生理性细胞凋亡在维持多细胞生物的体内平衡中起重要作用，并且已知异常细胞凋亡是诸多疾病的主要特征。过度的细胞凋亡与缺血相关损伤、免疫缺陷疾病，以及神经退行性疾病密切相关，包括阿尔兹海默综合征、帕金森氏综合征、亨廷顿氏综合征和肌萎缩性脊髓侧索硬化症(als)。细胞凋亡由两条主要的信号通路调节：死亡受体通路和线粒体凋亡通路。在识别启动线粒体凋亡的刺激后，是否启动细胞凋亡由促凋亡和抑凋亡的bcl-2蛋白家族成员的复杂调节决定。唯bh-3域蛋白(tbid,bim等)触发bax和/或bak的构象激活，其反过来易位至线粒体外膜并导致线粒体外膜的通透性的改变。这些变化使得促凋亡蛋白如细胞色素c和smac释放到细胞质中，并且这些促凋亡因子导致半胱天冬酶的活化，并最终导致细胞死亡。
对凋亡抑制剂的绝大多数研究集中在靶向半胱天冬酶或促凋亡bcl-2家族蛋白上。阻断半胱天冬酶活性可以停止细胞凋亡的最终执行步骤，但是细胞在此前已经遭受了相当大的破坏。实际上，这些细胞承受的应激程度通常会诱导其他类型的细胞死亡，例如坏死。因此，很明显，在细胞凋亡信号传导上游中起作用的药物靶标的鉴定将代表靶向半胱天冬酶的有吸引力的替代方案。几种小分子和肽抑制剂已被开发，靶向上游促凋亡的bcl-2家族蛋白成员bax和bid，并且其中一些已经在全脑缺血模型中显示出保护作用。然而，所有这些凋亡抑制剂仅具有中等效力，半数有效值(ec50)高于微摩尔水平。此外，阻断单个促凋亡bcl-2蛋白可能仅具有有限的作用，因为其他促凋亡bcl-2家族蛋白具有互补功能。
在此，通过基于表型的高通量筛选和详细的结构-活性关系研究开发了一类阻断细胞色素c释放的新型细胞凋亡抑制剂(tc09)。我们优化了tc09系列的细胞活性至低纳摩尔水平，并使用细胞可逆性测定来证明tc09与靶蛋白相互作用的共价结合模式。我们的数据表明，tc09凋亡抑制剂通过靶向琥珀酸脱氢酶亚基b起到线粒体电子传递链的稳定剂的作用，并在动物模型中显示出神经元保护作用。
嘧啶基类化合物公开于：wo2008/157003，us2009/163545，us3149109，us2005/80111，eng等；drugmetabolismanddisposition；41卷；nb.8；(2013)；1470–1479页。
发明概述
本发明提供磺酰基和亚磺酰基嘧啶基化合物，用于有需要的人或用于药物的制备，以修饰琥珀酸脱氢酶亚基b(sdhb)，抑制细胞凋亡，隔离或保护细胞，如多巴胺能神经元免受细胞凋亡损伤的损害，或治疗帕金森疾病。在一方面，该化合物具有式i：
其中：
r1是任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c1-c18烃基；
r2是任选取代的杂原子，或任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c1-c18烃基；
r3是任选取代的，任选含杂原子的，环状的c3-c18烃基；和
r4是h，或任选取代的杂原子，或任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c1-c18烃基；
或相应的亚磺酰基化合物，或其立体异构体、氢化物、盐或乙酸盐，其中相应的亚磺酰基化合物是：
本发明包括化合物的实施方案，包括磺酰基化合物，相应的亚磺酰基化合物，或其立体异构体、氢化物、盐或乙酸盐，例如其中：
r1是任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c1-c18烃基，或任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c2-c18烯基或炔基，或任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c2-c18芳基；
r1是任选取代的，任选含杂原子的c1-c18烷基；
r1是任选取代的c1-c4烷基；或
r1是甲基或乙基；
r2是任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c1-c18烃基，或任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c2-c18烯基或炔基，或任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c2-c18芳基；
r2是任选取代的c1-c4烷基、烯基或炔基；
r2是任选取代的，任选含杂原子的，环状的c5-c6烷基、烯基或炔基；
r2是胺、卤化物或叠氮基；
r2是f、ch2f、chf2或cf3；或
r2是cf3；
r3是任选取代的杂环的c3-c18烃基；
r3是任选取代的，任选含杂原子的c5-c18或c5-c6芳基；
r3是任选取代的杂环的c5-c18或c5-c6芳基；
r3是任选取代的氮杂环的c3-c18烃基；
r3是任选取代的氮杂环的c5-c18或c5-c6芳基；
r3是任选取代的吡啶基、吡咯基或吡唑基；
r3是任选取代的苯基或噻吩；或
r3是任选取代的5-吡啶-2(1h)-酮。
r4是h或任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c1-c18烷基，或任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c2-c18烯基或炔基，或任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c2-c18芳基；
r4是任选取代的c1-c4烷基、烯基或炔基；
r4任选取代的，任选含杂原子的，环状的c5-c6烷基、烯基或炔基；
r4是氢、胺、卤化物或叠氮基；或
r4是h。
且/或r3是式ii的任选取代的5-吡啶-2(1h))-酮：
其中：
r5是任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c3-c18烃基；
r5是任选取代的苄基；或
r5是3,4-二甲氧基苄基。
另一方面本发明提供式i的磺酰基嘧啶基化合物：
其中：
r1是任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c1-c18烃基；
r2是任选取代的杂原子，或任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c1-c18烃基；
r3是任选取代的氮杂环的c3-c18烃基；和
r4是h，或任选取代的杂原子，或任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c1-c18烃基；
或相应的亚磺酰基化合物，或其立体异构体、氢化物、盐或乙酸盐。
本发明包括化合物的实施方案，包括磺酰基化合物、相应的亚磺酰基化合物，或其立体异构体、氢化物、盐或乙酸盐，例如其中：
r1是任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c1-c18烷基，或任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c2-c18烯基或炔基，或任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c2-c18芳基；
r1是任选取代的，任选含杂原子的c1-c18烷基；
r1是任选取代的c1-c4烷基；或
r1是甲基或乙基。
r2是任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c1-c18烃基，或任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c2-c18烯基或炔基，或任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c2-c18芳基；
r2是任选取代的c1-c4烷基、烯基或炔基；
r2是任选取代的，任选含杂原子的，环状的c5-c6烷基、烯基或炔基；
r2是胺、卤化物或叠氮基；
r2是f、ch2f、chf2或cf3；或
r2是cf3；
r3是任选取代的杂环的c3-c18烃基；
r3是任选取代的，任选含杂原子的c5-c18或c5-c6芳基；
r3是任选取代的杂环的c5-c18或c5-c6芳基；
r3是任选取代的氮杂环的c3-c18烃基；
r3是任选取代的氮杂环的c5-c18或c5-c6芳基；
r3是任选取代的吡啶基、吡咯基或吡唑基；
r3是任选取代的苯基或噻吩；或
r3是任选取代的5-吡啶-2(1h)-酮。
r4是h或任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c1-c18烷基，或任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c2-c18烯基或炔基，或任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c2-c18芳基；
r4是任选取代的c1-c4烷基、烯基或炔基；
r4是任选取代的，任选含杂原子的，环状的c5-c6烷基、烯基或炔基；
r4是h、胺、卤化物或叠氮基；或
r4是h。
r3是式ii的任选取代的5-吡啶-2(1h)-酮：
其中：
r5是任选取代的，任选含杂原子的，任选环状的c3-c18烃基；
r5是任选取代的苄基；或
r5是3,4-二甲氧基苄基；
且/或化合物是公开的化合物(例如，见本文表中)，或是1-(3，4二甲氧基苄基)-5-(2-甲基磺酰基-6-三氟甲基嘧啶-4-基)-吡啶-2(1h)：
或其立体异构体、氢化物、盐或乙酸盐。
在实施方案中，烃基是任选取代的，任选环状的c1-c10烷基、c2-c9烯基、c2-c9炔基或c5-c14芳烃，包含1-5个n、s、o或p的杂原子，包括1-5个氮原子，其中杂原子可以被取代。在实施方案中，烃基是c3-c18环烃基，例如杂环c3-c18烃基，例如：三元环，其是任选取代的(例如氮杂环丙烷，环氧乙烷，氧杂吖丙啶)；四元环，是任选取代的(例如氮杂环丁烷，氧杂环丁烷，氧氮杂环丁烷)；五元环，是任选取代的(例如吡咯，1,2-二唑(吡唑)，1,3-二唑(咪唑)，噻唑，异噻唑，恶唑，异恶唑，呋喃，间二氧杂环戊烯，噻吩，三唑，呋咱，四唑)；六元环，是任选取代的(例如吡啶，吡喃，噻喃，二嗪，三嗪，恶嗪，噻嗪，二恶英，氧硫杂环己二烯，二硫杂环己二烯，五嗪)；七元环，是任选取代的(例如氮杂环庚三烯，二氢二苯恶庚英，硫杂环庚三烯，二氮杂卓，硫氮杂卓)；八元环，是任选取代的(例如吖辛因，辛因，噻辛因)；九元环，是任选取代的(例如吲哚，苯并噻唑，苯并恶唑，苯并呋喃，苯并二氧杂环戊烯，苯并噻吩，1,3-苯并二硫杂环戊烯)；或十元环，是任选取代的(例如喹啉，喹喔啉，喹唑啉，色烯，苯并二恶英，苯并硫吡喃，苯并二硫杂环己二烯)。
在实施方案中，化合物是琥珀酸脱氢酶亚基b(sdhb)的抑制剂或共价修饰物和/或细胞凋亡的抑制剂。
在实施方案中，化合物具有式i，其中r1,、r2、r3和r4如下定义：
包括相应的亚磺酰基化合物，或其立体异构体、氢化物、盐或乙酸盐。
在实施方案中，化合物具有式ii结构，其中r1是me，r2是cf3，r4是h，并且r5如下定义：
再次，包括相应的亚磺酰基化合物，或其立体异构体、氢化物、盐或乙酸盐。
在实施方案中，本发明提供药物组合物，其包含单位剂型的公开的化合物或组合物，和/或与一种不同的抗帕金森药物共同配制或共同包装或共同施用。
本发明也提供使用公开的化合物或组合物的方法，包括将其给予确定为有需要的个人，并且任选地检测所产生的的治疗效果，并且还可任选地包括确定该人的先前步骤，特别是诊断和适用的疾病或病症(本文)，或其在药物制造中的用途。
本发明包括本文所述的特定实施方案的所有组合，如同每种组合都已被着力表述一样。
本发明特定实施方案的描述
以举例说明而非限制的方式提供以下对特定实施方案和实施例的描述。本领域技术人员将容易地认识到可以改变或修改各种非关键参数以产生基本相似的结果。
除非有相反的提示或另有说明，在这些描述和整个说明书中，术语“一个”是指一个或多个，术语“或”指和/或，并且多核苷酸序列被理解为包括相反链以及本文所述的可选择骨架。此外，属类为该属类所有成员的叙述的简称；例如(c1-c3)烷基的叙述是指所有c1-c3烷基叙述的简写：甲基，乙基和丙基，包括其异构体。
烃基是取代或未取代的，直链，支链或环状的烷基、烯基、炔基、酰基、芳基、芳烷基、芳基烯基、芳基炔基、烷芳基、烯基芳基或炔基芳基，其包含1-15个碳原子，并且在其碳骨架中任选地包含一个或多个杂原子。
本文所述术语“杂原子”通常是指碳或氢之外的任何原子。优选的杂原子包括氧(o)、磷(p)、硫(s)、氮(n)和卤素，且优选的杂原子官能团为卤代甲酰基、羟基、醛、胺、偶氮、羧基、氰基、硫氰酸盐、c(o)r(如羰基)、卤素、过氧羟基、亚胺、醛亚胺、异氰化物、异氰酸酯、硝酸盐、腈、亚硝酸盐、硝基、亚硝基、磷酸盐、膦酰基、硫化物、磺酰基、磺基和巯基。
除非另外说明，术语“烷基”本身或作为另一取代基的一部分，是指直链或支链或者环状烃基，或其组合，其为完全饱和的具有指定碳原子数(即c1-c8指1至8个碳)。烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、环己基、(环己基)甲基、环丙基甲基，以及如正戊基、正己基、正庚基、正辛基等同系物和异构体。
术语“烯基”本身或作为另一取代基的一部分，是指直链或支链或环状烃基或其组合，其可以是单不饱和或多不饱和的，具有指定的碳原子数(即c2-c8指2至8个碳)和一个或多个双键。烯基的实例包括乙烯基、2-丙烯基、巴豆基、2-异戊烯基、2-(丁二烯基)、2,4-戊二烯基、3-(1,4-戊二烯基)及其高级同系物和异构体。
术语“炔基”本身或作为另一取代基的一部分，是指直链或支链烃基或其组合，其可以是单不饱和或多不饱和的，具有指定的碳原子数(即c2-c8指2至8个碳)和一个或多个三键。炔基的实例包括乙炔基、1-和3-丙炔基、3-丁炔基及其高级同系物和异构体。
术语“亚烷基”本身或作为另一取代基的一部分是指衍生自烷基的二价基团，例如以-ch2-ch2-ch2-ch2-实例。通常，烷基(或亚烷基)基团将具有1至24个碳原子，在本发明中优选具有10个或更少碳原子的那些基团。“低级烷基”或“低级亚烷基”为较短链的烷基或亚烷基，通常具有8个或更少的碳原子。
术语“烷氧基”，“烷基氨基”和“烷硫基”(或硫代烷氧基)以其常规含义使用，并且分别指的是通过氧原子、氨基或硫原子与分子剩余部分连接的那些烷基。
除非另外说明，术语“杂烷基”本身或与另一术语组合是指稳定的直链或支链或环状烃基或其组合，由确定数目的碳原子和一至三个选自氧、氮、磷、硅和硫的杂原子组成，其中氮、硫和磷原子可任选地被氧化，且氮杂原子可任选地被季铵化。杂原子氧、氮、磷和硫可置于杂烷基的任何内部位置。杂原子硅可置于杂烷基的任何位置，包括烷基与分子剩余部分连接的位置。实例包括-ch2-ch2-o-ch3,-ch2-ch2-nh-ch3,-ch2-ch2-n(ch3)-ch3,-ch2-s-ch2-ch3,-ch2-ch2,-s(o)-ch3,-ch2-ch2-s(o)2-ch3,-ch＝ch-o-ch3,-si(ch3)3,-ch2-ch＝n-och3,和-ch＝ch-n(ch3)-ch3。最多两个杂原子可以是连续的，例如-ch2-nh-och3和-ch2-o-si(ch3)3。
类似地，术语“杂亚烷基”本身或作为另一取代基的一部分是指衍生自杂烷基的二价基团，例如以-ch2-ch2-s-ch2-ch2-和-ch2-s-ch2-ch2-nh-ch2-为实例。对于杂亚烷基，杂原子也可以占据链末端的任一个或两个(例如亚烷基氧基、亚烷基二氧基、亚烷基氨基、亚烷基二氨基等)。此外，对于亚烷基和杂亚烷基连接基团，没有暗示连接基团的取向。
除非另外说明，术语“环烷基”和“杂环烷基”自身或与其它术语组合，分别表示“烷基”和“杂烷基”的环状形式。相应地，环烷基具有指定的碳原子数(即c3-c8表示3至8个碳)，并且还可以具有一个或两个双键。杂环烷基由指定的碳原子数和选自氧、氮、硅和硫的一至三个杂原子组成，并且其中氮和硫原子可任选地被氧化，且氮杂原子可任选地被季铵化。另外，对于杂环烷基，杂原子可以占据杂环与分子的剩余部分连接的位置。环烷基的实例包括环戊基、环己基、1-环己烯基、3-环己烯基、环庚基等。杂环烷基的实例包括1-(1,2,5,6-四氢吡啶基)、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-吗啉基、3-吗啉基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基、四氢噻吩-2-基、四氢噻吩-3-基、1-哌嗪基、2-哌嗪基等。
除非另有说明，术语“卤代”和“卤素”本身或作为另一取代基的一部分，是指氟、氯、溴或碘原子。另外，术语例如“卤代烷基”是指包括被一个到(2m'+1)的数目范围内的相同或不同的卤素原子取代的烷基，其中m'是烷基中碳原子的总数。例如，术语“卤代(c1-c4)烷基”是指包括三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、4-氯丁基、3-溴丙基等。因此，术语“卤代烷基”包括单卤代烷基(被一个卤素原子取代的烷基)和多卤代烷基(被2至(2m'+1)个卤素原子取代的烷基，其中m'为烷基中碳原子的总数)。除非另外说明，术语“全卤代烷基”是指被(2m'+1)个卤素原子取代的烷基，其中m'是烷基中的碳原子的总数。例如术语“全卤代(c1-c4)烷基”是指包括三氟甲基、五氯乙基、1,1,1-三氟-2-溴-2-氯乙基等。
术语“酰基”是指通过除去酸的羟基部分衍生自有机酸的那些基团。相应地，酰基是指包括如乙酰基、丙酰基、丁酰基、癸酰基、新戊酰基、苯甲酰基等。
除非另外说明，术语“芳基”是指多不饱和的，通常为芳香族的烃取代基，其可以是稠合在一起或共价连接的单环或多环(至多三个环)。芳基的非限制性实例包括苯基、1-萘基、2-萘基、4-联苯基和1,2,3,4-四氢萘。
术语“杂芳基”是指含有0至4个选自氮、氧和硫的杂原子的芳基(或环)，其中氮和硫原子任选地被氧化，且氮杂原子任选地被季铵化。杂芳基可以通过杂原子连接到分子的剩余部分。杂芳基的非限制性实例包括1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、吡嗪基、2-恶唑基、4-恶唑基、2-苯基-4-恶唑基、5-恶唑基、3-异恶唑基、4-异恶唑基、5-异恶唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-苯并噻唑基、嘌呤基、2-苯并咪唑基、5-吲哚基、1-异喹啉基、5-异喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔啉基、3-喹啉基和6-喹啉基。
为简便起见，当与其它术语(例如芳氧基芳基硫氧基芳基烷基)组合使用时，术语“芳基”包括如上定义的芳环和杂芳基环。因此，术语“芳基烷基”是指包括其中芳基连接至烷基的那些基团(例如苄基、苯乙基、吡啶基甲基等)，所述烷基包括其碳原子(例如亚甲基基团)被例如氧原子替代的烷基基团(如苯氧基甲基、2-吡啶基氧基甲基、3-(1-萘氧基)丙基等)。
上述术语(如“烷基”、“杂烷基”、“芳基”和“杂芳基”)中的每一个是指包含所示基团的取代和未取代两种形式。每种类型的基团的优选取代基提供如下。
烷基和杂烷基(以及被称为亚烷基、烯基、杂亚烷基、杂烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的那些基团)的取代基可以是选自以下的各种基团：-or'、＝o、＝nr'、＝n-or'、-nr'r"、-sr'、卤素、-sir'r"r'"、-oc(o)r'、-c(o)r'、-co2r'、-conr'r"、-oc(o)nr'r"、-nr"c(o)r'、-nr'-c(o)nr"r'"、-nr'-so2nr'"、-nr"co2r'、-nh-c(nh2)＝nh、-nr'c(nh2)＝nh、-nh-c(nh2)＝nr'、-s(o)r'、-so2r'、-so2nr'r"、-nr"so2r，-cn和-no2，数量范围从0至3，那些具有0、1或2个取代基的基团是特别优选的。r'、r"和r'"每个独立地指氢、未取代的(c1-c8)烷基和杂烷基、未取代的芳基、被一至三个卤素取代的芳基、未取代的烷基、烷氧基或硫代烷氧基，或芳基-(c1-c4)烷基基团。当r'和r"连接到相同的氮原子时，它们可以与氮原子组合形成5-，6-或7-元环。例如，-nr'r"是指包括1-吡咯烷基和4-吗啉基。通常，烷基或杂烷基具有0至3个取代基，在本发明中优选具有两个或更少取代基的那些基团。更优选地，烷基或杂烷基将是未取代的或单取代的。最优选地，烷基或杂烷基是未取代的。从上述取代基的讨论中，本领域技术人员将理解术语“烷基”意指包括例如三卤代烷基(例如，-cf3和-ch2cf3)的基团。
烷基和杂烷基的优选取代基选自：-or'、＝o、-nr'r"、-sr'、卤素、-sir'r"r'"、-oc(o)r'、-c(o)r'、-co2r'、-conr'r"、oc(o)nr'r"、-nr"c(o)r'、-nr"co2r'、-nr'-so2nr"r'"、-s(o)r'、-so2r'、-so2nr'r"、-nr"so2r、-cn和-no2，其中r'和r"如上面所定义的。进一步优选的取代基选自：-or'、＝o、-nr'r"、卤素、-oc(o)r'、-co2r'、-conr'r"、-oc(o)nr'r"、-nr"c(o)r'、-nr"co2r'、-nr'-so2nr"r'"、-so2r'、-so2nr'r"、-nr"so2r，-cn和-no2。
类似地，芳基和杂芳基的取代基是不同的，并且选自：卤素、-or'、-oc(o)r'、-nr'r"、-sr'、-r'、-cn、-no2、-co2r'、-conr'r"、-c(o)r'、-oc(o)nr'r"、-nr"c(o)r'、-nr"co2r'、-nr'-c(o)nr"r'"、-nr'-so2nr"r'"、-nh-c(nh2)＝nh、-nr'c(nh2)＝nh、-nh-c(nh2)＝nr'、-s(o)r'、-so2r'、-so2nr'r"、-nr"so2r、-n3、-ch(ph)2，全氟(c1-c4)烷氧基和全氟(c1-c4)烷基，数量范围为0至芳族环系统上的开放化合价的总数；并且其中r'，r"和r'"独立地选自氢、(c1-c8)烷基和杂烷基、未取代的芳基和杂芳基、(未取代的芳基)-(c1-c4)烷基和(未取代的芳基)氧基-(c1-c4)烷基。当芳基是1,2,3,4-四氢萘时，它可以被取代或未取代的(c3-c7)螺环烷基取代。(c3-c7)螺环烷基可以以本文对“环烷基”所定义的相同方式取代。通常，芳基或杂芳基具有0至3个取代基，在本发明中优选具有两个或更少取代基的那些基团。在本发明的一个实施方案中，芳基或杂芳基是未取代的或单取代的。在另一个实施方案中，芳基或杂芳基将是未取代的。
芳基和杂芳基的优选取代基选自：卤素、-or'、-oc(o)r'、-nr'r"、-sr'、-r'、-cn、-no2、-co2r'、-conr'r"、-c(o)r'、-oc(o)nr'r"、-nr"c(o)r'、-s(o)r'、-so2r'、-so2nr'r"、-nr"so2r、-n3、-ch(ph)2、全氟(c1-c4)烷氧基和全氟(c1-c4)烷基，其中r'和r"如上所定义。进一步优选的取代基选自：卤素、-or'、-oc(o)r'、-nr'r"、-r'、-cn、-no2、-co2r'、-conr'r"、-nr"c(o)r'、-so2r'、-so2nr'r"、-nr"so2r，全氟(c1-c4)烷氧基和全氟(c1-c4)烷基。
本文所用的取代基-co2h包括其生物电子等排置换；参见例如thepracticeofmedicinalchemistry；wermuth，c.g.，ed.；academicpress:newyork,1996；p.203。
芳环或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可任选地被式-t-c(o)-(ch2)q-u-的取代基替代，其中t和u独立地为-nh-、-o-，-ch2-或单键，且q为0-2的整数。或者，芳环或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可任选地被式-a-(ch2)r-b-的取代基替代，其中a和b独立地为-ch2-、-o-、-nh-、-s-、-s(o)-、-s(o)2-，-s(o)2nr'-或单键，且r为1-3的整数。如此形成的新环的单键之一可任选地被双键代替。或者，芳环或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可任选地被式-(ch2)s-x-(ch2)t-的取代基替代，其中s和t独立地为0至3的整数，并且x为-o-、-nr'-、-s-、-s(o)-，-s(o)2-或-s(o)2nr'-。-nr'-和-s(o)2nr'-中的取代基r'选自氢或未取代的(c1-c6)烷基。
本文公开了优选的取代基并在表格、结构，实施例和权利要求中举例说明，并且取代基可以应用于本发明的不同化合物，即任何给定化合物的取代基可以与其它化合物组合使用。
在具体的实施方案中，适用的取代基独立地为取代或未取代的杂原子，取代或未取代的，任选地杂原子c1-c6烷基，取代或未取代的，任选地杂原子c2-c6烯基，取代或未取代的，任选地杂原子c2-c6炔基，或取代或未取代的，任选地杂原子c6-c14芳基，其中每个杂原子独立地为氧、磷、硫或氮。
在更具体的实施方案中，适用的取代基独立地为醛、醛亚胺、烷酰氧基、烷氧基、烷氧基羰基、烷氧基、烷基、胺、偶氮、卤素、氨基甲酰基、c(o)r(例如羰基)、甲酰氨基、羧基、氰基、酯、卤代、卤代甲酰基、过氧烃基、羟基、亚胺、异氰化物、异氰酸酯、n-叔丁氧羰基、硝酸盐、腈、亚硝酸盐、硝基、亚硝基、磷酸酯、膦酰基、硫化物、磺酰基、磺基、巯基、硫醇、硫氰基，三氟甲基或三氟甲基醚(ocf3)。
术语“药学上可接受的盐”意指包括用相对无毒的酸或碱制备的活性化合物的盐，这取决于在本文所述化合物上发现的具体取代基。当本发明的化合物含有相对酸性的官能团时，碱加成盐可以通过使这种化合物的中性形式与足量的所需碱(要么是纯的要么在合适的惰性溶剂中)接触来获得。药学上可接受的碱加成盐的实例包括钠、钾、钙、铵，有机胺或镁盐，或类似的盐。当本发明的化合物含有相对碱性的官能团时，酸加成盐可以通过将这种化合物的中性形式与足量的所需酸(要么是在纯的要么在合适的惰性溶剂中)接触来获得。药学上可接受的酸加成盐的实例包括那些衍生自无机酸的如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸、一氢碳酸、磷酸、一氢磷酸、二氢磷酸、硫酸、一氢硫酸，氢碘酸或亚磷酸等，和衍生自相对无毒的有机酸如乙酸、丙酸、异丁酸、草酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富马酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸，甲磺酸等的盐。还包括氨基酸，例如精氨酸等的盐，以及有机酸，如葡糖醛酸或半乳糖醛酸等的盐。本发明的某些特定化合物同时含有碱性和酸性官能团，其允许化合物转化为碱或酸加成盐。
化合物的中性形式可以通过使盐与碱或酸接触并以常规方式分离母体化合物来再生成。化合物的母体形式在某些物理特性，例如在极性溶剂中的溶解度方面，不同于各种盐的形式，但是对于本发明的目的而言，这些盐等同于化合物的母体形式。
除了盐形式之外，本发明提供了前药形式的化合物。本文所述的化合物的前药是指在生理条件下经过化学变化以提供本发明化合物的那些化合物。另外，前药可以在体外环境中通过化学或生物化学方法转化为本发明的化合物。例如，当与合适的酶或化学试剂共同置于透皮贴剂储库中时，前药可被缓慢转化为本发明的化合物。前药通常是有用的，因为在一些情况下，它们可能比母体药物更容易施用。例如，它们可能比母体药物更具口服生物利用度。前药在药物组合物中也可能有比母体药物改善的溶解性。本领域已知各种各样的前药衍生物，例如依赖于水解裂解或氧化活化的那些前药。前药的一个非限制性实例是本发明中的一个化合物作为酯(“前药”)给药，但随后代谢水解成羧酸，即活性形式。另外的实例包括本发明化合物的肽基衍生物。
本发明的某些化合物可以非溶剂化形式以及溶剂化形式存在，包括水合物形式。通常，溶剂化形式等同于非溶剂化形式，并且包括在本发明的范围内。本发明的某些化合物可以以多种结晶或无定形形式存在。通常，所有物理形式对于本发明考虑的用途是等效的，并且包含在本发明的范围内。
一些题述化合物具有不对称碳原子(光学中心)或双键；外消旋体、非对映异构体，几何异构体和特别指定或描述的手性是优选的，并且在许多情况下对于最佳活性是关键的；但所有这些异构体都旨在包括在本发明的范围内。
本发明的化合物还可以在构成这种化合物的一个或多个原子处含有非天然比例的原子同位素。例如，化合物可以用放射性同位素放射性标记，例如氚(3h)，碘-125(125i)或碳-14(14c)。本发明化合物的所有同位素变体，无论是否是放射性的，都旨在包括在本发明的范围内。
术语“治疗有效量”是指将在一定程度上引起组织、系统、动物或人的生物或医学反应的题述化合物的量，这正是研究者、兽医、医生或其他临床医生所寻求的，例如当施用时，足以预防所治疗的病症或障碍的一种或多种症状的发展或在一定程度上减轻所治疗的病症或障碍的一种或多种症状。治疗有效量会根据化合物、疾病及其严重程度，以及待治疗的哺乳动物的年龄、体重等的不同而变化。
本发明还提供了包含题述化合物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物，特别是包含单位剂量的题述化合物的组合物，尤其是该组合物与描述组合物用于治疗适用疾病或病症(本文中)的说明书共包装。
施用的组合物可以是散装液体溶液或悬浮液或散装粉末的形式。然而，更普遍地，组合物以单位剂型呈现以促进精确给药。术语“单位剂型”是指适合作为人类受试者和其它哺乳动物的单位剂量的物理上不连续的单位，每个单位含有计算产生所需治疗效果的预定量的活性物质，并与合适的药物辅料结合。典型的单位剂型包括液体组合物的预先填充的、预先测量的安瓿或注射器，或在固体组合物的情况下的丸剂、片剂、胶囊、锭剂等。在这样的组合物中，化合物通常是次要组分(约从0.1％至50％重量，或优选地约为从1％至40％重量)，其余是各种载体和加工助剂，有助于形成所需剂量。
合适的赋形剂或载体和用于制备可施用组合物的方法是本领域技术人员已知或显而易见的，并且在诸如remington'spharmaceuticalscience，mackpublishingco，nj(1991)的出版物中有更详细地描述。此外，该化合物与本文所述的或本领域已知的其它治疗剂、特别是其它抗糖尿病或抗肥胖剂，联合用药时可有利地使用。因此，组合物可以单独、联合或组合施用于单一剂量单位。
施用量取决于化合物剂型，施用途径等，并且通常在常规试验中凭经验确定，并且根据靶标、宿主和施用途径等将必然发生变化。通常，根据具体应用，单位剂量制剂中活性化合物的量可以从约1，3，10或30到约30，100，300或1000mg变化或调节。在一个具体实施方案中，单位剂型包装在适于顺序使用的多包装中，例如泡罩包装，包括至少6，9或12个单位剂型的片材。所用的实际剂量可以根据患者的需要和所治疗的病症的严重程度而变化。对于特定情况的适当剂量的确定在本领域的技术范围内。通常，用小于化合物最佳剂量的较小剂量开始治疗。此后，剂量增加少量，直到达到在这种情况下的最佳效果。为了方便起见，如果需要，总日剂量可以分开并在当天内分批给药。
化合物可以通过多种方法施用，包括但不限于胃肠外、体表、口服或局部施用，例如通过气雾剂或经皮，用于预防和/或治疗性处理。此外，根据熟练临床医生的知识，治疗方案(例如，给药的剂量和次数)可以视所观察到的给予的治疗剂对患者的作用及所观察到的疾病与所施用的治疗剂的反应而变化。
在用于治疗患者的治疗有效方案的过程中，可以以治疗有效剂量和总量施用本发明的治疗剂。对于更有效的化合物，每千克患者的微克(μg)量可能是足够的，例如在约1，10或100ug/kg至约0.01，0.1，1，10或100mg/kg的患者体重范围内，尽管最佳剂量是化合物特定的，并且通常每种化合物是根据经验确定的。
一般来说，临床试验中的常规实验将确定最佳治疗效果的具体范围，对于每种治疗剂，每种给药方案，并且对特定患者的给药也将根据患者状况和对初始剂量的反应被调整到有效和安全的范围内。然而，最终给药方案将根据主治临床医生的判断，考虑诸如年龄、病人的状况和大小以及化合物效力、所治疗疾病的严重性等因素来调整。例如，化合物的剂量方案可以是以两至四个(优选两个)分开的剂量口服给药，从10毫克至2000毫克/天，优选的是10至1000毫克/天，更优选的是50至600毫克/天。还可以使用间歇治疗(例如，三周内一周或四周内三周)。
应理解，本文所述的实施例和实施方案仅用于说明目的，并且鉴于本领域技术人员会联想到其各种修改或变化，且包括在本申请的精神和范围以及所附权利要求的范围内。本文引用的所有出版物、专利和专利申请(包括其中的引用)在此以其全文并入作为参考用于所有目的。
实施例
靶向线粒体呼吸链的高效细胞凋亡抑制剂
在此，我们报告一系列独特并高效细胞凋亡抑制剂(tc09系列)。它们具有低纳摩尔ec50值，和靶向发生在bcl-2家族蛋白的调节和线粒体细胞色素c释放之间的凋亡信号传导途径中的事件。基于亲和力的蛋白质谱分析(abpp)的靶标识别揭示tc09凋亡抑制剂化合物的分子靶标是线粒体呼吸链复合物ii中的琥珀酸脱氢酶亚基b(sdhb)。
使用具有可诱导bim过表达的细胞系(u2os_bim)筛选含有200,000个小分子的化学文库，以寻找阻断细胞凋亡的化合物。[7]几种活性标的被鉴定，并且这些活性标的的ec50在2至20μm之间，在bim过表达诱导的细胞凋亡后增加细胞存活率。通过免疫荧光试验检查细胞色素c的线粒体释放，以检测这些标的是否在诱导的bim蛋白过表达后发生的凋亡相关的线粒体变化的上游起作用。ec50为4.0μm的一个标的可以阻止细胞色素c释放，选择该化合物用于进一步优化(tc09-标的,表1)。
我们进行了基于结构活性关系的优化，目的是改善筛选的标的的活性。我们首先优化了片段r1(表1)。在每种情况下，用不同大小的脂肪族基团取代r1使细胞凋亡抑制活性增加3-5倍(化合物1-3)。还测试了芳香族取代，并且活性保持在与标的相似的水平(化合物4,5)。这表明片段r1可以耐受相对大的结构变化。由于化合物1具有最强的凋亡抑制活性，我们用甲基取代r1的原始结构用于进一步的sar研究。我们接下来用不同的基团取代r2位的-cf3基团；所有这些变化导致活性完全丧失(化合物6-9)。这可能涉及约束的结合环境或原始-cf3基团的强吸电子性质的必要性。
表1化合物tc091-17的sar研究
我们接下来对片段r3进行sar优化(表1)。尽管用苯环(10)取代原始噻吩基团导致活性降低，但它确实提供了更多选择来测试取代基在环的不同位置的影响。在苯环的2-,3-,4-位具有甲基取代的化合物显示出其活性的不同趋势(化合物11-13)。与化合物10相比，2-和4-位的甲基取代(11,13)导致活性降低3倍，而3-位甲基取代(化合物12)具有与化合物10相似的ec50。此外，在2-,3-,4-位具有–cooch3取代的化合物的活性具有相似的模式，即只有3-位取代保持活性(化合物14-16)。这些结果暗示苯环3-位附近的区域比其他位置具有更大的耐受性。然后我们通过用吡啶酮环取代原始噻吩基团来合成化合物17。它是作为一个在3-位进一步探索sar的中间体，其活性完全丧失。然而，在吡啶酮(化合物18)中向n原子上加上苄基使其活性恢复到ec50为1157nm(表2)。该有趣发现表明通过添加苄基环延伸化合物的骨架可以与靶标形成新的相互作用。
表2.化合物tc0913-35的sar研究
受这些结果的鼓舞，然后对苄基环上sar进行了更详细的探索。检测苄基环(化合物19-21)不同位置的氯取代。如表2所示，与化合物18相比，2-氯化合物19的活性仅略微增加，但发现3-和4-氯化合物20和21在抑制细胞凋亡方面更有效。化合物20的ec50为257nm，比化合物18的效力高4倍。化合物21的效力比化合物18高17倍。我们接下来集中于苄基环的3-和4-位上的取代。合成并测试3-位-oh,-ome,-oet,和-opr取代的化合物(化合物22-25)。具有3-oh取代的化合物具有与化合物18相同的活性，并且效力低于3-氯化合物20。在氧原子上增加甲基(化合物23)使活性提高约20倍；其ec50仅为57nm。–oet和–opr取代的化合物24和25活性也显示出与化合物23的活性相似的增强作用。然后检测4-ome取代(化合物26)的影响，并且与3-ome取代相同，与化合物18相比，它也促进活性提高约12倍。受化合物23和26启发，我们接着在化合物271-(3，4二甲氧基苄基)-5-(2-甲基磺酰基-6-三氟甲基嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)中组合了3-和4-位-ome取代，其显示出进一步增加的抑制活性，ec50低至11nm，比初始标的化合物高300多倍。
除了检测tc09化合物在bim诱导的细胞凋亡的细胞凋亡抑制活性外，我们也评估了它们是否可以阻断由bcl-2家族的另一种促凋亡蛋白tbid的过表达诱导的细胞凋亡。在两种细胞凋亡诱导模型中均观察到可比较的抑制效力性质，并且最佳化合物27达到66nm的ec50。据我们所知，tc09化合物是第一个在细胞试验中以低纳摩尔水平完全抑制细胞凋亡的化合物。
据报道，当与吸电子基团连接时，砜可以作为sn2取代反应中的良好离去基团。[8]我们的sar研究中的活性化合物都含有与砜基团连接的-cf3取代的嘧啶环。用具有较弱吸电子性质的基团取代r2位置的cf3完全消除了细胞凋亡抑制活性。观察到的凋亡抑制活性的变化与与砜基团连接的片段的亲电性的变化相关的事实表明tc09化合物可通过与亲核残基的sn2取代反应，通过共价结合发挥作用。为了测试代表性tc09化合物的反应性，我们使用不同的亲核试剂(半胱氨酸，赖氨酸和谷胱甘肽)与化合物1，6和27进行模型反应。lc-ms反应分析表明化合物1和27的亲核取代产物在与半胱氨酸和谷胱甘肽的反应中观察到，但在赖氨酸反应中没有观察到。在任何亲核试剂反应中均未观察到化合物6的产物。为了进一步探索活性化合物在细胞环境中的结合模式，我们接下来进行细胞洗涤/不洗涤测定以确定化合物-靶标相互作用的可逆性。在化合物温育后，将一个细胞亚群洗涤数次以除去游离的测试化合物，并且不洗涤另一个亚组。诱导细胞凋亡，然后测量细胞的活力，并将洗涤条件下的ec50与无洗涤条件进行比较。[9]大多数化合物在这两种条件下具有相似的ec50值(表3)，表明这些化合物与靶标之间存在不可逆的结合模式。模型反应和细胞试验的结果表明，tc09凋亡抑制剂通过与靶标的共价结合起作用，并且可能通过-sh残基攻击起作用。
表3.洗涤和不洗涤测定之间的ec50值的比较
鉴于tc09凋亡抑制剂在线粒体细胞色素c释放的上游起作用以抑制细胞凋亡并维持细胞存活，我们接下来检查它们是否可以阻断诱导凋亡后发生的线粒体功能障碍。我们首先使用tmrm测量线粒体膜电位的变化，tmrm是一种在不同条件下的荧光染料。已知bim过表达的dox诱导导致线粒体膜电位的丧失，从而减少细胞凋亡期间tmrm的富集。化合物在完全阻断细胞凋亡的浓度下可以维持线粒体膜电位和tmrm富集，这是半胱天冬酶抑制剂zvad无法实现的结果。tc09化合物的线粒体保护作用也受到凋亡诱导后ros水平测定的支持。由于电子传递链的中断和细胞凋亡过程中膜通透性的变化，ros水平上调，过度产生的ros再次成为刺激因子并导致进一步损伤[13]。tc09化合物治疗即使在凋亡诱导时也维持正常的ros水平，并且显示出剂量依赖性效应。
为了鉴定ttc09凋亡抑制剂的靶蛋白，我们基于sar研究合成了两组用于靶标识别的探针。第一组探针设计用于基于直接活性的蛋白质谱分析(abpp)，其中生物素标签在不同位点连接。添加这些生物素标签导致不同程度的活性丧失，可能是由于大块片段的空间位阻或细胞渗透性的变化(表2)。选择化合物30和31作为用于亲和沉淀实验的阳性和阴性探针，并鉴定出琥珀酸脱氢酶亚基b(sdhb)，其是位于线粒体内膜上的呼吸链复合物ii的组分，是共价结合靶点。tc09凋亡抑制剂可在bim/tbid过表达后稳定线粒体呼吸链，并有助于维持线粒体的正常功能。还制备了第二组具有末端炔基的探针，其设计用于点击反应辅助的abpp。大多数这些化合物(28，29，32-34)保留了相对有效的活性，ec50值低于1μm。使用化合物29作为阳性探针并使用化合物27作为竞争剂进行点击反应辅助的abpp；这些探针也将sdhb鉴定为细胞靶标。为了进一步证实sdhb确实是分子靶标，我们还合成了化合物29的衍生物，其具有用于荧光成像的fitc标签(化合物35，ec50＝995nm)。化合物35的绿色荧光与线粒体的特定红色荧光染色很好地融合，表明化合物35大部分定位于线粒体中。
tc09化合物使细胞免于凋亡损伤
尽管进行了大量努力，但研究人员尚未找到当线粒体凋亡途径被激活时可赋予细胞长期生存活性的小分子。泛半胱天冬酶抑制剂z-vad-fmk能够在短时间内(通常少于24小时)保持细胞存活(通过细胞atp水平测量)，但在上游对线粒体的损伤持续存在时无法使细胞免于死亡。
因此，我们测试了tc09化合物对经历持续凋亡损伤的细胞的长期影响。在加入dox后24小时内，对照u2os_bim细胞完全死亡，尽管z-vad-fmk的存在明显延迟了死亡，但大多数细胞在第3天死亡。值得注意的是，在测试的tc09化合物存在下，细胞继续增殖，类似于在正常条件下生长的细胞。
当细胞培养1周时，tc09化合物赋予的长期细胞存活率再次得到证实，所得细胞集落用结晶紫染料显现。即使在z-vad-fmk存在下，当加入dox时，u2os_bim细胞全部被杀死。相反，当存在tc09化合物时，在含有dox的培养基中生长的细胞集落与在没有dox中生长的无法区分，这表明tc09化合物与仅延迟细胞死亡的半胱天冬酶抑制剂不同，能够使细胞保持活力，甚至在它们的线粒体凋亡途径被激活后也会增殖。
tc09化合物可有效地保护帕金森病动物模型中的神经元死亡
我们在体外实验中观察到的tc09化合物显著的细胞保护作用促使我们测试这些化合物在体内实验中是否显示出相似的效果。为此，我们选择了6-ohda诱导的大鼠帕金森病模型。将多巴胺衍生物6-ohda注射到大鼠脑的内侧前脑束区域中引起实质性黑质区域中多巴胺能神经元的特异性消耗。共同注射增加量的示例性tc09化合物(化合物27)显示出这些神经元的剂量依赖性保护，而无活性衍生物，即使在最高注射浓度下，也未显示出任何保护作用。单独使用tc09化合物治疗并未增加实质性黑质区域的面积，表明tc09化合物的作用通过细胞保护而不是通过增加的细胞增殖发生。tc09化合物的保护作用不是由中和6-ohda的化学反应引起的，因为无论是否存在化合物a，在大鼠脑组织中都能检测到相似量的6-ohda。由tc09化合物保护的多巴胺能神经元似乎具有功能性，因为注射6-ohda的大鼠的帕金森样行为被tc09化合物纠正。我们得出结论，tc09化合物可赋予多巴胺能神经元剂量依赖性保护并纠正与该疾病相关的神经学表型。
已知过度凋亡在神经障碍中起重要作用，并且我们确定tc09化合物可以在帕金森病的小鼠模型中赋予保护作用。在这里，我们测试了tc09化合物在大鼠缺血模型中的潜在治疗生物活性。在脑缺血后，已知唯bh3域蛋白上调并激活内在凋亡途径，并且半胱天冬酶抑制剂可减弱局灶性缺血中死亡组织的体积。对于体内评估，大鼠中脑动脉闭塞(mcao)诱导短暂局灶性脑缺血。注射tc09化合物显示出剂量依赖性保护作用；治疗后可减小局灶性脑缺血诱导后脑梗死体积，从而证明了tc09化合物在神经元保护中的应用。
总之，我们基于高通量筛选得到的初始标的和sar优化，开发了一系列独特的不可逆凋亡抑制剂，并将细胞活性提高到ec50在低纳摩尔水平。这些化合物与线粒体呼吸链复合物ii的sdhb亚基共价结合，并通过稳定线粒体呼吸链，维持线粒体膜电位和抑制ros产生来赋予线粒体保护作用。该化合物在短暂局灶性脑缺血中也显示出显著的保护作用，进一步证明了它们作为过度凋亡相关疾病的新疗法的应用。
实验方案：
高通量筛选
根据以下程序筛选含有200000种化合物的化学文库：u2os_bim细胞(一种唯bh3域的蛋白bim可通过向生长培养基中加入强力霉素而诱导表达的细胞系)[2]以每孔500个细胞的密度，用30μl培养基，接种于384-孔板。铺板16小时后，将测试化合物从储备板转移至具有培养细胞的测定板。向每个板中加入阳性对照(20μmzvad)和阴性对照(dmso)。化合物处理1小时后，加入0.1ug/ml多西环素(dox)以诱导bim蛋白的表达。24小时后，通过使用celltiter-glo试剂盒(promega，g7570)根据制造商的说明书测量atp水平来确定细胞活力。用perkinelmerenspiremultimodeplatereader多模板读数器记录发光。选择能够将细胞活力挽救至50％以上水平的化合物；然后保险起见，将这些化合物第二次筛选。
细胞色素c的免疫染色
将u2os_bim细胞接种在lab-tek八室载玻片(thermoscientific)中。24小时后，用实验化合物处理细胞1小时。用pbs洗涤细胞10分钟，并在室温下用2％pfa固定30分钟。在pbs中再洗涤三次后，将细胞在含有0.1％tritonx-100的pbs中温育10分钟。将细胞色素c抗体(在pbst中的5％bsa中稀释)与细胞一起在4℃温育过夜。然后用pbst洗涤细胞三次，并在室温下与二抗孵育1小时。在pbs中再洗涤三次后，将载玻片盖上并密封，然后用zeisslsm510共聚焦显微镜检查。
细胞凋亡抑制试验
将u2os_bim或u2os_tbid细胞以每孔3000个细胞的密度接种在96孔板中。24小时后，用实验化合物，zvad(阳性对照)和dmso(阴性对照)处理细胞1小时。然后用0.1μg/mldox处理细胞以引发细胞凋亡。加入dox后24小时，通过使用celltiter-glo试剂盒测量atp水平来确定细胞活力。计算细胞存活率。
不可逆性结合测定
将u2os_bim细胞以每孔3000个细胞的密度接种在96孔板中。24小时后，用实验化合物处理重复的细胞集3小时。用0.1μg/mldox处理这些细胞的一个子集以触发细胞凋亡。在用0.1μg/mldox处理之前，使用温热培养基将剩余的细胞亚群洗去实验化合物3次。加入dox后24小时，通过使用celltiter-glo试剂盒测量atp水平来确定细胞活力。计算细胞存活率。zvad(20μm)用作阳性对照。
tmrm染色
将u2os_bim细胞以每孔3000个细胞的密度接种在96孔光学板中。24小时后，用实验化合物处理细胞1小时。然后用0.1μg/mldox处理细胞以引发细胞凋亡。4小时后，向每个孔中加入50nmtmrm并孵育30分钟。用温热的pbs缓冲液洗涤细胞3次，并用zeisslsm510共聚焦显微镜检查。
ros测量
将u2os_bim细胞以每孔3000的密度接种在96孔光学板中。24小时后，用实验化合物处理细胞2小时。然后用0.1μg/mldox处理细胞以引发细胞凋亡。4小时后，用pbs洗涤细胞3次，然后在含有2μmdcfh-da的pbs中于37℃温育30分钟。然后用pbs洗涤细胞两次，用perkinelmerenspiremultimodeplatereader多模板读数器((λex＝485nm和λem＝525nm)检测荧光。作为阳性对照，在dcfh-da孵育和pbs洗涤后，将50μmh2o2加入未处理的细胞中，然后进行荧光分析。在荧光检测后，立即通过使用celltiter-glo试剂盒测量atp水平来确定细胞活力。将平均ros水平记录为ros荧光/细胞活力，并计算ros增加的比率。数据表示为平均值±重复的标准偏差。
点击化学辅助的基于活性的蛋白质谱分析
用竞争剂化合物27处理u2os_bim细胞1小时，浓度为20μm至200μm。然后用pbs洗涤化合物27(3次洗涤)，加入20μm化合物29并孵育3小时。然后裂解细胞并将裂解物调节至1mg/ml蛋白质的浓度。用化合物生物素-n3(n-(2-(2-(2-(2-叠氮基乙基氧)乙基氧)乙基氧)乙基)-5-((3as,4s,6ar)-2-氧六氢-1h噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)戊酰胺)(500μm)、tbta(500μm)、cuso4(1mm)和l-抗坏血酸钠(1mm)在37℃下进行点击反应1小时。然后用5倍体积的甲醇沉淀裂解物，用甲醇洗涤3次，然后用1ml含有0.2％sds的pbs缓冲液再溶解。向每个样品中加入200ul链霉抗生物素蛋白琼脂糖。将样品在室温下温育2小时，以3000转离心3分钟，然后用pbs缓冲液洗涤3次。使用30ul1x上样缓冲液进行洗脱。然后将样品洗脱液用于western印迹检测生物素和sdhb。
细胞荧光染色
将u2os_bim细胞接种在光学板上。24小时后，用化合物处理细胞3小时，然后与mitotrackerredcmxros(50nm)一起温育5分钟。用pbs洗涤细胞10分钟，并在室温下用2％pfa固定30分钟。在pbs中再进行三次额外洗涤后，使用nikona1-r共聚焦显微镜488nm和561nm激光检查细胞。
短暂局灶性脑缺血
如前所述，大鼠大脑中动脉闭塞(mcao)诱导短暂局灶性脑缺血，稍作修改(uluc，miranpuri等，2011)。简言之，将雄性spraguedawley大鼠(体重280-320g)用2％异氟烷麻醉。左侧颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉(cca，eca和ica)暴露。将具有硅涂层尖端的4-0单丝尼龙缝合线通过eca切口引入ica中以封闭mca的起源1小时。在缝合线插入后，将化合物注射到左侧纹状体中，在以下坐标处参照前囟：ap，0.4；ml，3.0；dv，-5.0毫米(来自硬脑膜)。使用hamilton注射器以1μl/分钟的速率注射溶液。将注射器留在原位5分钟，然后缓慢缩回。在mcao后24小时处死动物。取出脑并切成2mm厚的切片。通过用1.5％2,3,5-三苯基氯化四氮唑氯染色检查梗塞面积。
代表性示例化合物
标的。
表4a.sar优化：
表4a.sar优化：
化合物制备
2-(甲基亚磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(1)：
步骤1.4,4,4-三氟-1-(噻吩-2-基)丁烷-1,3-二酮(1-01)
在0℃下，向naome(10.3g,19mmol)的meoh溶液中加入1-(噻吩-2-基)乙酮(20g,16mmol)，并将混合物在室温下搅拌1小时。然后将混合物冷却到0℃，分批加入2,2,2-三氟乙酸乙酯(27g，19mmol)，将整个反应混合物在80℃下搅拌并回流过夜。在真空蒸发有机溶剂后，将残余物溶于h2o(200ml)中，用hcl(120ml,1n)酸化，并用etoac(200ml)萃取三次。合并有机层，用盐水洗涤，用na2so4干燥，浓缩，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝20/1)进一步纯化，得到11g4,4,4-三氟-1-(噻吩-2-基)丁烷-1,3-二酮(1-01)，为浅红色固体(32％)。
步骤2.4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-硫醇的制备(1-02)
在n2气氛下，25ml微波反应管中的meoh(4ml)中，将acoh(0.8ml)加入4,4,4-三氟-1-(噻吩-2-基)丁烷-1,3-二酮(1g,4.5mmol)和硫脲(1.7g,22.5mmol)的溶液中，将反应混合物在95℃下微波加热2小时。过滤反应混合液。从滤液中真空除去溶剂，然后将残余物用etoac和h2o萃取三次。合并有机层，用食盐水洗涤，用na2so4干燥，然后真空蒸发溶剂。固体残余物通过硅胶柱色谱(pe/ea＝1/1)进一步纯化，得到0.6g4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-硫醇(1-02)，为橙色固体(50％)。1hnmr(cdcl3)δ7.86(dd,j＝1.2,4.0hz,1h),7.63(dd,j＝1.2,5.2hz,1h),7.51(s,1h),7.20(dd,j＝4.0,5.2hz,1h).
步骤3.制备2-(甲基亚磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(1):
将1.1当量的k2co3(35mg,0.25mmol)加入到1-02(60mg,023mmol)和ch3i(36mg,0.25mmol)的dmf(1ml)溶液中，并将反应混合物在室温下搅拌2小时。然后将反应混合物用etoac/h2o(15ml/15ml)萃取三次。合并有机层，用食盐水洗涤，用na2so4干燥，浓缩，并用硅胶柱色谱(pe/ea＝1/1)进一步纯化，得到2-(甲硫基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶，为白色固体。
向2-(甲硫基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(54mg,0.196mmol)的dcm溶液中加入间氯过氧苯甲酸(85mg,0.49mmol)，反应混合物在室温下搅拌2小时。反应混合物用饱和nahco3/dcm(10ml/10ml)萃取三次。合并有机层，用食盐水洗涤，用na2so4干燥，并进一步用硅胶柱色谱(pe/ea＝1/1)纯化，得到化合物1为白色固体(10mg,0.04mmol)，收率18％。化合物11hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.02(dd,j＝1.2,4.0hz,1h0,7.84(s,1h),7.12(dd,j＝1.2,5.2hz,1h),7.25(dd,j＝4.0,5.2hz,1h),3.05(s,1h).
2-(乙基磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(2)
根据1的步骤，从1-02(60mg,023mmol)和碘乙烷(27mg,0.25mmol)制备标题化合物2，为淡黄色固体(12mg,0.04mmol)，收率15％。1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ8.78(s,1h),8.52(dd,j＝1.2,4.0hz,1h),8.11(dd,j＝1.2,4.8hz,1h),7.38(dd,j＝4.0,4.8hz,1h),3.67(q,j＝7.2hz,2h),1.34(t,j＝7.2hz,3h).
2-2-(乙基亚磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(3)
根据tc009014的步骤，从1-02(60mg,023mmol)和碘乙烷(27mg,0.25mmol)制备标题化合物3，为淡黄色固体(18mg,0.06mmol)，收率24％。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.02(dd,j＝1.2,3.6hz,1h),7.82(s,1h),7.71(dd,j＝1.2,4.8hz,1h),7.25(dd,j＝3.6,4.8hz,1h_,3.26-3.35(m,1h),3.14-3.24(m,1h),1.34(t,j＝7.2hz,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c11h10f3n2os2+],307.0,实测值307.3.
2-(丙基磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(4)
根据1的步骤，从1-02(60mg,0.23mmol)和1-碘丙烷(30mg,0.25mmol)制备标题化合物4，为淡黄色固体(19mg,0.06mmol)，收率25％。1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ8.78(s,1h),8.52(d,j＝3.6hz,1h),8.11(d,j＝4.8hz,1h),7.36-7.39(m,1h),3.62-3.67(m,2h),1.77-1.87(m,2h),1.04(t,j＝7.2hz,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c12h12f3n2o2s2+],337.0,实测值337.2.
2-(丙基亚磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(5)
根据1的步骤，从1-02(60mg,0.23mmol)和1-碘丙烷(30mg,0.25mmol)制备标题化合物5，为淡黄色固体(14mg,0.04mmol)，收率19％。lc-ms(esi)m/z:计算值[c12h12f3n2os2+],321.0,实测值321.4.
2-(丙-2-炔基-1-基磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(6)
根据1的步骤，从1-02(200mg,0.76mmol)和3-溴丙-1-炔(100mg,0.95mmol)制备标题化合物6，为白色固体(120mg,0.36mmol)，收率48％。1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.05(dd,j＝1.2,4.0hz,1h),7.95(s,1h),7.77(dd,j＝1.2,5.2hz,1h),7.27(dd,j＝4.0,5.2hz,1h),4.52(d,j＝2.8hz,2h),3.92(t,j＝2.8hz,1h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c12h8f3n2o2s2+],333.0,实测值333.2.
2-(苯基亚磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(7)
根据1的步骤，从1-02(60mg,0.23mmol)和1-碘苯(51mg,0.25mmol)制备标题化合物7，为浅黄色固体(10mg,0.03mmol)，收率12％。1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ8.69(s,1h),8.438(dd,j＝1.2,4.0hz,1h),8.06-8.09(m,2h),8.05(dd,j＝1.2,4.0hz,1h),7.83-7.86(m,1h),7.73-7.76(m,2h),7.33(dd,j＝4.0,4.8hz,1h).
2-氯-6-(4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基亚磺酰基)吡嗪(8)
根据1的步骤，从1-02(60mg,0.23mmol)和1-碘苯-2,6-二氯吡嗪(37mg,0.25mmol)制备标题化合物8，为浅黄色固体(7mg,0.02mmol)，收率8％。1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ9.11(s,1h),8.93(s,1h),8.332-8.35(m,1h),8.30(s,1h),7.96(dd,j＝1.2,4.8hz,1h),7.29(dd,j＝4.8hz,1h).
2-((环丙基甲基)磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(9)
根据1的步骤，从1-02(50mg,0.19mmol)和(溴甲基)环丙烷(46mg,0.21mmol)制备标题化合物9，为白色固体(7mg,0.02mmol)，收率12％。1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.03(d,j＝3.6hz,1h),7.93(s,1h),7.74(d,j＝4.8hz,1h),7.25(m,1h),3.56(d,j＝7.2hz,2h),0.83-0.89(m,1h),0.65-0.71(m,2h),0.40-0.45(m,2h).
2-((环丙基甲基)亚磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(10)
根据1的步骤，从1-02(50mg,0.19mmol)和(溴甲基)环丙烷(46mg,0.21mmol)制备标题化合物10，为白色固体(4.3mg,0.013mmol)，收率8％。1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.01(d,j＝3.6hz,1h),7.82(s,1h),7.71(d,j＝4.8hz,1h),7.24(m,1h),3.08-3.18(m,2h),0.86-0.89(m,1h),0.68-0.74(m,1h),0.61-0.66(m,1h),0.35-0.42(m,1h),0.23-0.28(m,1h).
2-(苄基磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(11)
根据1的步骤，从1-02(60mg,0.23mmol)和1-(溴甲基)苯(43mg,0.25mmol)制备标题化合物11，为淡黄色固体(19mg,0.06mmol)，收率25％。1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ8.78(s,1h),8.53(dd,j＝1.2,4.0hz,1h),8.13(dd,j＝1.2,4.8hz,1h),7.32-7.42(m,6h),5.05(s,2h).
2-(苄基亚磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(12)
根据1的步骤，从1-02(60mg,0.23mmol)和1-(溴甲基)苯(43mg,0.25mmol)制备标题化合物12(9mg,0.03mmol)，为淡黄色固体，收率11％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.97(dd,j＝0.8,4.0hz,1h),7.77(s,1h),7.71(dd,j＝0.8,4.8hz,1h),7.25-7.28(m,3h),7.24(dd,j＝4.0,4.8hz,1h),7.18-7.21(m,2h),4.47(d,j＝13.2hz,1h),4.34(d,j＝13.2hz,1h).
2-(((4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)磺酰基)甲基)苄腈(13)
根据1的步骤，从1-02(50mg,0.19mmol)和2-(溴甲基)苄腈(29mg,0.21mmol)制备标题化合物13，为白色固体(8mg,0.02mmol)，收率10％。1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.05(dd,j＝0.8,4.0hz,1h),7.94(s,1h),7.75-7.79(m,2h),7.72(dd,j＝0.8,7.6hz,1h),7.62-7.67(m,1h),7.48-7.53(m,1h),7.25-7.27(m,1h),5.10(s,2h).
2-(((4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)亚磺酰基)甲基)苄腈(14)
根据1的步骤，从1-02(50mg,0.19mmol)和2-(溴甲基)苄腈(29mg,0.21mmol)制备标题化合物14，为白色固体(6mg,0.02mmol)，收率8％。1hnmr(400hz,cdcl3)δ7.99(dd,j＝0.8,4.0hz,1h),7.84(s,1h),7.71(dd,j＝0.8,4.8hz,1h),7.54-7.63(m,3h),7.41-7.46(m,1h),7.24(dd,j＝4.0,4.8hz,1h),4.73(d,j＝13.2hz,1h),4.53(d,j＝13.2hz,1h).
3-(((4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)亚磺酰基)甲基)苄腈(15)
根据1的步骤，从1-02(60mg,0.23mmol)和3-(溴甲基)苄腈(49mg,0.26mmol)制备标题化合物15，为白色固体(17mg,0.03mmol)，收率20％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.99(d,j＝4.0,1h),7.81(s,1h),7.74(d,j＝4.8,1h),7.57(d,j＝7.6,1h),7.51(d,j＝7.6,1h),7.44(s,1h),7.41(t,j＝7.6,1h),7.24(dd,j＝4.0,4.8hz,1h),4.48(d,j＝13.2hz,1h),4.38(d,j＝13.2hz,1h).
2-((3-甲氧基苄基)亚磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(16)
根据1的步骤，从1-02(60mg,0.23mmol)和1-(氯甲基)-3-甲氧基苯(40mg,0.26mmol)制备标题化合物16，为白色固体(47mg,0.12mmol)，收率51％。1hnmr(400hz,cdcl3)δ7.98(d,j＝3.2hz,1h),7.78(s,1h),7.71(d,j＝4.8hz,1h),7.24(dd,j＝4.0,4.8hz,1h),7.18(t,j＝8.0hz,1h),6.82～6.78(3,3h),4.44(d,j＝12.8hz,2h),4.32(d,j＝12.8hz,2h),3.74(s,3h).
2-((4-甲氧基苄基)亚磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(17)
根据1的步骤，从1-02(60mg,0.23mmol)和1-(氯甲基)-4-甲氧基苯(40mg,0.26mmol)制备标题化合物17，为白色固体(43mg,0.11mmol)，收率45％。1hnmr(400hz,cdcl3)δ7.98(d,j＝3.6hz,1h),7.77(s,1h),7.71(d,j＝5.2hz,1h),7.24(t,j＝4.4hz,1h),7.11(d,j＝8.8hz,2h),6.79(d,j＝8.8hz,2h),4.42(d,j＝13.2hz,1h),4.30(d,j＝13.2hz,1h),3.74(s,3h).
2-((3,5-二氟苄基)磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(18)
根据1的步骤，从1-02(50mg,0.19mmol)和1-(溴甲基)-3,5-二氟苯(29mg,0.21mmol)制备标题化合物18，为白色固体(9mg,0.02mmol)，收率12％。1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.03(dd,j＝0.8,4.0hz,1h),7.92(s,1h),7.77(dd,j＝0.8,4.8hz,1h),7.27(dd,j＝4.0,4.8hz,1h),7.04-7.07(m,2h),6.76-6.82(m,1h),4.86(s,2h).
2-((3,5-二氟苄基)亚磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(19)
根据1的步骤，从1-02(50mg,0.19mmol)和1-(溴甲基)-3,5-二氟苯(29mg,0.21mmol)制备标题化合物19，为白色固体(8mg,0.02mmol)，收率10％。1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.00(dd,j＝0.8,4.0hz,1h),7.81(s,1h),7.73(dd,j＝0.8,4.8hz,1h),7.25(dd,j＝4.0,4.8hz,1h),6.71-6.80(m,3h),4.43(d,j＝13.2hz,1h),4.29(d,j＝13.2hz,1h).
2-(([1,1'-联苯基]-4-基甲基)亚磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(20)
根据1的步骤，从1-02(60mg,0.23mmol)和4-(氯甲基)-1,1'-联苯(51mg,0.25mmol)制备标题化合物20，为浅黄色固体(12mg，0.03mmol)，收率12％。1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ8.79(s,1h),8.54(dd,j＝1.2,4.0hz,1h),8.13(dd,j＝1.2,5.2hz,1h),7.64-7.68(m,4h),7.48-7.52(m,2h),7.43-7.48(m,2h),7.36-7.40(m,2h)
4-(4-(((4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)亚磺酰基)甲基)苯基)吗啉4-氧化物(21)
在n2气氛下，于0℃向1-02(75mg,0.28mmol)和(4-吗啉代苯基)甲醇(50mg,0.26mmol)的无水thf(1.7ml)溶液中分批加入pph3(88mg,0.31mmol)和diad(70mg,0.34mmol)。反应混合物在0℃搅拌8小时。反应混合物升至室温，然后真空除去溶剂。将残余物用dcm/h2o萃取三次。有机层用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝1/1)进一步纯化，得到2-((4-(吗啉-1-基)苄基)硫代)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶，为白色固体(90％)。
根据1的一般步骤，从2-((4-(哌嗪-1-基)苄基)硫基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(100mg,0.23mmol)和mcpba(50mg,0.29mmol)制备标题化合物21，为白色固体(94mg,0.20mmol)，收率87％。1hnmr(400hz,cdcl3)δ7.96(dd,j＝0.8,4.0hz,1h),7.88-7.92(m,2h),7.76(s,1h),7,71(dd,j＝0.8,4.8hz,1h),7.29-7.33(m,2h),7.24(dd,j＝4.0,4.8hz,1h),4.61-4.70(m,2h),4.49(d,j＝13.2hz,1h),4.38(d,j＝13.2hz,1h),3.77-3.92(m,4h),2.91-3,08(m,2h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c20h19f3n3o3s2+],470.1,实测值470.2
4-(4-(((4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)磺酰基)甲基)苯基)吗啉4-氧化物(22)
根据1的步骤，从1-02(113mg,0.42mmol)和(4-吗啉代苯基)甲醇(75mg,0.39mmol)制备标题化合物22，为白色固体(150mg,0.31mmol)，收率81％。1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.02(dd,j＝0.8,4.0hz,1h),8.01～7.98(m,2h),7.91(s,1h),7.77(dd,j＝0.8,5.2hz,1h),7.66～7.63(m,2h),7.24(dd,j＝4.0,5.2hz,1h),4.94(s,2h),4.72～4.66(m,2h),3.92～3.85(m,4h),3.14～3.09(m,2h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c20h19f3n3o4s2+],486.1,实测值486.2.
6-(((4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)磺酰基)甲基)喹啉1-氧化物(23)
根据1的步骤，从1-02(158mg,0.61mmol)和6-(溴甲基)喹啉(150mg,0.67mmol)制备标题化合物23，为白色固体(62mg,0.14mmol)，收率23％。1hnmr(400hz,dmso)δ8.78(s,1h),8.59(d,j＝6hz,1h),8.53～8.49(m,2h),8.16(s,1h),8.12(d,j＝5.2hz,1h),7.90(d,j＝8.4hz,1h),7.85(dd,j＝2,8.4hz,1h),7.48(dd,j＝6,8.4hz,1h),7.38(t,j＝4.4hz,1h),5.31(s,2h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c19h13f3n3o3s2+],452.0,实测值452.2.
6-(((4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)亚磺酰基)甲基)喹啉(24)
根据1的步骤，从1-02(70mg,0.27mmol)和6-(溴甲基)喹啉(65mg,0.29mmol)制备标题化合物24，为白色固体(11mg,0.03mmol)，收率10％。1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ8.86-8.88(m,1h),8.56(s,1h),8.44-8.50(m,1h),8.25-8.28(m,1h),8.03(dd,j＝4.0,4.8hzm1h),7.89(d,j＝13,2hz,1h),7.76(s,1h),7.46-7.52(m,2h),7.34(dd,j＝3.6,4.8hz,1h),4.73(d,j＝13,2hzm1h),4.60(d,j＝13.2hz,1h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c19h13f3n3os2+],420.0,实测值420.1.
1-(2-((4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)亚磺酰基)乙基)吡咯烷-2-酮(25)
根据1的步骤，从1-02(60mg,0.23mmol)和1-(2-氯乙基)吡咯烷-2-酮(37mg,0.25mmol)制备标题化合物25，为浅黄色色固体(10mg,0.02mmol)，收率11％。1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ8.80(s,1h),8.54(dd,j＝1.2,4.0hz,1h),8.12(dd,j＝1.2,5.2hz,1h),7.38(dd,j＝4.0,5.2hz,1h),3.91(t,j＝6.8hz,2h),3.71(t,j＝4.8hz,2h),3.38(t,j＝6.8hz,2h),2.08(t,j＝8.0hz,2h),1.77-1.86(m,2h).
2-(苯乙基磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(26)
根据1的步骤，从1-02(50mg,0.19mmol)和(2-溴乙基)苯(39mg,0.21mmol)制备标题化合物26，为白色固体(6mg,0.015mmol)，收率8％。1hnmr(400hz,cdcl3)δ7.98(dd,j＝0.8,4.0hz,1h),7.84(s,1h),7.74(dd,j＝0.8,4.8hz,1h),7.24(dd,j＝4.0,4.8hz,1h),7.12-7.21(m,5h),3.87-3.92(m,2h),3.21-3.27(m,2h).
2-(苯乙基亚磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(27)
根据1的步骤，从1-02(50mg,0.19mmol)和(2-溴乙基)苯(39mg,0.21mmol)制备标题化合物27，为白色固体(7mg,0.02mmol)，收率10％。1hnmr(400hz,cdcl3)δ7.96(dd,j＝0.8,4.0hz,1h),7.71(s,1h),7.69(dd,j＝0.8,4.8hz,1h),7.11-7.25(m,6h),3.49-3.54(m,2h),3.18-3.27(m,1h),3.02-3.10(m,1h).
3-((4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)亚磺酰基)丙酸(28)
根据1的步骤，从1-02(25mg,0.09mmol)和3-氯丙酸(11mg,0.10mmol)制备标题化合物28，为白色固体，收率18％。1hnmr(400hz,cdcl3)δ12.40(br,1h),8.57(s,1h),8.44(d,j＝3.2hz,1h),8.02(d,j＝4.4hz,1h),7.32(dd,j＝3.2,4.4hz,1h),3.53-3.46(m,1h),3.28-3.21(m,1h),2.76-2.61(m,2h).
3-((4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)磺酰基)丙酸乙酯(29)
根据1的步骤，从1-02和3-氯丙酸乙酯制备标题化合物29，为白色固体，收率36％。1hnmr(400hz,cdcl3)δδ8.03(dd,j＝1.2,4.0hz,1h),7.94(s,1h),7.75(dd,j＝1.2,4.8hz,1h),7.26(dd,j＝4.0,4.8hz,1h),4.17(q,j＝7.2hz,2h),3.95(t,j＝7.6hz,2h),3.01(t,j＝7.6hz,2h),1.27(t,j＝7.2hz,3h).
3-((4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)亚磺酰基)丙酸乙酯(30)
根据1的步骤，从1-02(100mg,0.38mmol)和3-氯丙酸乙酯(57mg,0.42mmol)制备标题化合物30为白色固体(90mg,0.24mmol)，收率26％。1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.01(dd,j＝0.8,3.6hz,1h),7.83(s,1h),7.72(dd,j＝0.8,4.8hz,1h),7.25(dd,j＝3.6,4.8hz,1h),4.09(m,2h),3.59(m,1h),3.42(m,1h),3.00(m,1h),2.77(m,1h),1.22(t,j＝7.2hz,3h).
4-((4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)磺酰基)丁酸甲酯(31)
根据1的步骤，从1-02(76mg,0.28mmol)和4-氯丁酸甲酯(39mg,0.32mmol)制备标题化合物31，为白色固体(30mg,0.08mmol)，收率20％。1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.04(dd,j＝0.8,4.0hz,1h),7.94(s,1h),7.76(dd,j＝0.8,5.2hz,1h),7.26(dd,j＝4.0,5.2hz,1h),3.70-3.74(m,2h),3.69(s,3h),2.60(t,j＝7.2hz,2h),2.24-2.33(m,2h).
4-((4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)亚磺酰基)丁酸甲酯(32)
根据1的步骤，从1-02(76mg,0.28mmol)和4-氯丁酸甲酯(39mg,0.32mmol)制备标题化合物32，为白色固体(60mg,0.158mmol)，收率38％。1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.00(dd,j＝0.8,4.0hz,1h),7.83(s,1h),7.68(dd,j＝0.8,5.2hz,1h),7.21(dd,j＝4.0,5.2hz,1h),3.60(s,3h),3.15-3.32(m,2h),2.48-2.51(m,2h),2.21-2.31(m,1h),1.98-2.08(m,1h).
4-氯-2-(甲基磺酰氯)-6-(噻吩-2-基)嘧啶(33)
步骤1.4-氯-2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶的制备(33-01):
n2气氛下，向4,6-二氯-2-(甲硫基)嘧啶(400mg,2.06mmol)和噻吩-2-基硼酸(300mg,2.26mmol)的dme/h2o(4ml/2ml)的溶液中分批加入pd(pph3)4(69mg,0.06mmol)和na2co3(546mg,4.12mmol)。反应混合物加热回流2小时。将反应混合物冷却至室温，并用硅藻土过滤。将溶剂真空蒸发，并将残余物用etoac/h2o(30ml/30ml)萃取3次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝20/1)进一步纯化，得到112mg4-氯-2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶(33-01)为白色固体(27％)。1hnmr(400hz,cdcl3)δ7.76(dd,j＝0.8,4.0hz,1h),7.56(dd,j＝0.8,4.8hz,1h),7.72(s,1h),7.16(dd,j＝4.0,4.8hz,1h),2.62(s,3h).
步骤2.33的制备：
向33-01(30mg,0.09mmol)的dcm溶液中加入间氯过氧苯甲酸(15mg,0.09mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌2小时。反应混合物用dcm和饱和nahco3溶液萃取3次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝1/1)进一步纯化，得到25mg4-氯-2-(甲基亚磺酰氯)-6-(噻吩-2-基)嘧啶为白色固体(78％)。1hnmr(400hz,cdcl3)δ7.90(dd,j＝0.8,3.6hz,1h),7.64(dd,j＝1.2,4.8hz,1h),7.57(s,1h),7.19(dd,j＝3.6,4.8hz,1h),3.00(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c9h8cln2os+],259.0,实测值259.1.
4-甲基-2-(甲磺酰基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶(34)
在-20℃n2气氛下，向4-氯-2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶(33-01)(70mg,0.29mmol)的thf/nmp(2ml/0.4ml)溶液中滴加fe(acac)3(6mg,0.01mmol)，然后滴加ch3mgcl溶液(30mg,0.35mmol)。反应混合物在-20℃至室温搅拌过夜。过滤反应混合物，真空除去滤液中的溶剂。残余物用etoac/h2o萃取3次。有机层用食盐水洗涤，na2so4干燥，通过硅胶柱色谱(pe/ea＝10/1)进一步纯化，得到12mg4-甲基-2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶，为浅黄色油状物(20％)。
向4-甲基-2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶(12mg,0.05mmol)的dcm溶液加入间氯过氧苯甲酸(24mg,0.14mmol)，反应混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物用dcm和饱和nahco3溶液萃取3次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝1/1)进一步纯化，得到2mg4-甲基-2-(甲基磺酰基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶，为白色固体(14％)。lc-ms(esi)m/z:计算值[c10h11n2o2s2+],255.0,实测值255.1.
4-乙炔基-2-(甲磺酰基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶(35)
步骤1.4-乙炔基-2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)的制备(35-01)
n2气氛下，向4-氯-2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶(33-01)(40mg,0.16mmol)的thf/tea(1ml/1.5ml)溶液中加入pd(pph3)2cl2(1.2mg,0.002mmol)和cui(1mg,0.005mmol)，缓慢滴加乙炔基三甲基硅烷(18mg,0.18mmol)。反应混合物在60℃下回流8小时。将反应混合物冷却至室温，并用硅藻土过滤。将溶剂真空蒸发，并将残余物在室温下溶于无水dcm，然后加入tbaf(47mg,0.18mmol)。反应混合物在室温下搅拌3小时。然后将反应混合物用dcm/h2o萃取3次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝10/1)进一步纯化，得到12mg4-乙炔基-2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶，为白色固体(31％)。
步骤2.35的制备：
向35-01(12mg,0.05mmol)的dcm溶液中加入间氯过氧苯甲酸(35mg,0.20mmol)，反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物用dcm和饱和nahco3溶液萃取3次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝1/1)进一步纯化，得到5mg4-乙炔基-2-(甲基磺酰基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶，为白色固体(37％)。1hnmr(400hz,cdcl3)δ7.92(dd,j＝0.8,4.0hz,1h),7.75(s,1h),7.67(dd,j＝1.2,4.8hz,1h),7.21(dd,j＝4.0,4.8hz,1h),3.53(s,1h),3.40(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c11h9n2o2s2+],265.0,实测值265.2.
2-(甲基磺酰基)-4-(1h-吡唑-1-基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶(36)
向4-氯-2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶(51-01)(30mg,0.13mmol)和1h-吡唑(12mg,0.18mmol)的dmf溶液中加入k2co3(34mg,0.25mmol)。将反应混合物在100℃下微波加热2小时。将反应混合物冷却至室温，并用etoac/h2o萃取三次。合并有机层，用食盐水洗涤，用na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝10/1)进一步纯化，得到16mg2-(甲硫基)-4-(1h-吡唑-1-基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶，为白色固体(47％)。
向2-(甲硫基)-4-(1h-吡唑-1-基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶(16mg,0.06mmol)的dcm溶液中加入间氯过氧苯甲酸(30mg,0.17mmol)，反应混合物在室温搅拌2小时。反应混合物用dcm和饱和nahco3溶液萃取3次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝1/1)进一步纯化，得到5mg2-(甲基磺酰基)-4-(1h-吡唑-1-基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶，为白色固体(28％)。1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.67(d,j＝0.8hz,1h),8.24(s,1h),7.98(dd,j＝0.8,4.0hz,1h),7.85(d,j＝1.6hz,1h),7.64(dd,j＝0.8,5.2hz,1h),7.21(dd,j＝4.0,5.2hz,1h),6.56(dd,j＝1.6,2.8hz,1h),3.45(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c12h11n4o2s2+],307.0,实测值307.2.
2-(甲基磺酰基)-4,6-二(噻吩-2-基)嘧啶(37)
n2气氛下，向4,6-二氯-2-(甲硫基)嘧啶(300mg,1.54mmol)和噻吩-2-基硼酸(800mg,6.19mmol)的dme/h2o(4ml/2ml)溶液中加入pd(pph3)4(56mg,0.05mmol)，然后加入na2co3(655mg,6.19mmol)。将反应混合物在150℃下微波加热反应2小时。将反应混合物冷却至室温，并用硅藻土过滤。将溶剂真空蒸发，并将残余物用etoac和h2o萃取三次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝100/1)进一步纯化，得到110mg2-(甲硫基)-4,6-二(噻吩-2-基)嘧啶，为白色固体(30％)。
向2-(甲硫基)-4,6-二(噻吩-2-基)嘧啶(27mg,0.09mmol)的dcm溶液中加入间氯过氧苯甲酸(32mg,0.19mmol)，并将反应混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物用dcm和饱和nahco3溶液萃取3次，合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝1/1)进一步纯化，得到6mg2-(甲基磺酰基)-4,6-二(噻吩-2-基)嘧啶，为白色固体(20％)。1hnmr(400hz,dmso)δ8.67(s,1h),8.37(d,j＝3.6hz,2h),7.99(d,j＝4.8hz,2h),7.35(dd,j＝3.6,4.8hz,2h),3.46(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c13h11n2o2s3+],323.0,实测值323.4.
1-(2-(甲基磺酰基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶-4-基)吡咯烷-2-酮(38)
n2气氛下，向4-氯-2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶(33-01)(30mg,0.12mmol)和吡咯烷-2-酮(21mg,0.24mmol)的无水二氧六环溶液中加入1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦(8mg,0.01mmol),pd2(dba)3(6mg,0.006mmol)和k3po4(65mg,0.30mmol)。将反应在160℃下回流8小时。将反应混合物冷却至室温，用硅藻土过滤。在真空中从滤液中除去溶剂，然后将残余物用etoac/h2o萃取三次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝4/1)进一步纯化，得到12mg1-(2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶-4-基)吡咯烷-2-酮，为黄色油状物(33％)。
向1-(2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶-4-基)吡咯烷-2-酮(12mg,0.04mmol)的dcm溶液中加入间氯过氧苯甲酸(20mg,0.12mmol)，反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物用dcm和饱和nahco3溶液萃取3次，合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝1/1)进一步纯化，得到(2mg1-(2-(甲基磺酰基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶-4-基)吡咯烷-2-酮，为白色固体15％)。1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.33(s,1h),7.91(d,j＝4.0hz,1h),7.58(d,j＝4.8hz,1h),7.17-7.20(m,1h),4.20(t,j＝7.2hz,2h),3.40(s,3h),2.73(t,j＝8.0hz,2h),2.16-2.24(m,2h).
1-(2-(甲基磺酰基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(39)
根据36的步骤，从4-氯-2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶(33-01)(30mg,0.12mmol)和2-羟基吡啶(20mg,0.15mmol)制备标题化合物，为白色固体(19mg,0.07mmol)，收率55％。1hnmr(400hz,dmso)δ8.72(s,1h),8,25(dd,j＝1.2,4.0hz,1h),8.09(dd,j＝1.2,7.2hz,1h),8.04(dd,j＝1.2,4.8hz,1h),7.62(ddd,j＝2.0,7.6,9.4hz,1h),7.34(dd,j＝4.0,4.8hz,1h),6.62(d,j＝9.2hz,1h),6.51(td,j＝7.2,1.2hz,1h),3.50(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c14h12n3o3s2+],334.0,实测值334.2.
4-(2-(甲基磺酰基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶-4-基)吗啉(40)
根据53的步骤，从4-氯-2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶(33-01)(30mg,0.12mmol)和吗啉(15mg,0.17mmol)制备标题化合物40，为白色固体(5mg,0.02mmol)，收率13％。1hnmr(400hz,cdcl3)δ7.76(dd,j＝1.2,4.0hz,1h),7,51(dd,j＝1.2,5.2hz,1h),7.14(dd,j＝4.0,5.2hz,1h),6.78(s,1h),3.83～3.73(m,8h),3.35(s,3h).
4-叠氮基-2-(甲基磺酰基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶(41)
向4-氯-2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶(33-01)(50mg,0.21mmol)的dmf溶液中分批加入nan3(20mg,0.31mmol)，反应混合物在90℃下回流8小时。将反应混合物用etoac/h2o萃取三次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝20/1)进一步纯化，得到21mg4-叠氮基-2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶，为白色固体(41％)。
向4-叠氮基-2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶(21mg,0.08mmol)的dcm溶液中加入间氯过氧苯甲酸(36mg,0.21mmol)，反应混合物在室温下搅拌2小时。反应混合物用dcm和饱和nahco3溶液萃取3次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝1/1)进一步纯化，得到2mg4-叠氮基-2-(甲基磺酰基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶，为白色固体(10％)。1hnmr(400hz,cdcl3)δ7.94(dd,j＝1.2,4.0hz,1h),7.90(s,1h),7.68(dd,j＝1.2,4.8hz,1h),7.23(dd,j＝4.0,4.8hz,1h),3.27(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c9h8n5o2s2+],282.0,实测值282.2.
n,n-二甲基-2-(甲基亚磺酰基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶-4-胺(42)
向4-氯-2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶(33-01)(50mg,0.21mmol)的dmf(2ml)溶液中逐滴加入二甲胺(48mg,1.04mmol)。反应混合物在150℃下微波加热30分钟。将反应混合物冷却至室温，然后用etoac和h2o萃取3次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，然后通过硅胶柱色谱(pe/ea＝10/1)进一步纯化，得到64mgn,n-二甲基-2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶-4-胺，为浅黄色油状物(100％)。
向n,n-二甲基-2-(甲硫基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶-4-胺(60mg,0.27mmol)的dcm溶液中加入间氯过氧苯甲酸(46mg,0.27mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物用dcm和饱和nahco3溶液萃取3次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝1/1)进一步纯化，得到25mgn,n-二甲基-2-(甲基亚磺酰基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶-4-胺，为白色固体(40％)。1hnmr(400hz,cdcl3)δ7.76(dd,j＝1.2,4.0hz,1h),7.46(dd,1.2,5.2hz,1h),7.12(dd,j＝4.0,5.2hz,1h),6.62(s,1h),3.23(s,6h),2.94(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c11h14n3os2+],278.0,实测值268.1.
4-(2-氟苯基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(43)
步骤1.2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-醇的制备(43-01)：
n2气氛下，向乙基4,4,4-三氟-3-氧代丁酸乙酯(2g,10.9mmol)和甲硫基氨基亚氨酸酯(4g,21.3mmol)的etoh(10ml)溶液中滴加10nnaoh水溶液(2ml)。反应混合物在90℃下微波加热2小时。反应混合物冷却至室温，然后真空蒸发溶剂。残余物溶于水，用1nhcl酸化至ph＝2.0，然后用dcm萃取3次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过dcm/pe重结晶进一步纯化，得到1.8g2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-醇，为白色固体(43-01)(8.5mmol,78％).1hnmr(400mhz,dmso):δ6.59(s,1h),2.51(s,3h).
步骤2.2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基-三氟甲磺酸酯的制备(43-02):
0℃下，向2-巯基-6-(三氟甲基)嘧啶-4-醇(100mg,0.48mmol)和diea(184mg,1.4mmol)的dcm(2ml)溶液中滴加三氟甲磺酸酐(201mg,0.71mmol)，于室温搅拌过夜。将混合物用h2o/dcm(50ml/50ml)萃取3次，用食盐水(50mlx3)洗涤，na2so4干燥，然后真空下浓缩，通过硅胶柱色谱(pe/ea＝10/1)纯化，得到90mg2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基-三氟甲烷磺酸酯(0.26mmol,y＝55％)，产品为浅黄色油状物。
步骤3.4-(2-氟苯基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶的制备(43-03):
n2气氛下，向2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基三氟甲烷磺酸酯(50mg,0.146mmol)和2-氟苯基硼酸(18mg,0.146mmol)的二氧六环(2ml)溶液中依次加入pdcl2(dppf)(10mg,0.01mmol)，na2co3(2n,1ml)。反应混合物在90℃下回流5小时。将反应混合物冷却至室温，并用硅藻土过滤。在真空中从滤液中除去溶剂，并将残余物用dcm/h2o(20ml/20ml)萃取三次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝30/1)进一步纯化，得到30mg4-(2-氟苯基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶，为浅黄色固体(0.11mmol,76％)。
步骤4.4-(2-氟苯基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶的制备(43)：向4-(2-氟苯基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶(30mg,0.11mmol)的dcm溶液中加入间氯过氧苯甲酸(48mg,0.28mmol)，反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物用dcm和饱和nahco3溶液萃取3次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝1/1)进一步纯化，得到12mg2-(甲磺酰基)-4-苯基-6-(三氟甲基)嘧啶，为浅黄色固体(0.04mmol,35.8％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.36-8.43(m,1h),8.3(s,1h),7.60-7.66(m,1h),7.37-7.42(m,1h),7.25-7.31(m,1h),3.48(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c12h9f4n2o2s+],321.0,实测值321.4.
4-(3-氟苯基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(44)
根据60的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和3-氟苯硼酸(20mg,0.146mmol)制备标题化合物44，为浅黄色固体(7mg,0.02mmol)，收率15％。1hnmr(400mhz,cdcl3):8.18(s,1h),8.01-8.04(m,1h),7.96-8.00(m,1h),7.55-7.61(m,1h),7.33-7.39(m,1h),3.48(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c12h9f4n2o2s+],321.0,实测值321.4.
4-(4-氟苯基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(45)
根据60的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和3-氟苯基硼酸(20mg,0.146mmol)制备标题化合物45，为浅黄色固体(7mg,0.02mmol)，收率15％。lc-ms(esi)m/z:计算值[c12h9f4n2o2s+],321.0,实测值321.4.
2-(甲基磺酰基)-4-(邻-甲苯基)-6-(三氟甲基)嘧啶(46)
根据43的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和邻-甲基苯硼酸(20mg,0.146mmol)制备标题化合物46，为浅黄色固体(2mg,0.006mmol)，收率4％。1hnmr(400mhz,cdcl3-d6):δ7.86(s,1h),7.58-7.61(m,1h),7.46-7.61(m,1h),7.37-7.41(m,2hh),3.46(s,3h),2.56(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c13h12f3n2o2s+],317.0,实测值317.4.
2-(甲基磺酰基)-4-(间-甲苯基)-6-(三氟甲基)嘧啶(47)
根据43的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和间-甲苯基硼酸(20mg,0.146mmol)制备标题化合物47，为浅黄色固体(2mg,0.006mmol)，收率4％。1hnmr(400mhz,cdcl3-d6):δ8.18(s,1h),8.06(s,1h),8.00-8.03(m,1h),7.46-7.68(m,2h),3.48(s,3h),2.49(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c13h12f3n2o2s+],317.0,实测值317.4.
2-(甲基磺酰基)-4-(对-甲苯基)-6-(三氟甲基)嘧啶(48)
根据43的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和对-甲苯基硼酸(20mg,0.146mmol)制备标题化合物48，为浅黄色固体(2mg,0.006mmol)，收率4％。1hnmr(400mhz,cdcl3-d6):δ8.15(d,j＝8.4hz,1h),8.14(s,1h),7.38(d,j＝8.4hz,2h),3.47(s,3h),2.48(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c13h12f3n2o2s+],317.0,实测值317.4.
4-(4-乙炔基苯基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(49)
步骤1.4-氯-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶的制备(49-01)：
将2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-醇(43-01)(1.4g,6.67mmol)和pocl3(15ml)的溶液在120℃下回流3小时。反应混合物冷至室温，真空除去pocl3。将残余物用dcm和冰h2o萃取三次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，浓缩得到1.38g4-氯-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶，为浅黄色油状物(90％).lc-ms(esi)m/z:计算值[c6h5clf3n2s+],229.0,实测值229.0.
步骤2.4-(4-溴苯基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶的制备(49-02)：
n2气氛下，向49-01(200mg,0.87mmol)和(4-溴苯基)硼酸(195mg,0.97mmol)的dme/h2o(5ml/1ml)溶液中依次加入pd(pph3)4(51mg,0.04mmol)，na2co3(186mg,1.75mmol)。反应混合物在80℃下回流5小时。反应混合物冷至室温，并用硅藻土过滤。在真空中除去溶剂，并将残余物用dcm和h2o萃取三次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝50/1)进一步纯化，得到176mg4-(4-溴苯基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶(57％)。1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.00-8.03(m,2h),7.66-7.68(m,2h),7.62(s,1h),2.69(s,3h).
步骤3.2-(甲硫基)-4-(三氟甲基)-6-(4-((三甲基硅基)乙炔基)苯基)嘧啶(49-03)：
n2气氛下，向49-02(176mg,0.50mmol)的无水tea溶液中加入pd(pph3)2cl2(18mg,0.03mmol),cui(5mg,0.03mmol)和p(t-bu)3(5mg,0.03mmol)。反应混合物搅拌5分钟，然后滴加乙炔基三甲基硅烷(110mg,1.12mmol)。然后反应混合物在80℃下回流4小时。将反应混合物冷至室温，硅藻土过滤。在真空中从滤液中除去溶剂，然后残余物用etoac/h2o萃取三次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝4/1)进一步纯化，得到120mg2-(甲硫基)-4-(三氟甲基)-6(4-((三甲基硅基)乙炔基)苯基)嘧啶，为白色固体(65％)。1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.07-8.11(m,2h),7.64(s,1h),7.59-7.62(m,2h),2.67(s,3h),0.28(s,9h).
步骤4.制备4-(4-乙炔基苯基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶：
向49-03(120mg,0.33mmol)的meoh溶液中逐滴加入k2co3(140mg,1.0mmol)。反应混合物在室温下搅拌3小时，真空除去溶剂，残余物用etoac/h2o萃取3次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，通过硅胶柱色谱(pe/ea＝10/1)纯化，得到35mg4-(4-乙炔基苯基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶，为无色油状物(36％)。
向4-(4-乙炔基苯基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶(15mg,0.05mmol)的meoh(2ml)溶液中滴加过硫酸氢钾(226mg,0.36mmol)的水溶液。反应混合物在室温下搅拌8小时。蒸发去除溶剂，残余物用etoac/h2o萃取3次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝10/1)进一步纯化，得到10mg4-(4-乙炔基苯基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶，为浅黄色固体(61％)。1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.23(d,j＝8.4hz,2h),8.19(s,1h),7.69(d,j＝8.4hz,2h),3.48(s,1h),3.33(s,1h).
3-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯酚(50)
根据43的步骤，从43-02(21mg,0.058mmol)和(3-羟基苯基)硼酸(16mg,0.058)制备标题化合物50，为白色固体(3mg,0.006mmol)，收率8％。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.16(s,1h),7.79(t,j＝2.0hz,1h),7.74(d,j＝8.0hz,1h),7.45(t,j＝8.0hz,1h),7.13(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),3.48(s,3h).质谱(m/z):319.4[m+h]+.
4-(2-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(51)
根据43的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和2-甲氧基苯硼酸(22mg,0.146mmol)制备标题化合物51，为浅黄色固体(20mg,0.06mmol)，收率42％。lc-ms(esi)m/z:计算值[c13h12f3n2o3s2+],333.0,实测值333.4.
4-(2-甲氧基苯基)-3-甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(52)
根据43的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和3-甲氧基苯硼酸(22mg,0.146mmol)制备标题化合物，为浅黄色固体(8mg,0.02mmol)，收率17％。lc-ms(esi)m/z:计算值[c13h12f3n2o3s2+],333.0,实测值333.4.
4-(4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(53)和4-(4-甲氧基苯基)-2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(54)
根据43的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和4-甲氧基苯硼酸(22mg,0.146mmol)制备标题化合物53，为浅黄色固体(11mg,0.03mmol)，收率23％。lc-ms(esi)m/z:计算值[c13h12f3n2o3s2+],333.0,实测值333.4.
根据43的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和4-甲氧基苯硼酸(22mg,0.146mmol)制备标题化合物54，为浅黄色固体(11mg,0.03mmol)，收率23％。lc-ms(esi)m/z:计算值[c13h12f3n2o2s2+],317.0,实测值317.4.
2-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苄腈(55)
根据43的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和2-氰基苯硼酸(21.4mg,0.146mmol)制备标题化合物55，为浅黄色固体(14mg,0.04mmol)，收率29％。lc-ms(esi)m/z:计算值[c13h9f3n3o2s2+],328.0,实测值328.4.
3-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苄腈(56)
根据43的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和3-氰基苯硼酸(21.4mg,0.146mmol)制备标题化合物56，为浅黄色固体(18mg,0.06mmol)，收率38％。1hnmr(400mhz,cdcl3-d6):δ8.23(s,1h),7.92-7.96(m,1h),7.78-7.81(m,1h),7.60-7.62(m,2h),3.50(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c13h9f3n3o2s2+],328.0,实测值328.4.
4-2-(甲磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苄腈(57)
根据43的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和4-氰基苯硼酸(21.4mg,0.146mmol)制备标题化合物，为浅黄色固体(18mg,0.06mmol)，收率40％。1hnmr(400mhz,cdcl3-d6):δ8.36-8.39(m,2h),8.24(s,1h),7.89-7.92(m,2h),3.49(s,3h).
2-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酸甲酯(58)和2-(2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酸甲酯(59)
根据43的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和2-(甲氧羰基)苯基硼酸(26mg,0.146mmol)制备标题化合物58，为浅黄色固体(13mg,0.04mmol)，收率25％。1hnmr(400mhz,cdcl3-d6):δ7.96-8.00(m,1h),7.97(s,1h),7.63-7.73(m,3h),3.81(s,3h),3.42(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c14h12f3n2o4s+],361.0,实测值361.4.
根据43的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和2-(甲氧羰基)苯基硼酸(26mg,0.146mmol)制备标题化合物59，为浅黄色固体(3mg,0.01mmol)，收率7％。1hnmr(400mhz,cdcl3-d6):δ7.96-7.99(m,1h),7.82(s,1h),7.61-7.69(m,3h),3.81(s,3h),3.02(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c14h12f3n2o3s+],345.0,实测值345.4.
3-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酸甲酯(60)
根据43的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和3-(甲氧羰基)苯基硼酸(26mg,0.146mmol)制备标题化合物60，为浅黄色色固体(14mg,0.04mmol)，收率26％。1hnmr(400mhz,cdcl3-d6):δ8.17(s,1h),7.76-7.79(m,2h),7.50(t,j＝8.4hz,1h),7.18(dd,j＝3.4,8.4hz,1h),3.93(s,3h),3.48(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c14h12f3n2o4s+],361.0,实测值361.4.
4-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酸甲酯(61)和4-(2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酸甲酯(62)
根据43的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和4-(甲氧羰基)苯基硼酸(26mg,0.146mmol)制备标题化合物61，为浅黄色固体(7mg,0.02mmol)，收率13％。1hnmr(400mhz,cdcl3-d6):δ8.31-8.34(m,2h),8.23-8.26(m,2h),8.25(s,1h),3.99(s,3h),3.49(s,3h).
根据43的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和4-(甲氧羰基)苯基硼酸(26mg,0.146mmol)制备标题化合物62，为浅黄色固体(7mg,0.02mmol)，收率17％。lc-ms(esi)m/z:计算值[c14h12f3n2o3s+],345.0,实测值345.4.
2-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酸(63)
向2-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酸甲酯(100mg,0.305mmol)的thf(8ml)溶液中滴加4nnaoh(水溶液,1ml)。然后反应混合物在室温下搅拌4小时。将溶剂真空蒸发，并将残余物用etoac和h2o萃取3次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，浓缩，并通过硅胶柱色谱进一步纯化，得到95mg2-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酸，为白色固体。
向2-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酸(10mg,0.03mmol)的dcm溶液中加入间氯过氧苯甲酸(10mg,0.04mmol)，反应混合物在室温搅拌2小时。反应混合物用dcm和饱和nahco3溶液萃取3次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝1/1)进一步纯化，得到3mg2-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酸，为淡黄色固体(0.006mmol,27％).1hnmr(400mhz,cdcl3-d6):δ8.10(d,j＝8.0hz,1h),8.00(s,1h),7.69-7.75(m,2h),7.40(d,j＝8.0hz,1h),3.42(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c13h10f3n2o4s+],347.0,实测值347.4.
4-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酸(64)和4-(2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酸(65)
根据63的步骤，从4-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酸(10mg,0.03mmol)制备标题化合物64，为浅黄色固体(5mg,0.01mmol)，收率32％。lc-ms(esi)m/z:计算值[c13h10f3n2o4s+],347.0,实测值347.4.
根据63.的步骤，从4-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酸(10mg,0.03mmol)制备标题化合物65，为浅黄色固体(3mg,0.006mmol)，收率20％。1hnmr(400mhz,cdcl3-d6):δ8.29-8.33(m,2h),8.19-8.23(m,2h),8.11(s,1h),3.13(s,3h).
3-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酰胺(66)
根据43的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和(3-((叔丁氧羰基)氨甲酰基)苯基)硼酸(40mg,0.146mmol)制备标题化合物，为浅黄色固体(7mg,0.02mmol)，收率14％。1hnmr(400mhz,cdcl3-d6):δ8.95(s,1h),8.85(s,1h),8.60(d,j＝8.0hz,1h),8.23(s,1h),8.18(d,j＝8.0hz,1h),7.75(t,j＝8.0hz,1h0,7.64(s,1h0,3.58(s,3h).
n-甲基-2-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酰胺(67)
向2-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酸(10mg,0.03mmol)的dmf(1ml)溶液中加入ch3nh2·hcl(1当量),dipea(2.5当量),hatu(1.2当量)，反应混合物在室温下搅拌过夜。溶剂真空蒸发，并将残余物用etoac和h2o萃取3次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，浓缩，并通过硅胶柱色谱进一步纯化，得到10mgn-甲基-2-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酰胺(89％)为白色固体。
向n-甲基-2-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酰胺(10mg,0.03mmol)的dcm溶液中加入间氯过氧苯甲酸(10mg,0.04mmol)，反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物用dcm和饱和nahco3溶液萃取3次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝1/1)进一步纯化，得到8mg2-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酸，为浅黄色固体(0.02mmol,70％).lc-ms(esi)m/z:计算值[c14h13f3n3o3s+],360.1,实测值360.4.
n-甲基-4-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酰胺(68)
根据67的步骤，从4-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酸(10mg,0.03mmol)和ch3nh2·hcl制备标题化合物68，为浅黄色固体(7mg,0.02mmol)，收率62％。1hnmr(400mhz,cdcl3-d6):δ8.29(d,j＝8.8hz,2h),8.23(s,1h),7.96(d,j＝8.8hz,2h),3.48(s,3h),3.06(d,j＝4.8hz,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c14h13f3n3o3s+],360.1,实测值360.4.
n,n-二甲基-3-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酰胺(69)
根据67的步骤，从3-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯甲酸(20mg,0.06mmol)和二甲胺制备标题化合物69，为浅黄色固体(2mg,0.004mmol)，收率8％。1hnmr(400mhz,dmso):δ8.97(s,1h),8.49-8.53(m,1h),8.46(s,1h),7.70-7.72(m,2h),3.56(s,3h),3.04(s,3h),2.94(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c15h15f3n3o3s+],374.0,实测值374.5.
1-(3-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苄基)吡啶-2(1h)-酮(70)
根据43的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和1-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苄基)吡啶-2(1h)-酮(45mg,0.146mmol)制备标题化合物70，为浅黄色固体(12mg,0.03mmol)，收率21％。1hnmr(400hz,dmso)δ8.86(s,1h),8.41(s,1h),8.37(d,j＝8.0hz,1h),7.89(s,j＝2.0,6.8hz,1h),7.59-7.64(m,1h),7.56(d,j＝8.0hz,1h),7.42-7.48(m,1h),6.44(d,j＝9.2hz,1h),6.26-6.30(m,1h),5.24(s,2h),3.54(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c18h15f3n3o3s+],410.1,实测值410.5.
2-(甲基磺酰基)-4-(3-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基)-6-(三氟甲基)嘧啶(71)和2-(甲基亚磺酰基)-4-(3-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基)-6-(三氟甲基)嘧啶(72)
步骤1.3-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯酚的制备(71-01)：
n2气氛下，向4-氯-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶(200mg,0.87mmol)和(3-羟苯基)硼酸(150mg,1.05mmol)的dme/h2o(5ml/1ml)溶液中依次加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(32mg,0.04mmol)，na2co3(280mg,2.62mmol)。反应混合物在110℃下回流5小时。将反应混合物冷至室温，并用硅藻土过滤。在真空中除去溶剂，并将残余物用dcm和h2o萃取三次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝30/1)进一步纯化，得到3-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯酚(71-01)，为白色固体(104mg，41％)。
步骤2.2-(甲基磺酰基)-4-(3-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基)-6-(三氟甲基)嘧啶(89)和2-(甲基亚磺酰基)-4-(3-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基)-6-(三氟甲基)嘧啶的制备(90)：
向71-01(104mg,0.36mmol)和3-溴丙-1-炔(52mg,0.44mmol)的dmf(2ml)溶液中加入k2co3(76mg,0.54mmol)。反应混合物在室温下搅拌3小时。将反应混合物用etoac和h2o萃取三次。合并有机层，用食盐水洗涤，用na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝4/1)进一步纯化，得到105mg2-(甲硫基)-4-(3-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基)-6-(三氟甲基)嘧啶为白色固体(90％)。向2-(甲硫基)-4-(3-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基)-6-(三氟甲基)嘧啶(70mg,0.22mmol)的meoh(2ml)溶液中滴加过硫酸氢钾(1g,1.51mmol)的水溶液。反应混合物在室温下搅拌8小时。从反应混合物中蒸发溶剂，然后残余物用etoac/h2o萃取3次。合并有机层，用食盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝6/1)进一步纯化，得到22mg2-(甲基磺酰基)-4-(3-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基)-6-(三氟甲基)嘧啶(71)为无色油状物和6mg2-(甲基亚磺酰基)-4-(3-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基)-6-(三氟甲基)嘧啶，为无色油状物(72)。71的1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.04(s,1h),7.86～7.83(m,1h),7.51(t,j＝8.0hz,1h),7.24(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),4.81(d,j＝2.4hz,2h),3.07(s,3h),2.57(t,j＝2.4hz,1h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c15h12f3n2o2s+],341.1,测得值341.0.
72的1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.16(s,1h),7.85～7.80(m,2h),7.51(t,j＝8.0hz,1h),7.25(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),4.80(d,j＝2.4hz,2h),3.47(s,3h),2.57(t,j＝2.4hz,1h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c15h12f3n2o3s+],357.1,测得值357.0.
2-(甲基磺酰基)-4-(3-苯氧基苯基)-6-(三氟甲基)嘧啶(73)和2-(甲基亚磺酰基)-4-(3-苯氧基苯基)-6-(三氟甲基)嘧啶(74)
步骤1.2-(甲硫基)-4-(3-苯氧基苯基)-6-(三氟甲基)嘧啶的制备：
n2气氛下，将溶液4-氯-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶(30mg,0.13mmol),(3-苯氧基苯基)硼酸(41mg,0.14mmol),pd(pph3)4(8mg,0.007mmol)，和1mna2co3水溶液(0.39ml,0.39mmol)在dme(2ml)中加热至100℃反应5h。将混合物冷至室温，并用dcm(30ml)萃取。分离有机层，用na2so4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过制备-tlc(etoac/pe＝1:30)纯化，得到产物，为白色固体(10mg,21％)。质谱(m/z):363.4[m+h]+.
步骤2.2-(甲基磺酰基)-4-(3-苯氧基苯基)-6-(三氟甲基)嘧啶(73)和2-(甲基亚磺酰基)-4-(3-苯氧基苯基)-6-(三氟甲基)嘧啶的制备(74):
向2-(甲硫基)-4-(3-苯氧基苯基)-6-(三氟甲基)嘧啶(10mg,0.03mmol)的meoh(2ml)溶液中加入过硫酸氢钾(51mg,0.09mmol)的水溶液(2ml)。然后反应混合物在室温下搅拌3小时。除去溶剂并用dcm(20ml)萃取。分离有机层，用na2so4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过制备-tlc(etoac/pe＝1:2)纯化，得到73，为白色固体(3mg)，和74，为白色固体(4mg)。对于73,1hnmr:(400mz,cdcl3):δ8.13(s,1h),7.95(dd,j＝0.8,7.6hz,1h),7.87(s,1h),7.54(t,j＝8.0hz,1h),7.39(t,j＝8.0hz,2h),7.18(dt,j＝0.8,7.6hz,2h),7.06(d,j＝8.0hz,2h),3.44(s,3h).质谱(m/z):395.3[m+h]+.对于74,1hnmr:(400mz,cdcl3):δ8.01(s,1h),7.97(dd,j＝0.8,7.6hz,1h),7.88(s,1h),7.52(t,j＝8.0hz,1h),7.38(t,j＝8.0hz,2h),7.18(dt,j＝0.8,7.6hz,2h),7.06(d,j＝8.0hz,2h),3.05(s,3h).质谱(m/z):379.4[m+h]+.
4-(3-(苄氧基)苯基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(75)
步骤1.4-(3-(苄氧基)苯基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶的制备：
0℃下，向3-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)苯酚(30mg,0.10mmol)的无水ch3cn(5ml)溶液中加入cs2co3(68mg,0.20mmol)。搅拌30分钟后，滴加溴化苄(27mg,0.15mmol)，并在室温搅拌3小时。蒸发有机溶剂后，残余物用硅胶柱色谱(200～300目硅胶,用etoac/pe＝1:25洗脱)纯化，得到产物，为白色固体(10mg,26％)。质谱(m/z):377.4[m+h]+.
步骤2.4-(3-(苄氧基)苯基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶的制备(93):
室温下向4-(3-(苄氧基)苯基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶(10mg,0.03mmol)的dcm(2ml)溶液中加入间氯过氧苯甲酸(14mg,0.09mmol)。然后将混合物在室温下搅拌3小时。除去溶剂，并用dcm(20ml)萃取。分离有机层，用na2so4干燥，过滤并浓缩，粗产物通过制备-tlc(etoac/pe＝1:2)纯化，得到75，为白色固体(3mg,24％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.15(s,1h),7.86(s,1h),7.79(d,j＝8.0hz,1h),7.51-7.34(m,7h),5.18(s,2h),3.46(s,3h).质谱(m/z):409.4[m+h]+.
2-(甲基磺酰基)-4-(萘-1-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(76)和2-(甲基亚磺酰基)-4-(萘-1-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(77)
根据43的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和萘-1-基硼酸(25mg,0.146mmol)制备标题化合物76，为浅黄色固体(2mg,0.003mmol)，收率2％。1hnmr(400mhz,cdcl3-d6):δ8.21-8.24(m,1h),8.17(s,1h),8.08(d,j＝8.4hz,1h),7.95-8.00(m,1h),7.83(dd,j＝1.2,7.2hz,1h),7.58-7.66(m,3h),3.48(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c16h12f3n2o2s+],353.1,实测值337.4.
根据43的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和萘-1-基硼酸(25mg,0.146mmol)制备标题化合物77，为浅黄色固体(8mg,0.012mmol)，收率7％。lc-ms(esi)m/z:计算值[c16h12f3n2os+],337.0,实测值337.4.
4-(2-甲氧基吡啶-3-基)-2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(78)和4-(2-甲氧基吡啶-3-基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(79)
步骤1.4-(2-甲氧基吡啶-3-基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶的制备(78-01)：
n2气氛下，将溶液2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基三氟甲磺酸酯(112mg,0.33mmol),(2-甲氧基吡啶-3-基)硼酸(50mg,0.33mmol),pd(dppf)cl2(12mg,0.02mmol)，和2mna2co3水溶液(0.49ml,0.99mmol)在dme(10ml)中加热至100℃反应4h。混合物冷至室温，用dcm(3×20ml)萃取。分离有机层，用na2so4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱(200～300目硅胶,用etoac/pe＝1:40洗脱)纯化，得到产物，为白色固体(10mg,10％)。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.57(dd,j＝2.0,7.6hz,1h),8.32(dd,j＝2.0,4.8hz,1h),8.11(s,1h),7.08(dd,j＝4.8,7.6hz,1h),4.10(s,3h),2.65(s,3h).质谱(m/z):302.3[m+h]+.
步骤2.4-(2-甲氧基吡啶-3-基)-2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(79)和4-(2-甲氧基吡啶-3-基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶的制备(78)：
向4-(2-甲氧基吡啶-3-基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶(10mg,0.03mmol)的dcm(2ml)溶液中加入间氯过氧苯甲酸(16mg,0.09mmol)。然后将混合物在室温下搅拌3小时。除去溶剂并用dcm(20ml)萃取。分离有机层，用na2so4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过制备-tlc(etoac/pe＝1:2)纯化，得到79，为白色固体(3mg)，和78，为白色固体(4mg)。对于79,1hnmr(400mhz,cdcl3)of:δ8.81(dd,j＝2.0,7.6hz,1h),8.60(s,1h),8.39(dd,j＝2.0,4.8hz,1h),7.13(d,j＝4.8,7.6hz,1h),4.15(s,3h),3.05(s,3h).质谱(m/z):318.4[m+h]+.对于78,1hnmr(400mhz,cdcl3)of:δ8.78(dd,j＝2.0,7.6hz,1h),8.73(s,1h),8.41(dd,j＝2.0,4.8hz,1h),7.15(dd,j＝4.8,7.6hz,1h),4.16(s,3h),3.46(s,3h).质谱(m/z):334.3[m+h]+.
3-(2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(81)和3-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(80)
步骤1.3-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(80-01):
将4-(2-甲氧基吡啶-3-基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶(50mg,0.17mmol)在hbr/etoh10/3(v/v)(2.5ml)中的溶液加热至100℃反应2小时。然后除去溶剂并用饱和nahco3水溶液调至ph7。有固体析出，过滤得到产物，为白色固体(42mg,94％)。1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ12.46(br,1h),8.85(s,1h),8.78(dd,j＝2.4,7.2hz,1h),7.79(dd,j＝2.4,6.4hz,1h),6.52(dd,j＝6.4,7.2hz,1h),2.63(s,3h).质谱(m/z):288.03[m+h]+.
步骤2.3-(2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(81)和3-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(80):
向3-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(10mg,0.03mmol)的meoh(1ml)溶液中滴加过硫酸氢钾(64mg,0.09mmol)的水溶液(1ml)。然后反应混合物在室温搅拌3小时。除去溶剂并用dcm(20ml)萃取。分离有机层，用na2so4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过制备-tlc(etoac/pe＝3:2)纯化，得到81，为白色固体(3mg)，和80，为白色固体(3mg).对于81,1hnmr:(400mz,cd3od):δ9.29(s,1h),9.08(dd,j＝1.6,7.2hz,1h),7.78(dd,j＝1.6,6.4hz,1h),6.64(dd,j＝6.4,7.2hz,1h),3.06(s,3h).质谱(m/z):304.2[m+h]+.对于80,1hnmr:(400mz,cd3od):δ9.42(s,1h),9.03(dd,j＝1.6,7.2hz,1h),7.81(dd,j＝1.6,6.4hz,1h),6.66(dd,j＝6.4,7.2hz,1h),3.48(s,3h).质谱(m/z):320.3[m+h]+.
4-(2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吗啉(82)
根据36的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和吗啉(13mg,0.15mmol)制备标题化合物82，为白色固体(5mg,0.02mmol)，收率55％。1hnmr(400mhz,cdcl3-d6):δ6.78(s,1h),3.80-3.83(m,4h),2.93(s,3h).
2-(甲基磺酰基)-4-(1h-吡唑-1-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(83)
根据36的步骤，从43-02(50mg,0.146mmol)和1h-吡唑(10mg,0.146mmol)制备标题化合物，为浅黄色固体(10mg,0.02mmol)，收率10％。1hnmr(400mhz,cdcl3-d6):δ8.70(dd,j＝0.8,2.0hz,1h),8.43(s,1h),7.91(m,1h),6.63(dd,j＝1.6,2.4hz,1h),3.45(s,3h).
2-(甲基磺酰基)-4-(1h-吡咯-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(84)
步骤1.2-(甲硫基)-4-(1h-吡咯-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶的制备(84-01)
n2气氛下，将4-氯-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶(94.9mg,0.42mmol),1-(叔丁氧羰基)-1h-吡咯-2-基硼酸(87mg,0.42mmol),pd(pph3)4(24.1mg,0.02mmol)，na2co3(1ml)的dme(3ml)溶液加热至105℃反应3h。将混合物冷至室温并用dcm(3*20ml)萃取。分离有机层，用na2so4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过制备-tlc纯化，得到产物(60mg)，为白色固体。质谱(m/z):260.04[m+h]+.
步骤2.2-(甲基磺酰基)-4-(1h-吡咯-2-基)-6-(三氟甲基)-嘧啶的制备
向2-(甲硫基)-4-(1h-吡咯-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(10mg,0.038mmol)的meoh(2ml)溶液中加入过硫酸氢钾(108mg,0.17mmol)的水溶液(2ml)。混合物在室温搅拌5小时。除去溶剂并用dcm(3*15ml)萃取。分离有机层，用na2so4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过制备-tlc纯化，得到产物，为白色固体(5.1mg,45.1％)。1h-nmr(400mhz,cdcl3):δ10.17(s,1h),7.74(s,1h),7.17-7.16(m,2h),6.44-6.42(m,1h),3.40(s,3h).质谱(m/z):292.03[m+h]+.
4-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-1h-吡咯-2-基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(85)和4-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-1h-吡咯-2-基)-2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(86)
步骤1.4-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-1h-吡咯-2-基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶的制备(85-01)
将2-(甲硫基)-4-(1h-吡咯-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(40.0mg,0.15mmol)和nah(14.0mg,0.28mmol)的无水dmf(3ml)溶液在0℃下搅拌15分钟。然后向混合物中加入4-(溴甲基)-1,2-二甲氧基苯(42.6mg,0.18mmol)，并在室温下搅拌4小时。然后将混合物倒入水中并用ea(3*15ml)萃取，分离有机层，用na2so4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过制备-tlc纯化，得到产物，为白色固体(43.0mg)。质谱(m/z):410.11[m+h]+.
步骤2.4-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-1h-吡咯-2-基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(85)和4-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-1h-吡咯-2-基)-2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶的制备(86)
向4-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-1h-吡咯-2-基)-2-(甲硫基)-6--(三氟甲基)嘧啶(40mg,0.097mmol)的meoh(3ml)溶液中加入过硫酸氢钾(293.4mg,0.47mmol)的水溶液(3ml)。然后将混合物在室温下搅拌4小时。除去溶剂并用dcm(3*15ml)萃取。分离有机层，用na2so4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过制备-tlc纯化，得到85，为白色固体(15mg,23.25％)，和86(5.0mg,12.07％)，为白色固体。851h-nmr(400mz,cdcl3):δ7.76(s,1h),7.18-7.15(m,2h),6.82(d,j＝2.0hz,1h),6.73(d,j＝8.0hz,1h),6.57(dd,1j＝2.0hz,2j＝8hz,1h),6.39-6.37(m,1h),5.79(s,2h),3.83(s,3h),3.80(s,3h),3.45(s,3h).质谱(m/z):442.10[m+h]+.
861h-nmr(400mz,cdcl3):δ7.72(s,1h),7.08-7.07(m,2h),6.85(d,j＝2.4hz,1h),6.76(d,j＝7.2hz,1h),6.63(dd,1j＝2.4hz,2j＝7.2hz,1h),6.63-6.61(m,1h),5.74(s,2h),3.85(s,3h),3.82(s,3h),3.28(s,3h).质谱(m/z):426.10[m+h]+.
2-(甲基磺酰基)-4-(1h-吡咯-3-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(87)和2-(甲基亚磺酰基)-4-(1h-吡咯-3-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(88)
步骤1.2-(甲硫基)-4-(1h-吡咯-3-基)-6-(三氟甲基)嘧啶的制备(87-01)：
n2气氛下，将溶液4-氯-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶(228mg,1mmol),(1-(三异丙基甲硅烷基)-1h-吡咯-3-基)硼酸(267mg,1mmol),pd(pph3)4(58mg,0.05mmol)和1mna2co3水溶液(3ml,3mmol)在dme(10ml)中加热至100℃反应5h。混合物冷至室温并用dcm(3×30ml)萃取。分离有机层，用na2so4干燥，过滤并浓缩，粗产物通过硅胶柱色谱(200～300目硅胶,用etoac/pe＝1:50-1:10洗脱)纯化，得到产物，为白色固体(190mg,73％)。质谱(m/z):260.2[m+h]+.
步骤2，2-(甲基磺酰基)-4-(1h-吡咯-3-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(87)和2-(甲基亚磺酰基)-4-(1h-吡咯-3-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(88)：
向2-(甲硫基)-4-(1h-吡咯-3-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(50mg,0.2mmol)的meoh(3ml)溶液中加入过硫酸氢钾(356mg,0.6mmol)的水溶液(3ml)。然后将混合物在室温搅拌3小时。除去溶剂并用dcm(50ml)萃取。分离有机层，用na2so4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过制备-tlc(etoac/pe＝1:2)纯化，得到87，为白色固体(12mg,13％)和88(15mg,17％)，为白色固体。对于87,1hnmr:(400mz,cdcl3):δ8.80-8.75(m,1h),7.86-7.82(m,1h),7.75(s,1h),6.94-6.91(m,1h),6.86-6.82(m,1h),3.42(s,3h).质谱(m/z):292.2[m+h]+.对于88,1hnmr:(400mz,cdcl3):δ9.39-9.36(m,1h),7.86-7.84(m,1h),7.64(s,1h),6.92-6.90(m,1h),6.81-6.78(m,1h),3.02(s,3h).质谱(m/z):276.3[m+h]+.
4-(1-(3-甲氧基苄基)-1h-吡咯-3-基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(89)和4-(1-(3-甲氧基苄基)-1h-吡咯-3-基)-2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(90)
步骤1.制备4-(1-(3-甲氧基苄基)-1h-吡咯-3-基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶：
在0℃下，向2-(甲硫基)-4-(1h-吡咯-3-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(30mg,0.11mmol)的无水dmf(2ml)溶液中加入nah(5mg,0.12mmol)，并搅拌30分钟。然后向混合物中加入1-(溴甲基)-3-甲氧基苯(24mg,0.12mmol)，并在室温下搅拌5小时。将反应混合物倒入水中，用ea(2×15ml)萃取，分离有机层，用na2so4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过制备-tlc纯化(etoac/pe＝1:7)，得到产物，为白色固体(36mg,82％)。质谱(m/z):380.4[m+h]+.
步骤2.4-(1-(3-甲氧基苄基)-1h-吡咯-3-基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(89)和4-(1-(3-甲氧基苄基)-1h-吡咯-3-基)-2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(90):
向4-(1-(3-甲氧基苄基)-1h-吡咯-3-基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶(40mg,0.11mmol)的meoh(1.5ml)溶液中加入过硫酸氢钾(203mg,0.33mmol)的水溶液(1.5ml)。然后将混合物在室温搅拌3小时。除去溶剂并用dcm(20ml)萃取。分离有机层，用na2so4干燥，过滤并浓缩。粗产物通过制备-tlc(etoac/pe＝3:2)纯化，得到89，为白色固体(14mg,31％)和90，为白色固体(11mg,24％)。对于89,1hnmr:(400mz,cdcl3):δ7.74(s,1h),7.68(s,1h),7.28(t,j＝8.0hz,1h),6.86(dd,j＝2.4,8.4hz,1h),6.79-6.75(m,3h),6.68(s,1h),5.08(s,2h),3.78(s,3h),3.39(s,3h).质谱(m/z):412.2[m+h]+.对于90,1hnmr:(400mz,cdcl3):δ7.75(s,1h),7.59(s,1h),7.28(t,j＝8.0hz,1h),6.87(dd,j＝2.4,8.4hz,1h),6.78-6.75(m,3h),6.69(s,1h),5.08(s,2h),3.78(s,3h),2.99(s,3h).质谱(m/z):396.4[m+h]+.
4-(1-(4-甲氧基苄基)-1h-吡咯-3-基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(91)和4-(1-(4-甲氧基苄基)-1h-吡咯-3-基)-2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(92)
根据89的步骤，从87-01(30mg,0.11mmol)和1-(溴甲基)-4-甲氧基苯(24mg,0.12mmol)制备标题化合物91(5mg,11％收率)和92(5mg,11％收率)，为两种白色固体。911hnmr:(400mz,cdcl3):δ7.74-7.71(m,1h),7.67(s,1h),7.16-7.12(m,2h),6.91-6.85(m,2h),6.77-6.74(m,2h),5.04(s,2h),3.81(s,3h),3.39(s,3h).质谱(m/z):412.3[m+h]+.
921hnmr:(400mz,cdcl3):δ7.74-7.72(m,1h),7.57(s,1h),7.16-7.13(m,2h),6.91-6.88(m,2h),6.76-6.74(m,2h),5.04(s,2h),3.80(s,3h),2.98(s,3h).质谱(m/z):396.4[m+h]+.
4-(1-(3-氯苄基)-1h-吡咯-3-基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(93)和4-(1-(3-氯苄基)-1h-吡咯-3-基)-2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(94)
根据89的步骤，从87-01(30mg,0.11mmol)和1-(溴甲基)-3-氯苯(24mg,0.12mmol)制备标题化合物93(5mg,11％收率)和94(5mg,11％收率)，为两种白色固体。931hnmr:(400mz,cdcl3):δ7.74-7.73(m,1h),7.70(s,1h),7.32-7.29(m,2h),7.14(s,1h),7.06-7.04(m,1h),6.80-6.76(m,2h),5.09(s,2h),3.40(s,3h).质谱(m/z):416.4[m+h]+.
941hnmr:(400mz,cdcl3):δ7.77-7.73(m,1h),7.60(s,1h),7.31-7.29(m,2h),7.14(s,1h),7.06-7.04(m,1h),6.80-6.74(m,2h),5.09(s,2h),2.99(s,3h).质谱(m/z):340.6[m+h]+.
4-(1-(4-氯苄基)-1h-吡咯-3-基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(95)和4-(1-(4-氯苄基)-1h-吡咯-3-基)-2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(96)
根据89的步骤，从87-01(30mg,0.11mmol)和1-(溴甲基)-4-氯苯(24mg,0.12mmol)制备标题化合物95(5mg,11％收率)和96(5mg,11％收率)，为两种白色固体。
951hnmr:(400mz,cdcl3):δ7.75-7.73(m,1h),7.68(s,1h),7.33(d,j＝8.4hz,2h),7.11(d,j＝8.4hz,2h),6.79-6.77(m,1h),6.75-6.73(m,1h),5.09(s,2h),3.39(s,3h).质谱(m/z):416.4[m+h]+.
961hnmr:(400mz,cdcl3):δ7.75-7.72(m,1h),7.59(s,1h),7.33(d,j＝8.4hz,2h),7.10(d,j＝8.4hz,2h),6.79-6.77(m,1h),6.75-6.73(m,1h),5.08(s,2h),2.99(s,3h).质谱(m/z):400.6[m+h]+.
3-((3-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1h-吡咯-1-基)甲基)苯苄腈(97)和3-((3-(2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1h-吡咯-1-基)甲基)苄腈(98)
根据89的步骤，从87-01(30mg,0.11mmol)和3-(溴甲基)苄腈(24mg,0.12mmol)制备标题化合物97(5mg,11％收率)和98(5mg,11％收率)，为两种白色固体。
971hnmr:(400mz,cdcl3):δ7.77-7.75(m,1h),7.72(s,1h),7.64(d,j＝8.0hz,1h),7.50(t,j＝8.0hz,1h),7.42-7.38(m,2h),6.83-6.81(m,1h),6.78-6.76(m,1h),5.17(s,2h),3.40(s,3h).质谱(m/z):407.3[m+h]+.
981hnmr:(400mz,cdcl3):δ7.78-7.75(m,1h),7.63-7.61(m,2h),7.51-7.47(m,1h),7.41-7.38(m,2h),6.84-6.82(m,1h),6.77-6.75(m,1h),5.17(s,2h),2.99(s,3h).质谱(m/z):391.3[m+h]+.
5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(99)
步骤1.4-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶的制备(99-01)：
n2气氛下，向4-氯-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶(49-01)(1g,4.4mmol)和(6-甲氧基吡啶-3-基)硼酸(0.8g,5.3mmol)的二氧六环/h2o(10ml/5ml)溶液中加入pd(pph3)4(250mg,0.22mmol)，然后加入na2co3(930mg,8.7mmol)。将反应混合物在90℃下回流5h。将反应混合物冷至室温，并用硅藻土过滤。在真空中从滤液中除去溶剂，残余物用dcm和h2o萃取三次。合并有机层，用食盐水洗涤，用na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝30/1)进一步纯化，得到917mg4-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶，为无色油状物(70％)。质谱(m/z):302.05[m+h]+.
步骤2.制备5-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(99-02)：
向4-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶(99-01)(917mg,3.05mmol)的etoh(10ml)溶液中滴加3mlhbr(水溶液)。反应混合物在120℃下回流3小时。将反应混合物冷至室温，用na2co3饱和溶液碱化至ph6.0，然后通过真空蒸发从混合物中除去etoh，然后过滤混合物。将固体部分干燥，得到870mg5-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮，为白色固体(98％)。质谱(m/z):288.03[m+h]+.
步骤3.5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮的制备(99)：
向5-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(99-02)(100mg,0.348mmol)的meoh溶液中滴加过硫酸氢钾水溶液(5当量)。反应混合物在室温下搅拌8小时。从反应混合物蒸发溶剂，然后残余物用etoac/h2o萃取三次。合并有机层，用食盐水洗涤，用na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝6/1)进一步纯化，得到70mg5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(99)，为白色固体，收率63％。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.74(s,1h),7.98(d,j＝7.2hz,1h),7.82(s,1h),7.58(d,j＝7.2hz,1h),3.08(s,3h).
5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(丙-2-炔-1-基)吡啶-2(1h)-酮(100)和5-(2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(丙-2-炔-1-基)吡啶-2(1h)-酮(101)
在n2气氛和0℃下，将nah(6mg，0.26mmol)分批加入到99-02(67mg，0.23mmol)的dmf溶液中。将反应混合物在0℃下搅拌30分钟，然后分批加入3-溴丙-1-炔(30mg，0.26mmol)。然后将整个反应混合物在室温下搅拌3小时。将反应混合物用etoac/h2o(15ml/15ml)萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，用na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝1/1)进一步纯化，得到5-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-(1)-(丙-2-炔-1-基)吡啶-2(1h)-酮，为白色固体(44mg，0.14mmol)，收率60％。
将过硫酸氢钾(550mg，0.86mmol)水溶液滴加到5-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)1-(丙-2-炔-1-基)吡啶-2(1h)-酮的甲醇溶液中。将反应混合物在室温下搅拌8小时。从反应混合物中蒸发溶剂，然后将残余物用etoac/h2o萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，用na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝6/1)进一步纯化，得到5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(丙-2-炔-1-基)吡啶-2(1h)-酮(100)，收率65％(28mg，0.08mmol)和5-(2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(丙-2-炔-1-基)吡啶-2(1h)-酮(101)，收率12％(5mg，0.01mmol)，为两种白色固体。
1001hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.99(d,j＝2.8hz,1h),8.06(dd,j＝2.8,8.6hz,1h),7.89(s,1h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),4.88(d,j＝2.8hz,2h),3.45(s,3h),2.65(t,j＝2.8hz,1h).
1011hnmr(400mhz,cdcl3)δ(d,j＝2.4hz,1h),8.08(dd,j＝2.4,8.6hz,1h),7.79(s,1h),6.73(d,j＝9.6hz,1h),4.86(t,j＝1.2hz,2h),3.04(s,3h),2.61(t,j＝2.8hz,1h).
1-(2-叠氮基乙基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(102)
步骤1.制备1-(2-溴乙基)-5-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(102-01)：
在n2气氛和0℃下，将nah(17mg，0.70mmol)分批加入到99-02(100mg，0.35mmol)的dmf溶液中。将反应混合物在0℃下搅拌30分钟，然后分批加入1,2-二溴乙烷(327mg，1.74mmol)。然后将整个反应混合物在室温下搅拌3小时。将反应混合物用etoac/h2o(15ml/15ml)萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，用na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝1/1)进一步纯化，得到1-(2-溴乙基)-5-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮，收率32％，为浅黄色油状物(45mg，0.11mmol)。
步骤2.制备1-(2-叠氮基乙基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(102)
根据59的步骤，由102-01(40mg，0.1mmol)和nan3(66mg，1mmol)制备标题化合物102，为淡黄色固体(17mg,0.04mmol)，收率40％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.62(d,j＝2.4hz,1h),8.06(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.89(s,1h),6.73(d,j＝9.6hz,1h),4.21(t,j＝5.6hz,2h),3.81(t,j＝5.6hz,2h),3.45(s,2h).
1-苄基-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(103)
步骤1.制备1-苄基-5-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮
在0℃下，向5-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(100mg，0.32mmol)的无水dmf(10ml)溶液中加入nah(8.4mg，0.35mmol)，搅拌30分钟。然后向混合物中加入苄基溴(66mg，0.38mmol)并在室温下搅拌5小时。之后将反应混合物倒入水中并用etoac(3×20ml)萃取，分离有机层，用na2so4干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱(200-300目硅胶，用pe/etoac＝10:1洗脱)纯化粗产物，得到产物74mg，收率57％，为白色固体。质谱(m/z):378.4[m+h]+。
步骤2.制备1-苄基-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(103)
室温下，向1-苄基-5-(2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(10mg，0.03mmol)的dcm(2ml)溶液中加入间氯过氧苯甲酸(10mg，0.06mmol)。反应混合物在室温下搅拌3小时。除去溶剂并用dcm(3×15ml)萃取。分离有机层，用na2so4干燥，过滤并浓缩。通过pre-tlc(etoac/pe＝1:2)纯化粗产物，得到4.0mg103，为白色固体，收率36％。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.65(d,j＝2.8hz,1h),7.99(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.82(s,1h),7.41-7.34(m,5h),6.76(d,j＝9.6hz,1h),5.27(s,2h),3.39(s,3h).质谱(m/z):410.4[m+h]+.
1-(2-氯苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(104)
根据103的步骤，由99-02(20mg,0.07mmol)和1-(溴甲基)-2-氯苯(16mg,0.08mmol)制备标题化合物104(5mg,18％)，为白色固体。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.67(d,j＝2.8hz,1h),8.00(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.86(s,1h),7.33-7.30(m,3h),7.25-7.22(m,1h),6.76(d,j＝9.6hz,1h),5.24(s,2h),3.42(s,3h).质谱(m/z):444.5[m+h]+.
1-(3-氯苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(105)
根据103的步骤，由99-02(20mg,0.07mmol)和1-(溴甲基)-3-氯苯(16mg,0.08mmol)制备标题化合物105(5mg,18％)，为白色固体。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.72(d,j＝2.8hz,1h),8.01(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.81(s,1h),7.45-7.42(m,1h),7.34-7.28(m,3h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),5.37(s,2h),3.38(s,3h).质谱(m/z):444.4[m+h]+.
1-(4-氯苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(106)
根据103的步骤，由99-02(20mg,0.07mmol)和1-(溴甲基)-4-氯苯(16mg,0.08mmol)制备标题化合物106(6mg,21％)，为白色固体。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.69(d,j＝2.4hz,1h),8.02(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.86(s,1h),7.34-7.27(m,4h),6.76(d,j＝9.6hz,1h),5.24(s,2h),3.43(s,3h).质谱(m/z):444.5[m+h]+.
1-(3-溴苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(107)
根据103的步骤，由99-02(20mg,0.07mmol)和1-(溴甲基)-3-溴苯(20mg,0.08mmol)制备标题化合物107(5mg,15％)，为白色固体。
1h-nmr(400mhz,cdcl3):δ8.67(d,j＝2.8hz,1h),8.01(dd,1j＝2.8hz,2j＝12.0hz,1h),7.84(s,1h),7.48-7.46(m,2h),7.29-7.18(m,2h),6.77(d,j＝12.0hz,1h),5.24(s,2h),3.42(s,3h).质谱(m/z):487.98[m+h]+.
1-(3-羟基苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(108)
根据103的步骤，由99-02(20mg,0.07mmol)和(3-(溴甲基)苯氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(24mg,0.08mmol)制备标题化合物108(5mg,18％)，为白色固体。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.66(d,j＝2.4hz,1h),7.97(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.83(s,1h),7.24(d,j＝8.0hz,1h),6.92(d,j＝9.6hz,1h),6.84-6.86(m,1h),6.80-6.83(m,1h),6.74(d,j＝9.6hz,1h),5.20(s,2h),3.41(s,3h).
1-(3-甲氧基苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(109)
根据103的步骤，由99-02(20mg,0.07mmol)和1-(溴甲基)-3-甲氧基苯(16mg,0.08mmol)制备标题化合物109(4mg,14％)，为白色固体。1hnmr:(400mhz,cdcl3)δ8.64(d,j＝2.8hz,1h),8.01(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.82(s,1h),7.31-7.26(m,1h),6.92-6.86(m,3h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),5.23(s,2h),3.80(s,3h),3.39(s,3h).质谱(m/z):440.2[m+h]+.
1-(4-甲氧基苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(110)和1-(4-甲氧基苄基)-5-(2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(111)
根据100的步骤，由99-02(30mg,0.10mmol)和1-(氯甲基)-4-甲氧基苯(22mg,0.11mmol)制备标题化合物110(5mg,0.011mmol)和111(3mg,0.007mmol)，收率分别为11％和7％，为两种白色固体。对于110,1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.63(d,j＝2.0hz,1h),7.97(dd,j＝2.0,9.6hz,1h),7.81(s,1h),7.32(d,j＝8.4hz,2h),6.90(d,j＝8.4hz,2h),6.73(d,j＝9.6hz,1h),5.19(s,2h),3.79(s,3h),3.39(s,3h).质谱(m/z):440.2[m+h]+.对于111,1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.67(d,j＝2.0hz,1h),7.99(dd,j＝2.0,9.6hz,1h),7.70(s,1h),7.32(d,j＝8.4hz,2h),6.89(d,j＝8.4hz,2h),6.72(d,j＝9.6hz,1h),5.22(d,j＝14.4hz,1h),5.18(d,j＝14.4hz,1h),3.79(s,3h),3.00(s,3h).质谱(m/z):424.3[m+h]+.
1-(3-乙氧基苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(112)
根据103的步骤，由99-02(20mg,0.07mmol)和1-(溴甲基)-3-乙氧基苯(16mg,0.08mmol)制备标题化合物(2mg)和tc009156(1mg)，为两种白色固体。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.62(d,j＝2.4hz,1h),7.99(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.81(s,1h),7.28(dd,j＝7.6,8.8hz,1h),6.84-6.91(m,3h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),5.23(s,2h),4.02(q,j＝6.8hz,2h),3.39(s,3h),1.40(t,j＝6.8hz,3h).
5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3-丙氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(113)和5-(2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3-丙氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(114)
根据103的步骤，由99-02(20mg,0.07mmol)和1-(溴甲基)-3-丙氧基苯(18mg,0.08mmol)制备标题化合物113(2mg)和114(2mg)，为两种白色固体。
1131hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.62(dd,j＝2.4hz,1h),8.00(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.81(s,1h),7.15-7.30(m,1h),6.85-6.91(m,3h),6.76(d,j＝9.6hz,1h),5.23(s,2h),3.91(t,j＝6.4hz,2h),3.39(s,3h),1.74-1.84(m,2h),1.22(t,j＝7.6hz,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c21h21f3n3o4s+],468.1,测得值469.6.
114lc-ms(esi)m/z:计算值[c21h21f3n3o3s+],452.1,测得值452.6。
5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3-(丙-2-炔-1-基氧基)苄基)吡啶-2(1h)-酮(115)
根据100的步骤，由99-02(30mg,0.1mmol)和1-(溴甲基)-3-(丙-2-炔-1-基氧基)苯(80mg,0.38mmol)制备标题化合物115(30mg,0.02mmol)，为白色固体，收率24％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.66(d,j＝2.0hz,1h),8.03(dd,j＝2.0,9.6hz,1h),7.90(s,1h),7.27-7.23(m,1h),6.93-6.88(m,3h),6.70(d,j＝9.6hz,1h),5.19(s,2h),4.63(dd,j＝1.2,2.4hz,2h),3.36(d,j＝0.8hz,3h),2.52(td,j＝2.4,1.2hz,1h).
5-(2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(4-(三氟甲氧基)苄基)吡啶-2(1h)-酮(116)和5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(4-(三氟甲氧基)苄基)吡啶-2(1h)-酮(117)
根据103的步骤，由99-02(20mg,0.07mmol)和1-(溴甲基)-4-(三氟甲氧基)苯(20mg,0.08mmol)制备标题化合物116(3mg,9％)和117(2mg,6％)，为两种白色固体。
1161hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.73(d,j＝2.4hz,1h),8.00(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.73(s,1h),7.38(d,j＝8.0hz,2h),7.18(d,j＝8.0hz,2h),6.72(d,j＝9.6hz,1h),5.26(d,j＝14.4hz,1h),5.22(d,j＝14.4hz,1h),2.99(s,3h).质谱(m/z):478.4[m+h]+.
1171hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.71(d,j＝2.8hz,1h),7.99(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.85(s,1h),7.41(dd,j＝2.8,8.0hz,2h),7.21(d,j＝8.0hz,2h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),5.26(s,2h),3.42(s,3h).质谱(m/z):478.4[m+h]+.
3-((5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-2-氧代吡啶-1(2h)-基)甲基)苯甲腈(118)
根据103的步骤，由99-02(20mg,0.07mmol)和3-(溴甲基)苄腈(16mg,0.08mmol)制备标题化合物118(4mg,13％)，为白色固体。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.75(d,j＝2.4hz,1h),8.02(dd,j＝2.0,9.6hz,1h),7.90(s,1h),7.63-7.50(m,4h),6.77(d,j＝9.6hz,1h),5.29(s,2h),3.43(s,3h).质谱(m/z):435.4[m+h]+.
4-((5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-2-氧代吡啶-1(2h)-基)甲基)苯甲腈(119)
根据103的步骤，由99-02(20mg,0.07mmol)和4-(溴甲基)苯甲腈(16mg,0.08mmol)制备标题化合物119(5mg,16％)，为白色固体。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.75(d,j＝2.8hz,1h),8.01(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.88(s,1h),7.66(d,j＝8.4hz,2h),7.44(d,j＝8.4hz,2h),6.76(d,j＝9.6hz,1h),5.31(s,2h),3.43(s,3h).质谱(m/z):478.4[m+h]+.
1-(3-乙炔基苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(120)和1-(3-乙炔基苄基)-5-(2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(121)
步骤1.制备(3-乙炔基苯基)甲醇(120-01):
在n2气氛下，向(3-溴苯基)甲醇(935mg,5mmol)的无水tea溶液中加入pd(pph3)2cl2(175mg,0.25mmol)，cui(48mg,0.25mmol)和p(t-bu)3(51mg,0.25mmol)。将反应混合物搅拌5分钟，然后逐滴加入乙炔基三甲基硅烷(980mg,10mmol)。然后将反应混合物在130℃下微波加热4小时。将反应混合物冷却至室温，硅藻土过滤。真空下从滤液中除去溶剂，然后将残余物用etoac/h2o萃取三次。合并有机层，用盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝4/1)进一步纯化，得到750mg(3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯基)甲醇120-01，为棕色油状物(73％)。
0℃下，向(3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯基)甲醇(500mg,2.46mmol)的thf溶液中分批加入tbaf(1g,4.92mmol)。将反应混合物在0℃至室温下搅拌3小时。真空下从混合物中除去溶剂，并将残余物用etoac/h2o萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝4/1)进一步纯化，得到184mg(3-乙炔基苯基)甲醇(120-01)，为棕色油状物(57％)。
步骤2.制备1-(溴甲基)-3-乙炔基苯(120-02):
在n2气氛下，向(3-乙炔基苯基)甲醇(184mg,1.39mmol)的dcm溶液中分批加入cbr4(557mg,1.74mmol)，搅拌5～10分钟后分批加入pph3(455mg,1.74mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。真空下从反应混合物中除去溶剂。将残余物溶于etoac中并过滤。浓缩滤液，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝30/1)进一步纯化，得到140mg1-(溴甲基)-3-乙炔基苯，为无色油状物(52％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.51-7.53(m,1h),7.36-7.44(m,2h),7.28-7.32(m,1h),4.45(s,2h),3.10(s,1h).
步骤3.制备1-(3-乙炔基苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(120)和1-(3-乙炔基苄基)-5-(2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(121)
根据100的步骤，由99-02(60mg,0.2mmol)和1-(溴甲基)-3-乙炔基苯(120-02)(38mg,0.19mmol)制备标题化合物120(17mg,0.02mmol)，为黄色固体，收率19％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.01(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.87(s,1h),7.71(dd,j＝3.2,6hz,1h),7.52(dd,j＝3.6,5.6hz,1h),7.56(s,1h),7.34～7.32(m,2h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),5,34(s,2h),3.40(s,3h),3.08(s,1h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c20h15f3n3o3s+],434.0,测得值434.0.
根据100的步骤，由99-02(60mg,0.2mmol)和1-(溴甲基)-3-乙炔基苯(120-02)(38mg,0.19mmol)制备标题化合物121(18mg,0.02mmol)，为黄色固体，收率19％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.03(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.76(s,1h),7.71(dd,j＝3.2,5.6hz,1h),7.52(dd,j＝3.2,5.6hz,1h),7.44(s,1h),7.36-7.30(m,2h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),5.24(dd,j＝14.4,21.2hz,2h),3.08(s,1h),3.01(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c20h15f3n3o2s+],418.1,测得值418.1.
1-(4-乙炔基苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(122)
步骤1.制备(4-乙炔基苯基)甲醇(122-01)：
在n2气氛下，向(4-溴苯基)甲醇(935mg,5mmol)的无水tea溶液中加入pd(pph3)2cl2(175mg,0.25mmol)，cui(48mg,0.25mmol)和p(t-bu)3(51mg,0.25mmol)。将反应混合物搅拌5分钟，然后逐滴加入乙炔基三甲基硅烷(980mg,10mmol)。然后将反应混合物在130℃下微波加热4小时。将反应混合物冷却至室温，用硅藻土过滤。真空下从滤液中除去溶剂，然后将残余物用etoac/h2o萃取三次。合并有机层，用盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝4/1)进一步纯化，得到670mg(4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯基)甲醇，为棕色油状物(66％)。
0℃下，向(4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯基)甲醇(250mg,1.23mmol)的thf溶液中分批加入tbaf(500mg,2.45mmol)。将反应混合物在0℃至室温下搅拌3小时。真空中从混合物中除去溶剂，并将残余物用etoac/h2o萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱(pe/ea＝4/1)进一步纯化，得到170mg(4-乙炔基苯基)甲醇，为棕色油状物(收率100％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.45-7.49(m,2h),7.21-7.26(m,2h),4.69(s,1h),4.65(s,2h)。
步骤2.制备1-(溴甲基)-4-乙炔基苯(122-02)：
在0℃下，向(4-乙炔基苯基)甲醇(110mg,0.84mmol)的无水dcm溶液中逐滴加入pbr3(450mg,1.67mmol)。将反应混合物在0℃至室温下搅拌3小时。将反应加水淬灭，之后用dcm/h2o萃取三次。合并有机层，用盐水洗涤，用na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝10/1)进一步纯化，得到80mg1-(溴甲基)-4-乙炔基苯，为无色油状物(50％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.45-7.48(m,2h),7.33-7.36(m,2h),4.47(s,2h),3.13(s,1h)。
步骤3.制备1-(4-乙炔基苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(122)
根据100的步骤，由99-02(130mg,0.45mmol)和1-(溴甲基)-4-乙炔基苯(122-02)(80mg,0.41mmol)制备标题化合物122(120mg,0.26mmol)，为黄色固体，收率64％.1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.68(d,j＝2.4hz,1h),8.00(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.88(s,1h),7.45(d,j＝8.0hz,2h),7.29(d,j＝8.0hz,2h),6.72(d,j＝9.6hz,1h),5.23(s,2h),3.39(s,3h),3.08(s,1h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c20h15f3n3o3s+],434.0,测得值434.1.
1-(4-叠氮基苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(123)
根据100的步骤，由99-02(46mg,0.10mmol)和1-叠氮基-4-(溴甲基)苯(44mg,0.21mmol)制备标题化合物123(13mg,0.029mmol)，为黄色固体，收率29％.1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.70(d,j＝2.8hz,1h),7.98(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.83(s,1h),7.37(d,j＝8.4hz,2h),7.03(d,j＝8.4hz,2h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),5.23(s,2h),3.42(s,3h).
1-(4-氯-2-氟苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(124)和1-(4-氯-2-氟苄基)-5-(2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(125)
根据103的步骤，由99-02(20mg,0.07mmol)和1-(溴甲基)-4-氯-2-氟苯(18mg,0.08mmol)制备标题化合物124(3mg,9％)和125(2mg,6％)，为两种白色固体。
1241hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.76(d,j＝2.8hz,1h),8.02(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.87(s,1h),7.45(t,j＝8.0hz,1h),7.16-7.12(m,2h),6.71(d,j＝9.6hz,1h),5.24(s,2h),3.43(s,3h).质谱(m/z):462.5[m+h]+.
1251hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.79(d,j＝2.8hz,1h),8.04(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.75(s,1h),7.45(t,j＝8.0hz,1h),7.15-7.12(m,2h),6.70(d,j＝9.6hz,1h),5.27(d,j＝14.4hz,1h),5.22(d,j＝14.4hz,1h),3.03(s,3h).质谱(m/z):446.3[m+h]+.
1-(2-氯-4-甲氧基苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(126)
根据103的步骤，由99-02(20mg,0.07mmol)和1-(溴甲基)-2-氯-4-甲氧基苯(20mg,0.08mmol)制备标题化合物126(5mg,15％)，为白色固体。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.73(d,j＝2.8hz,1h),8.00(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.81(s,1h),7.39(d,j＝8.4hz,1h),6.98(d,j＝2.8hz,1h),6.83(d,j＝2.4,8.4hz,1h),6.73(d,j＝9.6hz,1h),5.30(s,2h),3.81(s,3h),3.39(s,3h).质谱(m/z):474.3[m+h]+.
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(127)和1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(128)
根据103的步骤，由99-02(20mg,0.07mmol)和4-(溴甲基)-1,2-二甲氧基苯(19mg,0.08mmol)制备标题化合物127(6mg,15％)和128(4mg,10％)，为两种白色固体。
1271hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.68(d,j＝2.4hz,1h),7.98(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.82(s,1h),6.94(s,1h),6.92(d,j＝8.0hz,1h),6.84(d,j＝8.0hz,1h),6.73(d,j＝9.6hz,1h),5.18(s,2h),3.87(s,3h),3.85(s,3h),3.38(s,3h).质谱(m/z):470.3[m+h]+.
1281hnmr(400mhz,dmso-d6):δ9.24(d,j＝2.8hz,1h),8.68(s,1h),8.41(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.10(d,j＝2.8hz,1h),6.92(d,j＝8.4hz,1h),6.88(dd,j＝2.4,8.4hz,1h),6.63(d,j＝9.6hz,1h),5.18(s,2h),3.73(s,3h),3.72(s,3h),3.53(s,3h).质谱(m/z):454.3[m+h]+.
1-(4-甲氧基-3-(丙-2-炔-1-基氧基)苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(129)
步骤1.制备4-甲氧基-3-(丙-2-炔-1-基氧基)苯甲醛(129-01)
将k2co3(1.1g,8.0mmol)加入到3-羟基-4-甲氧基苯甲醛(1g,6.6mmol)和3-溴丙-1-炔(0.95g,7.9mmol)的dmf(10ml)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌3小时。将反应混合物用etoac和h2o萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，na2so4干燥，浓缩，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝4/1)进一步纯化，得到1.24g4-甲氧基-3-(丙-2-炔-1-基氧基)苯甲醛，为黄色油状物(100％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.50-7.53(m,2h),7.00(d,j＝8.0hz,1h),4.81(d,j＝2.4hz,2h),3.95(s,3h),2.53-2.55(t,j＝2.4hz,1h).
步骤2.制备(4-甲氧基-3-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基)甲醇(129-02)：
在0℃和n2气氛下，向4-甲氧基-3-(丙-2-炔-1-基氧基)苯甲醛(129-01)(1.24g,6.5mmol)的无水meoh(15ml)溶液中分批加入nabh4(350mg,8.8mmol)。然后将反应混合物在0℃至室温下搅拌3小时。加h2o淬灭反应，然后从混合物中真空除去溶剂。将残余物用etoac和h2o萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，na2so4干燥，浓缩，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝1/1)进一步纯化，得到1.07g(4-甲氧基-3-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基)甲醇，为白色固体(75％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.07(d,j＝2.0hz,1h),6.97(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),4.78(d,j＝2.4hz,2h),4.63(d,j＝5.6hz,2h),3.87(s,3h),2.51(t,j＝2.4hz,1h).
步骤3.制备4-(溴甲基)-1-甲氧基-2-(丙-2-炔-1-基氧基)苯(129-03)：
在n2气氛下，向(4-甲氧基-3-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基)甲醇(129-02)(200mg,1.04mmol)的dcm溶液中分批加入cbr4(432mg,1.30mmol)，搅拌5-10分钟后再分批加入pph3(341mg,1.30mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。真空中从反应混合物中除去溶剂。将残余物溶于etoac中并过滤。浓缩滤液，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝10/1)进一步纯化，得到221mg4-(溴甲基)-1-甲氧基-2-(丙-2-炔-1-基氧基)苯(83％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.06-7.08(m,1h),6.99-7.03(m,1h),6.82-6.85(m,1h),4.76-4.78(m,2h),4.49(s,2h),3.87(s,3h),2.53(t,j＝2.4hz,1h).
步骤4.制备1-(4-甲氧基-3-(丙-2-炔-1-基氧基)苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(129)：
根据100的步骤，由99-02(74mg,0.29mmol)和4-(溴甲基)-1-甲氧基-2-(丙-2-炔-1-基氧基)苯(129-03)(57mg,0.29mmol)制备标题化合物129(24mg,0.04mmol)，为白色固体，收率13％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.67(d,j＝2.8hz,1h),7.96(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.82(s,1h),7.10(d,j＝2.0hz,1h),7.01(dd,j＝2.0,8.4hz,1h),6.88(d,j＝8.0hz,1h),6.74(d,j＝9.6hz,1h),5.20(s,2h),4.76(d,j＝2.0hz,2h),3.88(s,3h),43.46(s,3h),2.55(t,j＝2.0hz,1h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c22h19f3n3o5s+],494.1,测得值494.3.
1-(3-甲氧基-4-(丙-2-炔-1-基氧基)苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(130)
步骤1.制备(3-甲氧基-4-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基)甲醇(130-01)：
向4-(羟甲基)-2-甲氧基苯酚(770mg，4.6mmol)的丙酮溶液中加入k2co3(1.04g，5.5mmol)和ki(910mg,5.5mmol)，随后加入3-溴丙-1-酮(650mg,5mmol)。将反应混合物在75℃下回流8小时。将反应混合物冷却至室温，真空除去溶剂。将残余物用etoac和h2o萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，na2so4干燥，浓缩，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝4/1)进一步纯化，得到725mg(3-甲氧基-4-(丙-2-炔)-1-基氧基)苯基)甲醇，为黄色油状物(182％)。
步骤2.制备4-(溴甲基)-2-甲氧基-1-(丙-2-炔-1-基氧基)苯(130-02)：
在n2气氛下，向(3-甲氧基-4-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基)甲醇(130-01)(422mg,2.2mmol)的dcm溶液中分批加入cbr4(910mg,2.7mmol)，搅拌5～10分钟后，再分批加入pph3(720mg，2.70mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。真空下从反应混合物中除去溶剂。将残余物溶于etoac中并过滤。浓缩滤液，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝10/1)进一步纯化，得到420mg4-(溴甲基)-2-甲氧基-1-(丙-2-炔-1-基氧基)苯(75％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.94-6.99(m,3h),4.76-4.78(m,2h),4.50(s,2h),3.89(s,3h),2.51-2.52(m,1h).
步骤3.制备1-(3-甲氧基-4-(丙-2-炔-1-基氧基)苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(130)：
根据100的步骤，由99-02(65mg,0.23mmol)和4-(溴甲基)-2-甲氧基-1-(丙-2-炔-1-基氧基)苯(130-02)(54mg,0.23mmol)制备标题化合物130(5mg,0.01mmol)，为白色固体，收率5％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.69(d,j＝2.4hz,1h),7.98(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.83(s,1h),7.02(d,j＝8.0hz,1h),6.97(s,1h),6.92(d,j＝8.0hz,1h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),5.20(s,2h),4.76(d,j＝2.4hz,2h),3.87(s,3h),3.40(s,3h),2.51(t,j＝2.4hz,1h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c22h19f3n3o5s+],494.1,测得值494.0.
1-([1,1'-联苯]-4-基甲基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(131)
根据100的步骤，由99-02(10mg,0.04mmol)和4-(溴甲基)-1,1'-联苯(12mg,0.05mmol)制备标题化合物131(7mg,0.015mmol)，为白色固体，收率42％。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ8.72(d,j＝2.4hz,1h),8.01(dd,1j＝2.4hz,2j＝10hz,1h),7.85(s,1h),7.59-7.34(m,4h),7.44-7.41(m,4h),7.36-7.33(m,1h),6.75(d,j＝10hz,1h),5.29(s,2h),3.37(s,3h).质谱(m/z):486.10[m+h]+.
1-(4-(1h-吡唑-1-基)苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(132)
根据100的步骤，由99-02(30mg,0.11mmol)和1-(4-(溴甲基)苯基)-1h-吡唑(36mg,0.15mmol)制备标题化合物132(18mg,0.038mmol)，为白色固体，收率35％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.72(d,j＝2.0hz,1h),7.99(m,1h),7.91(d,j＝2.0hz,1h),7.86(s,1h),7.72-7.69(m,3h),7.46(d,j＝9.2hz,2h),6.75(d,j＝9.2hz,1h),6.46(m,1h),5.29(s,3h),3.40(s,1h).质谱(m/z):476.09[m+h]+.
5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(萘-1-基甲基)吡啶-2(1h)-酮(133)
根据103的步骤，由99-02(20mg,0.07mmol)和1-(溴甲基)萘(18mg,0.08mmol)制备标题化合物133(5mg,16％)，为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.43(d,j＝9.6hz,1h),8.02-7.91(m,4h),7.68(s,1h),7.58-7.42(m,4h),6.83(d,j＝9.6hz,1h),5.72(s,2h),3.18(s,3h).质谱(m/z):460.3[m+h]+.
5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(萘-2-基甲基)吡啶-2(1h)-酮(134)
根据103的步骤，由99-02(20mg,0.07mmol)和2-(溴甲基)萘(18mg,0.08mmol)制备标题化合物134(5mg,16％)，为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.68(d,j＝2.4hz,1h),8.00(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.87-7.81(m,4h),7.52-7.45(m,4h),6.78(d,j＝9.6hz,1h),5.43(s,2h),3.29(s,3h).质谱(m/z):460.3[m+h]+.
1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(135)
根据103的步骤，由99-02(20mg,0.07mmol)和4-(溴甲基)-2-甲氧基吡啶(16mg,0.08mmol)制备标题化合物135(2mg,6％)，为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.69-8.70(m,1h),8.16(d,j＝5.6hz,1h),8.04(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.88(s,1h),6.82(d,j＝5.2hz,1h),6.79(d,j＝9.6hz,1h),5.24(s,2h),3.95(s,3h),3.43(s,3h).
1-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基甲基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(136)
根据103的步骤，由99-02(20mg,0.07mmol)和5-(溴甲基)苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯(17mg,0.08mmol)制备标题化合物(2mg,6％)，为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.63(d,j＝2.4hz,1h),7.98(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.82(s,1h),6.84-6.86(m,2h),6.80(d,j＝8.4hz,1h),6.74(d,j＝9.6hz,1h),5.96(s,2h),5.16(s,2h),3.41(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c19h15f3n3o5s+],454.1,测得值454.5.
1-((4-溴苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)甲基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(137)和1-((4-溴苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)甲基)-5-(2-(甲基亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(138)
根据103的步骤，由99-02(20mg,0.07mmol)和4-溴-5-(溴甲基)苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯(24mg,0.08mmol)制备标题化合物137(5mg,13％)和138(4mg,10％)，为两种白色固体。
1371hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.78(d,j＝2.8hz,1h),8.02(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.83(s,1h),7.06(s,1h),6.88(s,1h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),5.99(s,2h),5.28(s,2h),3.40(s,3h).质谱(m/z):533.3[m+h]+.
1381hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.80(d,j＝2.8hz,1h),8.05(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.73(s,1h),7.06(s,1h),6.85(s,1h),6.74(d,j＝9.6hz,1h),5.98(s,2h),5.29(d,j＝14.8hz,1h),5.25(d,j＝14.8hz,1h),3.01(s,3h).质谱(m/z):517.3[m+h]+.
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(1h-吡唑-1-基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(139)
步骤1.制备4-氯-2-(甲硫基)-6-(1h-吡唑-1-基)嘧啶(139-01)：
根据36的步骤，由4,6-二氯-2-(甲硫基)嘧啶(300mg,1.55mmol)和1h-吡唑(95mg,1.40mmol)制备标题化合物139-01(130mg,0.56mmol)，为白色固体，产率40％。
步骤2.制备4-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2-(甲硫基)-6-(1h-吡唑-1-基)嘧啶(139-02)：
根据99-01的步骤，由139-01(125mg,0.55mmol)和2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶(140mg,0.61mmol)制备标题化合物139-02(146mg,0.47mmol)，为白色固体，产率86％。
步骤3.制备5-(2-(甲硫基)-6-(1h-吡唑-1-基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(139-03)：
根据99-02的步骤，由139-02(146mg,0.47mmol)制备标题化合物139-03(75mg,0.30mmol)，为白色固体，产率54％。
步骤4.制备1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(1h-吡唑-1-基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(139)：
根据99-01的步骤，由139-03(40mg,0.14mmol)和4-(溴甲基)-1,2-二甲氧基苯(32mg,0.14mmol)制备标题化合物139(10mg,0.02mmol)，为白色固体，产率14％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.62(d,j＝2.4hz,1h),8.53(d,j＝2.4hz,1h),8.15(s,1h),8.04(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.85(d,j＝0.8hz,1h),6.95-6.97(m,1h),6.93(d,j＝2.4hz,1h),6.85-6.88(m,1h),6.73(d,j＝9.6hz,1h),6.57(dd,j＝1.6,2.4hz,1h),5.19(s,2h),3.88(s,3h),3.87(s,3h),3.35(s,3h).lc-ms(esi)m/z:计算值[c22h22n5o5s+],468.1,测得值468.5.
5-(2-(([1,1'-联苯]-4-基甲基)磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(140)
制备1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-巯基-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(140-01)：
在n2气氛下，将nahs(28mg,0.38mmol)加入到1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(127)(60mg,0.13mmol)的dmf(2ml)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌2小时。通过1nhcl将反应混合物酸化至ph＝5，然后通过dcm/h2o萃取。合并有机层，用盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝1/1)进一步纯化，得到50mg1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-巯基-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮，为黄色固体(98％)。
制备5-(2-(([1,1'-联苯基]-4-基甲基)磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(140)：
将k2co3(10mg,0.07mmol)加入到1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-巯基-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(20mg，0.05mmol)和4-(氯甲基)-1,1'-联苯(15mg,0.07mmol)的dmf(2ml)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌3小时。将反应混合物用etoac和h2o萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，na2so4干燥，浓缩，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝4/1)进一步纯化，得到10mg5-(2-(([1,1'-联苯基]-4-基甲基)硫代)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮，为白色固体(36％)。
将过硫酸氢钾(50mg,0.08mmol)的水溶液滴加到5-(2-(([1,1'-联苯基]-4-基甲基)硫代)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(10mg,0.02mmol)的meoh(2ml)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌8小时。从反应混合物中蒸发溶剂，然后将残余物用etoac/h2o萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝10/1)进一步纯化，得到2mg5-(2-(([1,1'-联苯]-4-基甲基)磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮，为白色固体(16％)。lc-ms(esi)m/z:计算值[c32h27f3n3o5s3+],622.2,测得值622.4。
5-(2-(丁-3-炔-1-基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(141)
根据140的步骤，由140-01(40mg,0.10mmol)和4-溴丁-1-炔(20mg,0.14mmol)制备标题化合物(7mg,0.015mmol)，为白色固体，产率15％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.68(d,j＝2.4hz,1h),7.96(dd,j＝1.2,9.6hz,1h),7.82(s,1h),6.96～6.92(m,2h),6.85(d,j＝8.0hz,1h),6.73(d,j＝9.6hz,1h),5.19(s,2h),3.88(s,3h),3.86(s,3h),3.79(t,j＝7.2hz,2h),2.85(dt,j＝7.2,2.8hz,2h),1.97(t,j＝2.8hz,1h).
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(6-(三氟甲基)-2-(乙烯基磺酰基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(142)
根据140的步骤，由140-01(50mg,0.12mmol)和2-溴-n,n-二甲基乙胺(0.18mmol)制备标题化合物142(40mg,0.12mmol)，为无色油状物，收率69％。142:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.45(d,j＝2.8hz,1h),7.99(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.83(s,1h),7.09(dd,j＝10.0,16.4hz,1h),6.93-6.90(m,2h),6.84(d,j＝8.4hz,1h),6.72(d,j＝9.6hz,1h),6.69(d,j＝17.2hz,1h),6.37(d,j＝10.0hz,1h),5.17(s,2h),3.85(s,3h),3.84(s,3h).质谱(m/z):482.54[m+h]+.
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-((2-甲氧基乙基)磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(143)
根据140的步骤，由140-01(24mg,0.06mmol)和1-溴-2-甲氧基乙烷(12mg,0.09mmol)制备标题化合物143(21mg,0.041mmol)，为白色固体，收率68％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.68(d,j＝2.8hz,1h),8.01(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.81(s,1h),6.95-6.92(m,2h),6.85(d,j＝8.0hz,1h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),5.19(s,2h),3.59-3.85(m,8h),3.80(t,j＝5.6hz,2h),3.16(s,3h).质谱(m/z):514.43[m+h]+.
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-((3-甲氧基丙基)磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(144)
根据140的步骤，由140-01(21mg,0.05mmol)和1-溴-3-甲氧基丙烷(11mg,0.075mmol)制备标题化合物144(21mg,0.04mmol)，为白色固体，收率80％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.70(d,j＝2.4hz,1h),7.99(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.81(s,1h),6.96-6.91(m,2h),6.85(d,j＝8.4hz,1h),6.74(d,j＝9.6hz,1h),5.19(s,1h),3.87(s,3h),3.86(s,3h),3.69(t,j＝7.6hz,2h),3.52(t,j＝5.6hz,2h),3.30(s,3h),2.21-2.14(m,2h).质谱(m/z):528.49[m+h]+.
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-((2-(2-甲氧基乙氧基)乙基)硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(145)
根据140的步骤，由140-01(18mg,0.042mmol)和1-溴-2-(2-甲氧基乙氧基)乙烷(12mg,0.063mmol)制备标题化合物145(17mg,0.03mmol)，为白色固体，收率71％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.66(d,j＝2.8hz,1h),7.99(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.79(s,1h),6.95-6.92(m,2h),6.86(d,j＝8.0hz,1h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),5.19(s,2h),3.97(t,j＝6.0hz,2h),3.87-3.83(m,8h),3.45-3.43(m,2h),3.23-3.20(m,2h),3.14(s,3h).质谱(m/z):558.25[m+h]+.
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-(庚基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(146)
根据140的步骤，由140-01(21mg,0.05mmol)和1-溴-3-甲氧基丙烷(13mg,0.075mmol)制备标题化合物146(13mg,0.023mmol)，为白色固体，收率46％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.69(d,j＝2.4hz,1h),7.98(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.79(s,1h),6.94-6.90(m,2h),6.84(dmj＝8.4hz,1h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),5.19(s,2h),3.86(s,3h),3.85(s,3h),3.56(t,j＝8.0hz,2h),1.90-1.84(m,2h),1.34-1.24(m,6h),0.86(t,j＝6.8hz,3h).质谱(m/z):554.27[m+h]+
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-(戊基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(147)
根据140的步骤，由140-01(22mg,0.052mmol)和1-溴戊烷(12mg,0.078mmol)制备标题化合物147(21mg,0.04mmol)，为白色固体，收率77％。质谱(m/z):526.20[m+h]+.
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-((2-(2-甲氧基乙氧基)乙基)磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(145)
根据140的步骤，由140-01(18mg,0.042mmol)和1-溴-2-(2-甲氧基乙氧基)乙烷(12mg,0.063mmol)制备标题化合物145(17mg,0.03mmol)，为浅黄色油状物，收率74％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.66(d,j＝2.8hz,1h),7.99(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.79(s,1h),6.95-6.92(m,2h),6.86(d,j＝8.0hz,1h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),5.19(s,2h),3.97(t,j＝6.0hz,2h),3.87-3.83(m,8h),3.45-3.43(m,2h),3.23-3.20(m,2h),3.14(s,3h).质谱(m/z):558.25[m+h]+.
3-((4-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)磺酰基)-n,n-二甲基丙酰胺(149)
根据140的步骤，由140-01(20mg,0.047mmol)和3-溴-n,n-二甲基丙酰胺(13mg,0.071mmol)制备标题化合物149(6mg,0.011mmol)，为白色固体，收率23％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.75(d,j＝2.4hz,1h),8.01(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.82(s,1h),6.98-6.94(m,2h),6.86(d,j＝8.0hz,1h),6.80(d,j＝9.6hz,1h),5.22(s,2h),3.96(t,j＝7.2hz,2h),3.87(s,3h),3.86(s,3h),3.04-3.00(m,5h),2.93(s,3h).质谱(m/z):555.24[m+h]+.
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-((3-氧代-3-(吡咯烷-1-基)丙基)磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(150)
根据140的步骤，由140-01(25mg,0.059mmol)和3-溴-1-(吡咯烷-1-基)丙-1-酮(24mg,0.12mmol)制备标题化合物(17mg,0.029mmol)，为无色糖浆，收率49％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.77(d,j＝2.8hz,1h),7.99(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.83(s,1h),6.98(d,j＝2.0hz,1h),6.96(dd,j＝2.0,8.4hz,1h),6.84(d,j＝8.0hz,1h),6.72(d,j＝9.6hz,1h),5.20(s,2h),3.96(t,j＝7.6hz,2h),3.86(s,3h),3.84(s,3h),3.40(q,j＝6.7hz,4h),2.92(t,j＝7.6hz,2h),1.99-1.92(m,2h),1.87-1.80(m,2h).质谱(m/z):581.25[m+h]+.
4-((4-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)磺酰基)-n,n-二甲基丁酰胺(151)
根据140的步骤，由140-01(15mg,0.035mmol)和4-溴-n,n-二甲基丁酰胺(21mg,0.11mmol)制备标题化合物(3mg,0.0053mmol)，为白色固体，收率15％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.96(d,j＝2.4hz,1h),7.99(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.62(s,1h),7.02(d,j＝2.0hz,1h),6.99(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),6.85(d,j＝8.0hz,1h),6.78(d,j＝9.6hz,1h),5.28(s,2h),3.87(s,3h),3.86(s,3h),3.75(t,j＝7.2hz,2h),3.03(s,3h),2.93(s,3h),2.62(t,j＝6.8hz,2h),2.30-2.24(m,2h).质谱(m/z):569.24[m+h]+.
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-((4-氧代-4-(吡咯烷-1-基)丁基)磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(152)
根据140的步骤，由140-01(23mg,0.054mmol)和4-溴-1-(吡咯烷-1-基)丁-1-酮(36mg,0.16mmol)制备标题化合物(9mg,0.015mmol)，为无色油状物，收率28％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.07(d,j＝2.8hz,1h),7.96(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.82(s,1h),7.04(d,j＝2.0hz,1h),7.01(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),6.84(d,j＝8.0hz,1h),6.72(d,j＝9.6hz,1h),5.29(s,2h),3.86(s,3h),3.85(s,3h),3.81-3.77(m,2h),3.40(t,j＝6.8hz,4h),2.54(t,j＝6.4hz,2h),2.29-2.22(m,2h),1.96(q,j＝6.4hz,2h),1.87-1.82(m,2h).质谱(m/z):595.24[m+h]+.
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-((3-氧代-3-(哌啶-1-基)丙基)磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(153)和1-(2-氯-4,5-二甲氧基苄基)-5-(2-((3-氧代-3-(哌啶-1-基)丙基)磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(154)
根据140的步骤，由140-01(28mg,0.066mmol)和3-溴-1-(哌啶-1-基)丙-1-酮(44mg,0.20mmol)制备标题化合物153(8mg，产率20％)和154(3mg，产率7％)，为两种白色固体。153:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.75(d,j＝2.4hz,1h),8.02(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.82(s,1h),6.98(m,1h),6.97-6.95(m,1h),6.86(d,j＝8.0hz,1h),6.82(d,j＝9.6hz,1h),5.23(s,2h),3.97(t,j＝7.2hz,2h),3.88(s,3h),3.87(s,3h),3.51(t,j＝5.6hz,2h),3.44-3.41(m,2h),3.03(t,j＝7.6hz,2h),1.66-1.53(m,6h).质谱(m/z):595.28[m+h]+；154:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.87(d,j＝2.4hz,1h),8.07(dd,j＝2.4,9.2hz,1h),7.82(s,1h),7.11(s,1h),6.91(s,1h),6.80(d,j＝9.6hz,1h),5.33(s,2h),3.95(t,j＝7.2hz,2h),3.87(s,3h),3.86(s,3h),3.52(t,j＝5.6hz,2h),3.42(t,j＝5.2hz,2h),3.03(t,j＝7.6hz,2h),1.68-1.63(m,2h),1.62-1.59(m,2h),1.56-1.51(m,2h).质谱(m/z):629.24[m+h]+.
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-((4-氧代-4-(哌啶-1-基)丁基)磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(155)
根据140的步骤，由140-01(25mg,0.059mmol)和4-溴-1-(哌啶-1-基)丁-1-酮(41mg,0.18mmol)制备标题化合物(27mg,0.044mmol)，为白色固体，收率75％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.99(d,j＝2.8hz,1h),7.98(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.83(s,1h),7.01(d,j＝2.0hz,1h),6.97(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),6.83(d,j＝8.4hz,1h),6.72(d,j＝9.6hz,1h),5.25(s,2h),3.85(s,3h),3.84(s,3h),3.77-3.73(m,2h),3.48(m,2h),3.37(m,2h),2.58(t,j＝6.8hz,2h),2.28-2.21(m,2h),1.65-1.59(m,2h),1.54(m,2h),1.47(m,2h).质谱(m/z):609.27[m+h]+.
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-((4-吗啉代-4-氧代丁基)磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(156)和1-(2-氯-4,5-二甲氧基苄基)-5-(2-((4-吗啉代-4-氧代丁基)磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(157)
根据140的步骤，由140-01(21mg,0.05mmol)和4-溴-1-吗啉代丁-1-酮(35mg,0.15mmol)制备标题化合物156(3mg,产率10％)和157(11mg,产率34％)，为两种白色固体。156:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.87(d,j＝2.4hz,1h),8.12(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.83(s,1h),6.99(d,j＝2.0hz,1h),6.97(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),6.86(d,j＝8.0hz,1h),6.81(d,j＝9.6hz,1h),5.25(s,2h),3.87(s,3h),3.86(s,3h),3.76-3.72(m,2h),3.70-3.68(m,2h),3.66-3.63(m,2h),3.60-3.57(m,2h),3.49-3.47(m,2h),2.64(t,j＝6.8hz,2h),2.29(q,j＝6.8hz,2h).质谱(m/z):611.26[m+h]+；157:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.93(d,j＝2.4hz,1h),8.05(dd,j＝2.8,10.0hz,1h),7.82(s,1h),7.09(s,1h),6.90(s,1h),6.77(d,j＝10.0hz,1h),5.33(s,2h),3.87(s,3h),3.86(s,3h),3.73(t,j＝7.2hz,2h),3.69-3.65(m,4h),3.60-3.58(m,2h),3.49-3.46(m,2h),3.63(t,j＝6.8hz,2h),2.29(q,j＝6.8hz,2h).质谱(m/z):645.18[m+h]+.
4-((4-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)磺酰基)丁酰胺(158)和4-((4-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)亚磺酰基)丁酰胺(159)
根据140的步骤，由140-01(20mg,0.047mmol)和4-溴丁酰胺(24mg,0.14mmol)制备标题化合物158(9mg,产率35％)和159(7mg,产率28％)，为两种白色固体。
158:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.79(d,j＝2.4hz,1h),7.97(dd,j＝2.8,10.0hz,1h),7.82(s,1h),6.98(m,1h),6.96-6.94(m,1h),6.86(d,j＝8.4hz,1h),6.74(d,j＝10.0hz,1h),5.63(br,1h),5.54(br,1h),5.23(s,2h),3.87(s,3h),3.86(s,3h),3.70(t,j＝7.2hz,2h),2.50(t,j＝6.4hz,2h),2.29-2.21(m,2h)；质谱(m/z):541.27[m+h]+.
159:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.69(s,1h),7.70(s,1h),6.97(m,1h),6.95(m,1h),6.86(d,j＝8.4hz,1h),6.74(d,j＝9.6hz,1h),5.73(br,1h),5.55(br,1h),5.20(s,2h),5.87(s,3h),5.86(s,3h),3.33-3.20(m,2h),2.46(t,j＝6.8hz,2h),2.11-2.07(m,2h)；质谱(m/z):525.24[m+h]+.
5-(6-(二氟甲基)-2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(160)
步骤1.根据43-01的步骤，由4,4-二氟-3-氧代丁酸乙酯(495mg,3mmol)和甲硫基氨基亚氨酸酯(1.12g,6mmol)制备标题化合物160-01(460mg)，收率80％，为白色固体。1hnmr(400hz,acetone-d6)δ6.83(s,0.66h),6.69(s,1h),6.56(s,0.58h),6.34(s,1h),2.52(s,3h)；质谱(m/z):193.5[m+h]+.
步骤2.根据49-01的步骤，由160-01(500mg,2.6mmol)和三氯氧磷(4ml)制备标题化合物160-02(492mg)，收率90％，为白色固体。1hnmr(400hz,cdcl3)δ7.25(s,1h),6.59(s,0.24h),6.44(s,0.46h),6.29(s,0.24h),2.58(s,3h)；质谱(m/z):211.2[m+h]+.
步骤3.根据99-01的步骤，由160-02(27mg,0.13mmol)制备标题化合物160-03(20mg)，收率66％，为白色固体。质谱(m/z):420.4[m+h]+.
步骤4.根据49的步骤，由160-03(20mg,0.048mmol)和过硫酸氢钾(146mg,0.24mmol)制备标题化合物160(10.7mg)，收率50％，为白色固体。1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.61(d,j＝2.4hz,1h),7.99(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.81(s,1h),6.94(d,j＝2.0hz,1h),6.92(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),6.85(d,j＝8.0hz,1h),6.74(d,j＝9.6hz,1h),6.62(s,0.6h),6.48(s,0.4h),5.29(s,2h),3.86(s,6h),3.35(s,3h)；质谱(m/z):452.5[m+h]+.
5-(6-(氟甲基)-2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(161)
步骤1.根据43-01概述的步骤，由4-氟-3-氧代丁酸乙酯(677mg,4.6mmol)和甲硫基氨基亚氨酸酯(1.7g,9.3mmol)制备标题化合物161-01(693mg)，收率86％，为白色固体。质谱(m/z):175.1[m+h]+.
步骤2.根据49-01的步骤，由161-01(180mg,1.03mmol)和三氯氧磷(2ml)制备标题化合物161-02(150mg)，收率76％，为白色固体。1hnmr(400hz,cdcl3)δ7.16(s,1h),5.42(s,1h),5.30(s,1h),2.56(s,3h).
步骤3.根据99-01的步骤，由161-02(80mg,0.22mmol)制备标题化合物161-03(12mg)，收率14％，为白色固体。1hnmr:(400mz,cdcl3):δ8.37(d,j＝2.4hz,1h),7.96(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.40(s,1h),6.90(d,j＝2.0hz,1h),6.88(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),6.84(d,j＝8.0hz,1h),6.70(d,j＝9.6hz,1h),5.42(s,1h),5.31(s,1h),5.16(s,2h),3.86(s,6h),2.5(s,3h)；质谱(m/z):402.5[m+h]+.
步骤4.根据49的步骤，由161-03(12mg,0.031mmol)和过硫酸氢钾(48mg,0.078mmol)制备标题化合物161(4.7mg)，收率36％，为白色固体。1hnmr:(400mz,cdcl3):δ8.54(d,j＝2.4hz,1h),7.97(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.71(s,1h),6.93(d,j＝2.0hz,1h),6.90(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),6.84(d,j＝8.0hz,1h),6.71(d,j＝9.6hz,1h),5.59(s,1h),5.47(s,1h),5.17(s,2h),3.86(s,6h),3.30(s,3h)；质谱(m/z):434.5[m+h]+.
5-(5-氯-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(162)
步骤1.制备5-氯-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-醇(162-01)：
向2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-醇(210mg，1mmol)的acoh(3ml)溶液加入ac2o(0.2ml)，fecl3(40mg)和so2cl2(150mg)。然后在110℃回流6小时。将反应混合物冷却至室温，真空除去溶剂。将残余物用dcm和冰水萃取三次。合并有机层，用盐水洗涤，用na2so4干燥并浓缩，得到110mg5-氯-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-醇(162-01)，为淡黄色油状物，收率45％。质谱(m/z):245.5[m+h]+
步骤2.根据49-01的步骤，由162-01(42mg,0.172mmol)和三氯氧磷(2ml)制备标题化合物162-02(12mg)，收率27％，为白色固体。
步骤3.根据99-01的步骤，由162-02(20mg,0.076mmol)制备标题化合物162-03(15mg)，收率42％，为白色固体。
步骤4.根据67的步骤，由162-03(15mg,0.032mmol)和过硫酸氢钾(100mg,0.016mmol)制备标题化合物162(6.4mg)，收率40％，为白色固体。1hnmr:(400mz,cdcl3):δ8.41(d,j＝2.4hz,1h),8.10(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),6.93(d,j＝2.0hz,1h),6.90(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),6.86(d,j＝8.0hz,1h),6.70(d,j＝9.6hz,1h),5.16(s,2h),3.87(s,6h),3.38(s,3h).质谱(m/z):504.3[m+h]+.
5-(6-乙酰基-2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(163)
步骤1.根据43-01的步骤，制备标题化合物163-01。质谱(m/z):187.1[m+h]+.
步骤2.根据49-01的步骤，由163-01(19.6mg,0.1mmol)制备标题化合物163-02。
步骤3.在0℃下，向6-氯-2-(甲硫基)嘧啶-4-碳酰氯(163-02)和n,o-二甲基羟胺盐酸盐的ch2cl2的溶液中缓慢加入et3n。将反应混合物在0℃下搅拌4小时。将反应混合物用nh4cl淬灭。将残余物用ch2cl2/h2o萃取3次。有机层用盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝5/1)进一步纯化，得到50mg的6-氯-n-(甲氧基甲基)-n-甲基-2-(甲硫基)嘧啶-4-甲酰胺(163-03)，为浅黄色油状物(三步反应收率15％)。1hnmr:(400mz,cdcl3):δ7.14(s,1h),3.74(s,3h),3.34(s,3h),2.59(s,3h).质谱(m/z):248.0[m+h]+.
步骤4.在ar和0℃下，将甲基溴化镁缓慢加入到163-03(42mg)的无水thf溶液中，将反应混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物用nh4cl淬灭。将残余物用etoac/h2o萃取3次。将有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝5/1)进一步纯化，得到24mg1-(6-氯-2-(甲硫基)嘧啶-4-基)乙酮(163-04)，为浅黄色油状物，收率70％。1hnmr:(400mz,cdcl3):δ7.52(s,1h),2.68(s,3h),2.63(s,3h),2.59(s,3h).质谱(m/z):203.0[m+h]+.
步骤5.根据99-01的步骤，由163-04(19.6mg,0.1mmol)制备标题化合物163-05(10mg)，收率40％，为白色固体。质谱(m/z):412.2[m+h]+.
步骤6.根据67概述的步骤，由200-05(10mg,0.024mmol)和过硫酸氢钾(45mg,0.073mmol)制备标题化合物163，收率45％，为白色固体。1hnmr:(400mz,cdcl3):δ8.56(d,j＝2.8hz,1h),8.11(s,1h),8.04(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),6.95(d,j＝2.0hz,1h),6.92(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),6.85(d,j＝8.0hz,1h),6.74(d,j＝9.6hz,1h),5.30(s,2h),3.87(s,3h),3.86(s,3h),3.39(s,3h),2.76(s,3h).质谱(m/z):444.2[m+h]+.
5-(6-(1,1-二氟乙基)-2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(164)
步骤1.将1-(6-氯-2-(甲硫基)嘧啶-4-基)乙酮(163-04)的ch2cl2溶液缓慢加入到冷却的(0℃)dast的ch2cl2溶液中。将反应混合物缓慢升至室温并在室温下搅拌23小时。将反应混合物用nahco3(饱和溶液)淬灭。将残余物用ch2cl2/h2o萃取3次。将有机层用盐水洗涤，用na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝5/1)进一步纯化，得到50mg的4-氯-6-(1,1-二氟乙基)-2-(甲硫基)嘧啶(163-04)，为浅黄色油状物，收率43％。1hnmr:(400mz,cdcl3):δ7.28(s,1h),2.58(s,3h),1.96(m,3h),质谱(m/z):225.1[m+h]+.
步骤2.根据99-01的步骤，由164-01(6mg,0.027mmol)制备标题化合物164-02(5mg)，收率42％，为白色固体。质谱(m/z):434.2[m+h]+.
步骤3.根据67的步骤，由164-02(5.4mg,0.013mmol)和过硫酸氢钾(23mg,0.037mmol)制备标题化合物164，收率60％，为白色固体。hnmr:(400mz,cdcl3):δ8.58(s,1h),7,97(d,9.6hz,1h),7.73(s,1h),6.93(d,j＝2.0hz,1h),6.92(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),6.83(d,j＝8.0hz,1h),6.72(d,j＝9.6hz,1h),5.18(s,2h),,3.87(s,3h),3.86(s,3h),3.35(s,3h),2.18(m,3h).质谱(m/z):466.2[m+h]+.
5-(6-(二氟甲基)-2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)-3-氟吡啶-2-(1h)-酮(165)
步骤1.在ar下，5-溴-3-氟-2-甲氧基吡啶(206mg,1.0mmol)，双(频哪醇)二硼(508mg,2.0mmol)，pd(pph3)cl2(70.1mg,0.05mmol)，乙酸钾(294mg,3.0mmol)和1,4-二氧六环(4ml)的混合溶液在80℃下加热4小时。然后将反应混合物冷却并倒在冰上。将残余物用etoac萃取3次。有机层用盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝9/1)进一步纯化，得到228mg165-01，为浅黄色油状物，收率90％。质谱(m/z):254.2[m+h]+.
步骤2.根据99-01的步骤，由160-02(125mg,0.6mmol)制备标题化合物165-02(130mg)收率72％，为白色固体。质谱(m/z):302.1[m+h]+.
步骤3.向165-02的etoh溶液中缓慢加入hbr。将混合溶液在95℃加热3.5小时。将反应混合物冷却至室温，真空除去溶剂。将残余物用etoac萃取3次。合并有机层，并用盐水洗涤，na2so4干燥，再通过(pe/ea＝1/9)进一步重结晶纯化，得到99mg3-氟-2甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶(165-03)，为浅黄色固体，收率80％。1hnmr:(400mz,dmso-d6):δ12.83(s,1h),8.42(s,3h),8.22(dd,j＝2.0,12.0hz,1h),7.95(s,1h),7.02(s,0.2h),6.89(s,0.4h),6.75(s,0.3h),2.60(s,3h).质谱(m/z):288.1[m+h]+.
步骤4.在0℃下，向5-(6-(二氟甲基)-2-(甲硫基)嘧啶-4-基)-3-氟吡啶-2-(1h)-酮(50mg,0.17mmol)，4-(溴甲基)-1,2-二甲氧基苯(60mg,0.26mmol)的dmf(3ml)溶液中缓慢加入nah(10mg,0.26mmol)，然后缓慢升至室温6小时。然后将反应混合物冷却并倒在冰上。将残余物用etoac萃取3次。有机层用盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝2/1)进一步纯化，得到60mg5-(6-(二氟甲基)-2-(甲硫基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)-3-氟吡啶-2-(1h)-酮(165-04)，为浅黄色油状物，收率78％。1hnmr:(400mz,cdcl3):δ8.19(s,1h),7,76(dd,2.0,10.0hz,1h),6.92-6.81(m,4h),6.48(s,0.2h),6.40(s,0.4h),6.25(s,0.3h),5.18(s,2h),3.83(s,3h),3.81(s,3h),2.51(s,3h).质谱(m/z):438.2[m+h]+.
步骤4.根据67的步骤，由165-04(59mg,0.14mmol)和过硫酸氢钾(250mg,0.41mmol)制备标题化合物165，收率66％，为白色固体。hnmr:(400mz,cdcl3):δ8.44(s,1h),7,79-7.78(m,2h),6.95-6.93(m,2h),6.85(d,j＝8.0hz,1h),6.78(s,0.2h),6.62(s,0.4h),6.50(s,0.3h),5.23(s,2h),3.87(s,3h),3.86(s,3h),3.36(s,3h).质谱(m/z):470.1[m+h]+.
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(6-甲基-2-((2,2,2-三氟乙基)磺酰基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(166)
步骤1.根据49-01的步骤，由6-甲基嘧啶-2,4-二醇(500mg,3.97mmol)和三氯氧磷(4ml)制备标题化合物166-01(540mg)，收率84％，为白色固体。质谱(m/z):164.7[m+h]+.
步骤2.根据99-01的步骤，由166-01(163mg,1.0mmol)制备标题化合物166-02(188mg)，收率80％，为白色固体。1hnmr:(400mz,cdcl3):δ9.27(d,j＝2.4hz,1h),8.66(dd,j＝2.4,9.2hz,1h),7.09(s,1h),6.88(d,j＝9.2hz,1h),4.03(s,6h),2.56(s,3h).质谱(m/z):236.1[m+h]+.
步骤3.在0℃下向166-02(146mg,0.61mmol)和cf3ch2sh(1.0g)的dmf(3ml)溶液中缓慢加入nah(49mg,1.28mmol)。之后缓慢升至室温18小时。然后将反应混合物冷却并倒在冰上。将残余物用etoac萃取3次。有机层用盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱法(pe/ea＝5/1)进一步纯化，得到38mg166-03，收率20％，为浅黄色油状物。质谱(m/z):316.2[m+h]+.
步骤4.根据165-03的步骤，由166-03(3mg,0.013mmol)制备标题化合物166-04，为白色固体，质谱(m/z):303.1[m+h]+.
步骤5.根据165-04的步骤，由166-04(0.013mmol)制备标题化合物166-05。质谱(m/z):452.2[m+h]+.
步骤6.根据67的步骤，由166-05(0.013mmol)和过硫酸氢钾(20mg,0.032mmol)制备标题化合物166，收率32％(三步)。hnmr:(400mz,cdcl3):δ8.60(d,9.6hz,1h),8.33(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),7.63(s,1h),7.00-6.86(m,2h),6.85(d,j＝8.4hz,1h),6.71(d,j＝9.2hz,1h),5.19(s,2h),3.83(s,3h),3.81(s,3h),2.70(s,1h),2.22-2.16(m,2h).质谱(m/z):484.2[m+h]+.
5-(6-(二氟甲基)-2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(3-氟-4-甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(167)和5-(6-(二氟甲基)-2-(甲基亚磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(3-氟-4-甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(168)
根据100的步骤，由5-(6-(二氟甲基)-2-(甲硫基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(30mg,0.11mmol)和4-(溴甲基)-2-氟-1-甲氧基苯(28mg,0.13mmol)制备标题化合物167(12mg,产率25％)和168(6mg,产率13％)，为两种无色油状物。167:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.60(d,j＝2.8hz,1h),8.01(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.84(s,1h),7.12(t,j＝2.0hz,1h),7.10(m,1h),6.95(t,j＝8.4hz,1h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),6.62(t,j＝54.4hz,1h),5.17(s,2h),3.87(s,3h),3.38(s,3h).质谱(m/z):440.18[m+h]+.168:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.60(d,j＝2.4hz,1h),8.03(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.73(s,1h),7.12(m,1h),7.10(m,1h),6.94(t,j＝8.0hz,1h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),6.64(t,j＝54.4hz,1h)5.18(d,j＝3.2hz,2h),3.87(s,3h),2.99(s,3h).质谱(m/z):424.18[m+h]+.
5-(6-(二氟甲基)-2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(4-甲氧基-3-(三氟甲基)苄基)吡啶-2(1h)-酮(169)和5-(6-(二氟甲基)-2-(甲基亚磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(4-甲氧基-3-(三氟甲基)苄基)吡啶-2(1h)-酮(170)
根据100的步骤，由5-(6-(二氟甲基)-2-(甲硫基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(30mg,0.11mmol)和4-(溴甲基)-1-甲氧基-2-(三氟甲基)苯(46mg,0.17mmol)制备标题化合物169(13mg,收率25％)和170(10mg,收率19％)，为两种无色油状物。169:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.63(d,j＝2.4hz,1h),8.02(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.86(s,1h),7.58(d,j＝2.0hz,1h),7.56(dd,j＝2.4,8.4hz,1h),7.01(d,j＝8.8hz,1h),6.74(d,j＝9.6hz,1h),6.62(t,j＝54.4hz,1h),5.21(s,2h),3.89(s,3h),3.37(s,3h).质谱(m/z):490.21[m+h]+.170:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.67(d,j＝2.4hz,1h),8.03(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.75(s,1h),7.58-7.54(m,2h),7.00(d,j＝8.4hz,1h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),6.63(t,j＝54.4hz,1h),5.22(d,j＝7.6hz,2h),3.89(s,3h),2.99(s,3h).质谱(m/z):474.18[m+h]+.
5-(6-(二氟甲基)-2-(甲硫基)嘧啶-4-基)-1-(3-氟-4,5-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(171)
根据100的步骤，由5-(6-(二氟甲基)-2-(甲硫基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(30mg,0.11mmol)和5-(氯甲基)-1-氟-2,3-二甲氧基苯(30mg,0.15mmol)制备标题化合物171(12mg,产率25％)，为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.40(d,j＝2.4hz,1h),8.00(dd,2.8,9.6hz,1h),7.34(s,1h),6.73(d,j＝3.6hz,1h),6.70-6.67(m,1h),6.46(t,j＝54.4hz,1h),5.14(s,2h),3.90(s,3h),3.86(s,3h),2.57(s,3h).质谱(m/z):438.26[m+h]+.
5-(6-(二氟甲基)-2-((3-甲氧基苄基)磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(172)和5-(6-(二氟甲基)-2-((3-甲氧基苄基)亚磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(173)
步骤1.根据140-01的步骤，由化合物160(100mg,0.22mmol)制备标题化合物172-1，为黄色油状物。质谱(m/z):406.21[m+h]+.
步骤2.根据140的步骤，由172-1(24mg,0.059mmol)和1-(溴甲基)-3-甲氧基苯(18mg,0.089mmol)制备标题化合物172(13mg)和173(11mg,收率25％)，为两种白色固体。172:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.59(d,j＝2.4hz,1h),7.96(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.76(s,1h),7.19(t,j＝8.4hz,1h),6.94(t,j＝2.0hz,1h),6.91-6.88(m,2h),6.86-6.81(m,2h),6.74(d,j＝9.6hz,1h),6.63(t,j＝54.4hz,1h),5.18(s,2h),4.74(s,2h),3.86(s,3h),3.82(s,3h),3.74(s,3h).质谱(m/z):558.28[m+h]+.173:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.50(d,j＝2.4hz,1h),7.97(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.66(s,1h),7.16(t,j＝8.0hz,1h),6.96(m,1h),6.93(dd,j＝1.6,8.4hz,1h),6.86(d,j＝8.0hz,1h),6.81(dd,j＝2.4,8.4hz,1h),6.71(m,2h),6.60(t,j＝54.4hz,1h),5.18(s,2h),4.37(d,j＝12.8hz,1h),4.26(d,j＝12.8hz,1h),3.87(s,3h),3.85(s,3h),3.73(s,3h).质谱(m/z):542.26[m+h]+.
5-(6-(二氟甲基)-2-((3-甲氧基苯基)磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(174)和5-(6-(二氟甲基)-2-((3-甲氧基苯基)亚磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(175)
步骤1.在0℃下，向搅拌着的3-甲氧基苯硫醇(14mg,0.099mmol)的dmf(5ml)溶液中加入nah(5mg,0.13mmol)，搅拌30分钟，然后向上述混合物中加入化合物160(30mg,0.066mmol)，继续搅拌2小时，加入饱和nh4cl淬灭反应，并用ea萃取3次，浓缩有机层，用ea/pe(1/2)快速柱色谱纯化，得到174-130mg，为无色油状物，收率89％。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.17(d,j＝2.8hz,1h),7.79(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.36(t,j＝8.0hz,1h),7.31(s,1h),7.23-7.21(m,2h),7.03-7.00(m,1h),6.93(d,j＝2.0hz,1h),6.82(d,j＝8.0hz,1h),6.78(dd,j＝2.0,8.4hz,1h),6.63(d,j＝9.6hz,1h),6.40(t,j＝54.4hz,1h),5.02(s,2h),3.86(s,3h),3.84(s,3h),3.80(s,3h).质谱(m/z):512.22[m+h]+.
步骤2.根据140的步骤，制备标题化合物174(18mg,收率56％)和175(13mg,收率42％)，为两种白色固体。174:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.48(d,j＝2.8hz,1h),7.92(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.71(s,1h),7.68-7.65(m,1h),7.60(dd,j＝1.6,2.4hz,1h),7.54-7.52(m,1h),7.47(t,j＝8.0hz,1h),7.22-7.19(m,1h),6.95(d,j＝2.0hz,1h),6.91(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),6.87(d,j＝8.0hz,1h),6.58(t,j＝54.4hz,1h),5.16(s,2h),3.88(s,6h),3.86(s,3h).质谱(m/z):544.24[m+h]+.175:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.52(d,j＝2.4hz,1h),7.97(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.61(s,1h),7.42(m,1h),7.35-7.32(m,2h),6.99-6.93(m,3h),6.88(d,j＝8.8hz,1h),6.73(d,j＝9.6hz,1h),6.61(t,j＝54.4hz,1h),5.20(d,j＝6.8hz,2h),3.88(s,6h),3.81(s,3h).质谱(m/z):528.24[m+h]+.
4–((4-(二氟甲基)-6-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)嘧啶-2-基)磺酰基)-n-甲基丁酰胺(176)和4–((4-(二氟甲基)-6-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)嘧啶-2-基)亚磺酰基)-n-甲基丁酰胺(177)
根据140的步骤，由172-1(33mg,0.081mmol)和4-溴-n-甲基丁酰胺(29mg,0.16mmol)制备标题化合物176(6mg,收率14％)和177(3mg,收率7％)，为两种白色固体。176:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.85(d,j＝2.4hz,1h),7.98(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.81(s,1h),7.02(d,j＝2.0hz,1h),7.00(dd,j＝2.0,8.4hz,1h),6.87(d,j＝8.4hz,1h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),6.65(t,j＝54.4hz,1h),5.59(br,1h),5.28(s,2h),3.88(s,3h),3.87(s,3h),3.68(t,j＝7.6hz,2h),2.80(d,j＝4.8hz,3h),2.44(t,j＝6.8hz,2h),2.29-2.22(m,2h).质谱(m/z):537.38[m+h]+.177:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.64(d,j＝2.4hz,1h),8.01(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.70(s,1h),6.99(m,1h),6.96(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),6.86(d,j＝8.0hz,1h),6.76(d,j＝9.6hz,1h),6.64(t,j＝54.4hz,1h),5.78(br,1h),5.22(s,2h),3.87(s,3h),3.86(s,3h),3.29-3.21(m,2h),2.79(d,j＝4.8hz,3h),2.41(t,j＝6.8hz,2h),2.12-2.05(m,2h).质谱(m/z):521.35[m+h]+.
3–((4-(二氟甲基)-6-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)嘧啶-2-基)磺酰基)-n-甲基丙-1-磺酰胺(178)和3–((4-(二氟甲基)-6-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)嘧啶-2-基)亚磺酰基)-n-甲基丙-1-磺酰胺(179)
根据140的步骤，由172-1(30mg,0.075mmol)和3-氯-n-甲基丙烷-1-磺酰胺(27mg,0.16mmol)制备标题化合物178(7mg,收率16％)和179(4mg,收率10％)，为两种白色固体。178:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.69(d,j＝2.4hz,1h),7.98(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.83(s,1h),6.98-6.96(m,2h),6.87(d,j＝8.0hz,1h),6.76(d,j＝10.0hz,1h),6.65(t,j＝55.4hz,1h),5.22(s,2h),3.88(s,3h),3.87(s,3h),3.82(t,j＝7.2hz,2h),3.26(t,j＝6.8hz,2h),2.83(d,j＝5.2hz,3h),2.47-2.40(m,2h).质谱(m/z):573.40[m+h]+.179:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.63(d,j＝2.4hz,1h),8.00(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.72(s,1h),6.98-6.95(m,2h),6.87(d,j＝8.0hz,1h),6.77(d,j＝10.0hz,1h),6.65(t,j＝55.4hz,1h),5.21(s,2h),4.39(m,1h),3.88(s,3h),3.87(s,3h),3.48-3.43(m,1h),3.40-3.33(m,1h),3.20(t,j＝7.2hz,2h),2.80(d,j＝5.2hz,3h),2.50-2.43(m,1h),2.25-2.16(m,1h).质谱(m/z):557.40[m+h]+.
5-(2-((3-氨基苯基)磺酰基)-6-(二氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(180)和5-(2-((3-氨基苯基)亚磺酰基)-6-(二氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(181)
步骤1.根据174-1的步骤，由160(100mg,0.22mmol)和3-氨基苯硫酚(41mg,0.33mmol)制备标题化合物180-1(92mg,收率56％)，为黄色糖浆。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.20(d,j＝2.8hz,1h),7.80(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.31(m,1h),7.24(d,j＝8.0hz,1h),7.04-6.99(m,2h),6.93(s,1h),6.68-6.79(m,2h),6.63(d,j＝9.6hz,1h),6.41(t,j＝55.4hz,1h),5.05(s,2h),3.86(s,3h),3.85(s,3h).质谱(m/z):497.49[m+h]+.
步骤2.用ar封闭(blank)胺180-1(90mg,0.17mmol)的无水thf(5ml)溶液，然后加入(boc)2o(54mg,0.25mmol)的无水thf(2ml)溶液。加入完毕后将混合物在60℃下搅拌过夜，浓缩反应混合物，并通过快速色谱纯化(ea/pe＝2/1)得到180-256mg，收率55％.1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.17(d,j＝2.4hz,1h),7.80(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.37-7.28(m,3h),6.91(d,j＝1.6hz,1h),6.81-6.74(m,2h),6.66-6.62(m,2h),6.41(t,j＝55.4hz,1h),5.04(s,2h),3.86(s,3h),3.84(s,3h),1.50(s,9h).质谱(m/z):597.46[m+h]+.
步骤3.根据化合物67概述的步骤制备180-3和181-1，均为无色油状物。180-3:质谱(m/z):629.47[m+h]+,181-1:质谱(m/z):613.45[m+h]+.
步骤4.将化合物183-3(31mg,0.049mmol)溶解在ch2cl2(5ml)中，然后加入tfa(1ml)，整个体系搅拌30分钟，浓缩并通过制备型hplc纯化，得到9.0mg白色固体180，收率35％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.52(d,j＝2.4hz,1h),7.95(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.73(s,1h),7.41(d,j＝7.8hz,1h),7.33-7.29(m,2h),6.95-6.88(m,3h),6.78(d,j＝9.6hz,1h),6.59(t,j＝55.4hz,1h),5.18(s,2h),3.88(s,6h).质谱(m/z):529.45[m+h]+.
步骤5.根据180的步骤，由181-1(17mg,0.032mmol)制备标题化合物181(4mg,0.0078mmol,收率24％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.55(s,1h),7.98(d,j＝9.6hz,1h),7.62(s,1h),7.33-7.23(m,4h),6.97-6.87(m,3h),6.78(d,j＝9.2hz,1h),6.61(t,j＝54.4hz,1h),5.21(d,j＝8.0hz,2h),3.87(s,6h).质谱(m/z):513.41[m+h]+.
n-(3-((4-(二氟甲基)-6-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)嘧啶-2-基)磺酰基)苯基)乙酰胺(182)
步骤1.向搅拌着的180-1(20mg,0.037mmol)的ch2cl2(5ml)溶液中依次加入ac2o(19mg,0.19mmol)和吡啶(29mg,0.37mmol)，搅拌5小时，浓缩并通过快速色谱法(ea/pe＝2/1)纯化，得到17mg白色固体，收率85％。质谱(m/z):539.47[m+h]+.
步骤2.根据67的步骤制备标题化合物182-1(6mg,收率33％)，为无色油状物。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.61(s,1h),8.15(m,1h),8.02-7.90(m,2h),7.83-7.81(m,1h),7.75-7.68(m,2h),7.53(d,j＝8.4hz,1h),7.01-6.93(m,2h),6.79-6.74(m,1h),6.47(t,j＝54.4hz,1h),5.25(s,2h),3.92(s,3h),3.87(s,3h),2.21(s,3h).质谱(m/z):571.41[m+h]+.
4-((4-(二氟甲基)-6-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)嘧啶-2-基)磺酰基)-n-己基丁酰胺(183)和4-((4-(二氟甲基)-6-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)嘧啶-2-基)亚磺酰基)-n-己基丁酰胺(184)
根据140的步骤，由172-1(42mg,0.17mmol)和4-溴-n-己基丁酰胺(45mg,0.11mmol)制备标题化合物183(3mg,收率3％)和184(1mg,收率1％)，为两种白色固体。183:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.88(d,j＝2.4hz,1h),7.98(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.81(s,1h),7.02(d,j＝2.0hz,1h),7.00(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),6.86(d,j＝8.0hz,1h),6.74(d,j＝9.6hz,1h),6.64(t,j＝54.4hz,1h),5.56(t,j＝4.4hz,1h),5.27(s,2h),3.87(s,3h),3.86(s,3h),3.68(t,j＝7.2hz,2h),3.24-3.19(m,2h),3.43(t,j＝6.8hz,2h),2.28-2.21(m,2h),1.50-1.43(m,2h),1.29-1.22(m,6h),0.86(t,j＝6.8hz,3h).质谱(m/z):607.40[m+h]+.184:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.64(d,j＝2.0hz,1h),8.00(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.70(s,1h),6.98(m,1h),6.96-6.94(m,1h),6.86(d,j＝8.4hz,1h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),6.64(t,j＝54.4hz,1h),5.70(br,1h),5.21(s,2h),3.88(s,3h),3.87(s,3h),3.23-3.19(m,2h),2.40(t,j＝6.8hz,2h),2.28-2.19(m,2h),1.48-1.43(m,2h),1.31-1.26(m,6h),0.86(t,j＝6.8hz,3h).质谱(m/z):591.40[m+h]+.
n-(3-((4-(二氟甲基)-6-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)嘧啶-2-基)磺酰基)丙基)乙酰胺(185)
根据140的步骤，由172-1(28mg,0.069mmol)和n-(3-溴丙基)乙酰胺(23mg,0.13mmol)制备标题化合物185(10mg,收率27％)，为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.65(d,j＝2.8hz,1h),8.00(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.81(s,1h),6.98(d,j＝2.0hz,1h),6.96(dd,j＝2.0,8.4hz,1h),6.86(d,j＝8.0hz,1h),6.75(d,j＝10.0hz,1h),6.64(t,j＝54.4hz,1h),5.94(br,1h),5.22(s,2h),3.87(s,3h),3.86(s,3h),3.60(t,j＝7.2hz,2h),3.46(q,j＝6.8hz,2h),2.17-2.10(m,2h),1.97(s,3h).质谱(m/z):537.21[m+h]+.
5,5'–(2,2'-(丙烷-1,3-二基双磺酰基)双(6-(二氟甲基)嘧啶-4,2-二基))双(1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮)(186)
根据140的步骤，由172-1(69mg,0.17mmol)和1,3-二溴丙烷(10mg,0.048mmol)制备标题化合物186(26mg,收率59％)，为白色固体。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.66(d,j＝2.8hz,1h),7.96(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.81(s,1h),6.97(d,j＝2.0hz,1h),6.95(dd,j＝2.0,8.4hz,1h),6.84(d,j＝8.4hz,1h),6.73(d,j＝10.0hz,1h),6.60(t,j＝54.4hz,1h),5.19(s,2h),3.88(t,j＝7.2hz,1h),3.85(s,3h),3.84(s,3h),2.61(qu,j＝7.2hz,1h),1.25(t,j＝6.8hz,1h),质谱(m/z):915.21[m+h]
化合物187-200的合成
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(6-氟-2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(201)
5-(6-(二氟甲基)-2-(甲基亚磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(202)
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(6-(氟甲基)-2-(甲基亚磺酰基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(203)
化合物204-217的合成
化合物218-222的合成
化合物223-268的合成
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-(甲基磺酰基)-6-丙酰基嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(269)
5-(6-(1,1-二氟丙基)-2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(270)
5-(6-苯甲酰基-2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(271)
5-(2-((3-(苄氧基)丙基)磺酰基)-6-(二氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(9272)和5-(6-(二氟甲基)-2-((3-羟丙基)磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(9273)
步骤1:根据140的步骤，由化合物172-1(29mg,0.072mmol)和((3-溴丙氧基)甲基)苯(25mg,0.11mmol)制备标题化合物272，产率为55％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.60(d,j＝2.8hz,1h),7.98(dd,j＝2.8,9.6hz,1h),7.78(s,1h),7.30(m,5h),6.94(d,j＝2.0hz,1h),6.91(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),6.83(d,j＝8.4hz,1h),6.58(t,j＝54.4hz,1h),6.70(d,j＝2.4hz,1h),5.14(s,2h),4.46(s,2h),3.86(s,3h),3.84(s,3h),3.71-3.68(m,2h),3.61(t,j＝5.6hz,2h),2.26-2.16(m,2h).质谱(m/z):586.23,[m+h]+.
步骤2:在n2气氛下，向-78℃搅拌的272(15mg,0.026mmol)的无水ch2cl2的溶液中加入1mbcl3的己烷溶液(,39ul,0.039mmol)，整个系统继续搅拌2小时，温热至室温，加入1mlh2o以淬灭反应，然后浓缩溶剂，并通过制备型tlc(pe/ea2/1)纯化，得到7mg9273，为淡黄色固体(54％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.65(d,j＝2.8hz,1h),8.00(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.81(s,1h),6.96-6.93(m,2h),6.87-6.82(m,1h),6.77(d,j＝9.6hz,1h),6.50(t,j＝54.4hz,1h),5.19(s,2h),4.53(t,j＝6.4hz,1h),3.88-3.80(m,8h),3.72-3.68(m,2h),2.18-2.12(m,2h).质谱(m/z):496.26,[m+h]+.
4-(3-(3,4-二甲氧基苯氧基)哌啶-1-基)-2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶(274)
步骤1:在0℃下向pph3(0.98g,3.75mmol)的5ml无水thf中滴加diad(0.74ml,3.75mmol)。将溶液搅拌10分钟，然后加入含有3-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.5g,2.5mmol)的thf(2ml)，并在0℃下再搅拌10分钟。加入3,4-二甲氧基苯酚(0.39g,2.5mmol)，将溶液升至室温过夜，浓缩溶剂，并通过快速柱色谱法(pe/ea5/1)纯化，得到0.19g无色油状物274-01，产率为23％,质谱(m/z):338.48,[m+h]+.
步骤2：向274-01(0.39g,1.16mmol)的ch2cl2(10ml)溶液中加入tfa(3ml)，将其在室温下搅拌2小时，浓缩溶剂，并溶解于乙酸乙酯，加入nahco3水溶液中和酸。分离有机层，水层用乙酸乙酯萃取三次。合并有机层，干燥，浓缩并通过快速硅胶柱色谱法(ch2cl2/meoh10/1)纯化，得到0.27g黄色油状物274-02，产率100％。质谱(m/z):238.20,[m+h]+。
步骤3：将274-02(38mg,0.16mmol),49-01(30mg,0.13mmol)和碳酸钾(28mg,0.2mmol)的无水dmf(2ml)在微波管中混合在一起，将反应在90℃下微波加热2小时。冷却至室温加入水，有机层用乙酸乙酯萃取三次，合并有机层，干燥，，通过快速柱色谱法(ea/pe＝1/8)进一步纯化，得到54mg无色油状物274-03，产率96％。质谱(m/z):430.15,[m+h]+.
步骤4:根据71的步骤，由化合物274-03(27mg,0.063mmol)和过硫酸氢钾(0.19g,0.31mmol)制备标题化合物274，产率为59％。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.57(s,1h),6.83(d,j＝8.4hz,1h),6.53-6.52(m,1h),6.47-6.41(m,1h),4.62(m,1h),4.54-4.42(m,1h),4.28-4.21(m,1h),4.07-4.00(m,1h),3.91-3.85(m,1h),3.68(s,6h),3.13(s,3h),2.02-1.98(m,2h),1.88-1.82(m,2h).质谱(m/z):462.20[m+h]+.
6-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-3-甲基-2-(甲基磺酰基)嘧啶-4(3h)-酮(275)
步骤1：将2.25gn-甲基硫脲(,0.025mol),2.7g甲醇钠(0.05mmol)，10mlmeoh和4.0g丙二酸二乙酯(0.025mol)的混合物煮沸回流3h，在约50℃下滴加碘甲烷(3.55g,0.025mol)，并将混合物在50℃下再搅拌0.5小时。滤出结晶出的盐，溶于20ml水中，通过加入冰醋酸中和该溶液，然后滤出沉淀物，得到白色固体275-013.0g(0.017mol)，产率69.8％。质谱(m/z):172.03,[m+h]+.
步骤2:根据49-01的步骤，由化合物275-01(1.2g,6.97mmol)和三氯氧磷(10ml)制备标题化合物275-02，为白色固体(0.9g,4.72mmol)，产率67.7％。质谱(m/z):190.65,[m+h]+.
步骤3:根据99-01的步骤，由275-02(0.9g,4.72mmol)制备标题化合物275-03(1.06g,4.03mmol)，产率85.4％。质谱(m/z):264.30,[m+h]+.
步骤4:根据99-02的步骤，由275-03(1.06g,4.03mmol)制备标题化合物275-04(1.06g)，为白色固体。质谱(m/z):250.23,[m+h]+.
步骤5:根据99-01的步骤，由275-04(0.13g,0.53mmol)和4-(溴甲基)-1,2-二甲氧基苯(0.15g,0.64mmol)制备标题化合物275(15mg,6.6％)，为浅黄色油状物，产率6.6％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.93(d,j＝2.8hz,1h),7.70(dd,j＝2.4,6.8hz,1h),6.87(m,3h),6.71(d,j＝9.6hz,1h),6.61(s,1h),5.10(s,2h),3.89(s,3h),3.86(s,3h),3.79(s,3h),3.22(s,3h).质谱(m/z):432.35,[m+h]+.
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(2-((4-羟基丁基)磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(276)
步骤1：根据140的步骤，由140-1(50mg,0.12mmol)和((4-溴丁氧基)甲基)苯(44mg,0.18mmol)制备标题化合物276-01(25mg,0.04mmol)，产率为33.3％，为无色油状物。质谱(m/z):618.47,[m+h]+.
步骤2:根据273的步骤，由276-01(0.013mmol)制备标题化合物276(10mg,0.019mmol)，为白色固体，产率为47.5％。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.72(d,j＝2.4hz,1h),7.99(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.81(s,1h),6.96-6.92(m,2h),6.86(d,j＝8.0hz,1h),6.77(d,j＝9.6hz,1h),5.21(s,2h),3.88(s,3h),3.87(s,3h),3.71(t,j＝6.0hz,2h),3.66-3.62(m,2h),2.06-1.99(m,2h),1.80-1.73(m,2h).质谱(m/z):528.59,[m+h]+.
5-(2-((3-(苄氧基)-3-苯基丙基)亚磺酰基)-6-(二氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(277)和5-(2-((3-(苄氧基)-3-苯基丙基)磺酰基)-6-(二氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(278)
根据140的步骤，由172-1(55mg,0.12mmol)和(1-(苄氧基)-3-氯丙基)苯(47mg,0.18mmol)制备标题化合物277(8mg,0.012mmol)和278(10mg,0.015mmol)，为无色油状物。277:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.53(s,1h),7.97(m,1h),7.71(m,1h,),7.65(s,1h),7.53(m,1h),7.37-7.28(m,8h),7.23(m,1h),6.94(m,1h),6.90-6.87(m,1h),6.83-6.80(dd,j＝1.6,8.4hz,1h),6.73-6.70(m,1h),4.55(q,j＝4.4hz,1h),4.48-4.40(m,1h),4.32-4.15(m.2h),3.86(d,j＝2.4hz,3h),3.85(s,3h),3.40-3.32(m,1h),3.26-3.08(m,1h).质谱(m/z):646.45[m+h]+；278:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.58(d,j＝2.8hz,1h),7.97(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.76(s,1h),7.39-7.29(m,7h),7.28(m,3h),6.94(d,j＝2.0hz,1h),6.90(dd,j＝1.6,8.0hz,1h),6.83(d,j＝8.4hz,1h),6.71(d,j＝9.6hz,1h),6.54(t,j＝54.4hz,1h),5.14(d,j＝2.0hz,2h),4.56(dd,j＝4.8,8.0hz,1h),4.48(d,j＝11.6hz,1h),4.27(d,j＝12.0hz,1h),3.86(s,3h),3.84(s,3h),3.82-3.74(m,1h),3.66-3.57(m,1h),2.38-2.23(m,2h).质谱(m/z):662.53,[m+h]+.
5-(2-((3-氯-3-苯基丙基)磺酰基)-6-(二氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(279)
根据273的步骤，由278(16mg,0.024mmol)制备标题化合物279产率100％(14mg，0.024mmol)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.63(d,j＝2.0hz,1h),7.98(dd,j＝1.6,9.6hz,1h),7.81(s,1h),7.38-7.37(m,h),6.95(m,1h),6.93(2.0,8.0hz,1h),6.85(d,j＝8.0hz,1h),6.76(d,j＝9.2hz,1h),6.60(t,j＝54.4hz,1h),5.19(s,2h),5.11(dd,j＝5.6,8.0hz,1h),3.87(s,3h),3.86(s,3h),3.82-3.75(m,1h),3.71-3.63(m,1h),2.71-2.57(m,2h).质谱(m/z):590.42,[m+h]+.
5-(2-((3-(苄氧基)-3-苯基丙基)亚磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(280)和5-(2–((3-(苄氧基)-3-苯基丙基)磺酰基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(281)
根据140的步骤，由140-1(55mg,0.12mmol)和(1-(苄氧基)-3-氯丙基)苯(44mg,0.17mmol)制备标题化合物280(4.8mg,0.0072mmol)和281(15mg,0.022mmol)，均为白色固体。280:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.70(t,j＝2.4hz,1h),7.99(td,j＝2.4,9.6hz,1h),7.67(d,j＝2.4hz,1h),7.39-7.22(m,10h),6.97(t,j＝2.4hz,1h),6.93-6.90(m,1h),6.83(dd,j＝1.28.4hz,1h),6.77(dd,j＝0.8,9.6hz,1h),5.25-5.11(m,2h),4.58(q,j＝4.0hz,0.7h),4.49-4.42(m,1.57h),4.29(d,j＝12.0hz,0.60h),4.21(d,j＝12.0hz,0.55h),3.87(d,j＝2.4hz,3h),3.85(s,3h),3.46-3.38(m,1h),3.33-3.26(m,0.70h),3.23-3.16(m,0.70h),2.48-2.31(m,1h),2.14-2.00(m,1h).质谱(m/z):664.28,[m+h]+.281:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.87(d,j＝2.0hz,1h),8.01(dd,j＝2.0,9.6hz,1h),7.80(s,1h),7.40-7.26(m,10h),6.95(s,1h),6.92(d,j＝8.4hz,1h),6.84-6.79(m,2h),5.19(s,2h),4.57(m,1h),4.49(d,j＝11.6hz,1h),4.27(d,j＝11.6hz,1h),3.87-3.79(m,7h),3.69-3.62(m,1h),2.41-2.25(m,2h)；质谱(m/z):680.28,[m+h]+.
5-(2–((3-(苄氧基)-3-苯基丙基)磺酰基)-6-(氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(282)
步骤1:根据140-1的步骤，由161(16mg,0.037mmol)不经纯化制备标题化合物282-01，为黄色糖浆。质谱(m/z):388.24,[m+h]+.
步骤2:根据140的步骤，由282-01(0.037mmol)和(1-(苄氧基)-3-氯丙基)苯(15mg,0.056mmol)制备标题化合物282(3.4mg，0.0053mmol)，产率为14％，为无色油状物。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.49(s,1h),7.97(d,j＝9.6hz,1h),7.72-7.71(m,1h),7.66(s,1h),7.54-7.54(m,1h),7.38-7.26(m,9h),6.93(s,1h),6.89(d,j＝8.0hz,1h),6.83(d,j＝8.0hz,1h),6.70(d,j＝9.6hz,1h),5.54(s,1h),5.42(s,1h).,5.17-5.09(m,2h),4.56-4.45(m,2h),4.29-4.25(m,1h),3.86(s,3h),3.85(s,3h),3.79-3.72(m,1h),3.61-3.54(m,1h),2.34-2.21(m,2h).质谱(m/z):644.45,[m+h]+.
5-(6-(二氟甲基)-2-(3-(2-氟苄基)-3-苯基丙基亚磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(3-氟-4-甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(283)和5-((6-(二氟甲基)-2-(3-(2-氟苄基)-3-苯基丙基磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(3-氟-4-甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(284)
步骤1.根据140-1的步骤，由化合物167(292mg,0.67mmol)制备化合物283-01，为285mg黄色固体，收率99％。。质谱(m/z):394.41[m+h]+.
步骤2.根据140的步骤，由283-01(100mg,025mmol)和1-((3-氯-1-苯基丙氧基)甲基)-2-氟苯(106mg,0.38mmol)制备标题化合物283(25.5mg,16.7％)和284(5.1mg,3.3％)，均为黄色固体。283:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.60(s,1h),7.99(d,j＝9.6hz,1h),7.70(s,1h),7.32-7.29(m,6h),7.10-7.06(m,3h),7.00-6.88(m,2h),6.72(d,j＝9.6hz,1h),6.58(t,j＝54.5hz,1h),5.13(m,2h),4.57(m,1h),4.50-4.26(m.3h),3.84(s,3h),3.42-3.11(m,2h),2.43-2.30(m,1h),2.09-2.00(m,1h).质谱(m/z):652.20[m+h]+.284:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.57(s,1h),7.99(d,j＝9.6hz,1h),7.81(s,1h),7.38-7.32(m,7h),7.10(m,3h),7.00(t,j＝9.6hz,1h),6.91(t,j＝9.6hz,1h),6.75(d,j＝9.6hz,1h),6.55(t,j＝54.4hz,1h),5.13(s,2h),4.56(m,1h),4.49(d,j＝12.0hz,1h),4.37(d,j＝12.0hz,1h),3.85(s,3h),3.84-3.76(m,1h),3.65-3.57(m,1h),2.34-2.26(m,2h).质谱(m/z):668.21[m+h]+
5-(2-(3-(2,4-二氟苄氧基)-3-苯基丙基亚磺酰基)-6-(二氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3-氟-4-甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(285)和5-(2-(3-(2,4-二氟苄氧基)-3-苯基丙基磺酰基)-6-(二氟甲基)嘧啶-4-基)-1-(3-氟-4-甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(286)
根据140的步骤，由283-01(100mg,0.25mmol)和1-((3-氯-1-苯基丙氧基)甲基)-2,4-二氟苯(112mg,0.38mmol)制备标题化合物285(14.3mg,10.3％)和286(15.0mg,8.1％)，均为黄色固体。285:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.62(s,1h),7.98(d,j＝9.2hz,1h),7.70(s,1h),7.33-7.28(m,6h),7.12(d,j＝9.6hz,2h),6.91(t,j＝8.4hz,1h),6.83-6.72(m,3h),6.59(t,j＝54.4hz,1h),5.15(s,2h),4.56(m,1h),4.44-4.21(m,3h),3.85(s,3h),3.40-3.11(m,2h),2.46-2.24(m,1h).质谱(m/z):670.19[m+h]+.286:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.57(s,1h),8.00(d,j＝9.2hz,1h),7.81(s,1h),7.39-7.29(m,6h),7.10(d,j＝10.4hz,2h),6.93(t,j＝8hz,1h),6.84(t,j＝8hz,1h),6.79(m,2h),6.56(t,j＝54.4hz,1h),5.15(s,2h),4.57(m,1h),4.44(d,j＝11.6hz,1h),4.34(d,j＝12.0hz,1h),3.86(s,3h),3.80-3.72(m,1h),3.64-3.56(m,1h),2.34-2.26(m.2h).质谱(m/z):686.16[m+h]+.
5-(6-(二氟甲基)-2-((3-羟基-3-苯丙基)磺酰基)嘧啶-4-基)-1-(3-氟-4-甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(287)
根据140的步骤，由283-01(59mg,0.15mmol)和2-(3-氯-1-苯基丙氧基)四氢-2h-吡喃(58mg,0.23mmol)制备标题化合物287(13mg,0.023mmol)，为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.65(d,j＝2.4hz,1h),8.01(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.83(s,1h),7.38-7.29(m,5h),7.13-7.10(m,2h),6.94(t,j＝8.4hz,1h),6.79(d,j＝9.6hz,1h),6.61(t,j＝54.4hz,1h),5.18(s,2h),4.96(dd,j＝5.2,7.6hz,1h),3.87(s,3h),3.82-3.66(m,2h),2.37-2.25(m,2h).质谱(m/z):560.13,[m+h]+.
n-((3s,5s,7s)-金刚烷-1-基)-4-((4-(二氟甲基)-6-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)嘧啶-2-基)磺酰基)丁酰胺(288)
根据140的步骤，由172-1(58mg,0.14mmol)和n-((3s,5s,7s)-金刚烷-1-基)-4-溴丁酰胺(78mg,0.26mmol)制备标题化合物288(3.2mg,收率5.6％)，为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.83(d,j＝2.8hz,1h),7.98(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.81(s,1h),7.01-6.96(m,2h),6.86(d,j＝8.4hz,1h),6.74(d,j＝4.8hz,1h),6.65(t,j＝54.4hz,1h),5.35(m,1h),5.27(s,3h),3.87(s,3h),3.86(s,3h),3.65(t,j＝7.2hz,2h),2.35(t,j＝6.4hz,2h),2.23(m,3h),2.03(m,5h),1.96(m,6h)1.63(m,3h).质谱(m/z):657.51[m+h]+；
n-((3s,5s,7s)-金刚烷-1-基)-4-((4-(1-(3,4-二甲氧基苄基)-6-氧代-1,2,3,6-四氢吡啶-3-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2-基)磺酰基)丁酰胺(289)
根据140的步骤，由140-01(40mg,0.094mmol)和n-((1s,3s)-金刚烷-1-基)-4-溴丁酰胺(30mg,0.1mmol)制备标题化合物(9mg,收率16％)，为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.85(d,1h,j＝2.4hz),7.96(dd,1h,j＝2.4,9.6hz),7.81(s,1h),6.99(d,1h,j＝2.0hz),6.70(dd,1h,j＝2.0,4.0hz),6.84(d,1h,j＝8.0hz),6.72(d,1h,j＝9.6hz),5.26(s,2h),3.87(s,3h),3.86(s,3h),3.67(t,2h,j＝7.2hz),2.36(t,2h,j＝6.8hz),2.26-2.22(m,2h),2.04-2.01(m,3h),1.96-1.95(m,6h),1.27-1.24(m,6h).13cnmr(100mhz,cdcl3):δ169.89,166.32,165.48,162.06,157.76,157.41,149.46,141.88,135.81,130.02,127.87,121.46,121.22,113.16,112.08,111.99,111.36,56.15,56.08,53.15,52.32,50.99,41.79,36.39,35.15,29.51,27.35,25.67,22.83,18.83.hrms(esi):计算值[c33h38f3n4o6s+],675.2459,实测值675.2479.
2-(3-(苄氧基)-3-苯基丙基亚磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(290)和2-(3-(苄氧基)-3-苯基丙基磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(291)
根据140的步骤，由1-02(30mg,0.12mmol)和(1-(苄氧基)-3-氯丙基)苯(47mg,0.18mmol)制备标题化合物290(13.5mg,收率17.2％)和291(21.2mg,收率26.2％)，均为白色固体。290:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.98(d,j＝4.4hz,1h),7.79(d,j＝1.6hz,1h),7.71-7.69(m,1h),7.35-7.28(m,8h),7.24-7.22(m,3h),4.57(q,j＝4.0hz,1h),4.49-4.42(m,1h),4.30(d,j＝12.0hz,1h),4.22(d,j＝12hz,1h),3.46-3.38(m,1h),3.32-3.15(m,1h),2.48-2.32(m,1h)..质谱(m/z):503.27[m+h]+.291:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.99(d,j＝3.6hz,1h),7.89(s,1h),7.73(d,j＝5.2hz,1h),7.38-7.28(m,10h),7.23(t,j＝4.4hz,1h),4.58(q,j＝4.0hz,1h),4.51(d,j＝12.0hz,1h),4.30(d,j＝12.0hz,1h),3.89-3.81(m,1h),3.72-3.6(m,1h),2.44-2.31(m,2h).质谱(m/z):519.28[m+h]+.
2-((3-氯-3-苯基丙基)磺酰基)-4-(噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)嘧啶(292)
根据273的步骤，由291(18.8mg,0.036mmol)制备标题化合物292(13mg,0.029mmol)，收率71.2％，为淡黄色油状物。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.03(dd,j＝1.2,4.0hz,1h),7.94(s,1h),7.77(dd,j＝1.2,4.8hz,1h),7.42-7.33(m,5h),7.31-7.27(m,1h),5.12(m,1h),3.88-3.80(m,1h),3.77-3.69(m,1h),2.76-2.67(m,2h).质谱(m/z):447.17,[m+h]+.
5-(2-((3-(苄氧基)-3-苯基丙基)磺酰基)喹唑啉-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(293)
步骤1.根据99-01的步骤，由2,4-二氯喹唑啉(1.0g,5.02mmol)和(6-甲氧基吡啶-3-基)硼酸(0.52g,3.35mmol)制备标题化合物293-01(0.87g,3.2mmol)，收率63.7％，为白色固体。质谱(m/z):272.17,[m+h]+.
步骤2.如上所述140-1的合成，代替使用nasme制备标题化合物293-02，得到0.6g黄色固体，不经进一步纯化直接用于下步反应。质谱(m/z):284.13,[m+h]+.
步骤3.根据99-02的步骤，由293-02(0.6g)制备标题化合物293-03(0.5g)，为黄色固体，不经纯化。质谱(m/z):270.20,[m+h]+.
步骤4.根据99-01的步骤，由293-03(0.4g,1.48mmol)和4-(溴甲基)-1,2-二甲氧基苯(0.34g,1.48mmol)制备标题化合物293-04(16mg,0.035mmol)，收率2.4％，为无色油状物。质谱(m/z):452.21,[m+h]+.
步骤5.根据140-1的步骤，由293-04(16mg,0.035mmol)制备标题化合物293-05，为黄色糖浆，不经纯化。质谱(m/z):406.18,[m+h]+.
步骤6.根据140的步骤，由293-05(0.035mmol)和(1-(苄氧基)-3-氯丙基)苯(14mg,0.053mmol)制备标题化合物293(2.0mg,0.003mmol)，收率8.57％，为无色油状物。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.21(m,1h),8.07(m,3h),7.87(m,1h),7.75-7.71(m,1h),7.36-7.26(m,11h),6.98(s,1h),6.94-6.92(m,1h),6.84-6.82(m,1h),6.77-6.75(m,1h),5.18(s,2h),4.58(t,j＝5.6hz,1h),4.48(d,j＝12.0hz,1h),4.29(d,j＝11.2hz,1h),3.88(s,3h),3.86(s,3h),3.75-3.67(m,2h),2.40-2.32(m,2h).质谱(m/z):662.32,[m+h]+.
5-(2-(3-(苄氧基)-3-苯基丙基亚磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(294)和5-(2-(3-(苄氧基)-3-苯基丙基磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(295)
步骤1.4,6-二氯-2-(甲硫基)嘧啶(6.7g,0.034mol)，6-甲氧基吡啶-3-基硼酸(3.5g,0.023mol)，na2co3(10.8g,0.10mol)和pd(pph3)4(1.0g,0.86mmol)在1,4-二氧六环(50ml)和h2o(25ml)的混合物加热至90℃。将反应混合物在n2气氛下搅拌3小时。蒸发除去1,4-二氧六环，将混合物用h2o稀释。将水层用etoac萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱法(pe:ea＝300:1至100:1)进一步纯化，得到5.3g294-01，为白色固体，(86.9％)。质谱(m/z):269.16[m+h]+.
步骤2.根据99-02的步骤，由294-01(5.3g,19.8mmol)制备化合物294-02(4.62g)，收率92.0％，为淡黄色固体。质谱(m/z):254.16[m+h]+.
步骤3.根据85-01的步骤，由294-02(4.52g,17.9mmol)制备标题化合物294-03(3.87g)，收率53.6％，为白色固体。质谱(m/z):404.20[m+h]+.
步骤4.根据85的步骤，由294-3(3.87g,9.6mmol)和过硫酸氢钾(11.8g,19.2mmol)制备化合物294-04(3.46g)，收率82.8％，为黄色固体。质谱(m/z):436.59[m+h]+.
步骤5.在n2气氛下，将[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(214mg,0.29mmol)加入到294-04(1.3g,2.98mmol)，甲基硼酸(180mg,3.01mmol)和k3po4(1.58g7.44mmol)的thf(15ml)溶液中。将混合物加热至90℃并搅拌过夜。将反应混合物用h2o稀释，并用etoac萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，用na2so4干燥。蒸发除去溶剂，通过制备tlc进一步纯化(dcm:meoh＝20:1)，得到77.8mg294-05(5.9％)，为淡黄色油状物。质谱(m/z):416.12,[m+h]+.
步骤6.根据140-01的步骤，由化合物294-05(78mg,0.19mmol)制备化合物294-06，为黄色油状物。质谱(m/z):370.11[m+h]+.
步骤7.根据140的步骤，由294-06(0.19mmol)和(1-(苄氧基)-3-氯丙基)苯(74mg,0.28mmol)制备标题化合物294(5.2mg,18.2％)和295(3.2mg,10.9％)，分别为白色固体和无色油状物。294:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.44(s,1h),7.91(d,j＝9.6hz,1h),7.72-7.51(m,1h),7.36-7.29(m,8h),7.23(m,2h),6.94(s,1h),6.89-6.86(m,1h),6.81(d,j＝8hz,1h),6.69(dd,j＝3.2,9.6hz,1h),5.12(m,2h),4.56(q,j＝4hz,1h),4.47-4.40(m,1h),4.32-4.17(m.2h),3.85(s,3h),3.84(s,3h),3.35-3.09(m,2h),2.60(s,3h),2.41-2.31(m,1h).质谱(m/z):610.46[m+h]+；295:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.44(d,j＝2.8hz,1h),7.90(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.38-7.27(m.10h),6.93(d,j＝2.0hz.1h),6.88(dd,j＝2.0.8.0hz,1h),6.82(d,j＝8.4hz,1h),6.68(dd,j＝9.6hz,1h),5.12(m,2h),4.56(m,1h),4.48(d,j＝11.6hz,1h),4.29(d,j＝11.6hz,1h),3.86(s,3h),3.84(s,3h),3.82-3.72(m,1h),3.62-3.55(m,1h),2.61(s,3h),2.35-2.20(m,3h).质谱(m/z):626.48[m+h]+.
1-(3,4-二甲氧基苄基)-5-(6-(2-氟苯基)-2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(296)
根据294-05的步骤，由294-04(0.15g,0.35mmol)和(2-氟苯基)硼酸(59mg,0.42mmol)制备标题化合物296(0.13g,76％)，为棕色固体。1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.58(s,1h),8.26(t,j＝6.8hz,1h),8.09-8.01(m,2h),7.58-7.53(m,1h),7.35(t,j＝7.2hz,1h),7.24(m,1h),7.00-6.94(m,2h),6.87-6.85(m,1h),6.75-6.74(m,1h),5.21(s,2h),3.89(s,3h),3.87(s,3h),3.40(s,3h).质谱(m/z):496.30,[m+h]+.
5-(2-((3-(苄氧基)-3-苯基丙基)亚磺酰基)-6-(2-氟苯基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(297)和5-(2-((3-(苄氧基)-3-苯基丙基)磺酰基)-6-(2-氟苯基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶-2(1h)-酮(298)
步骤1.根据140-01的步骤，由304(70mg,0.14mmol)制备标题化合物297-01，为黄色固体，不经纯化。质谱(m/z):450.18,[m+h]+.
步骤2.根据140的步骤，由297-01(48mg,0.11mmol)和(1-(苄氧基)-3-氯丙基)苯(44mg,0.17mmol)制备标题化合物297(13mg,0.019mmol)和298(15mg,0.021mmol)，均为无色油状物。297:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.60(m,1h),8.20(m,1h),8.01-7.95(m,2h),7.53(m,1h),7.31-7.20(m,12h),6.87-6.92(m,2h),6.83-6.74(m,2h),5.19(s,2h),4.59-4.57(m,0.6h),4.49-4.41(m,1.49h),4.32(d,j＝11.6hz,0.57h),4.21(d,j＝11.6hz,0.54h),3.87,3.85(s*2,6h),3.43-3.20(m,2h),2.43-2.37(m,2h).质谱(m/z):690.29,[m+h]+.298:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.54(s,1h),8.20(t,j＝7.6hz,1h),8.06(s,1h),7.99(d,j＝9.6hz,1h),7.56-7.51(m,1h),7.35-7.23(m,12h),6.96(s,1h),6.92(d,j＝8.4hz,1h),6.84-6.82(m,1h),6.73(d,j＝9.6hz,1h),5.16(s,2h),4.59-4.56(m,1h),4.50(d,j＝11.6hz,1h),4.30(d,j＝11.6hz,1h),3.91-3.85(m,7h),3.69-3.62(m,1h),2.40-2.32(m,2h).质谱(m/z):706.27,[m+h]+.
5-(2-((3-(苄氧基)-3-苯基丙基)亚磺酰基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶2(1h)-酮(299)和5-(2-((3-(苄氧基)-3-苯基丙基)磺酰基)-6-(噻吩-2-基)嘧啶-4-基)-1-(3,4-二甲氧基苄基)吡啶2(1h)-酮(300)
步骤1.根据294-05的步骤，由294-04(0.15g,0.34mmol)和噻吩-2-基硼酸(52mg,0.41mmol)制备标题化合物299-01(0.15g,0.31mmol)，收率91％，为棕色固体。质谱(m/z):484.10,[m+h]+.
步骤2.根据140-1的步骤，由299-01(0.15g,0.31mmol)制备标题化合物299-02，为黄色固体，不经纯化。质谱(m/z):438.07,[m+h]+.
步骤3.根据140的步骤，由299-02(0.31mmol)和(1-(苄氧基)-3-氯丙基)苯(96mg,0.37mmol)制备标题化合物299(6mg,0.0089mmol)和300(10mg,0.014mmol)，均为无色油状物。299:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.64(s,1h),8.00(d,j＝8.4hz,1h),7.89(m,1h),7.62(t,j＝4.8hz,2h),7.34-7.19(m,11h),6.97(m,1h),6.92(dd,j＝7.6hz,1h),6.82(m,1h),6.76(d,j＝8.4hz,1h),5.24-5.11(m,2h),4.58-4.56(m,0.58h),4.50-4.41(m,1.62h),4.32(d,j＝11.6hz,0.60h),4.21(d,j＝11.6hz,0.62h),3.87(s,3h),3.85(s,3h),3.47-3.40(m,1h),3.35-3.29(m,0.54h),3.25-3.19(m,0.53h),2.46-2.34(m,1h),2.15-2.10(m,1h).质谱(m/z):678.17,[m+h]+.300:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.58(s,1h),7.95(d,j＝7.6hz,1h),7.87(d,j＝2.8hz,1h),7.65(s,1h),7.60(d,j＝5.2hz,1h),7.39-7.26(m,10h),7.17(t,j＝4.0hz,1h),6.97(s,1h),6.92(d,j＝8.4hz,1h),6.83(d,j＝8.0hz,1h),6.73(d,j＝8.8hz,1h),5.17(s,2h),4.60-4.57(m,1h),4.51(d,j＝11.6hz,1h),4.31(d,j＝12.0hz,1h),3.92-3.79(m,7h),3.70-3.63(m,1h),2.42-2.30(m,2h).质谱(m/z):694.20,[m+h]+.
3-氟-1-(3-氟-4-甲氧基苄基)-5-(2-(3-(2-氟苄氧基)-3-苯基丙基亚磺酰基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(301)和3-氟-1-(3-氟-4-甲氧基苄基)-5-(2-(3-(2-氟苄氧基)-3-苯基丙基磺酰基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(302)
步骤1.根据165-04的步骤，由5-溴-3-氟吡啶-2(1h)-酮(3.0g,16.0mmol)和4-(溴甲基)-2-氟-1-甲氧基苯(3.8g,17.0mmol)制备化合物301-01(3.73g)，收率70.6％，为白色固体。质谱(m/z):329.98,[m+h]+.
步骤2.在n2气氛下，将pd(pph3)2cl2(442mg,0.60mmol)加入到301-01(2.0g,6.05mmol)，4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂硼环戊烷)(3.1g,12.1mmol)，和醋酸钾(1.78g,18.2mmol)的1,4-二氧六环(40ml)的混合物中。然后将混合物加热至80℃，搅拌3小时。蒸发除去溶剂，将残余物用etoac洗涤，得到301-02和301-03的混合物，为棕色粉末，收率98％。产物不需进一步纯化即可使用。301-2:质谱(m/z):379.17,[m+h]+,301-03:质谱(m/z):296.01[m+h]+.
步骤3.根据99-01的步骤，由301-02和301-03的混合物(100mg)和2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶(100mg,0.3mmol)制备标题化合物301-04(77.5mg)，收率69.8％，为黄色固体。质谱(m/z):419.99,[m+h]+.
步骤4.根据140-01的步骤，由化合物301-04(77.5mg,0.18mmol)制备标题化合物301-05，为黄色油状物。质谱(m/z):418.01[m+h]+.
步骤5.根据140的步骤，由301-5和1–((3-氯-1-苯基丙氧基)甲基)-2-氟苯(75mg,0.27mmol)制备标题化合物301(8.5mg,6.3％)和302(5.5mg,5.5％)，均为白色固体。301:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.04(s,1h),7.75(m,2h),7.42(d,j＝6hz,1h),7.34-7.28(m,7h),7.16(d,j＝10.4hz,2h),7.10-6.92(m,3h),5.27-5.16(m,2h),4.59-4.36(m,2h),4.32-4.20(m,1h),3.87(s,3h),3.41-3.18(m,1h),2.46-2.31(m,1h),2.13-1.95(m,1h).质谱(m/z):676.13[m+h]+.302:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.05(s,1h),7.87(d,j＝6.0hz,1h),7.80(dd,j＝2.4,10.0hz,1h),7.48(d,j＝6.0hz,1h),7.37-7.27(m,7h),7.16-7.08(m,3h),7.02-6.92(m,2h),5.21(m,2h),4.57(m,1h),4.49(d,j＝12.0hz,1h),4.36(d,j＝12.0hz,1h),3.87(s,3h),3.85-3.77(m,1h),3.69-3.61(m,1h),2.35-2.27(m,2h).质谱(m/z):692.14,[m+h]+.
3-氟-1-(3-氟-4-甲氧基苄基)-5-(6-甲基-2-((3-氧代丁基)磺酰基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(303)
步骤1.根据99-01的步骤，由2,4-二氯-6-甲基嘧啶(0.52g,3.19mmol)和301-02(0.8g,2.12mmol)制备标题化合物303-01(0.74g,1.96mmol)，收率92.5％，为淡黄色固体。质谱(m/z):378.11,[m+h]+.
步骤2.根据140-1的步骤，由303-01(0.74g,1.96mmol)制备标题化合物303-02(0.58g)，为黄色固体，不经纯化。质谱(m/z):376.09,[m+h]+.
步骤3.根据140的步骤，由303-02(24mg,0.06mmol)和4-氯丁-2-酮(7.8mg,0.07mmol)制备标题化合物303(4mg,0.0084mmol)，收率14％，为白色固体。hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.37(dd,j＝1.2,2.0hz,1h),7.72(dd,j＝2.4,10.0hz,1h),7.40(s,1h),7.17(d,j＝9.6hz,2h),6.94(t,j＝8.4hz,1h),5.21(s,2h),3.87(s,3h),3.85-3.83(m,2h),3.10(t,j＝7.6hz,2h),2.66(s,3h).质谱(m/z):478.07,[m+h]+.
3-氟-1-(3-氟-4-甲氧基苄基)-5-(2-((3-((2-氟苄基)氧基)丁基)亚磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(304)和3-氟-1-(3-氟-4-甲氧基苄基)-5-(2-((3-((2-氟苄基)氧基)丁基)磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(305)
根据140的步骤，由303-02(70mg,0.19mmol)和1-(((4-氯丁-2-基)氧基)甲基)-2-氟苯(53mg,0.25mmol)制备标题化合物304(30mg,0.052mmol)和305(66mg,0.11mmol)，均为白色固体。304:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.30(s,1h),7.75-7.71(m,1h),7.38-7.32(m,1h),7.27(s,1h)7.24-7.18(m,1h),7.12-7.09(m,2h),7.07-7.01(m,1h),6.99-6.88(m,2h),5.17(m,2h),4.63(d,j＝12.0hz,0.5h),4.56-4.49(m,1h),4.37(d,j＝12.0hz,0.5h),3.86(s,3h),3.78-3.74(m,0.56h),3.67-3.61(m,0.59h),3.41-3.33(m,0.58h),3.30-3.18(m,1h),3.15-3.07(m,0.60h),2.64(s,3h),2.25-2.17(m,0.72h),2.15-2.05(m,0.71h),1.98-1.89(m,0.62h),质谱(m/z):572.18,[m+h]+.305:1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.32(m,1h),7.76(dd,j＝2.4,10.0hz,1h),7.42(s,1h),7.38(td,j＝1.6,7.6hz,1h),7.29-7.23(m,1h),7.13-7.08(m,3h),7.03-6.98(m,1h),6.92(t,j＝8.4hz,1h),5.19(d,j＝14.4hz,1h),5.11(d,j＝14.4hz,1h),4.63(d,j＝11.6hz,1h),4.49(d,j＝11.6hz,1h),3.85(s,3h),3.83-3.78(m,1h),3.77-3.72(m,1h),3.58-3.50(m,1h),2.63(s,3h),2.19-2.10(m,1h),2.08-1.98(m,1h).质谱(m/z):588.17,[m+h]+.
1'-(3,4-二甲氧基苄基)-2-((3-((2-氟苄基)氧基)-3-苯基丙基)磺酰基)-6-甲基-[4,5'-联嘧啶]-2’(1'h)-酮(306)和1'-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基甲基)-2-((3-((2-氟苄基)氧基)-3-苯基丙基)磺酰基)-6-甲基-[4,5'-联嘧啶]-2'(1'h)-酮(307)
步骤1：根据99-01的步骤，由2,4-二氯-6-甲基嘧啶(1.5g,9.24mmol)制备标题化合物306-01(1.66g,7.0mmol)，收率100％，为白色固体。质谱(m/z):237.11,239.12,[m+h]+.
步骤2：根据140-01的步骤，由306-01(0.25g,1.06mmol)制备标题化合物306-02(0.2g)，为黄色固体，不经纯化。质谱(m/z):235.23,[m+h]+.
步骤3:根据140的步骤，由306-02(0.13g,0.55mmol)和1-(((4-氯丁-2-基)氧基)甲基)-2-氟苯(0.18g,0.83mmol)制备标题化合物306-03(21mg,0.047mmol)，收率8.5％，为白色固体。质谱(m/z):509.31,[m+h]+.
步骤4:根据99-02的步骤，由306-03(21mg,0.047mmol)制备标题化合物306-04，为黄色糖浆，不经纯化。质谱(m/z):495.29,[m+h]+.
步骤5:根据85-01的步骤，由306-04(7mg,0.014mmol)制备标题化合物306(2mg,0.003mmol)，收率21％，为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.92(s,1h),7.61(m,1h),7.39-7.30(m,7h),7.28-7.24(m,1h),7.12(dt,j＝0.8,7.2hz,1h),7.03-6.99(m,2h),6.97(d,j＝8.0hz,1h),6.85(d,j＝8.0hz,1h),5.15(s,2h),4.57(q,j＝4.4hz,1h),4.49(d,j＝11.6hz,1h),4.36(d,j＝12.0hz,1h),3.88(s,3h),3.86(s,3h),3.79-3.73(m,1h),3.63-3.55(m,1h),2.65(s,3h),2.25-2.21(m,2h).质谱(m/z):645.29,[m+h]+.
步骤6:根据85-01的步骤，由306-04(14mg,0.028mmol)制备标题化合物307(2.5mg,0.004mmol)，收率14.3％，为白色固体。质谱(m/z):629.31,[m+h]+.
1-(环己基甲基)-5-(2-(3-(2,4-二氟苄氧基)-3-苯基丙基亚磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-氟吡啶-2-(1h)-酮(308)和1-(环己基甲基)-5-(2-(3-(2,4-二氟苄氧基)-3-苯基丙基磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-氟吡啶-2-(1h)-酮(309)
步骤1.根据99-01的步骤，由165-01和2,4-二氯-6-甲基嘧啶(2.93g,18.0mmol)制备标题化合物308-01(2.46g)，收率81.0％，为白色固体。质谱(m/z):254.00,[m+h]+.
步骤2.根据140-01的步骤，由化合物308-01(2.46g,9.7mmol)制备化合物308-02(2.12g)，收率86.9％，为黄色固体。质谱(m/z):418.04[m+h]+.
步骤3.在n2下，将k2co3(397mg,g2.88mmol)加入到308-02(390mg,1.44mmol)和1-((3-氯-1-苯基丙氧基)甲基)-2,4-二氟苯(469mg,1.58mmol)的dmf(15ml)溶液中。然后将反应混合物在室温下搅拌过夜。加水淬灭反应，用etoac萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，na2so4干燥。蒸发除去溶剂，得到308-03，为浅黄色油状物(850mg)。所得粗品不需进一步纯化即可使用。质谱(m/z):513.32[m+h]+.
步骤4.将hbr(aq,5ml)加入到308-03(500mg,0.98mmol)的1,4-二氧六环(10ml)溶液中。然后将反应混合物于50℃搅拌1.5小时。将反应混合物冷却至室温，用水稀释。过滤得到437mg308-04，为橙色固体(89.7％)。质谱(m/z):498.18[m+h]+.
步骤5.将308-04(67mg,0.13mmol)，(溴甲基)环己烷(166mg,0.94mmol)和k2co3(83mg,0.94mmol)在acn(5ml)中的混合物在微波下于180℃反应11分钟。将反应混合物用水稀释，用etoac萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，na2so4干燥，并通过硅胶柱色谱法(pe:ea＝5:1)进一步纯化，得到39mg308-05，为无色油状物(48.8％)。质谱(m/z):594.26[m+h]+.
步骤6.根据80和81的步骤，由308-05(39mg,0.066mmol)制备标题化合物(12.5mg,29.8％)和309(5.6mg,14.8％)，均为白色固体。308:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.16(s,1h),7.72-7.69(m,2h),7.54-7.51(m.1h),7.36-7.26(m,5h),6.86-6.71(m,2h),4.56-4.53(m,1h),4.45-4.35(m,2h),4.32-4.20(m,2h),3.93(d,j＝7.2hz,2h),3.35-3.05(m.2h),2.62(s,3h),2.47-2.21(m,2h),2.08-2.00(m,1h),1.92-1.87(m,1h),1.75-1.63(m,6h),1.44-1.40(m,2h).质谱(m/z):610.28[m+h]+.309:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.16(s,1h),7.71(dd,j＝2.4,10hz,1h),7.39-7.32(m,7h),6.88-6.83(m,1h),6.81-6.76(m,1h),4.58-4.55(m,1h),4.46(d,j＝11.6hz,1h),4.35(d,j＝11.6hz,1h),3.93(d,j＝7.6hz,2h),3.80-3.72(m,1h),3.62-3.55(m,1h),2.64(s,3h),2.40-2.25(m.2h),1.94-1.86(m,1h),1.75-1.64(m,6h),1.27-1.17(m,4h).质谱(m/z):626.20[m+h]+.
5-(2-((3-((2,4-二氟苄基)氧基)-3-苯基丙基)亚磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1-(3-乙氧基苄基)-3-氟吡啶-2(1h)-酮(310)5-(2-((3-((2,4-二氟苄基)氧基)-3-苯基丙基)磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1-(3-乙氧基苄基)-3-氟吡啶-2(1h)-酮(311)
根据80和81的步骤，由308-04(100mg,0.21mmol)和1-(溴甲基)-3-乙氧基苯(50.0mg,0.23mmol)制备标题化合物310(9.3mg,21.5％)和311(13.6mg,26.4％)，为无色油状物和白色固体。310:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.21(s,1h),7.74-7.69(m,.2h),7.54-7.51(m,1h),7.36-7.28(m,6h),7.25(m,1h),6.94-6.80(m.4h),5.23(s,2h),4.55(m,1h),4.45-4.42(m,4h),4.03-3.97(m,2h),3.33-3.30(m,2h),2.61(s,3h),1.38(t,j＝7.2hz,3h).质谱(m/z):648.20[m+h]+；311:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.21(s,1h),7.74-7.69(m,1h),7.53(m,1h),7.38-7.28(m,7h),6.89-6.83(m,5h),5.22(s,2h),4.56(m,1h),4.42(d,j＝11.6hz,1h),4.34-4.28(m,2h),4.02(q,j＝7.2hz,2h),3.77-3.69(m,1h),3.60-3.52(m,1h),2.62(s,1h),1.38(t,j＝6.8hz,3h).质谱(m/z):664.16[m+h]+.
5-(2-(3-(2,4-二氟苄氧基)-3-苯基丙基磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-氟-1-(哌啶-4-基甲基)吡啶-2(1h)-酮(312)
步骤1.根据308-05的步骤，由308-04(95mg,0.19mmol)和叔丁基4-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(531mg,1.9mmol)制备化合物312-01(50mg)，收率37.7％，为无色油状物。质谱(m/z):696.19[m+h]+.
步骤2.根据81的步骤，由312-01(50mg,0.07mmol)制备化合物312-02(51mg)，收率97.5％，为无色油状物。质谱(m/z):727.27,[m+h]+.
步骤3.将tfa(0.5ml)加入到312-02(51mg,0.07mmol)的dcm溶液中。将反应混合物在室温下搅拌2小时。之后向混合物中加入nahco3水溶液以中和剩余的tfa。将水相用dcm萃取3次，合并有机层，用盐水洗涤，na2so4干燥，通过硅胶柱色谱法(dcm:meoh＝10:1)进一步纯化，得到312，为19mg白色固体。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.69(s,1h),8.12(s,2h),7.73-7.65(m,1h),7.50-7.44(m,1h),7.39-7.32(m,4h),7.22-7.17(m,1h),7.07-7.03(m,1h),4.62-4.59(m,1h),4.34(d,j＝5.2hz,2h),4.03(d,j＝7.2hz,2h),3.78-3.71(m,1h),3.66-3.58(m,1h),3.33(s,3h),3.28(d,j＝13.6hz,1h),2.85-2.78(m,1h),2.57(s,2h),2.19-1.98(m,4h),1.73-1.55(m,2h),1.47-1.34(m,2h).质谱(m/z):627.21[m+h]+
5-(2-(3-(2,4-二氟苄氧基)-3-苯基丙基亚磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-氟-1-((四氢-2h-吡喃-4-基)甲基)吡啶-2(1h)-酮(313)和5-(2-(3-(2,4-二氟苄氧基)-3-苯基丙基磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-氟-1-((四氢-2h-吡喃-4-基)甲基)吡啶-2(1h)-酮(314)
根据80和81的步骤，由308-04(50mg,0.10mmol)和4-(溴甲基)四氢-2h-吡喃(179mg,1.0mmol)制备标题化合物313(11.7mg,收率16.3％)和314(8.5mg,收率11.2％)，分别为淡黄色固体和白色固体。313:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.185(s,1h),7.73(dd,j＝2.4,10hz,1h),7.40-7.32(m,7h),6.87-6.75(m,2h),4.58(m,1h),4.46(d,j＝11.6hz,1h),4.35(d,j＝11.6,1h),3.99(d,j＝7.2hz,3h),3.79-3.72(m,1h),3.62-3.54(m,1h),3.38-3.31(t,j＝11.6hz,2h),2.64(s,3h),2.36-2.16(m,4h),1.56(d,j＝11.2hz,2h),1.47-1.41(m,2h).质谱(m/z):612.46[m+h]+.314:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.20(s,1h),7.73-7.69(m,1h),7.36-7.27(m,7h),6.86-6.71(m,2h),4.56(m,1h),4.46-4.25(m,3h),3.99(d,j＝6.8hz,3h),3.34(m,3h),2.62(m,3h),2.46-1.98(m,4h),1.55-1.40(m,4h).质谱(m/z):628.43[m+h]+.
1-(3,4-二氯苄基)-5-(2-(3-(2,4-二氟苄氧基)-3-苯基丙基亚磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-氟吡啶-2-(1h)-酮(315)和1-(3,4-二氯苄基)-5-(2-(3-(2,4-二氟苄氧基)-3-苯基丙基磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-氟吡啶-2-(1h)-酮(316)
根据81和82的步骤，由308-04(102mg,0.21mmol)和4-(溴甲基)-1,2-二氯苯(55.4mg,0.23mmol)制备标题化合物315(11.4mg,收率26.5％)和316(17.5mg,收率30.4％)，分别为淡黄色固体和白色固体。315:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.32(s,1h),7.74-7.69(m,1h),7.45(s,1h),7.43(dd,j＝2.0,8.4hz.1h),7.35-7.29(m,7h),7.23-7.20(m,1h),6.86-6.70(m,2h),5.21(s,2h),4.56-4.21(m,4h),3.35-3.05(m,2h),2.62(s,3h),2.5-2.31(m,2h).质谱(m/z):656.33[m+h]+；316:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.29(s,1h),7.74(dd,j＝2.0,9.6hz,1h),7.45-7.30(m,9h),7.21(dd,j＝2.0,8.0hz,1h),6.87-6.82(m,1h),6.80-6.74(m.1h),5.20(s,2h),4.57(dd,j＝4.8,8.4hz.1h),4.45(d,j＝11.6hz,1h),4.34(d,j＝11.6hz,1h),3.79-3.72(m,1h),3.61-3.53(m,1h),2.64(s,3h),2.39-2.23(m,2h).质谱(m/z):672.30[m+h]+。
1-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基甲基)-5-(2-((3–((2,4-二氟苄基)氧基)-3-苯基丙基)磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-氟吡啶-2-(1h)-酮(317)
根据85的步骤，由308-04(90mg,0.18mmol)和5-(溴甲基)苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯(43mg,0.20mmol)制备标题化合物317(15.3mg)，收率12.8％，为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.23(s,1h),7.72(dd,2.0,9.6hz,1h),7.39-7.28(m,7h),6.85(m,3h),6.79-6.74(m,2h),5.94(s,2h),6.15(s,2h),4.56(m,1h),4.45(d,j＝12.0hz,1h),4.34(d,j＝12.0hz,1h),3.77-3.68(m,1h),3.60-3.53(m.1h),2.62(s,3h),2.38-2.20(m,2h).质谱(m/z):664.38[m+h]+.
1-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基甲基)-3-氟-5-(2-(3-(2-氟苄基)-3-苯基丙基磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(318)
步骤1.根据308-03的步骤，由308-02(1g,3.98mmol)和1-((3-氯-1-苯基丙氧基)甲基)-2-氟苯(1.22g,4.38mmol)制备化合物318-01(2.26g)，为淡黄色固体。质谱(m/z):494.16[m+h]+.
步骤2.根据308-04的步骤，由318-01(2.20g,4.46mmol)制备化合物318-02(1.77g)，收率92.6％，为淡黄色油状物。质谱(m/z):480.29[m+h]+.
步骤3.根据85的步骤，由318-02(200mg,0.42mmol)和5-(溴甲基)苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯(100mg,0.46mmol)制备标题化合物318(98.3mg)，收率36.9％，为白色固体。318:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.24(s,1h),7.72(dd,j＝2.4,10hz,1h),7.39-7.27(m,8h),7.12(t,j＝7.6hz,1h),7.03(t,j＝9.6hz,1h),6.85(d,j＝9.2hz,2h),6.78(d,j＝8.0hz,1h),5.95(s,2h),5.14(s,2h),4.58(dd,j＝4.8,8.4hz,1h),4.50(d,j＝12.0hz,1h),4.37(d,j＝12.0hz,1h),3.81-3.74(m,1h),3.62-3.54(m,1h),2.63(s.3h),2.34-2.26(m,2h).质谱(m/z):664.38[m+h]+
1-(苯并[c][1,2,5]噻二唑-5-基甲基)-3-氟-5-(2-(3-(2-氟苄氧基)-3-苯基丙基磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(319)
根据85的步骤，由318-02(100mg,0.21mmol)和5-(溴甲基)苯并[c][1,2,5]噻二唑(58mg,0.23mmol)制备标题化合物319(30.1mg)，收率25.1％，为淡黄色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.37(s,1h),8.02(d,j＝8.8hz,1h),7.87(s.1h),7.78(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.60(dd,j＝2.0,8.8hz,1h),7.38(s,1h),7.36-7.30(m,7h),7.10(t,j＝7.4hz,1h),7.00(t,j＝10.0hz,1h),5.43(s,2h),4.56(dd,j＝8.0,4.4hz,1h),4.49(d,j＝12.0hz,1h),4.36(d,j＝12.0hz,1h),3.82-3.75(m,1h),3.61-3.53(m,1h),2.63(s,3h),2.33-2.19(m,2h).质谱(m/z):660.42[m+h]+.
1-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基甲基)-3-氟-5-(2-(3-(2-氟苄基)-3-苯基丙基磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(320)
根据85的步骤，由318-02(100mg,0.21mmol)和4-(溴甲基)苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯(49.8mg,0.23mmol)制备标题化合物320(71.7mg)，收率53.3％，为淡黄色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.53(s,1h),7.67(dd,j＝2.4,10.0hz,1h),7.39-7.31(m,8h),7.10(t,j＝7.2hz,1h),6.99(t,j＝9.6hz,1h),6.93-6.91(m,1h),6.83-6.78(m,2h),5.22(s,2h),4.58(dd,j＝4.8,8.0hz,1h),4.49(d,j＝11.6hz,1h),4.37(d,j＝11.6hz,1h),3.79-3.72(m,1h),3.62-3.55(m,1h),2.63(s,3h),2.36-2.24(m,2h).质谱(m/z):646.24[m+h]+。
3-氟-5-(2-(3-(2-氟苄基)-3-苯基丙基磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)吡啶-2(1h)-酮(321)
根据85的步骤，由318-02(105mg,0.22mmol)和4-(溴甲基)-2-甲氧基吡啶(40mg,0.20mmol)制备标题化合物321(55.5mg)，收率46.0％，为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.29(s,1h),8.15(d,j＝5.6hz,1h),7.78(dd,j＝2.0,9.6hz,1h),7.41(s,1h),7.39-7.27(m,7h),7.10(t,j＝7.6hz,1h),7.00(t,j＝9.6hz,1h),6.80(d,j＝4.8hz,1h),6.59(s,1h),5.21(s,2h),4.56(m,1h),4.49(d,j＝11.6hz,1h),4.37(d,j＝12.0hz,1h),3.92(s,3h),3.83-3.75(m,1h),3.61-3.53(m,1h),2.63(s,3h),2.34-2.26(m,2h).质谱(m/z):633.36[m+h]+。
1-((1h-苯并[d]咪唑-6-基)甲基)-3-氟-5-(2-(3-(2-氟苄基)-3-苯基丙基磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(322)
步骤1.根据85的步骤，由318-02(253mg,0.53mmol)和5-(溴甲基)-1h-苯并[d]咪唑-1-羧酸叔丁酯及6-(溴甲基)-1h-苯并[d]咪唑-1-羧酸叔丁酯(181mg,0.58mmol)的混合物制备标题化合物322-01和322-02。质谱(m/z):742.24[m+h]+.
步骤2.根据312的步骤，由322-01和322-02的混合物制备标题化合物322(9mg)，收率2.4％，为淡黄色固体。322:1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.91(s.1h),8.42(br,1h),8.13(s,2h),7.73-7.63(m,2h),7.40-7.28(m,8h),7.15-7.11(m,2h),5.39(s,2h),4.60(m,1h),4.34(dd,12.0,16.4hz,2h),4.03(dd,j＝6.8,14.0hz,3h),3.77-3.59(m,2h),2.57(s,3h).质谱(m/z):642.33[m+h]+.
5-((3-氟-5-(2-(3-(2-氟苄基)-3-苯基丙基磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-2-氧代吡啶-1(2h)-基)甲基)苯并[c][1,2,5]恶二唑1-氧化物(323)
根据85的步骤，由318-02(50mg,0.11mmol)和5-(溴甲基)苯并[c][1,2,5]恶二唑制备标题化合物323(14.7mg)，两步收率11.7％，为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.37(s,1h),7.77(dd,j＝2.0,9.6hz,1h),7.40-7.28(m,9h),7.10(t,j＝6.4hz,1h),7.00(t,j＝9.6hz,1h),5.24(s,2h),4.55(m,1h),4.50(d,j＝12.0hz,1h),4.37(d,j＝12.0hz,1h),3.82-3.75(m,1h),3.61-3.54(m,1h),2.64(s,3h),2.35-2.23(m,2h).质谱(m/z):660.09[m+h]+.
1-(3,4-二甲氧基苄基)-3-氟-5-(6-甲基-2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(324)
步骤1.在0℃下将ch3i(85mg.0.6mmol)加入到308-02(100mg,0.4mmol)和k2co3(83mg,0.6mmol)dmf(10ml)的混合物中，然后将反应混合物加热至室温并搅拌过夜。将反应混合物用水淬灭，用etoac萃取3次，na2so4干燥。蒸发除去溶剂，得到324-01(221mg)，为黄色固体。所得粗品不需进一步纯化即可使用。质谱(m/z):267.16,[m+h]+.
步骤2.在0℃下，将hbr(水溶液，3ml)加入到324-01的etoh溶液中。然后将反应混合物回流2小时。蒸发除去溶剂，将残余物用水稀释，过滤，得到粗产物324-02，为黄色固体。所得粗品不需进一步纯化即可使用。质谱(m/z):253.12[m+h]+.
步骤3.根据85的步骤，由324-02(50mg,0.2mmol)和4-(溴甲基)-1,2-二甲氧基苯(16mg,0.4mmol)制备标题化合物324(65.4mg)，两步收率75.8％，为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.31(s,1h),7.71(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.36(s,1h),6.95(d,j＝10.0hz,2h),6.862(d,j＝8.0hz,1h),5.22(s,2h),3.88(s,3h),3.87(s,3h),3.33(s,3h),2.66(s,3h).质谱(m/z):434.11[m+h]+
3-氟-5-(2-(3-(2-氟苄氧基)-3-苯基丙基磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(325)
步骤1.根据81的步骤，由318-01(1.5g,3.04mmol)制备化合物325-01(331mg)，收率22.6％，为无色油状物。质谱(m/z):326.24[m+h]+.
步骤2.根据99-02的步骤，由325-01(315mg,0.97mmol)制备标题化合物325(232.3mg)，收率72.3％，为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.28(d,j＝2.0hz,1h),7.99(dd,j＝2.4,10.4hz,1h),7.47(s,1h),7.40-7.30(m,7h),7.12(t,j＝7.6hz,1h),7.02(t,j＝9.6hz,1h),4.58(m,1h),4.52(d,j＝11.6hz,1h),4.3(d,j＝11.6hz,1h),3.85-3.77(m,1h),3.65-3.58(m,1h),2.66(s,3h),2.35-2.27(m,2h).质谱(m/z):512.25[m+h]+.
1-(苯并[d]噻唑-5-基甲基)-3-氟-5-(2-(3-(2-氟苄氧基)-3-苯基丙基磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)吡啶2(1h)-酮(326)
根据85-01的步骤，由325(30mg,0.058mmol)和5-(溴甲基)苯并[d]噻唑(28.5mg,0.12mmol)制备标题化合物326(21.2g)，收率21.2％，为淡黄色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.02(s,1h),8.36(s,1h),8.13(d,j＝8.4hz,1h),7.99(s,1h),7.73(m,1h),7.53(m,2h),7.37-7.28(m,7h),7.10(t,j＝7.6hz,1h),7.00(t,j＝9.6hz,1h),5.39(m,3h),4.55(m,1h),4.50(d,j＝11.6hz,1h),4.37(d,j＝12.0,1h),4.21(t,j＝5.6hz,1h),3.81-3.74(m,1h),3.61-3.53(m.1h),2.63(s,3h).质谱(m/z):659.31[m+h]+。
3-氟-5-(2-(3-(2-氟苄氧基)-3-苯基丙基磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1-((1-甲基-1h-吲唑-5-基)甲基)吡啶-2(1h)-酮(327)和5-((3-氟-5-(2-(3-(2-氟苄氧基)-3-苯丙基磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)吡啶-2-基氧基)甲基)-1-甲基-1h-吲唑(328)
在n2和0℃下，将diad(24mg,0.12mmol)加入到325(30mg,0.06mmol)，(1-甲基-1h-吲唑-5-基)甲醇(10mg,0.06mmol)和pph3(30mg,012mmol)的thf溶液中。然后将反应混合物加热至50℃并搅拌2小时。蒸发除去溶剂，将残余物用水稀释，用etoac萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，na2so4干燥，通过制备tlc(pe:ea＝1:1)进一步纯化，得到标题化合物327(15mg,38.1％)，为浅黄色固体，和328(7mg,19.1％)为白色固体。327:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.31(dd,j＝0.8,2.0hz,1h),7.96(s,1h),7.74-7.69(m,2h),7.54-7.51(m,1h),7.44(dd,j＝1.2,8.8hz,1h),7.38-7.30(m,8h),7.09(td,j＝0.8,7.6hz,1h),7.00(m,1h),5.34(m,2h),4.55(m,1h),4.49(d,j＝12.0hz,1h),4.36(d,j＝12.0hz,1h),4.05(s,3h),3.78-3.72(m,1h),3.60-3.52(m.1h),2.59(s,3h),2.36-2.20(m,2h).质谱(m/z):656.41[m+h]+.328:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.68(d,j＝2.0,1h),8.13(dd,j＝2.0,10.4hz,1h),7.99(m,1h),7.88(m,1h),7.73-7.69(m,1h),7.63(s,1h),7.57-7.51(m,2h),7.49-7.30(m,6h),7.12(td,j＝1.2,7.6hz,1h),7.01(m,1h),5.66(s,2h),4.59(m,1h),4.52(d,j＝12.0hz,1h),4.39(d,j＝12.0hz,1h),4.09(s,3h),3.85-3.77(m,1h),3.66-3.59(m,1h),2.68(s,3h),2.40-2.26(m,2h).质谱(m/z):656.51[m+h]+.
1-(苯并[d]恶唑-5-基甲基)-3-氟-5-(2-((3-((2-氟苄基)氧基)-3-苯基丙基)磺酰基)-6-甲基嘧啶吡啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(329)
根据85-01的步骤，由325(12mg,0.023mmol)和5-(溴甲基)苯并[d]恶唑(7.3mg,0.035mmol)制备标题化合物329(9mg,0.015mmol)，收率65.2％，为淡黄色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.31(q,j＝1.2hz,1h),8.11(s,1h),7.77(d,j＝1.6hz,1h),7.75(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.59(d,j＝8.8hz,1h),7.45(dd,j＝1.6,8.4hz,1h),7.36-7.30(m,7h),7.27-7.23(m,1h),7.12(dt,j＝1.2,7.2hz,1h),7.00-6.97(m,1h),5.37(s,2h),4.57(dd,j＝4.8,8.4hz,1h),4.50(d,j＝12.0hz,1h),4.37(d,j＝12.0hz,1h),3.82-3.74(m,1h),3.61-3.54(m,1h),2.62(s,1h),2.36-2.23(m,2h).质谱(m/z):643.33,[m+h]+.
3-氟-5-(2-(3-(2-氟苄氧基)-3-苯基丙基磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1-((1-甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)甲基)吡啶-2(1h)-酮(330)
根据85-01的步骤，由325(25mg,0.049mmol)和5-(溴甲基)-1-甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑(22mg,0.098mmol)制备标题化合物330(17mg)，收率52.9％，为淡黄色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.33(s,1h),8.06(s,1h),7.78(dd,j＝1.6,9.6hz,1h),7.60(dd,j＝8.4,24.8hz,2h),7.42(s,1h),7.38-7.28(m,6h),7.09(td,j＝1.2,7.6hz,1h),7.02(m,1h),5.42(s,2h),4.57(m,1h),4.49(d,j＝11.6hz,1h),4.36(d,j＝11.6hz,1h),4.30(s,3h),3.80-3.72(m,1h),3.60-3.53(m,1h),2.61(s,3h),2.35-2.23(m,3h).质谱(m/z):657.47[m+h]+.
1-((2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)甲基)-3-氟-5-(2-(3-(2-氟苄氧基)-3-苯基丙基磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(331)
根据85-01的步骤，由325(40mg,0.08mmol)和6-(溴甲基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯(36mg,0.16mmol)制备标题化合物331(17mg)，收率83.3％，为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.20(m,1h),7.72(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.39-7.27(m,8h),7.10(td,j＝1.2,7.2hz,1h),7.00(m,1h),6.86(m,3h),5.12(s,2h),4.58(m,1h),4.50(d,j＝12.0hz,1h),4.37(d,j＝12.0hz,1h),4.22(s,4h),3.80-3.73(m,1h),3.61-3.54(m,1h),2.63(m,3h),2.34-2.24(m,2h).质谱(m/z):660.51[m+h]+
3-氟-5-(2-((3-((2-氟苄基)氧基)-3-苯基丙基)磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1-(4-甲氧基-3-(丙-2-炔-1-基氧基)苄基)吡啶-2(1h)-酮(332)
根据85-01的步骤，由325(50mg,0.11mmol)和4-(溴甲基)-1-甲氧基-2-(丙-2-炔-1-基氧基)苯(32mg,0.13mmol)制备标题化合物332(16mg,收率21％)，为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.27(m,1h),7.70(dd,j＝2.4,10hz,1h),7.39-7.23(m,8h),7.13-7.07(m,2h),7.03-6.90(m,2h),6.85(d,j＝8.3hz,1h),5.19(s,2h),4.74(d,j＝2.4hz,2h),4.58-4.54(d,j＝11.8hz,1h),4.49(d,j＝11.8hz,1h),4.35(d,j＝11.8hz,1h),3.84(s,3h),3.80-3.73(m,1h),3.62-3.54(m,1h),2.61(s,3h),2.53(t,j＝2.4hz,1h),2.39-2.21(m,3h).质谱(m/z):686.23,[m+h]+.
1-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基甲基)-3-氟-5-(6-甲基-2-((3-苯基-3-(吡啶-3-基氧基)丙基)磺酰基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(333)
步骤1.根据140的步骤，由308-02(0.18g,0.72mmol)和3-(3-氯-1-苯基丙氧基)吡啶(0.23g,0.93mmol)制备标题化合物333-01(0.06g,0.12mmol)，收率17％，为白色固体。质谱(m/z):495.29,[m+h]+.
步骤2.根据99-02的步骤，由333-01(60mg,0.012mmol)制备标题化合物333-02(24mg)，为白色固体，不经纯化。质谱(m/z):481.19,[m+h]+.
步骤3.根据85-01的步骤，由333-02(24mg,0.05mmol)和5-(溴甲基)苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯(16mg,0.075mmol)制备标题化合物333(12mg,0.02mmol,收率40％)，为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.24(q,j＝1.2hz,1h),8.21(m,1h),8.14(m,1h),7.71(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.37-7.27(m,6h),7.09-7.08(m,2h),6.86(dd,j＝1.6,6.8hz,2h),6.79(dd,j＝1.6,6.8hz,1h),5.95(s,2h),5.40(dd,j＝5.2,7.6hz,1h),5.17(d,j＝2.0hz,2h),3.85-3.69(m,2h),2.62(s,3h),2.57-2.51(m,2h).质谱(m/z):615.27,[m+h]+.
1-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基甲基)-3-氟-5-(6-(氟甲基)-2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(334)
步骤1.根据99-01的步骤，由161-02(1.54g,8.0mmol)制备标题化合物334-01(2.86g,2.13mmol)，收率26.7％，为白色固体。质谱(m/z):284.23,[m+h]+.
步骤2.根据99-02的步骤，由334-01(2.86g,2.13mmol)制备标题化合物334-02(2.50g)，为黄色固体，不经纯化。质谱(m/z):270.19,[m+h]+.
步骤3.根据99-01的步骤，由334-02(0.5g,2.01mmol)和5-(溴甲基)苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯(0.48g,2.21mmol)制备标题化合物334(0.7g,1.61mmol)，收率79.7％，为无色油状物。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.35(q,j＝1.2hz,1h),7.81(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.70(m,1h),6.88-6.86(m,2h),6.80(d,j＝8.4hz,1h),5.95(s,2h),5.61(s,1h),5.49(s,1h),5.19(s,2h),3.34(s,3h).质谱(m/z):436.26,[m+h]+.
1-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基甲基)-3-氟-5-(2-((3-((2-氟苄基)氧基)-3-苯基丙基)磺酰基)-6-(氟甲基)嘧啶-4-基)吡啶-2(1h)-酮(335)
步骤1.根据140-1的步骤，由334(0.6g,1.38mmol)制备标题化合物335-01(0.6g)，为黄色固体，不经纯化。质谱(m/z):390.30,[m+h]+.
步骤2.根据140的步骤，由335-01(89mg,0.23mmol)和1-((3-氯-1-苯基丙氧基)甲基)-2-氟苯(83mg,0.3mmol)制备标题化合物335(28mg,0.042mmol)，收率18.3％，为白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.30(dd,j＝0.8,2.4hz,1h),7.80(dd,j＝2.4,9.6hz,1h),7.66(d,j＝0.8hz,1h),7.39-7.25(m,7h),7.12(dt,j＝0.8,7.2hz,1h),7.03-6.99(m,1h),6.86(m,1h),6.84(d,j＝1.6hz,1h),6.78-6.76(m,1h),5.95(s,2h),5.56(s,1h),5.44(s,1h).,5.19(m,2h),4.57(dd,j＝4.8,8.0hz,1h),4.50(d,j＝12.0hz,1h),4.36(d,j＝11.6hz,1h),3.81-3.73(m,1h),3.61-3.53(m,1h),2.36-2.21(m,2h).质谱(m/z):664.40,[m+h]+.
5-(2-((3-((2-氟苄基)氧基)-3-苯基丙基)磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1-((1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)吡啶-2(1h)-酮和5-(2-((3-((2-氟苄基)氧基)-3-苯基丙基)磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1-((1-甲基-1h-苯并[d]咪唑-6-基)甲基)吡啶-2(1h)-酮(336)
步骤1.根据85-01的步骤，由318-02(0.1g,0.2mmol)和5-(溴甲基)-1h-苯并[d]咪唑-1-羧酸叔丁酯，6-(溴甲基)-1h-苯并[d]咪唑-1-羧酸叔丁酯(81mg,0.26mmol)制备标题化合物336-01和336-01’(97mg,0.14mmol)，收率70％，为白色固体。质谱(m/z):710.49,[m+h]+.
步骤2.向336-01和336-01’(97mg,0.14mmol)的ch2cl2(8ml)溶液中加入tfa(2ml)，室温搅拌2hrs，浓缩溶剂并重新溶于乙酸乙酯(5ml)中，加入nahco3水溶液以中和酸，分离有机层，水层用乙酸乙酯萃取三次，合并有机相，干燥并浓缩，所得336-02不经纯化直接使用。质谱(m/z):610.47,[m+h]+.
步骤3.将336-02(0.11g,0.18mmol)，草酸二甲酯(32mg,0.27mmol)，t-buok(30mg，0.27mmol)溶于无水dmf(3ml)中，将混合物在150℃下回流3小时。然后冷却至室温，浓缩dmf，残余物通过快速柱色谱法(ch2cl2/meoh10/1)纯化，得到28mg(0.045mmol)336-03和336-03’，为黄色糖浆，收率25％.质谱(m/z):624.49,[m+h]+.
步骤4:根据99的步骤，由336-03和336-03’(28mg,0.045mmol)制备标题化合物336(8mg,0.012mmol)，收率26.7％，为白色固体。1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.57(s,1h),8.49(s,1h),7.82-7.75(m,2h),7.63-7.52(m,2h),7.35-7.29(m,7h),7.25-7.21(m,1h),7.09(t,j＝6.4hz,1h),7.00-6.96(m,1h),5.38(s,2h),4.56-4.53(m,1h),4.48(d,j＝11.6hz,1h),4.36(d,j＝12.0hz,1h),4.02(s,3h),3.80-3.72(m,1h),3.61-3.54(m,1h),2.56(s,3h),2.32-2.24(m,2h).质谱(m/z):656.53,[m+h]+.
5-(2-((3-(1h-苯并[d]咪唑-1-基)丙基)磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-氟-1-((1-甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-6-基)甲基)吡啶-2(1h)-酮(337)
步骤1.根据85-01的步骤，由5-溴-3-氟吡啶-2-(1h)-酮(0.76g,3.96mmol)和6-(溴甲基)-1-甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑(0.75g,3.3mmol)制备标题化合物337-01(0.7g,2.08mmol)，收率63.6％，为白色固体。质谱(m/z):337.25,339.23,[m+h]+.
步骤2.根据165-01的步骤，由337-01(0.7g,2.08mmol)制备标题化合物337-02(0.5g,1.30mmol)，收率62.5％，为白色固体。质谱(m/z):385.43,[m+h]+.
步骤3.根据99-01的步骤，由337-02(0.5g,1.30mmol)和2,4-二氯-6-甲基嘧啶(0.32g,1.97mmol)制备标题化合物337-03(0.5g,1.30mmol)，收率100％，为白色固体。质谱(m/z):385.34,[m+h]+.
步骤4.根据140-1的步骤，由337-03(0.5g,1.30mmol)制备标题化合物337-04(0.43g)，为黄色固体，不经纯化。质谱(m/z):383.36,[m+h]+.
步骤5.根据140的步骤，由337-04(50mg,0.13mmol)和1-(3-溴丙基)-1h-苯并[d]咪唑(40mg,0.17mmol)制备标题化合物337(10mg,0.017mmol)，收率18.3％，为白色固体。1hnmr(400hz,cdcl3)δ8.61(s,1h),8.27(m,1h),7.95-7.93(m,1h),7.76-7.74(m,1h),7.68(m,1h),7.63-7.53(m,3h),7.39(s,1h),7.25-7.24(m,2h),5.55(s,2h),4.88-4.86(m,2h),4.29(s,3h),3.71(t,j＝5.6hz,2h),2.70-2.67(m,2h),2.61(s,3h).质谱(m/z):573.68,[m+h]+.
5-(2-((3-(1h-苯并[d]咪唑-1-基)丙基)磺酰基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基甲基)-3-氟吡啶-2-(1h)-酮(338)
步骤1.根据85-01的步骤，由5-溴-3-氟吡啶-2-(1h)-酮(0.41g,2.12mmol)和5-(溴甲基)苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯(0.38g,1.77mmol)制备标题化合物338-01(0.48g,1.47mmol)，得到白色固体，收率83.7％。质谱(m/z):326.15,328.15,[m+h]+.
步骤2.根据165-01的步骤，由338-01(0.48g,1.47mmol)制备标题化合物338-02(0.5g,1.34mmol)，得到白色固体，收率91.2％。质谱(m/z):374.38,[m+h]+.
步骤3.根据99-01的步骤，由338-02(0.5g,1.34mmol)制备标题化合物338-03(0.27g,0.72mmol)，得到白色固体，收率53.7％。质谱(m/z):374.28,[m+h]+.
步骤4.根据140-1的步骤，由338-03(0.27g,0.72mmol)制备标题化合物338-04(0.3g)，为黄色固体，不经纯化。质谱(m/z):372.37,[m+h]+.
步骤5.根据140的步骤，由338-04(50mg,0.13mmol)和1-(3-溴丙基)-1h-苯并[d]咪唑(41.6mg,0.17mmol)制备标题化合物338(25mg)，收率34.2％，为白色固体。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.78(m,1h),8.34(s,1h),8.12(dd,j＝2.4,11.2hz,1h),8.07(s,1h),7.65-7.63(m,1h),7.57-7.55(m,1h),7.19-7.17(m,2h),7.02(d,j＝1.2hz,1h),6.91(dd,j＝1.6,8.0hz,1h),6.88(d,j＝8.0hz,1h),5.97(s,2h),5.19(s,2h),4.43(t,j＝6.8hz,2h),3.72(m,2h),2.52(s,3h),2.27-2.17(m,2h).质谱(m/z):562.59,[m+h]+.
化合物339-361的合成
化合物362,364,366的合成
化合物363,365,367的合成
化合物368,369的合成
化合物370-375的合成
化合物376-381的合成
化合物382的合成
化合物383-400的合成
化合物401-421的合成
细胞凋亡抑制测定
将u2os_bim细胞(用bim转基因转染的稳定u2os细胞系)在dmem(gibico)培养基中培养。第一天，将u2os_bim细胞以每孔3000个细胞的密度接种在96孔板上。第二天，将细胞用化合物预处理细胞1小时。然后用0.1μg/ml多西环素(dox)处理细胞以引发细胞凋亡。在dox处理24小时后，通过使用celltiter-glo试剂盒(promega,g7570)根据制造商的说明书测量atp水平来确定细胞活性。发光值通过perkinelmerenspiremultimodeplatereader多模板读数器记录。将存活的细胞标准化为用dmso处理的细胞。zvad(20μm)用作阳性对照。化合物1-886的活性数据表示为平均数±重复的标准偏差；化合物187-274的活性数据基于初步结果估算。
生物活性数据,ec50
生物活性数据,ec50
*est.估测