本发明属于生物发酵提取技术领域，特别是涉及一种辅酶q10纯品的制备方法。
背景技术：
辅酶q10(coenzymeq10),又称泛醌,分子式c59h90o4，分子量863.4，具有醌式结构,是一种类维生素。辅酶q10具有自由基清除、改善细胞内呼吸、增强免疫等功能。临床上可用于癌症的辅助治疗；用于治疗冠心病、心衰、心率失常等各种心脏病，对急慢性病毒肝炎、糖尿病、牙松动、肌无力、再生障碍性贫血、胃十二指肠溃疡、帕金森综合症等多种疾病也有辅助疗效。随着对其应用研究的不断深入，辅酶q10在医药、食品添加剂、保健等领域的广泛应用。目前，世界辅酶q10用量逐年急剧增加，市场需求量极大。
辅酶q10的生产方法主要有化学合成法、植物细胞培养法和微生物发酵法。微生物发酵法具有工艺稳定性高,易于控制,产品纯度高，产率高，易于大规模的生产。因此,利用微生物发酵法生产辅酶qio，是生产工艺发展的主流。
辅酶q10在室温下呈黄色或淡黄色的结晶，熔点48～52℃，对光不稳定,易分解为微红色的物质,对湿度和温度不敏感,较稳定。辅酶q10在甲醇和水中不溶，在乙醇中微溶，在乙醚、丙酮中溶解，在正己烷、氯仿、苯、四氯化碳等溶剂中易溶。
辅酶q10是一种酯溶性类维生素，利用微生物发酵法生产辅酶qio主要存在菌体细胞内，仅有少量分泌到细胞外。现有技术中，对于此类辅酶q10的提取，公开的报道有：
1、醇碱皂化提取法，首先将辅酶q10发酵液离心分离得到的菌丝体，加入含有焦没食子酸、乙醇、氢氧化钠、正己烷的体系中，回流提取，菌丝中游离脂肪酸、脂肪酸甘油脂皂化水解转入水相，而酯溶性强辅酶q10转入低极性的正己烷中，再经石油醚多次萃取，辅酶q10转入石油醚-正己烷有机溶媒体系中，将有机溶媒提取液水洗至中性，真空浓缩旋转蒸发去除有机溶剂，用无水乙醇溶解，滤过，加水沉淀、过滤，得到辅酶q10纯品。该工艺中，由于长时间皂化回流，易导致辅酶q10中甲氧基与乙醇中的乙氧基换位，生成单或双乙氧基衍生物，影响辅酶q10提取产量和质量。
2、碱化皂化提取法，首先将辅酶q10发酵液离心分离得到的菌丝体，先后经酸性水、碱水回流，用有机溶媒萃取，将有机溶媒提取液水洗至中性，真空浓缩旋转蒸发去除有机溶剂，用无水乙醇溶解，滤过，加水沉淀、过滤，得到辅酶q10纯品。该工艺中，不生成单或双乙氧基衍生物，但萃取过程乳化严重，影响萃取收率和质量。
3、有机溶剂搅拌破碎提取法，首先将辅酶q10发酵液离心分离得到的菌丝体，加入丙酮，强力搅拌，离心，取上清液，用真空浓缩旋转蒸发去除丙酮，加入石油醚或者正己烷多次萃取得到辅酶q10提取液，将提取液用真空旋转蒸发器浓缩至浓绸液，加入无水乙醇，冷冻降温、静置沉淀、过滤，回收滤液，加水沉淀、过滤，得到辅酶q10纯品。本工艺中，丙酮搅拌破碎时间短，辅酶q10释放收率低，丙酮搅拌破碎时间长，辅酶q10易变性，影响产品质量。
4、研磨破碎提取法，首先将辅酶q10发酵液离心分离得到的菌丝体，加入丙酮，加入石英砂，抗氧剂，快速研磨，离心，取上清液，用真空浓缩旋转蒸发去除丙酮，加入石油醚或者正己烷多次萃取得到辅酶q10提取液，将提取液用真空旋转蒸发器浓缩至浓绸液，加入无水乙醇，冷冻降温、静置沉淀、过滤，回收滤液，加水沉淀、过滤，得到辅酶q10纯品。本工艺中，需专门研磨设备，研磨力度、时间对辅酶q10释放率影响大，为防止过度研磨造成辅酶q10氧化损失，还需加入抗氧剂，增加生产成本和提取难度。
5、超声波破碎提取法，首先将辅酶q10发酵液离心分离得到的菌丝体，加入丙酮，配成菌悬液，冷冻降温，用超声波按一定功率、频率、间隙时间进行破碎，离心，取上清液，用真空浓缩旋转蒸发去除丙酮，加入石油醚或者正己烷多次萃取得到辅酶q10提取液，将提取液用真空旋转蒸发器浓缩至浓绸液，加入无水乙醇，冷冻降温、静置沉淀、过滤，回收滤液，加水沉淀、过滤，得到辅酶q10纯品。本工艺中，超声波处理过程大量放热，需进行冷冻降温设备，超声波随处理层厚度增加能量衰减快，限制处理量，而且超声波设备价值昂贵，大生产应用生产成本高，不适用于工业化生产。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服上述现有技术的缺陷，提供一种有效提高辅酶q10收率及产品质量，工艺简单，溶媒损耗少，同时可降低环境污染的辅酶q10纯品的制备方法。
为实现上述目的所采取的技术方案为：
一种辅酶q10纯品的制备方法，其特征在于其工艺步骤为：首先将辅酶q10发酵液经陶瓷膜微滤和喷雾干燥得到粗品，然后将该粗品用丙酮浸提，所得浸提液分相、减压浓缩得到辅酶q10提取浓缩液，之后用石油醚萃取、硅胶柱层析、减压蒸馏浓缩洗脱液，最后加入辅酶q10晶种结晶，减压干燥即可得到辅酶q10纯品。
所述陶瓷膜微滤是指采用滤径0.1um～0.45um的陶瓷膜过滤，控制进料温度25～30℃，透析比1:1.5～2.0，浓缩倍数1.8～2.6倍。
所述喷雾干燥条件为，控制进风温度140～160℃，出风温度60～70℃。
所述丙酮浸提是指在所得粗品中，加入丙酮及沸石，缓慢升温至49～52℃，回流2.0～2.5hr后，趁热经陶瓷滤芯过滤器过滤，上述丙酮的加入量为粗品体积的3～5倍，沸石的加入量为粗品的0.5～0.8‰，以质量体积计。
所述浸提液分相是指浸提液放入分相罐中，加入质量体积15～20%nacl饱和液，温度28～32℃，搅拌30～40min，静置20～30min，收集上层清液，减压蒸馏，得到辅酶q10提取浓缩液。
所述石油醚萃取是指将减压浓缩所得的丙酮浸提浓缩液加入石油醚溶解，加量为辅酶q10浓缩液3～5倍体积，再加入等体积水，搅拌10～20min，静置，分水，收集石油醚层。
所述硅胶柱层析、减压蒸馏浓缩洗脱液是指将含有辅酶q10的石油醚萃取液，进硅胶柱进行纯化分离，洗脱液为石油醚，进料速度以2～5bv/h，洗脱速度以1.5～3.5bv/h，进料温度25～30℃，收集含辅酶q10段洗脱液，减压蒸馏，得到纯化辅酶q10浓缩液。
所述结晶是指在减压蒸馏所得的辅酶q10洗脱液中加入2～3倍体积无水乙醇，加热至48～52℃，搅拌溶解，趁热过滤；搅拌下，将过滤液缓慢降温至28～30℃，加入质量体积0.02～0.05‰辅酶q10晶种，加入去离子水至析出晶体，继续加入去离子水，总加水量为辅酶q10浓缩液体积3～5倍，温度控制20～23℃，保温9.0～10.5hr，过滤，湿晶体经减压干燥，得到辅酶q10纯品。
本发明的技术优势体现在：
1本发明提供了一种利用陶瓷膜微滤、喷雾干燥方法粉碎菌丝、丙酮回流浸提提取辅酶q10的方法，总收率平均达75%以上，比现有收率提高7%以上。
2本发明利用辅酶q10熔点48～52℃特性，将辅酶q10粗品经丙酮回流浸提、陶瓷膜过滤器分离，提取完全，分离杂质方法简便。
3本发明操作流程简捷，可操作性强。
4本发明废水量少，减轻环保处理强度。
具体实施方法
下面用实例予以说明本发明，应该理解的是，实例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。本发明的范围与核心内容依据权利要求书加以确定。
下述实施例中的辅酶q10发酵液来源：依据以下工艺流程得到：
冷冻管
采用三级发酵模式生产辅酶q10，其生产菌种为沼泽红假单胞菌，培养基中的碳源主要是淀粉和葡萄糖，氮源是豆饼粉、玉米浆、酵母膏，经96h的发酵培养，其效价一般在2600～3000ug/ml左右。
准备辅酶q10发酵液500l（效价2900u/ml）备用。
实施例1
取辅酶q10发酵液100l（发酵单位2900u/ml），进陶瓷膜微滤膜（孔径0.1um）过滤，进料温度25℃左右，透析比1:1.5，浓缩倍数1.8倍，得到膜浆139l（效价2050u/ml）,收率98.18%。
将以上膜浆，经喷雾干燥，控制进风温度140～160℃，出风温度60～70℃，得到辅酶q10粗品307g，水份9.2%，收率97.90%。
将以上喷雾干燥得到粗品，加到蒸馏器中，加入粗品重量3倍体积的丙酮(921ml)，加入0.5‰(w/v)沸石，缓慢升温至49℃，回流2.0hr后，趁热经陶瓷滤芯过滤器过滤（孔径0.5um)，滤渣再重复浸提一次，浸提条件不变。收集浸提液，转入分相罐中，加入15%(w/v)nacl饱和液，温度28℃，搅拌30min，静置20min，收集上层清液，减压蒸馏，得到辅酶q10提取浓缩物411g，水份34.30%，收率96.83%。
将以上丙酮浸提浓缩物加入石油醚溶解，加量为辅酶q10浓缩物3.0倍体积(1233ml)，再加入等体积水，搅拌10min，静置，分水，收集石油醚层,进硅胶柱进行纯化分离，洗脱液为石油醚，进料速度以2bv/h，洗脱速度以1.5bv/h，进料温度25℃，收集含辅酶q10段洗脱液，减压蒸馏，得到纯化辅酶q10提取浓缩物326g，水份20.78%，收率95.68%。
将以上减压蒸馏浓缩洗脱液得到的纯化辅酶q10浓缩物，加入其重量2倍体积无水乙醇(652ml)，加热至48℃，搅拌溶解，趁热过滤；搅拌下，将过滤液缓慢降温至28℃，加入0.02‰w/v辅酶q10晶种，加入去离子水至析出晶体，继续加入去离子水，总加水量为纯化辅酶q10浓缩物重量3倍(978ml)，温度控制20℃，保温9.0hr，过滤，湿晶体经减压干燥，得到辅酶q10纯品217g，水份0.12%，收率83.90%，总收率74.74%。
实施例2
取辅酶q10发酵液100l（发酵单位2900u/ml），进陶瓷膜微滤膜（孔径0.1um）过滤，进料温度27℃左右，透析比1:1.7，浓缩倍数2.0倍，得到膜浆135l（效价2130u/ml）,收率99.16%。
将以上膜浆，经喷雾干燥，控制进风温度140～160℃，出风温度60～70℃，得到辅酶q10粗品308g，水份7.6%，收率98.97%。
将以上喷雾干燥得到粗品，加到蒸馏器中，加入粗品重量3.5倍体积丙酮(1078ml)，加入0.6‰(w/v)沸石，缓慢升温至50℃，回流2.2hr后，趁热经陶瓷滤芯过滤器过滤（孔径0.5um)，滤渣再重复浸提一次，浸提条件不变。收集浸提液，转入分相罐中，加入16%(w/v)nacl饱和液，温度29℃，搅拌35min，静置25min，收集上层清液，减压蒸馏，得到辅酶q10提取浓缩物408g，水份32.12%，收率97.41%。
将以上丙酮浸提浓缩物加入石油醚溶解，加量为辅酶q10提取浓缩物重量3.5倍体积(1430ml)，再加入等体积水，搅拌15min，静置，分水，收集石油醚层,进硅胶柱进行纯化分离，洗脱液为石油醚，进料速度以3bv/h，洗脱速度以2bv/h，进料温度27℃，收集含辅酶q10段洗脱液，减压蒸馏，得到纯化辅酶q10提取浓缩物331g，水份19.41%，收率96.25%。
将以上减压蒸馏浓缩洗脱液得到的辅酶q10浓缩物，加入其重量2.5倍体积无水乙醇(828ml)，加热至49℃，搅拌溶解，趁热过滤；搅拌下，将过滤液缓慢降温至29℃，加入0.03‰w/v辅酶q10晶种，加入去离子水至析出晶体，继续加入去离子水，总加水量为纯化辅酶q10浓缩物重量4倍(1324ml)，温度控制22℃，保温10.0hr，过滤，湿晶体经减压干燥，得到辅酶q10纯品219g，水份0.07%，收率84.80%，总收率75.46%。
实施例3
取辅酶q10发酵液100l（发酵单位2900u/ml），进陶瓷膜微滤膜（孔径0.22um）过滤，进料温度29℃左右，透析比1:1.8，浓缩倍数2.2倍，得到膜浆127l（效价2230u/ml）,收率97.87%。
将以上膜浆，经喷雾干燥，控制进风温度140～160℃，出风温度60～70℃，得到辅酶q10粗品301g，水份8.9%，收率96.61%。
将以上喷雾干燥得到粗品，加到蒸馏器中，加入粗品重量4倍体积的丙酮(1204ml)，加入0.7‰(w/v)沸石，缓慢升温至51℃，回流2.0hr后，趁热经陶瓷滤芯过滤器过滤（孔径0.5um)，滤渣再重复浸提一次，浸提条件不变。收集浸提液，转入分相罐中，加入17%(w/v)nacl饱和液，温度30℃，搅拌35min，静置20～30min，收集上层清液，减压蒸馏，得到辅酶q10提取浓缩物412g，水份35.55%，收率96.91%。
将以上丙酮浸提浓缩物加入石油醚溶解，加量为辅酶q10浓缩物重量4倍体积(1648ml)，再加入等体积水，搅拌15min，静置，分水，收集石油醚层，进硅胶柱进行纯化分离，洗脱液为石油醚，进料速度以4bv/h，洗脱速度以2.5bv/h，进料温度28℃，收集含辅酶q10段洗脱液，减压蒸馏，得到纯化辅酶q10浓缩物327g，水份21.38%，收率96.75%。
将以上减压蒸馏浓缩洗脱液得到的纯化辅酶q10浓缩物，加入其3倍重量无水乙醇(981ml)，加热至50℃，搅拌溶解，趁热过滤；搅拌下，将过滤液缓慢降温至30℃，加入0.03‰w/v辅酶q10晶种，加入去离子水至析出晶体，继续加入去离子水，总加水量为纯化辅酶q10浓缩物体积5倍（1635ml），温度控制22℃，保温10.5hr，过滤，湿晶体经减压干燥，得到辅酶q10纯品212g，水份0.04%，收率82.40%，总收率73.07%。
实施例4
取辅酶q10发酵液100l（发酵单位2900u/ml），进陶瓷膜微滤膜（孔径0.22um）过滤，进料温度30℃左右，透析比1:1.9，浓缩倍数2.4倍，得到膜浆121l（效价2340u/ml）,收率97.50%。
将以上膜浆，经喷雾干燥，控制进风温度140～160℃，出风温度60～70℃，得到辅酶q10粗品302g，水份6.4%，收率99.97%。
将以上喷雾干燥得到粗品，加到蒸馏器中，加入粗品重量4.5倍体积丙酮(1360ml)，加入0.8‰(w/v)沸石，缓慢升温至51℃，回流2.5hr后，趁热经陶瓷滤芯过滤器过滤（孔径0.5um)，滤渣再重复浸提一次，浸提条件不变。收集浸提液，转入分相罐中，加入18%(w/v)nacl饱和液，温度30℃，搅拌35min，静置25min，收集上层清液，减压蒸馏，得到辅酶q10提取浓缩物402g，水份31.70%，收率97.20%。
将以上丙酮浸提浓缩物加入石油醚溶解，加量为辅酶q10浓缩物4.5倍体积(1810ml)，再加入等体积水，搅拌15min，静置，分水，收集石油醚层，进硅胶柱进行纯化分离，洗脱液为石油醚，进料速度以5bv/h，洗脱速度以3bv/h，进料温度29℃，收集含辅酶q10段洗脱液，减压蒸馏，得到纯化辅酶q10浓缩物340g，水份22.53%，收率95.86%。
将以上减压蒸馏浓缩洗脱液得到的纯化辅酶q10浓缩物，加入其重量2.5倍体积无水乙醇(850ml)，加热至51℃，搅拌溶解，趁热过滤；搅拌下，将过滤液缓慢降温至29℃，加入0.04‰w/v辅酶q10晶种，加入去离子水至析出晶体，继续加入去离子水，总加水量为纯化辅酶q10浓缩物体积4.5倍（1530ml)，温度控制22℃，保温10.5hr，过滤，湿晶体经减压干燥，得到辅酶q10纯品216g，水份0.09%，收率81.92%，总收率74.42%。
实施例5
取辅酶q10发酵液100l（发酵单位2900u/ml），进陶瓷膜微滤膜（孔径0.45um）过滤，进料温度28℃左右，透析比1:2.0，浓缩倍数2.6倍，得到膜浆115l（效价2480u/ml）,收率98.67%。
将以上膜浆，经喷雾干燥，控制进风温度140～160℃，出风温度60～70℃，得到辅酶q10粗品298g，水份5.5%，收率98.41%。
将以上喷雾干燥得到粗品，加到蒸馏器中，加入粗品重量5倍体积的丙酮(1490ml)，加入0.7‰(w/v)沸石，缓慢升温至52℃，回流2.5hr后，趁热经陶瓷滤芯过滤器过滤（孔径0.5um)，滤渣再重复浸提一次，浸提条件不变。收集浸提液，转入分相罐中，加入20%(w/v)nacl饱和液，温度32℃，搅拌40min，静置30min，收集上层清液，减压蒸馏，得到辅酶q10提取浓缩物407g,水份32.31%，收率97.80%。
将以上丙酮浸提浓缩物加入石油醚溶解，加量为辅酶q10浓缩物重量5倍体积(2035ml)，再加入等体积水，搅拌20min，静置，分水，收集石油醚层,进硅胶柱进行纯化分离，洗脱液为石油醚，进料速度以5bv/h，洗脱速度以3.5bv/h，进料温度30℃，收集含辅酶q10段洗脱液，减压蒸馏，得到纯化辅酶q10浓缩物338g,水份22.05%，收率95.66%。
将以上减压蒸馏浓缩洗脱液得到的纯化辅酶q10浓缩物，加入其重量2.5倍体积无水乙醇(845ml)，加热至52℃，搅拌溶解，趁热过滤；搅拌下，将过滤液缓慢降温至30℃，加入0.05‰w/v辅酶q10晶种，加入去离子水至析出晶体，继续加入去离子水，总加水量为纯化辅酶q10浓缩物重量5倍（1690ml），温度控制23℃，保温10.5hr，过滤，湿晶体经减压干燥，得到辅酶q10纯品225g，水份0.07%，收率85.30%，总收率77.53%。
对比实施例1（醇碱皂化提取法）：
取辅酶q10发酵液100l（发酵单位2900u/ml），进入离心机进行固液分离，转速控制1200转/分钟，料液进完后，离心机继续运行20分钟，将菌渣甩干，得到湿菌渣32kg，将其放入200l反应釜中，再加入焦没食子酸2kg、碱性乙醇（ph7.8～8.0）50l及正己烷50l，将反应釜温度控制在60℃左右，对菌渣中辅酶q10进行回流提取，回流2hr后，将反应釜液体转入带搅拌分相罐中，在分相罐中加入20l石油醚，室温下，分相罐转速控制40～60转/分钟，搅拌20分钟，静置、分层，分出上层清液，再将下层液中残留的辅酶q10，分三次提取，每次加入10l石油醚，汇总石油醚提取液，将提取液水洗至中性,分水，收集石油醚层,进硅胶柱进行纯化分离，洗脱液为石油醚，进料速度以5bv/h，洗脱速度以1.5bv/h，进料温度30℃，收集含辅酶q10段洗脱液，减压蒸馏，得到纯化辅酶q10浓缩物324g,水份21.22%，收率88.02%。
将以上浓缩物转入200l溶解罐中，加入90l无水乙醇，加热至48～50℃，搅拌下溶解后，趁热经陶瓷滤芯过滤器过滤（孔径0.5um)，滤液进入结晶罐，搅拌下，将过滤液缓慢降温至30℃，加入0.05‰w/v辅酶q10晶种，加入去离子水至析出晶体，继续加入去离子水，总加水量至180l，温度控制23～25℃，保温10.5hr，过滤，湿晶体经减压干燥，得到辅酶q10纯品198g，水份0.06%，收率77.42%，总收率68.14%。
对比实施例2（碱化皂化提取法）：
取辅酶q10发酵液100l（发酵单位2900u/ml），进入离心机进行固液分离，转速控制1200转/分钟，料液进完后，离心机继续运行20分钟，将菌渣甩干，得到湿菌渣32kg，将其放入500l反应釜中，先加入100l草酸水（ph3.5～3.8），温度控制在60℃左右，对菌渣中辅酶q10进行回流提取，回流3hr，再加入150l液碱（5%氢氧化钠）,继续保温回流3hr，回流结束后，将反应釜液体转入带搅拌分相罐中，在分相罐中加入20l石油醚，室温下，转速控制60转/分钟，搅拌20分钟，静置10分钟后，分层，分出上层清液，再将下层液中残留的辅酶q10，分三次提取，每次加入10l石油醚，汇总石油醚提取液。
将以上石油醚提取液，加入等体积水，搅拌15min，静置，分水，收集石油醚层,进硅胶柱进行纯化分离，洗脱液为石油醚，进料速度以5bv/h，洗脱速度以1.5bv/h，进料温度30℃，收集含辅酶q10段洗脱液，减压蒸馏，得到纯化辅酶q10浓缩物318g,水份22.05%，收率85.48%。
将以上浓缩物转入200l溶解罐中，加入90l无水乙醇，加热至48～50℃，搅拌下溶解，趁热经陶瓷滤芯过滤器过滤（孔径0.5um)，进入结晶罐，搅拌下，将过滤液缓慢降温至30℃，加入0.5‰w/v辅酶q10晶种，加入去离子水至析出晶体，继续加入去离子水，总加水量至200l，温度控制23℃，保温10.5hr，过滤，湿晶体经减压干燥，得到辅酶q10纯品208g，水份0.07%，收率83.85%，总收率71.67%。
对比实施例3（有机溶剂搅拌破碎提取法）：
取辅酶q10发酵液100l（发酵单位2900u/ml），进入离心机进行固液分离，转速控制1200转/分钟，料液进完后，离心机继续运行20分钟，将菌渣甩干，得到湿菌渣32kg，将其放入2000l搅拌罐中，加入700l丙酮，转速调至1000～1200转/分钟，搅拌5hr，取上清液，用真空旋转蒸发仪去除丙酮，浓缩物322g，水份19.68%，收率89.18%。
将以上浓缩物转入200l溶解罐中，将反应釜液体转入带搅拌分相罐中，在分相罐中加入20l石油醚，室温下，转速控制60转/分钟，搅拌20分钟，静置10分钟后，分层，分出上层清液，再将下层液中残留的辅酶q10，分三次提取，每次加入10l石油醚，汇总石油醚提取液，将提取液水洗至中性，分水，收集石油醚层,进硅胶柱进行纯化分离，洗脱液为石油醚，进料速度以5bv/h，洗脱速度以1.5bv/h，进料温度30℃，收集含辅酶q10段洗脱液，减压蒸馏，得到纯化辅酶q10浓缩物275g,水份16.72%，收率88.55%。
将以上浓缩物转入200l溶解罐中，加入90l无水乙醇，加热至48～50℃，搅拌下溶解，趁热经陶瓷滤芯过滤器过滤（孔径0.5um)，进入结晶罐。搅拌下，将过滤液缓慢降温至30℃，加入0.05‰w/v辅酶q10晶种，加入去离子水至析出晶体，继续加入去离子水，总加水量至180l，温度控制23℃，保温10.5hr，过滤，湿晶体经减压干燥，得到辅酶q10纯品190g，水份0.04%，收率82.93%，总收率65.49%。
对比实施例4（研磨破碎提取法）：
取辅酶q10发酵液100l（发酵单位2900u/ml），进入离心机进行固液分离，转速控制1200转/分钟，料液进完后，离心机继续运行20分钟，将菌渣甩干，得到湿菌渣32kg，将其加入微粉研磨设备中，分别加入60l丙酮，2kg石英砂，0.2kg硫代硫酸钠，快速研磨1.5～2.0hr，研磨结束，将料液过滤，取滤液，用真空浓缩旋转蒸发去除丙酮，得到浓缩物326g，水份20.23%，收率89.67%。
将以上浓缩物转入200l溶解罐中，将反应釜液体转入带搅拌分相罐中，在分相罐中加入20l石油醚，室温下，转速控制60转/分钟，搅拌20分钟，静置10分钟后，分层，分出上层清液，再将下层液中残留的辅酶q10，分三次提取，每次加入10l石油醚，汇总石油醚提取液，将提取液水洗至中性，分水后，收集石油醚层,进硅胶柱进行纯化分离，洗脱液为石油醚，进料速度以5bv/h，洗脱速度以1.5bv/h，进料温度30℃，收集含辅酶q10段洗脱液，减压蒸馏，得到纯化辅酶q10浓缩物290g,水份19.28%，收率90.02%。
将以上浓缩液转入200l溶解罐中，加入90l无水乙醇，加热至48～50℃，搅拌下溶解，趁热经陶瓷滤芯过滤器过滤（孔径0.5um)，进入结晶罐；搅拌下，将过滤液缓慢降温至30℃，加入0.5‰w/v辅酶q10晶种，加入去离子水至析出晶体，继续加入去离子水，总加水量至180l，温度控制23℃，保温10.5hr，过滤，湿晶体经减压干燥，得到辅酶q10纯品185g，水份0.07%，收率82.02%，总收率66.21%。