所述的溶剂选自乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇、乙醇、四氢呋喃、乙腈或任意两者混合溶剂，优选乙醇和二氯甲烷的混合溶剂；氨源选自氨气、碳酸铵、甲酸铵、氯化铵或硫酸铵，优先氨气或碳酸铵。

由化合物(i)经成盐制备化合物i·a的过程，反应物(a)为氯化氢、溴化氢、硫酸、磷酸、碳酸、草酸、柠檬酸、琥珀酸、酒石酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、马来酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸或阿魏酸；溶剂优选为甲醇、乙醇、二氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯、甲苯或四氢呋喃，或任意几种的混合溶剂。

本发明还公开了一种药物组合物，其包括药物有效剂量的本发明的化合物(i)或其盐和药学上可接受的载体。

本发明所述的化合物可以添加药学上可接受的载体制成常见的药用制剂，如片剂、胶囊、粉剂、糖浆、液剂、悬浮剂、冻干粉针、针剂，可以加入香料、甜味剂、液体或固体填料或稀释剂等常用药用辅料。

本发明所述的化合物在临床上的给药方式可以采用口服、注射等方式。

一般地，本发明的化合物用于治疗时，人用剂量范围为1mg～1000mg/天。也可根据剂型的不同和疾病严重程度，使用剂量超出该范围。

本发明部分化合物的药理学实验及结果如下：

检测化合物在酶水平抑制parp-1的ic50值

实验方法

取出已经预包被组蛋白的96孔板中，每孔加入以下酶反应体系及不同浓度的抑制剂，包括：50μl的反应缓冲液(tris*hcl,ph8.0)，nad⁺，生物素标记的活化dna，parp-1酶及抑制剂；在室温下反应1h以后，每孔中加入50μl亲和素标记的hrp，反应30min；再加入100μl的hrp底物，在spectramaxm5仪器上检测化学发光值。

药物浓度按照三倍浓度梯度稀释，每个浓度均检测两个复孔。将药物浓度作为横坐标，各浓度对应的酶活性百分率为纵坐标，使用graphpadprism5做非线性回归，计算得到各化合物抑制parp-1的ic50值。

实验结果见表1

表1.部分受试化合物抑制parp-1和肿瘤细胞的ic50

具体实施方式

实施例1

4-(4-氟-3-(1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑[1,2-a]吡嗪-2-羰基)苄基)酞嗪-1(2h)-酮(i-1)的合成(1h-苯并[d]咪唑-2-基)甲胺盐酸盐(iii-1)

将邻苯二胺(ii-1)(2.0g,18.49mmol)加入100ml反应瓶中，加入5.5mol/l盐酸20ml，搅拌溶解，100℃回流反应1小时，加入甘氨酸(2.77g,36.90mmol)，加热回流反应48小时。tlc监测(二氯甲烷:甲醇＝10:1)原料完全反应，冷却至室温，析出大量浅绿色固体，抽滤，少量冰乙醇洗涤滤饼，干燥得白色固体(iii-1)3.23g，收率95.1％。m.p.:>250℃.¹h-nmr(300mhz,dmso-d6)δ(ppm):8.97(brs,2h,nh2),7.96-7.65(m,2h,arh),7.64-7.19(m,2h,arh),4.46(s,2h,ch2),1.21(s,1h,nh).¹h-nmr(300mhz,dmso-d6+d2o)δ(ppm):7.80-7.54(m,2h,arh),7.54-7.21(m,2h,arh),4.37(s,2h,ch2)

1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑[1,2-a]吡嗪(iv-1)

在100ml三颈瓶中，加入naoh(15g,0.38mol)和15ml水，机械搅拌，溶清后加入iii-1(2.63g,14.32mmol)，四丁基溴化铵(185mg,0.57mmol)，25℃搅拌反应1小时，滴加1,2-二溴乙烷(5.38g,28.64mmol)溶于50mldmf所得的溶液，滴毕，25℃反应4小时，抽滤除去无机盐，减压浓缩得白色固体，柱层析(二氯甲烷:甲醇:氨水＝50:1:0.05～40:1:0.05)纯化，得产品(iv-1)1.25g，收率50.4％。m.p.:131-132℃.¹h-nmr(300mhz,cdcl3)δ(ppm):7.75-7.66(m,1h,arh),7.38-7.27(m,3h,arh),4.34(s,2h,cch2nh),4.12(t,j＝5.6hz,2h,nch2ch2nh),3.42(t,j＝5.6hz,2h,nch2ch2nh).ms(esi(+)70v)m/z:174.1[m+h]⁺.

4-(4-氟-3-(1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑[1,2-a]吡嗪-2-羰基)苄基)酞嗪-1(2h)-酮(i-1)

将中间体v(534mg,1.79mmol)，中间体iv-1(310mg,1.79mmol)和pybop(1.12g,2.15mmol)加入100ml反应瓶中，加入20mldmf搅拌溶解，再加入diea(0.81g，6.27mmol)，25℃反应。tlc(二氯甲烷:甲醇＝20:1)监测原料反应完毕，将反应液倒入100ml水中，析出大量黄色固体，搅拌10min，抽滤，水洗，干燥，粗品柱层析(二氯甲烷:甲醇＝100:1～80:1梯度洗脱)纯化，得产品(i-1)420mg，收率51.7％。m.p.:158～160℃.¹h-nmr(300mhz,dmso-d6)δ(ppm):12.60(s,1h,conh),8.25(t,j＝6.7hz,1h,arh),8.01-7.77(m,3h,arh),7.66-7.40(m,4h,arh),7.37-7.15(m,3h,arh),5.03(brs,1h,1/2nch2arh),4.69(s,1h,1/2nch2arh),4.43-4.29(m,2h,nch2ch2n),4.24(s,2h,arch2),4.07-3.97(m,1h,1/2nch2ch2n),3.81-3.69(m,1h,1/2nch2ch2n).hrms(esi):m/z[m+h]⁺.calcdforc26h20fn5o2:454.1674；found:454.1673.

实施例2

4-(4-氟-3-(7-氟-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑[1,2-a]吡嗪-2-羰基)苄基)酞嗪-1(2h)-酮(i-2)的合成(6-氟-1h-苯并[d]咪唑-2-基)甲胺盐酸盐(iii-2)

以4-氟邻苯二胺(ii-2)(3.17g,25.13mmol)和甘氨酸(3.77g,50.22mmol)为原料，类似于iii-1的制备方法，得到(iii-2)2.6g，收率51.3％。m.p.:200-204℃.¹h-nmr(300mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.61(brs,2h,nh2),8.85(s,1h,nh),7.79-7.59(m,1h,arh),7.59-7.38(m,1h,arh),7.27-7.04(m,1h,arh),4.36(s,2h,ch2).¹h-nmr(300mhz,dmso-d6+d2o)δ(ppm):7.67-7.56(m,1h,arh),7.49-7.36(m,1h,arh),7.18-7.06(m,1h,arh),4.29(s,2h,ch2).

7-氟-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑[1,2-a]吡嗪(iv-2)

以中间体iii-2(1.13g,5.60mmol)和1,2-二溴乙烷(4.23g,22.52mmol)为原料，类似于iv-1的制备方法，得到(iv-2)0.46g，收率43.0％。m.p.:>250℃.¹h-nmr(300mhz,cdcl3)δ(ppm):7.66-7.31(m,1h,arh),7.25-6.92(m,2h,arh),4.29(s,2h,cch2nh),4.14-4.01(m,2h,nch2ch2nh),3.47-3.32(m,2h,nch2ch2nh).

4-(4-氟-3-(7-氟-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑[1,2-a]吡嗪-2-羰基)苄基)酞嗪-1(2h)-酮(i-2)

以中间体v(406mg,1.36mmol)和中间体iv-2(260mg,1.36mmol)为原料，类似于i-1的制备方法，得产品(i-2)320mg，收率49.9％。m.p.:142～144℃.¹h-nmr(300mhz,dmso-d6)δ(ppm):12.59(s,1h,conh),8.32-8.16(m,1h,arh),8.05-7.73(m,3h,arh),7.69-7.18(m,5h,arh),7.17-6.94(m,1h,arh),5.02(brs,1h,1/2nch2arh),4.67(s,1h,1/2nch2arh),4.50-4.29(m,2h,nch2ch2n),4.23(s,2h,arch2),4.08-3.88(m,1h,1/2nch2ch2n),3.82-3.68(m,1h,1/2nch2ch2n).hrms(esi):m/z[m+h]⁺.calcdforc26h19f2n5o2:472.1580；found:472.1582.

实施例3

4-(4-氟-3-(7-氯-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑[1,2-a]吡嗪-2-羰基)苄基)酞嗪-1(2h)-酮(i-3)的合成(6-氯-1h-苯并[d]咪唑-2-基)甲胺盐酸盐(iii-3)

以4-氯邻苯二胺(ii-3)(2g,14.03mmol)和甘氨酸(2.11g,28.11mmol)为原料，类似于iii-1的制备方法，得到(iii-3)2.49g，收率81.4％。m.p.:214-219℃.¹h-nmr(300mhz,dmso-d6)δ(ppm):11.80(brs,1h,nh),8.91(s,2h,nh2),7.80-7.73(m,1h,arh),7.73-7.64(m,1h,arh),7.38-7.28(m,1h,arh),4.37(s,2h,ch2).¹h-nmr(300mhz,dmso-d6+d2o)δ(ppm):7.72-7.66(m,1h,arh),7.66-7.58(m,1h,arh),7.33-7.24(m,1h,arh),4.31(s,2h,ch2).

7-氯-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑[1,2-a]吡嗪(iv-3)

以中间体iii-3(1.96g,8.99mmol)和1,2-二溴乙烷(6.76g,35.98mmol)为原料，类似于iv-1的制备方法，得到深红色油状物(iv-3)0.78g，收率41.7％。¹h-nmr(300mhz,cdcl3)δ(ppm):7.70-7.56(m,1h,arh),7.33-7.17(m,2h,arh),4.30(s,2h,cch2nh),4.06(dd,j1＝11.5hz,j2＝5.8hz,2h,nch2ch2nh),3.40(t,j＝5.5hz,2h,nch2ch2nh).

4-(4-氟-3-(7-氯-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑[1,2-a]吡嗪-2-羰基)苄基)酞嗪-1(2h)-酮(i-3)

以中间体v(677mg,2.27mmol)和中间体iv-3(470mg,2.27mmol)为原料，类似于i-1的制备方法，得产品(i-3)570mg，收率51.4％。m.p.:158～160℃.¹h-nmr(300mhz,dmso-d6)δ(ppm):12.62(s,1h,conh),8.34-8.18(m,1h,arh),7.98-7.81(m,3h,arh),7.71-7.45(m,4h,arh),7.35-7.23(m,2h,arh),5.05(brs,1h,1/2nch2arh),4.70(s,1h,1/2nch2arh),4.45-4.31(m,2h,nch2ch2n),4.25(s,2h,arch2),4.12-3.99(m,1h,1/2nch2ch2n),3.85-3.68(m,1h,1/2nch2ch2n).hrms(esi):m/z[m+h]⁺.calcdforc26h19clfn5o2:488.1284；found:488.1285.

实施例4

4-(4-氟-3-(7-甲基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑[1,2-a]吡嗪-2-羰基)苄基)酞嗪-1(2h)-酮(i-5)的合成(6-甲基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)甲胺盐酸盐(iii-5)

以4-甲基邻苯二胺(ii-5)(2g,16.37mmol)和甘氨酸(2.46g,32.77mmol)为原料，类似于iii-1的制备方法，得到(iii-5)2.8g，收率86.4％。m.p.:219-221℃.¹h-nmr(300mhz,dmso-d6)δ(ppm):8.24(brs,2h,nh2),7.43(d,j＝7.7hz,1h,arh),7.35(s,1h,arh),7.01(d,j＝7.6hz,1h),4.25(s,2h,ch2),3.32(s,1h,nh),2.39(s,3h,ch3).¹h-nmr(300mhz,dmso-d6+d2o)δ(ppm):7.44(d,j＝8.1hz,1h,arh),7.34(s,1h,arh),7.04(d,j＝8.5hz,1h,arh),4.22(s,2h,ch2),2.35(s,3h,ch3).

7-氯-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑[1,2-a]吡嗪(iv-5)

以中间体iii-5(2.8g,14.17mmol)和1,2-二溴乙烷(10.65g,56.80mmol)为原料，类似于iv-1的制备方法，得到(iv-5)1.05g，收率39.6％。m.p.:184-186℃.¹h-nmr(300mhz,cdcl3+d2o)δ(ppm):7.65-7.40(m,1h,arh),7.29-7.16(m,1h,arh),7.13-7.04(m,1h,arh),4.27(s,2h,cch2nh),4.16-3.89(m,2h,nch2ch2nh),3.43-3.25(m,2h,nch2ch2nh),2.47(s,3h,ch3).

4-(4-氟-3-(7-甲基-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑[1,2-a]吡嗪-2-羰基)苄基)酞嗪-1(2h)-酮(i-5)

以中间体v(988mg,3.31mmol)和中间体iv-5(620mg,3.31mmol)为原料，类似于i-1的制备方法，得产品(i-5)750mg，收率48.5％。m.p.:164-166℃.¹h-nmr(300mhz,dmso-d6)δ(ppm):12.60(s,1h,conh),8.25(t,j＝6.6hz,1h,arh),7.97-7.79(m,3h,arh),7.51-7.25(m,5h,arh),7.09-6.97(m,1h,arh),5.00(brs,1h,1/2nch2arh),4.66(s,1h,1/2nch2arh),4.34-4.27(m,2h,nch2ch2n),4.21(s,2h,arch2),4.03-3.93(m,1h,1/2nch2ch2n),3.79-3.68(m,1h,1/2nch2ch2n),2.43-2.38(m,3h,ch3).

hrms(esi):m/z[m+h]⁺.calcdforc26h20fn5o2:454.1674；found:454.1673.

实施例5

2-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-取代)亚甲基)苯甲酰基)-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡嗪-9-甲酰胺(i-9)的合成

2,3-二氨基苯甲酰胺(vii)

将2-氨基-3-硝基苯甲酰胺vi(10g,55.20mmol)加入1l反应瓶中，加入500ml无水甲醇搅拌溶解，缓慢加入10％pd/c(1g,dry)，25℃加氢反应。tlc(二氯甲烷:甲醇＝20:1)监测原料反应完全，停止反应，抽滤除去钯碳，减压浓缩滤液，柱层析(二氯甲烷:甲醇＝200:1)纯化，得产品(vii)5.0g，收率60.0％。m.p.:100-102℃.¹h-nmr(300mhz,dmso-d6)δ(ppm):7.60(brs,1h,conh2),6.97(brs,1h,conh2),6.88(dd,j1＝8.0hz,j2＝1.2hz,1h,arh),6.60(dd,j1＝7.5hz,j2＝1.2hz,1h,arh),6.34(t,j＝7.7hz,1h,arh),6.07(brs,2h,arnh2),4.60(brs,2h,arnh2).

苄基((4-氨基甲酰基-1h-苯并[d]咪唑-2-取代)亚甲基)氨基甲酸酯(viii)

在250ml反应瓶中加入cbz-甘氨酸(2.92g,13.89mmol)和120ml乙腈，搅拌溶解，缓慢加入cdi(2.57g,15.85mmol)，45℃反应1.5小时。tlc(二氯甲烷:甲醇＝10:1)监测原料反应完后，加入中间体vii(2g,13.23mmol)，45℃反应4小时。tlc(二氯甲烷:甲醇＝10:1)监测原料反应完，生产大量白色固体，抽滤，干燥。将其加入100ml反应瓶，加入50ml冰醋酸，120℃回流反应，tlc(二氯甲烷:甲醇＝10:1)监测原料反应完后，减压浓缩除去冰醋酸，加入100ml水溶解，乙酸乙酯萃取(100ml×2)，合并有机层，饱和氯化钠洗涤(150ml)，无水硫酸钠干燥。抽滤，浓缩滤液得粗品(viii)4.18g，收率97.4％。m.p.:166-168℃.¹h-nmr(300mhz,dmso+d2o-d6)δ(ppm):12.75(s,1h,nh),9.22(s,1h,nh),7.96(s,1h,arh),7.80(d,j＝7.5hz,1h,arh),7.66(d,j＝7.9hz,2h,arh),7.47-7.06(m,5h,arh),5.07(s,2h,ch2),4.49(s,2h,ch2).¹h-nmr(300mhz,dmso+d2o-d6)δ(ppm):7.79(d,j＝7.1hz,1h,arh),7.67(d,j＝8.0hz,1h,arh),7.43-7.18(m,5h,arh),7.09(brs,1h,arh),5.05(s,2h,ch2),4.49(s,2h,ch2).

2-(氨甲基)-1h-苯并[d]咪唑-4-甲酰胺(ix)

将中间体viii(3g,9.25mmol)加入250ml反应瓶中，加入100ml无水甲醇搅拌溶解，缓慢加入10％pd/c(0.3g,dry)，30℃加氢反应。tlc(二氯甲烷:甲醇＝10:1)监测原料反应完后，抽滤除去钯碳，减压浓缩滤液得(ix)1.4g，收率79.5％。m.p.:>250℃.¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.19(s,1h,conh2),7.76(d,j＝7.3hz,1h,arh),7.64(d,j＝7.9hz,1h,arh),7.22(t,j＝7.8hz,1h,arh),3.97(s,2h,ch2).

1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑[1,2-a]吡嗪-9-甲酰胺(x)

在100ml三颈瓶中，加入naoh(8g,0.20mol)和8ml水，机械搅拌，溶清后加入ix(1.4g,7.36mmol)，四丁基溴化铵(94mg,0.29mmol)，25℃搅拌反应1小时，滴加1,2-二溴乙烷(5.53g,29.44mmol)溶于40mldmf所得的溶液，滴毕，25℃反应4小时，抽滤除去无机盐，减压浓缩得白色固体，柱层析(二氯甲烷:甲醇:氨水＝50:1:0.05～40:1:0.05)纯化，得产品(x)0.75g，收率47.2％。m.p.:>250℃.¹h-nmr(300mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.15(s,1h,arh),7.84(d,j＝7.5hz,1h,arh),7.74-7.63(m,2h,conh2),7.30(t,j＝7.7hz,1h,arh),4.12(s,2h,cch2nh),4.11-3.98(m,4h,nch2ch2nh),3.25-3.12(m,2h,nch2ch2nh).

ms(esi(+)70v)m/z:239.1[m+na]⁺,217.1[m+h]⁺.

2-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-取代)亚甲基)苯甲酰基)-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡嗪-9-甲酰胺(i-9)

将中间体v(648mg,2.17mmol)，中间体x(470mg,2.17mmol)和pybop(1.36g,2.61mmol)加入100ml反应瓶中，加入30mldmf搅拌溶解，再加入diea(0.98g,7.58mmol)，25℃反应。tlc(二氯甲烷:甲醇＝20:1)监测原料反应完毕，将反应液倒入120ml水中，析出大量黄色固体，搅拌10min，抽滤，水洗，干燥。粗品柱层析(二氯甲烷:甲醇＝100:1～20:1)纯化，得产品(ⅰ-9)470mg，收率43.6％。m.p.:238-240℃.¹h-nmr(300mhz,dmso-d6)δ(ppm):12.59(s,1h,conh),9.12-8.83(m,2h,conh2),8.30-8.20(m,1h,arh),7.96-7.69(m,5h,arh),7.53-7.46(m,2h,arh),7.39-7.24(m,2h,arh),5.12(brs,1h,1/2nch2arh),4.77(s,1h,1/2nch2arh),4.40-4.01(m,5h,nch2ch2n,arch2,1/2nch2ch2n),3.84-3.70(m,1h,1/2nch2ch2n).hrms(esi):m/z[m+h]⁺.calcdforc27h21fn6o3:497.1732；found:497.1733.

实施例6

2-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-取代)亚甲基)苯甲酰基)-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡嗪-9-甲脒(i-10)的合成

1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑[1,2-a]吡嗪-9-甲腈(xi)

将中间体x(500mg,2.31mmol)加入100ml反应瓶中，降温至0℃，加入20mlpocl3搅拌溶解，升温回流反应2小时。tlc(二氯甲烷:甲醇＝20:1)监测原料反应完毕后，停止加热。冷却至室温，倒入100ml冰水中，用30％的naoh溶液调ph至9，乙酸乙酯萃取(30ml×3)，合并有机层，水洗涤一次(80ml)，饱和食盐水洗涤一次(80ml)，无水硫酸钠干燥。抽滤，浓缩滤液得黄色油状物(xi)350mg，收率76.4％。m.p.:212-214℃.¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ(ppm):7.64-7.50(m,2h,arh),7.34-7.28(m,1h,arh),4.40(s,2h,cch2nh),4.20-4.10(m,2h,nch2ch2nh),3.48-3.37(m,2h,nch2ch2nh).ms(esi(+)70v)m/z:221.1[m+na]⁺.

2-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-取代)亚甲基)苯甲酰基)-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑[1,2-a]吡嗪-9-甲腈(xii)

将中间体v(1.05g,3.52mmol)，中间体xi(0.7g,3.53mmol)和pybop(2.21g,4.25mmol)加入100ml反应瓶中，加入40mldmf搅拌溶解，再加入diea(1.59g，12.30mmol)，25℃反应。tlc(二氯甲烷:甲醇＝20:1)监测原料反应完毕，将反应液倒入160ml水中，析出大量黄色固体。搅拌10min，抽滤，滤饼水洗，干燥。粗品柱层析(二氯甲烷:甲醇＝100:1～80:1)纯化，得产品(xii)1.04g。收率61.9％。m.p.:192-194℃.¹h-nmr(300mhz,dmso-d6)δ(ppm):12.61(s,1h,conh),8.25(t,j＝6.6hz,1h,arh),8.00-7.76(m,4h,arh),7.73(d,j＝7.5hz,1h,arh),7.55-7.44(m,2h,arh),7.39(t,j＝7.8hz,1h,arh),7.31(t,j＝8.7hz,1h,arh),5.11(brs,1h,1/2arch2n),4.78(s,1h,1/2arch2n),4.45-4.14(m,4h,ch2),4.14-4.04(m,1h,1/2ch2),3.85-3.67(m,1h,1/2ch2).

2-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-取代)亚甲基)苯甲酰基)-1,2,3,4-四氢苯并[4,5]咪唑并[1,2-a]吡嗪-9-甲脒(i-10)

将中间体xii(270mg,0.56mmol)加入50ml三颈瓶中，加入20ml(无水乙醇:二氯甲烷＝8:1)混合溶剂搅拌溶解，降温至0℃，通入干燥的hcl气体至饱和。tlc(二氯甲烷:甲醇＝20:1)监测原料反应完毕，减压浓缩除去溶剂得到黄色油状物。于残留物中加入20ml混合溶剂(无水乙醇:二氯甲烷＝8:1)搅拌溶解，加入碳酸铵(700mg,7.29mmol)，25℃反应8h。停止反应，减压浓缩反应液，柱层析(二氯甲烷:甲醇＝80:1～40:1)纯化，得产物(i-10)105mg，收率37.8％。m.p.:178～180℃.¹h-nmr(300mhz,dmso-d6)δ(ppm):12.59(brs,1h,conh),9.60(brs,3h,c(nh)nh2),8.25(s,1h,arh),8.13-8.09(m,1h,arh),8.06-7.67(m,4h,arh),7.62-7.38(m,3h,arh),7.38-7.22(m,1h,arh),5.15(s,1h,1/2nch2arh),4.80(s,1h,1/2nch2arh),4.47-4.18(m,4h,nch2ch2n,arch2),4.18-4.06(m,1h,1/2nch2ch2n),3.87-3.72(m,1h,1/2nch2ch2n).

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