本发明涉及稳定剂领域，尤其涉及一种蛋白稳定剂、该蛋白稳定剂的使用方法以及该蛋白稳定剂的制备方法。
背景技术：
：人体衰老过程中的生理变化主要体现在机体组织细胞和构成物质的丧失，机体代谢率的减缓，机体和器官功能减退，延长衰老一直是人们迫切希望解决的问题。人类的脐带中存在着具有较高分化潜能的间充质干细胞，这些间充质干细胞的分泌物中含有多种细胞因子，其中包含表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子、肝细胞生长因子等等。在保证其活性的情况下将其用于化妆品或其他养生产品中，既安全又具有显著的抗衰除皱效果，但这些细胞因子的活性容易丧失，当其活性丧失后，不具备抗衰除皱效果。中国专利文献公告号cn106754433a公开了一种渗透压稳定剂及其用途，包含：渗透压维持剂、保湿剂和ph缓冲剂，该组合物的ph值为6.5～7.5。这种渗透压稳定剂仅包含透明质酸、海藻糖中的一种，其主要作为是防止原生质体失活，但其难以应用于间充质干细胞培养基或者含脐带提取液的精华液。技术实现要素：为了克服现有技术的缺陷，本发明所要解决的技术问题在于提出一种蛋白稳定剂，包含透明质酸、海藻糖以及牛血清白蛋白等物质，十分适合间充质干细胞培养基或者含脐带提取液的精华液的培养。为达此目的，本发明采用以下技术方案：本发明提供了一种蛋白稳定剂，包括：透明质酸1～3wt％；海藻糖8～10wt％；余量为磷酸盐缓冲液；所述蛋白稳定剂的ph值维持在6.5～7.5。透明质酸是d-葡萄糖醛酸及n-乙酰葡糖胺组成的双糖单位玻尿酸(hyaluronan)，又称糖醛酸，基本结构是由两个双糖单位d-葡萄糖醛酸及n-乙酰葡糖胺组成的大型多糖类。透明质酸的透明质分子能携带500倍以上的水分，为当今所公认的最佳保湿成分，广泛的应用在保养品和化妆品中。海藻糖又称称漏芦糖、蕈糖等，是一种安全、可靠的天然糖类，其由两个葡萄糖分子以1,1-糖苷键构成的非还原性糖，并对多种生物活性物质具有非特异性保护作用。壳聚糖(chitosan)，又称脱乙酰甲壳素，是由自然界广泛存在的几丁质(chitin)经过脱乙酰作用得到的，化学名称为聚葡萄糖胺[(1-4)-2-氨基-b-d葡萄糖，壳聚糖这种天然高分子具有生物官能性和相容性、血液相容性、安全性、微生物降解性等优良性能。在本发明的进一步地实施方案中，所述蛋白稳定剂包括：透明质酸1～3wt％；海藻糖8～10wt％；牛血清白蛋白1～3wt％；余量为磷酸盐缓冲液。牛血清白蛋白是牛血清中的简单蛋白，是血液的主要成分，在动物细胞无血清培养中，添加牛血清白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。磷酸盐缓冲液是常用于生物学研究的缓冲溶液，磷酸盐缓冲液有助于保持恒定的ph值，溶液的渗透压和离子浓度通常与人体ph相近(等渗)。在本发明的进一步地实施方案中，所述蛋白稳定剂包括：透明质酸1.8wt％；海藻糖8.8wt％；牛血清白蛋白1.8wt％；余量为磷酸盐缓冲液。本发明还提供了一种用于上述的蛋白稳定剂的使用方法，将蛋白稳定剂用于间充质干细胞培养基或者含脐带提取液的精华液。本发明还提供了一种用于上述的蛋白稳定剂的制备方法，按如下步骤实施：先将透明质酸、海藻糖加入至磷酸盐缓冲液中，形成混合液，按照2-4℃/min升温速度将所述混合液加热到80-85℃，并以1500-2000r/min搅拌速度将混合液搅拌5-10min；维持混合液的温度处于恒温状态，且温度控制在34-37℃，再将牛血清白蛋白添加至所述混合液内，并以100-150r/min搅拌速度搅拌3-5min后，形成所述蛋白稳定剂。本发明的有益效果为：本发明提供的蛋白稳定剂，包含透明质酸、海藻糖以及牛血清白蛋白等物质，十分适合间充质干细胞培养基或者含脐带提取液的精华液的培养，通过实验数据可知，这种蛋白稳定剂能够极大的提升细胞因子活性保持时间。具体实施方式下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。实施例一本实施例中提供的蛋白稳定剂，包括：透明质酸1wt％或者3wt％；海藻糖8wt％或者10wt％；余量为磷酸盐缓冲液；所述蛋白稳定剂的ph值维持在6.5～7.5。在磷酸盐缓冲液添加了适量的透明质酸、海藻糖能够有效延长细胞因子的活性保持时间，且保持时间具有明显延长变化。实施例二本实施例中提供的蛋白稳定剂，包括：透明质酸1.8wt％；海藻糖8.8wt％；余量为磷酸盐缓冲液；所述蛋白稳定剂的ph值维持在6.5～7.5。在磷酸盐缓冲液添加了适量的透明质酸、海藻糖能够有效延长细胞因子的活性保持时间，且保持时间具有明显延长变化。实施例三本实施例中提供的蛋白稳定剂，包括：透明质酸1wt％或者3wt％；海藻糖8wt％或者10wt％；牛血清白蛋白1wt％或3wt％；余量为磷酸盐缓冲液。在磷酸盐缓冲液添加了适量的透明质酸、海藻糖能够有效延长细胞因子的活性保持时间，且保持时间的延长变化十分显著。实施例四本实施例中提供的蛋白稳定剂，包括：透明质酸1.8wt％；海藻糖8.8wt％；牛血清白蛋白1.8wt％；余量为磷酸盐缓冲液。在磷酸盐缓冲液添加了适量的透明质酸、海藻糖能够有效延长细胞因子的活性保持时间，且保持时间的延长变化达到最佳状态。实施例五本实施例中提供的一种上述的蛋白稳定剂的使用方法，将蛋白稳定剂用于间充质干细胞培养基或者含脐带提取液的精华液。实施例六本实施例中提供的一种用于上述的蛋白稳定剂的制备方法，按如下步骤实施：先将透明质酸、海藻糖加入至磷酸盐缓冲液中，形成混合液，按照2-4℃/min升温速度将所述混合液加热到80-85℃，并以1500-2000r/min搅拌速度将混合液搅拌5-10min；维持混合液的温度处于恒温状态，且温度控制在34-37℃，再将牛血清白蛋白添加至所述混合液内，并以100-150r/min搅拌速度搅拌3-5min后，形成所述蛋白稳定剂。对上述实施例中提供的蛋白稳定剂的部分进行使用效果的试验测量，试验测量的结果如下：第一组试验在培养基中加入il-8细胞因子3000pg/ml，实验组加入蛋白稳定剂物质，对照组不加蛋白质稳定剂，每隔30天对il-8含量进行测量。测量结果如下(见表一)：时间实验组对照day03096.262938.31day302912.19853.97day602841.59132.68day902830.8868.13表一在抗衰除皱精华液产品中加入脐带提取物，形成的混合物中含有vegf(血管内皮生长因子)约3600pg/ml。实验组一加入实施例四种提供的蛋白质稳定剂；实验组二加入实施例二中提供的蛋白质稳定剂，该蛋白质稳定剂包含除牛血清白蛋白以外的其他物质；实验组三加入蛋白质稳定剂中的透明质酸和海藻糖；对照组不加蛋白质稳定剂。三个月后测定精华液中vegf含量，结果如下(见表二)：表二本发明是通过优选实施例进行描述的，本领域技术人员知悉，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，可以对这些特征和实施例进行各种改变或等效替换。本发明不受此处所公开的具体实施例的限制，其他落入本申请的权利要求内的实施例都属于本发明保护的范围。当前第1页12